HPLC法同时测定中消软膏中4种成分含量

目的:建立HPLC法同时测定中消软膏中盐酸小檗碱、芦荟大黄素、大黄酚、欧前胡素4种活性成分的含量。方法:采用超声提取法,提取溶剂为甲醇,流动相为乙腈(A)-0.1%的磷酸水溶液(B),检测波长为254 nm,体积流量0.8 mL/min,柱温30℃,理论塔板数以盐酸小檗碱计算不低于4000。结果:中消软膏中盐酸小檗碱、芦荟大黄素、大黄酚、欧前胡素在线性范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.6%、99.8%、99.1%、99.7%,RSD分别为1.0%、0.8%、1.1%、0.3%。结论:该方法简便、快速、精密度和准确度良好,可为中消软膏质量标准提升提供一定依据。

高效液相色谱法同时测定黄芎抗栓胶囊中5种大黄成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定黄芎抗栓胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量的方法。方法采用Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸(85:15)为流动相,流速1.0mL/min,柱温25℃,检测波长254nm。结果芦荟大黄素在0.230～3.68μg(r=0.9998)、大黄酸在0.224～3.584μg(r=0.9999)、大黄素在0.223～3.568μg(r=0.9998)、大黄酚在0.257～4.112μg(r=0.9999)、大黄素甲醚在0.287～4.592μg(r=0.9998)范围线性良好;平均回收率分别为98.48%、98.10%、99.08%、100.34%、97.52%;RSD分别为1.39%、1.54%、1.44%、2.40%、2.03%。结论该方法简便、可靠、准确,可作为黄芎抗栓胶囊的质量控制方法 。

HPLC测定药用芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素含量

目的以离子液体1-丁基-3-甲基咪唑溴化盐（[BMIM]Br）为萃取剂超声辅助萃取，高效液相色谱法同时分离测定芦荟中的芦荟苷和芦荟大黄素。方法采用PhenomenexC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-0．3％冰醋酸水溶液（65：35）；流速：0．80mL／min；紫外检测波长：360nm；柱温：35℃。结果芦荟苷和芦荟大黄素分别在0．000336-1．68lag（r=0．99996）、0．000608-3．04μg（r=0．99976）范围内线性关系良好，检出限分别为0．0506、0．262ng／mL，平均加样回收率分别为95．99％、95．80％。结论本法操作简单快速、定量准确、灵敏度高、成本低，且对环境友好，是检测及分离芦荟中蒽醌类化合物的有效方法。

高效液相色谱法测定金振口服液中6种成分含量

目的建立测定金振口服液中黄芩苷、芦荟大黄素、大黄酸、甘草酸、大黄素和大黄酚6种成分含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Phenomenex C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,波长切换时间序列采样(黄芩苷0~15.0 min、280 nm,芦荟大黄素、大黄酸15.0~35.0 min、254 nm,甘草酸35.0~39.8 min、237 nm,大黄素、大黄酚39.8~50.0 min、254 nm)。结果黄芩苷、芦荟大黄素、大黄酸、甘草酸、大黄素和大黄酚进样量分别在0.043 2~2.162 5μg,0.012 8~0.638 0μg,0.018 5~0.926 0μg,0.035 8~1.792 5μg,0.049 8~2.488 0μg,0.052 9~2.643 5μg范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.84%,99.49%,99.89%,100.31%,99.55%,99.54%,RSD分别为1.10%,1.03%,1.49%,1.23%,0.98%,1.19%(n=9)。结论该方法简单快捷,准确可靠,可用于金振口服液的质量控制。

芦荟大黄素对人胃癌细胞HGC-27增殖周期及凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素对人胃癌细胞HGC-27细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用甲基噻唑(MTT)比色法和生长曲线测定不同浓度芦荟大黄素在不同作用时间内对在体外培养HGC-27细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果:芦荟大黄素可在G0/G1期阻滞人胃癌细胞HGC-27的增殖,使S期细胞比率降低;在一定范围内,芦荟大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论:芦荟大黄素能抑制人胃癌细胞HGC-27细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。

给喜古纳三味汤散的质量标准研究

目的建立蒙药给喜古纳三味汤散(大黄、碱面、诃子)的定性鉴别与成分定量测定项目。方法采用薄层色谱法(TLC)对大黄、诃子进行鉴别;显微鉴别法对大黄、面碱、诃子进行鉴别研究;高效液相色谱法(HPLC)对大黄所含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚进行定量测定研究。结果薄层色谱中各味药的特征斑点清晰,专属性强;显微鉴别中大黄、面碱、诃子的显微特征典型,重复性好;定量测定方法中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的平均回收率依次为97.4%(RSD=0.5%)、98.8%(RSD=0.8%)、98.0%(RSD=1.0%)、99.2%(RSD=0.4%)、98.2%(RSD=1.5%)。结论上述方法重复性好,专属性强,可用于该制剂的质量控制。

芦荟大黄素抑制人胃癌细胞株SGC-7901增殖研究

目的:研究芦荟大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制机制。方法:采用MTT方法观察芦荟大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用;采用流式细胞仪技术检测细胞周期和DNA含量;应用免疫组化方法观察PCNA的表达。结果:芦荟大黄素能抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖(P<0.05);使G_0/G_1期细胞增多,使S期和G_2/M期的细胞明显减少,细胞增殖抑制率明显增高,DNA指数明显降低(P<0.05);芦荟大黄素能抑制PCNA的表达(P<0.05)。结论:芦荟大黄素抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖,可能是通过抑制PCNA的表达而影响细胞周期的结果。

高速逆流色谱分离制备大黄化学成分

采用pH-区带精制逆流色谱(pH-ZRCCC)与常规高速逆流色谱(HSCCC)结合技术分离制备大黄粗提物中的化学成分。首先采用pH-ZRCCC分离大黄粗提物,溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3:7:4:6,V/V),上相加TFA(10 mmol/L)作为固定相,下相加Na OH(15 mmol/L)作为流动相。从1.3 g粗提物中得到140 mg桂皮酸(纯度为96.1%)、130 mg大黄酸(纯度为92.5%)和560 mg尾吹物。称取260 mg该尾吹物采用常规HSCCC的方法进一步分离,溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(7:3:7:4,V/V),得到约98 mg大黄素(纯度为96.5%)和60 mg芦荟大黄素(纯度为94.6%)。用HPLC检测纯度,用ESI-MS和1HNMR鉴定结构。研究结果表明pH-ZRCCC与HSCCC结合是分离大黄中化合物的一种有效方法。

利胆排石片中游离蒽醌、总蒽醌和结合蒽醌的含量测定

目的 建立利胆排石片中游离蒽醌、总蒽醌和结合蒽醌的高效液相色谱测定方法。方法 采用Phenomenex Luna 5u-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1 m L/min,检测波长：254 nm。结果 各待测组分分离度良好;芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5个成分的进样量在2.408~24.08 ng（r=0.9996）,2.718~27.18 ng（r=0.9999）,3.060~30.60 ng（r=0.9995）,4.298~42.98 ng（r=0.9999）,3.050~30.50 ng（r=0.9998）与峰面积呈良好的线性关系;游离蒽醌中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的加样回收率（n=6）分别为：99.1%（RSD=1.3%）,98.6%（RSD=1.1%）,99.0%（RSD=1.4%）,98.5%（RSD=0.8%）,99.7%（RSD=1.0%）;总蒽醌中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的加样回收率（n=6）分别为：98.4%（RSD=0.6%）,99.5%（RSD=0.9%）,98.8%（RSD=1.2%）,99.3%（RSD=0.8%）,99.1%（RSD=1.3%）。结论 经方法学验证,本方法简单、快速、灵敏、准确,可用于利胆排石片的质量控制定量分析方法。

渴络欣胶囊的血清药物化学研究

目的:研究渴络欣胶囊吸收入血的主要物质基础及特征。方法:采用HPLC-DAD体系,建立渴络欣胶囊大鼠血清的HPLC指纹图谱;差示分析渴络欣胶囊、空白血清及含药血清指纹图谱,获得大鼠口服渴络欣胶囊后血液中移行成分概况。结果:所建大鼠血清指纹图谱方法具有良好的精密度、重复性和稳定性;基于该方法分析渴络欣胶囊大鼠含药血清,共检出移行成分13个,其中原型成分9个、代谢成分4个,原型成分中包括芦荟大黄素及大黄酸。结论:吸收入血的13种成分可能是渴络欣胶囊发挥药效的主要物质基础。

波长切换HPLC法同时测定元和正胃片中5种成分的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定元和正胃片中龙胆苦苷、甘草苷、甘草酸、芦荟大黄素、大黄酸5种成分的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)进行分离;流动相为乙腈(A)-体积分数0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1;检测波长为0～35 min、276 nm,35～61 min、254 nm;柱温30℃。结果龙胆苦苷、甘草苷、甘草酸、芦荟大黄素、大黄酸质量浓度分别在29.4～294 mg·L-1(r=0.999 5,n=6)、4.35～43.5 mg·L-1(r=0.999 3,n=6)、8.25～82.5 mg·L-1(r=0.999 7,n=6)、1.27～12.7 mg·L-1(r=0.999 3,n=6)、0.68～6.8 mg·L-1(r=0.999 7,n=6)内与峰面积呈良好的线性关系,方法的平均回收率分别为99.5%(RSD=1.6%)、100.1%(RSD=1.4%)、99.4%(RSD=1.5%)、98.9%(RSD=1.1%)和99.4%(RSD=1.5%)。结论该方法简便、准确、重现性好、专属性强,可用于元和正胃片的质量控制。

RP-HPLC波长切换法同时测定阑尾灵颗粒中5种有效成分的含量

目的建立RP HPLC波长切换法同时测定阑尾灵颗粒中绿原酸、咖啡酸、木犀草素、丹皮酚和芦荟大黄素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,以Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,乙腈体积分数为0.05%的磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:(0～40 min)350 nm,(40～60 min)274 nm,进样量:20μL。结果 5种成分质量浓度分别在58.88～588.8(r=0.999 3,n=6)、6.53～65.3(r=0.999 3,n=6)、1.15～11.5(r=0.999 4,n=6)、0.74～7.4(r=0.999 1,n=6)、2.92～29.2 mg.L-1(r=0.999 7,n=6)内与峰面积呈良好的线性关系,方法的平均回收率分别为100.6%(RSD=1.1%)、99.7%(RSD=1.1%)、99.6%(RSD=1.3%)、99.7%(RSD=0.9%)、100.3%(RSD=1.5%)。结论所建立的高效液相色谱测定法可用于阑尾灵颗粒的质量控制。

高效液相色谱法测定六味能消胶囊中蒽醌类成分的含量

目的建立六味能消胶囊中蒽醌类成分的高效液相色谱法含量测定方法。方法色谱柱:Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(80∶20);流速:1.0 ml.min-1;检测波长:254 nm。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚总含量为2%以上,平均回收率为100.28%,RSD=2.22%。结论该方法简便、灵敏、准确,可作为六味能消胶囊的质量控制方法。

芦荟大黄素对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的研究芦荟大黄素对MPP+诱导的人神经母细胞株SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用。方法采用体外SH-SY5Y细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞MPP+损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法),检测芦荟大黄素对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果同正常对照组细胞相比,MPP+损伤模型组细胞活性明显降低;同模型组比较,浓度为2μmol/L、4μmol/L、6μmol/L、8μmol/L的芦荟大黄素能减轻MPP+引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率。结论芦荟大黄素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用。

HPLC法同时测定清瘟解毒散中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量

目的建立清瘟解毒散中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用HPLC法,以Wondasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱为色谱柱,流动相为甲醇-体积分数为0.1%的磷酸溶液(体积比为85∶15),以1.0 mL·min^(-1)为流速,以254 nm为检测波长,柱温为30℃。结果芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在5~30、5~30、10~60和5~30 mg·L^(-1)内呈良好线性关系,相关系数分别为0.999 5、0.999 8、0.999 8和0.999 8,平均回收率分别为99.0%、99.2%、98.6%和98.9%。结论该方法可以作为清瘟解毒散质量的控制指标之一。

HPLC法测定糖清胶囊中的芦荟大黄素 大黄酸 大黄素的含量

目的:建立糖清胶囊中蒽醌类成分的高效液相色谱法含量测定方法。方法:色谱柱:Hydrosphere C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(78∶22);流速:1.0mL·min-1;检测波长:254nm。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素总含量为1.2%以上,平均回收率为100.58%,RSD为2.07%。结论:该方法灵敏、准确,可作为糖清胶囊的蒽醌类成分质量控制方法。

UPLC-MS/MS法同时测定狗皮膏中2种大黄蒽醌类成分含量的研究

目的:建立超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定狗皮膏中大黄素、芦荟大黄素2种大黄蒽醌类有效成分的含量。方法:样品经甲醇溶液超声提取后,采用ACQUITY BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)进行检测,流动相组成:乙腈(A)-0.1%乙酸(B),梯度洗脱(0~3 min,30%~60%A,3~10 min,60%~60%A),流速为0.3 m L·min^(-1),柱温30℃。质谱采用电喷雾电离源,多重反应检测模式(MRM)扫描。结果:该方法在选定浓度范围内线性关系良好r>0.9996,平均回收率为98.85%~98.91%,精密度RSD≤3.68%(n=6)。结论:该方法可以用于狗皮膏中两种大黄蒽醌类成分的含量测定,为后续的分析提供参考。

芦荟大黄素对血吸虫病性肝纤维化小鼠的影响

目的:探讨芦荟大黄素对血吸虫肝纤维化的影响。方法:采用日本血吸虫尾蚴感染小鼠建立血吸虫性肝纤维化模型,用芦荟大黄素0.3mg.kg-1.d-1治疗8周。测定小鼠肝脏匀浆丙二醛(MDA)水平,免疫组化检测其肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、局部黏着斑激酶(FAK)、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达。结果:芦荟大黄素能减轻血吸虫性肝纤维化的组织病理改变,使血吸虫肝纤维化小鼠肝脏Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达降低,显著抑制肝组织中TGF-β1、VEGF和FAK的表达(P<0.01)。结论:芦荟大黄素对血吸虫性肝纤维化有治疗作用,其作用机制可能与影响TGF-β1、VEGF和FAK的表达相关。

芦荟大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用

目的:是研究芦荟大黄素对胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用。方法:空白对照组加培养基、阴性对照组加2‰DMSO、阳性对照组加5-氟尿嘧啶、芦荟大黄素组(终浓度分别为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL);孵育12、24、48h;采用MTT法观察增殖抑制作用。结果:芦荟大黄素在25μg/mL^100μg/mL浓度范围内作用12h,对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖没有明显的抑制作用,作用24h和48h时能起到显著的抑制作用(P<0.05)。结论:芦荟大黄素能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖。

HPLC法同时测定蒙药给喜古讷-6中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量

目的:建立HPLC法同时测定给喜古讷-6中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。方法:采用高效液相色谱法Welchrom C18色谱柱(4.6mm×300mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液(68:32)为流动相,流速1mL·min^-1,检测波长254nm,柱温40℃。结果:5种成分在各自范围内均呈良好的线性关系(r≥O.9991);平均加样回收率95.73%~102.91%,RSD1.3%~1.6%。结论:高效液相色谱法灵敏度高,该实验方法简便快捷、重现性好,为完善蒙药给喜古讷-6汤的质量控制提供依据。