咪喹莫特联合慢性温和性不可预知应激建立斑秃样小鼠模型

目的通过外用咪喹莫特乳膏联合慢性温和性不可预知应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)的方法,探索建立C57BL/6J小鼠的斑秃(alopecia areata,AA)动物模型。方法选取5-7周龄C57BL/6J雌性小鼠30只,随机分成3组:空白对照组(Control组)、咪喹莫特组(IMQ组)、联合慢性温和性不可预知应激组(CUMS组)。CUMS组于实验1-21 d给予CUMS应激,IMQ组及CUMS组于实验14-21 d予以同部位等量咪喹莫特乳膏外用。实验第21天拍摄小鼠宏观表征及皮肤镜照片,并进行行为学测试,采集小鼠背部皮损及外周血。通过免疫组化染色观察毛囊CD4^(+)、CD8^(+)T细胞浸润情况,流式细胞技术检测外周血T淋巴细胞亚群中Th1/Th2、Th17/Treg细胞分化情况。结果CUMS组小鼠局部毛发斑片状脱落明显,毛发镜下可见断发、感叹号样毛发,旷场实验移动距离、直立次数、进入中央区域次数明显减少(P<0.05),强迫游泳实验静止不动明显增加(P<0.05),提示小鼠处于焦虑抑郁状态;免疫组化显示CUMS组小鼠皮损CD4^(+)、CD8^(+)T细胞在毛囊周围及毛囊球部表达明显;流式细胞术结果显示,CUMS组小鼠Th1水平明显升高(P<0.01)、Th2水平明显降低(P<0.05)、Th17水平明显升高(P<0.05)、Th1/Th2细胞比率明显升高(P<0.001)、Th17/Treg比例有上升趋势。结论外用咪喹莫特联合CUMS应激建立的C57BL/6J小鼠模型,基本模拟了人类AA疾病表现,突出了发病机制中的精神心理因素,并在一定程度上符合中医肝郁脾虚证候,提供了一种培育方便、更具性价比的AA动物造模方法。

斑秃动物模型与临床病证特点的吻合度分析

本研究基于文献梳理和病证特点赋值法对现有斑秃动物模型进行系统总结,分析其临床吻合度。结果发现,与临床吻合度较高的造模方法有细胞诱导和皮损移植,吻合度高达80%;咪喹莫特乳膏和环磷酰胺药物诱发斑秃动物模型,吻合度为72%。从斑秃疾病的发病机制、致病因素和模型的可复制性、便捷性、实用性等方面考虑,模型动物以C3H/HeJ小鼠和C57BL/6小鼠为首要选择,其他SCID鼠、B6.KM-AA小鼠、SD大鼠、BALB/c小鼠可根据斑秃实验研究内容及周期进行适当选择。分析发现,现有的斑秃动物模型造模方式大多以西医为主,缺少中医致病因素,并且斑秃病证结合模型在实际应用中并不广泛。基于此,建议后续构建斑秃模型时多考虑“病证结合”动物模型,使其更贴合于临床病证特点;可以加入中医肝肾不足、血瘀毛窍、血虚血热不同证型的相关指标及七情内伤等致病因素,增添动物精神状态、饮食饮水量、行为学等表观指标,完善与中西医临床病证特点吻合度高的斑秃动物模型。

鹰嘴豆素A对病理脱发模型小鼠毛发生长影响的初步研究

本文初步研究了鹰嘴豆素A对毛发生长的影响和机制。实验分为空白对照组、脱发模型组、鹰嘴豆素A组和米诺地尔组。以睾酮诱导的C57BL/6小鼠为脱发模型,通过对比空白对照组与其毛长、毛重以及皮肤中毛囊的差异性来判断脱发模型是否构建成功,对比两组之间激素含量的差异以研究此脱发模型对激素的影响;对比鹰嘴豆素A组与脱发模型组毛长、毛重、皮肤中毛囊和血液中激素含量的差异性来研究鹰嘴豆素A对脱发小鼠毛发生长情况和激素水平的影响;利用体外微量酶反应体系研究鹰嘴豆素A对5α-还原酶活性的抑制作用。结果显示,与空白对照组相比,脱发模型组小鼠毛长、毛重、毛囊数目显著减少,血液中雄激素含量显著升高;与脱发模型组相比,鹰嘴豆素A组小鼠毛长、毛重、毛囊数目显著增加,血液中雄激素含量显著降低。鹰嘴豆素A具有一定抑制5α-还原酶活性,相对抑制率达到50%的浓度(IC50)为94.45±6.92μmol/L。结果表明脱发模型构建成功,鹰嘴豆素A对毛发生长具有一定的促进作用,其机制可能与睾酮的转化过程或抑制5α-还原酶活性有关。

生发乳防治脱发的实验研究

目的考察生发乳对脱发的防治作用。方法运用环磷酰胺诱导大鼠脱发模型和石蜡、松香混合物脱发模型等,考察生发乳防止脱发、促进毛发生长等作用。结果生发乳各剂量组虽不能阻止环磷酰胺诱导大鼠脱发,但对环磷酰胺损伤毛囊的作用有一定的对抗作用,同时该药对正常小鼠的毛发生长有一定促进作用。结论生发乳对脱发具有防治作用。

脱发实验模型及其药物治疗学现状

脱发是一种以毛发缺失为特征的疾病,其病理生理机制及毛发再生治疗是当前研究的焦点问题。脱发实验模型的成功复制对脱发病理机制和药物治疗学研究起到关键的推动作用。本文就国内外已经建立的体内脱发动物模型,体外脱发器官模型及其实验治疗学进展作系统综述,方便研究者根据需要选择合适的模型开展实验。

复方白鲜皮乳防治脱发作用机理研究

目的研究复方白鲜皮乳防治脱发的作用及其相关机制。方法通过环磷酰胺诱导大鼠脱发模型实验、石蜡松香混合物脱发模型实验、醋酸诱导小鼠腹腔通透性实验,以及2,4-二硝基氟苯(DNFB)迟发性超敏反应动物模型实验,探讨复方白鲜皮乳防止脱发、促进毛发生长、对毛细血管通透性的影响以及免疫抑制等作用。结果复方白鲜皮乳各剂量组不能减少环磷酰胺诱导大鼠脱发,对正常小鼠毛囊数无明显影响;大、中剂量可增加环磷酰胺大鼠皮肤毛囊数,各剂量可显著降低醋酸诱导小鼠腹腔通透性增高的作用,减少DNFB增加小鼠耳肿胀的程度及DNFB小鼠的胸腺指数,与赋形剂组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方白鲜皮乳各剂量组不能阻止环磷酰胺诱导大鼠脱发,但对环磷酰胺损伤毛囊的作用有一定的对抗作用,对正常小鼠的毛发生长有一定促进作用,这些作用可能与该药具有一定的抗炎和免疫抑制作用有关。

丹参酮治疗雄激素性秃发大鼠模型的研究

目的:研究丹参酮对二氢睾酮(DHT)诱导的雄激素性秃发(AGA)大鼠模型的治疗作用。方法:32只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、DHT造模组、丹参酮组及非那雄胺组,每组8只;空白对照组大鼠不予处理,余24只大鼠应用皮下注射5 mg/kg·d DHT的方法建立AGA大鼠模型。DHT造模组大鼠不予干预;丹参酮组大鼠予0.24 g/kg·d丹参酮进行灌胃干预,灌胃从造模的第二天开始,连续给药60 d;非那雄胺组大鼠予0.12 mg/kg·d非那雄胺进行灌胃干预,时间与丹参酮组一致。观察大鼠毛发的形态学改变及皮肤组织病理学改变,检测大鼠血清及组织的雌二醇(E2)、睾酮(T)、DHT、酸性成纤维细胞生长因子(αFGF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果:DHT造模组大鼠背部毛发与空白对照组大鼠相比明显稀疏,部分毛发脱落,血清TNF-α、TGF-β1浓度较空白对照组明显升高(P<0.05);丹参酮组大鼠与DHT造模组大鼠相比,背部毛发分布整齐,毛发较为浓密;丹参酮组大鼠的血清雌二醇浓度较二氢睾酮造模组显著升高(P<0.05),血清DHT浓度较DHT造模组明显降低(P<0.05);丹参酮组大鼠组织αFGF的浓度显著高于DHT造模组大鼠(P<0.05)。结论:丹参酮治疗AGA模型大鼠有效,其治疗AGA的机制与调节组织和循环的激素代谢水平及细胞因子作用相关。

脱毛动物模型造模要素和药物防治的数据挖掘研究

目的:定量研究脱毛动物模型的造模要素和防治药物,为提高造模效率和科学评价药物有效性提供参考。方法:收集1992-2016年研究脱毛动物模型文献70篇,录入动物种别、性别、给药面积,造模试剂、剂量、受试药物、阳性对照药、测试指标等信息进行定量统计和分析。结果:常用C57BL6小鼠、KM小鼠、SD大鼠,雌性居多,给药面积常用2cm×2cm=4 cm^2;常用造模试剂有松香和石蜡、丙酸睾酮、硫化钠、环磷酰胺等,但造模剂量和时间跨度大,以背部皮肤给药为主;常测试指标为毛囊数、毛发长度及重量、毛细血管数、终毛毳毛比例、真皮厚度、毛细血管管径、皮脂分泌率和组织学等,血清中T、E2、T/E2、TCHO、TG、DHT等,机制指标涉及VEGF、HGF、IGF-Ⅰ、Bcl-2、ColⅠ、Bax等;以治疗性给药为主,给药周期为27 d左右,常用米诺地尔溶液和中药复方,涉及何首乌、丹参、侧柏叶、当归、黄芪、红花、川芎、女贞子、茯苓、熟地黄等51种药材。结论:脱发动物模型种类较多,有效性评价和作用机制研究指标亦较多,但各文献使用的造模剂量和周期差异大,导致造模效率低,失败风险大;中医药防治脱发的作用确切,但机制研究缺乏系统性和深度。

中药治疗脂溢性脱发的药理及实验模型研究概述

脂溢性脱发为皮肤科的多发病与难治性疾病之一,中药因其多成分、多靶点、协同作用等阻断未知的疾病途径,达到较好的治疗效果,并逐渐成为科研领域的研究热点。本文综述了中药治疗脂溢性脱发的药理与实验模型研究进展,为进一步深入研究提供思路与线索。

斑秃动物模型制备规范(草案)

斑秃是一种皮肤疾病,现代医学认为与遗传因素、免疫因素、环境因素及微循环改变等有关,中医学认为其多属"油风"的范畴。目前斑秃造模方法较少,常用的造模方法有静脉注射干扰素-γ、腹腔注射环磷酰胺、表皮涂抹咪喹莫特乳膏等,这些方法在一定程度上反映了斑秃临床病症特点。通过对斑秃动物模型制作方法、原理、观察指标及与中西医斑秃病症特点吻合情况进行分析总结,探讨斑秃动物模型的制备规范,以期为斑秃的深入研究及病症结合斑秃模型的建立提供可靠的依据。

复方透骨草酊对睾酮的抑制及促进毛发生长作用的初步研究

目的 探究复方透骨草酊对睾酮诱导的C57BL/6病理脱发模型小鼠的性激素水平、毛发生长及毛囊细胞凋亡情况的作用。方法 将40只小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、米诺地尔酊组、复方透骨草酊组,分别在脱毛区外给药,摘眼球取血法检测小鼠血清睾酮、雌二醇、双氢睾酮水平,原位杂交技术原位末端标记法(TUNEL)评价毛囊细胞凋亡水平。结果 与模型对照组相比,复方透骨草酊在毛发生长时间、血清睾酮及双氢睾酮水平、细胞凋亡指数方面均有明显统计学差异(P <0.01)。与空白对照组相比,复方透骨草酊组及米诺地尔酊组图像和凋亡指数均无明显差异(P> 0.05)。4组在血清雌二醇水平上无统计学差异(P> 0.05)。结论 复方透骨草酊能够促进毛发生长,其作用机制可能与缩短毛发生长休止期、延长生长期时间,降低血清中睾酮、双氢睾酮水平,抑制毛囊细胞凋亡相关。

Kopyrrol和Kopexil及其组合物对雄激素型脱发小鼠模型的影响

通过在小鼠背部涂抹睾酮,制备小鼠雄激素脱发模型,观察小鼠表观指标、血清5α-还原酶、雄激素受体和二氢睾酮水平及毛囊病理观察来综合评价吡咯烷基二氨基嘧啶氧化物(Kopyrrol)和二氨基嘧啶氧化物(Kopexil)及其组合物的防脱发效果。结果:体内效果评估表明,Kopyrrol和Kopexil及其组合物可显著促进小鼠的毛发生长速度,降低小鼠血清5α还原酶、雄激素受体及二氢睾酮水平,显著改善小鼠背部皮肤毛囊病理变化,且存在量效关系。结论:Kopyrrol和Kopexil及其组合物具有较好的防脱发效果。

家兔被毛周期转换法评价治疗男型秃发药物的疗效

上本文利用家兔被毛从生长末期到初期60天同步转换一次的特点,在家兔破毛处于生长末期起始阶段剪除背部被毛,分别外用CH一4、CH-2生发精,0.03%维甲酸,101A毛发再生精,CH-1,CH-3生发精,丽尔生发灵及50%酒精,结果发现前4种药物使家兔被毛比正常周期性波动提前20.2～23天转换成初期毛,推测这些药物也能激活男型秃发时的毫毛毛囊,从而提出家兔被毛周期转换法可以做为与男型秃发机理相关的药物筛选模型.

肾虚证雄性大鼠脱毛发模型的建立与评价

目的:观察雄激素对SD大鼠毛发生长及毛发周期的影响。方法:采用单因素及复合因素导致雄性大鼠肾虚脱发模型造模的方法,观察大鼠背部新生毛发生长情况,并通过血清中睾酮含量,HE染色切片来综合分析雄激素与脂质对毛发生长、毛囊形态、毛囊数量等的影响。结果:与空白对照组相比,模型组的毛发生长情况得到了明显抑制。结论:雄激素含量过高和高脂质饮食可导致类似肾虚型脱发。

雄激素源性脱发的动物模型研究进展

雄激素源性脱发,是最常见的脱发类型。临床上脱发虽然不会带来身体上的损害,但是严重影响患者心理。随着社会经济发展,人们对美容外观需求逐渐提高,针对脱发的研究也越发受到学界重视。雄激素源性脱发的动物模型在探究其发病机制和筛选治疗方法中发挥着关键作用。本文根据文献报道回顾了雄激素源性脱发动物模型的相关研究,对脱发病因、造模类型及造模效果等方面进行简单综述,并对动物模型在临床中的转化应用进行总结和展望。

咪喹莫特诱导C3H／HeJ小鼠脱毛实验动物模型的建立

目的利用咪喹莫特对C3H／HeJ小鼠建立一种脱毛动物模型，为人类的脱毛实验研究提供平台。方法58只C3H／HeJ小鼠随机分成7组。实验1～5组分别给予不同部位和时间间隔的咪喹莫特乳膏外用，对照1组给予空白赋形剂外用，对照2组不予任何处理。一定时间后观察各组脱毛的诱导情况。并用免疫组化法检测毛囊周围CD4^＋T、CD8^＋T细胞的聚集和原位杂交法检测毛周细胞IFN-γmRNA的转录情况。结果实验1组（项部外用每周3次）和2组（项部外用每周2次）脱毛诱导的总有效率为100％，实验3组（项部外用每周1次）40％，实验4组（背部外用每周3次）67％，实验5组（腹部外用每周3次）50％。实验1、2组与其他各组差异有统计学意义（P〈0．05）。在脱毛生成后的稳定期内毛囊周围有较多的CD4^＋T、CD8^＋T细胞浸润和IFN-γ mRNA高表达现象（P〈0．05）。结论咪喹莫特外用能诱导C3H／HeJ小鼠发生脱毛，并在临床经过和组织学特征等方面与人脱毛具有较强相似性。

基于中西医临床病症特点的脱发动物模型分析

基于脱发的临床病症特点,通过查阅脱发的相关文献,整理分析并建立脱发的西医诊断标准与中医诊断辨证标准,总结脱发动物模型的造模方法和模型特点。分析其与中西医临床病症特点的吻合度及优缺点,发现现有脱发动物模型在一定程度上能够揭示出脱发的相应机制,与西医临床病症吻合度较高。模型特征缺乏中医证候的体现,疾病与证候关联性不强,将中医证的模型与西医病的模型相结合是日后努力的方向。

二氨基嘧啶氧化物/苦参碱/齐墩果酸复合纳米脂质体的制备及防脱生发功效研究

通过纳米载体技术,将不同机制防脱生发活性物二氨基嘧啶氧化物(Kopexil)、苦参碱和齐墩果酸进行包载制备了复合纳米脂质体,并对其性质进行了检测。通过鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)和人体斑贴试验评价安全性,采用人毛乳头细胞(HDPC)和C57BL/6小鼠雄脱模型评价防脱生发功效。结果表明,复合纳米脂质体稳定性良好,安全性较高。与游离复合活性物相比,复合纳米脂质体可提高HDPC增殖率、氧化应激及雄激素刺激的细胞存活率,促进小鼠雄脱模型的毛发生长,减少真皮和毛囊损伤。二氨基嘧啶氧化物/齐墩果酸/苦参碱复合纳米脂质体在防脱生发化妆品领域将具有良好的应用前景。

常见化疗脱发研究模型的分析与比较

化疗脱发(chemotherapy-induced alopecia, CIA)是化疗药物常见的副作用,会对肿瘤患者产生一定的心理困扰,是临床有待于解决的难题之一。目前,CIA的发病机制尚未阐明,且尚无理想的预防和治疗措施。本文就几种经典的CIA研究模型的建立及其优缺点进行了分析与比较,以期为研究者在探明CIA的发病机制、寻找其防治手段时选择合适的实验模型提供参考。