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Current Situation and Development Countermeasures of Alpaca Breeding
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作者 佘秋生 张红波 +2 位作者 娄鹏雁 姬晓娜 赵桢 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第5期733-736,共4页
This paper briefly introduces the biological characteristics and value of alpaca breeding,reviews the development of alpaca breeding,describes the global distribution of alpaca and the current situation of alpaca bree... This paper briefly introduces the biological characteristics and value of alpaca breeding,reviews the development of alpaca breeding,describes the global distribution of alpaca and the current situation of alpaca breeding in the introduction of well-bred,indicates the technology of feeding,managing and deep processing.And finally some countermeasures for future development of alpaca breeding in China are put forward. 展开更多
关键词 alpaca BREEDING Current situation Development countermeasures
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Microbial Community in the Forestomachs of Alpacas (Lama pacos) and Sheep (Ovis aries) 被引量:3
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作者 PEI Cai-xia LIU Qiang +3 位作者 DONG Chang-sheng LI Hong-quan JIANG Jun-bing GAO Wen-jun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期314-318,共5页
Four 2-yr old alpacas ((48±2.3) kg) and four 2-yr old sheep ((50±1.7) kg) were used to study the pH and microbial community of forestomach from alpacas (Lama pacos) and sheep (Ovis aries) fed fre... Four 2-yr old alpacas ((48±2.3) kg) and four 2-yr old sheep ((50±1.7) kg) were used to study the pH and microbial community of forestomach from alpacas (Lama pacos) and sheep (Ovis aries) fed fresh alfalfa as the sole forage at low altitude (793 m). The forestomach fluid was taken anaerobically via the esophagus. The electric pH meter and quantitative polymerase chain reaction systems were used to study the the pH and microbial community of forestomach. The results showed that the mean pH of forestomach fluid from alpacas was higher than that from sheep (P〈0.01). The percentages of methanogens and Ruminococcusflavefaciens to total bacterial were lower in the forestomach of alpacas than that in the rumen of sheep, while the percentage of fungi and Fibrobacter succinogenes were higher. The percentage of protozoa was similar in the forestomach of alpacas and sheep. These differences can partly explain the reason that alpacas were lower methane production than sheep. 展开更多
关键词 forestomach microbial community alpacaS SHEEP ALFALFA
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Effects on the quality of frozen-thawed alpaca(Lama pacos)semen using two different cryoprotectants and extenders 被引量:1
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作者 AlexeiSantiani WilfredoHuanca +3 位作者 RómuloSapana TeodosioHuanca NéstorSepúlveda RaúlSánchez 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2005年第3期303-309, ,共7页
Aim: To evaluate two extenders and two cryoprotectant agents (CPA) for alpaca semen cryopreservation. Methods: Semen samples were obtained from four adult alpacas (Lama pacos) and frozen using extender Ⅰ (TRIS... Aim: To evaluate two extenders and two cryoprotectant agents (CPA) for alpaca semen cryopreservation. Methods: Semen samples were obtained from four adult alpacas (Lama pacos) and frozen using extender Ⅰ (TRIS, citrate, egg yolk and glucose) or extender Ⅱ (skim milk, egg yolk and fructose), each containing either glycerol (G) or ethylene glycol (EG) as CPA. Consequently, four groups were formed: 1) extender Ⅰ-G; 2) extender Ⅰ-EG; 3) extender Ⅱ-G; and 4) extender Ⅱ-EG. Semen was diluted in a two-step process: for cooling to 5 ℃ (extenders without CPA), and for freezing (extenders with CPA). Viability and acrosome integrity were assessed using trypan blue and Giemsa stains. Results: When compared, the motility after thawing was higher (P 〈 0.05) in groups Ⅱ-EG (20.0 %±6.7 %) and Ⅱ-G (15.3 %±4.1%) than that in groups Ⅰ-G (4.0 %±1.1%) and Ⅰ-EG (1.0 %±1.4 %). Viable spermatozoa with intact acrosomes in groups Ⅱ-EG (18.7 %±2.9 %) and Ⅱ-G (12.7 %±5.9 %) were higher than that in groups Ⅰ-G (5.7 %±1.5 %) and Ⅰ-EG (4.0 %±1.0 %). Conclusion: The skim milk- and egg yolk-based extenders containing ethylene glycol or glycerol to freeze alpaca semen seems to promote the survival of more sperm cells with intact acrosomes than the other extenders. (Asian J Androl 2005 Sep; 7: 303-309) 展开更多
关键词 cryopreservation glycerol ethylene glycol EXTENDERS alpaca spermatozoa
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Cloning and Expression Level Analysis of Melanocyte-stimulating Hormone Receptor 1 Gene(MC1R) in Alpacas with Different Coat Color
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作者 REN Yu-hong REN Bin +4 位作者 FAN Rui-wen ZHU Zhi-wei YANG Yong LI Hui DONG Chang-sheng 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期21-25,共5页
Specific primers for the MC1R gene of alpacas(GenBank EU1358800) were designed to amplify the cDNA sequence using RT-PCR to seek variation in the sequence and explore the relationship between the expression level of M... Specific primers for the MC1R gene of alpacas(GenBank EU1358800) were designed to amplify the cDNA sequence using RT-PCR to seek variation in the sequence and explore the relationship between the expression level of MC1R gene and alpaca coat color.The MC1R gene from white alpaca was cloned successfully and sequence analysis verified that the MC1R gene,encoding 317 amino acids,was 1081 bp in length.Compared with the existing sequence in GenBank,sequence identity was 99.9%and 7 mutations were found.Primers,designed from the sequence obtained,were used to assess the relative expression of MC1R in alpacas of different coat color using QRT-PCR and SPSS 13.0 software.Relative expression of MC1R in the skin of brown alpacas was 4.32 times higher than that in white alpacas after normalization with GAPDH(P【0.01),indicating that MC1R expression may be related to coat color of alpacas. 展开更多
关键词 alpaca melanocyte-stimulating hormone receptor 1 gene(MC1R) cloning QRT-PCR gene expression level
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Molecular Identification of Shiga-Toxin Producing and Enteropathogenic <i>Escherichia coli</i>(STEC and EPEC) in Diarrheic and Healthy Young Alpacas
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作者 Lorena Mori Rosa Perales +4 位作者 Jorge Rodríguez Carlos Shiva Ysabel Koga Geraldine Choquehuanca Cesar Palacios 《Advances in Microbiology》 2014年第7期360-364,共5页
Isolation and biochemical and molecular identification of 303 strains of Escherichia coli obtained from diarrheic and healthy young alpacas of Puno-Peru, were realized. PCR amplification for 7 virulence factor genes a... Isolation and biochemical and molecular identification of 303 strains of Escherichia coli obtained from diarrheic and healthy young alpacas of Puno-Peru, were realized. PCR amplification for 7 virulence factor genes associated with STEC, STEC O157:H7, EPEC: sxt1, sxt2, rfbO157, fliCH7, hlyA, eae y bfp were determined. A total of 39 strains (12.88%) showed amplification for one or more of these genes. Twenty three strains (59%) were classified as STEC and 16 strains (41%) as EPEC. An 88.18% (34/39) of STEC and EPEC strains were obtained from healthy alpacas and only 11.82% (5/39) from diarrheic alpacas considering this specie as potential zoonotic reservoir of STEC and EPEC. 展开更多
关键词 Shiga Toxin Producing ESCHERICHIA COLI Enteropathogenic ESCHERICHIA COLI Diarrhea YOUNG alpacaS
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Ribosomal proteins expression and phylogeny in alpaca (<i>Lama pacos</i>) skin
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作者 Junming Bai Ruiwen Fan +3 位作者 Shanshan Yang Yuankai Ji Jianshan Xie Chang-Sheng Dong 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2012年第3期231-237,共7页
Ribosomal proteins (RP) has been reported as a central player in the translation system, and are required for the growth and maintenance of all cell kinds. RP genes form a family of homologous proteins that express in... Ribosomal proteins (RP) has been reported as a central player in the translation system, and are required for the growth and maintenance of all cell kinds. RP genes form a family of homologous proteins that express in the stable pattern and were used for phylogenetic analysis. Here we constructed a cDNA library of alpaca skin and 13,800 clones were sequenced. In the cDNA library, RP genes from skin cDNA library of alpaca were identified. Then 8 RP genes were selected at random and built the phylogenetic trees from the DNA sequences by using parsimony or maximum likelihood methods for molecular and evolutionary analysis of ribosomal proteins. The results showed that the 42 RP genes of alpaca have been expressed in alpaca skin. They were highly conserved. The phylogeny inferred from all these methods suggested that the evolutionary distances of alpaca RP genes were closer to rat. 展开更多
关键词 RIBOSOMAL Protein EXPRESSION Phylogenetic Tree alpaca
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羊驼源地衣芽孢杆菌SXAU08的益生功能评价及其对小鼠肠道菌群的影响
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作者 于秀菊 胡燕姣 +5 位作者 孙铮 王蓉蓉 朱芷葳 王海东 贺俊平 杨丽华 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期6780-6790,共11页
本试验旨在探究分离自羊驼肠道的地衣芽孢杆菌SXAU08的益生功能及其对小鼠肠道菌群的影响。试验首先对分离菌株进行革兰氏染色和16S rRNA基因鉴定,将其命名为地衣芽孢杆菌SXAU08,然后测定该菌株的高温耐受性、在人工胃液和人工肠液中的... 本试验旨在探究分离自羊驼肠道的地衣芽孢杆菌SXAU08的益生功能及其对小鼠肠道菌群的影响。试验首先对分离菌株进行革兰氏染色和16S rRNA基因鉴定,将其命名为地衣芽孢杆菌SXAU08,然后测定该菌株的高温耐受性、在人工胃液和人工肠液中的存活率、抑菌活性和抗生素敏感性。选取40只21日龄清洁级昆明小鼠,随机分为2组,每组20只(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮并灌服生理盐水,试验组在基础饲粮的基础上灌服1×10^(10)CFU/mL地衣芽孢杆菌SXAU08,灌胃量均为0.3 mL/只。试验期30 d,研究该菌对小鼠肠道组织形态和菌群的影响。结果表明:1)该菌无细胞培养液可显著抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和藤黄微球菌的生长;在40~100℃处理后仍可正常生长,在人工胃液和人工肠液作用6 h后仍可存活,且呈生长趋势;对庆大霉素、氟氧沙星和阿莫西林等10种常见饲用抗菌药物敏感。2)灌服地衣芽孢杆菌SXAU08后的小鼠无不良反应,存活率为100%,剖检无病理性变化。3)与对照组相比,灌服地衣芽孢杆菌SXAU08的试验组小鼠十二指肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(V/C)值极显著提高(P<0.01),十二指肠隐窝深度极显著降低(P<0.01)。4)与对照组相比,在门水平上,试验组小鼠空肠厚壁菌门和脱硫杆菌门相对丰度显著提高(P<0.05),空肠拟杆菌门相对丰度显著降低(P<0.05),盲肠脱硫杆菌门和髌骨菌门相对丰度显著提高(P<0.05);在属水平上,试验组小鼠空肠和盲肠乳杆菌属相对丰度均显著提高(P<0.05)。综上所述,源自羊驼肠道的地衣芽孢杆菌SXAU08能够改善小鼠肠道形态,提高肠道益生菌相对丰度,调节肠道菌群,维持肠道健康,可作为益生菌的备选菌株。 展开更多
关键词 羊驼 地衣芽孢杆菌 益生性 小鼠 肠道菌群
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羊驼精液集存与人工授精的应用研究进展
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作者 李驰 钟文迪 +3 位作者 刘金洋 刘进芳 傅炽栋 邓铭 《广东畜牧兽医科技》 2024年第4期85-90,共6页
近年来,人民生活水平逐渐提高,观光畜牧业正快速发展。作为观赏动物的羊驼,养殖规模将进一步扩大。人工授精不仅可以提高优质种畜的利用率和畜群质量,降低生物安全风险,还有利于制定科学合理的繁育计划,提高养殖场生产效率。然而人工授... 近年来,人民生活水平逐渐提高,观光畜牧业正快速发展。作为观赏动物的羊驼,养殖规模将进一步扩大。人工授精不仅可以提高优质种畜的利用率和畜群质量,降低生物安全风险,还有利于制定科学合理的繁育计划,提高养殖场生产效率。然而人工授精在羊驼养殖中并没有得到广泛应用,国内对于羊驼人工授精的相关报道较少,因此,该文对羊驼精液的采集、精液的稀释和保存、人工授精技术等方面进行综述。 展开更多
关键词 羊驼 精液的采集 精液的保存 人工授精
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羊驼酪氨酸酶基因家族在不同毛色个体中的基因表达水平 被引量:35
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作者 高莉 董常生 +5 位作者 赫晓燕 贺俊平 耿建军 范瑞文 朱芷薇 游蓉丽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期895-899,共5页
黑色素对动物毛色的形成起重要作用,酪氨酸酶基因家族成员参与了黑色素的合成。为了探索羊驼酪氨酸酶基因家族的基因表达与其毛色之间的相关性,本研究利用实时荧光定量PCR技术分析了不同毛色羊驼酪氨酸酶基因家族成员TYR、TRP1和TRP2的... 黑色素对动物毛色的形成起重要作用,酪氨酸酶基因家族成员参与了黑色素的合成。为了探索羊驼酪氨酸酶基因家族的基因表达与其毛色之间的相关性,本研究利用实时荧光定量PCR技术分析了不同毛色羊驼酪氨酸酶基因家族成员TYR、TRP1和TRP2的相对基因表达量。研究结果显示:棕色羊驼中的TYR、TRP1和TRP2的mRNA相对表达量经内参基因校正后分别是白色羊驼中的13.669倍、3.417倍和8.593倍。结论表明棕色羊驼中酪氨酸酶基因家族3种成员的基因表达水平均高于白色羊驼,揭示了羊驼TYR基因家族成员的基因表达量与其毛色表型具有相关性。 展开更多
关键词 羊驼 TYR TRP1 TRP2 实时荧光定量PCR
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黑素皮质素受体1(MC1R)在不同毛色羊驼皮肤组织中的表达与定位研究 被引量:18
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作者 任玉红 杨刚 +2 位作者 范瑞文 朱芷葳 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1049-1055,共7页
旨在通过研究黑素皮质素受体1(MC1R)在羊驼皮肤组织中的定位与表达,探讨其在羊驼毛色形成中的作用机制及与毛色的相关性。选用成年白色羊驼与棕色羊驼为研究对象,采用免疫组织化学方法及免疫印迹法(Western blotting),对MC1R在羊驼皮肤... 旨在通过研究黑素皮质素受体1(MC1R)在羊驼皮肤组织中的定位与表达,探讨其在羊驼毛色形成中的作用机制及与毛色的相关性。选用成年白色羊驼与棕色羊驼为研究对象,采用免疫组织化学方法及免疫印迹法(Western blotting),对MC1R在羊驼皮肤中的表达进行定位和定量分析。结果,(1)免疫组化结果显示,MC1R蛋白在白色和棕色羊驼皮肤表皮、毛囊周围外根鞘组织、毛乳头以及毛球周围都呈阳性着色。在棕色羊驼,阳性表达部位主要分布于毛球顶部及表皮,呈强阳性着色。在白色羊驼,阳性表达部位主要在外根鞘及表皮,毛球部表达呈弱阳性。MC1R在棕色羊驼皮肤组织中极显著表达(P<0.01)。(2)Western blotting结果显示,羊驼皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约35ku与兔抗MC1R多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,且棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼,差异极显著(P<0.01)。MC1R在羊驼皮肤组织中的定位与表达量的不同与羊驼毛色表型之间存在一定的相关性。 展开更多
关键词 黑素皮质素受体1(MC1R) 免疫组化 免疫印迹 羊驼皮肤 表达
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β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位 被引量:17
11
作者 于秀菊 董常生 +4 位作者 范阔海 贺俊平 姜俊兵 朱芷葳 董彦君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期335-340,共6页
旨在研究β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色的关系。以成年白色和棕色羊驼为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术、Western blot和免疫组织化学技术,对β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤中mRNA、蛋白表达水平和定位... 旨在研究β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色的关系。以成年白色和棕色羊驼为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术、Western blot和免疫组织化学技术,对β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤中mRNA、蛋白表达水平和定位进行研究。实时荧光定量PCR结果显示,β-catenin在棕色羊驼皮肤组织中的相对基因表达量是白色羊驼皮肤组织的1.662倍;Western blot结果显示,羊驼皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约85 ku与兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼;免疫组织化学结果显示,β-catenin在羊驼皮肤的表皮、毛乳头、毛根鞘和皮脂腺中表达,根据光密度值得出,除皮脂腺之外,在表皮、毛乳头和毛根鞘的表达差异极显著(P<0.01)。结果提示β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤组织中定位以及表达的差异,表明β-catenin参与毛色形成。 展开更多
关键词 Β-CATENIN 羊驼 实时荧光定量PCR WESTERN BLOT 免疫组织化学
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α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对羊驼皮肤黑素细胞增殖和黑素生成的影响 被引量:15
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作者 于志慧 白瑞 +4 位作者 范瑞文 杨刚 董彦君 贺俊平 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1095-1101,共7页
旨在研究α-黑素细胞刺激素(α-Melanocyte stimulating hormone,α-MSH)对羊驼皮肤黑素细胞(Melano-cyte,MC)增殖和黑素合成的影响。体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度α-MSH(0、10-9、10-8、10-7mol·L-1)对羊驼皮肤黑... 旨在研究α-黑素细胞刺激素(α-Melanocyte stimulating hormone,α-MSH)对羊驼皮肤黑素细胞(Melano-cyte,MC)增殖和黑素合成的影响。体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度α-MSH(0、10-9、10-8、10-7mol·L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、表皮黑皮素-1受体(Melanocortin1receptor,MC1R)基因、小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcription factor,MITF)和酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因表达量的影响。结果表明,α-MSH处理羊驼皮肤黑素细胞3d后,羊驼皮肤黑素细胞增多,黑素含量、MC1R和TYR基因表达量都明显增加(P<0.05),以10-8mol·L-1组最为显著,MITF基因表达量也明显增加(P<0.05),以10-7mol·L-1组最为显著。α-MSH能诱导羊驼皮肤黑素细胞增殖、树突增长、黑素合成增加、MC1R、MITF和TYR基因表达量增高。 展开更多
关键词 Α-MSH 羊驼 皮肤 黑素细胞 MC1R MITF TYR
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羊驼MC1R基因克隆及其在不同毛色个体中表达水平研究 被引量:23
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作者 任玉红 任彬 +4 位作者 范瑞文 朱芷葳 杨勇 李辉 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期841-845,共5页
为了获取羊驼MC1R基因序列,探索MC1R基因表达水平与羊驼毛色之间的相关性,根据GenBank已发表序列(EU1358800)设计1对引物,以羊驼皮肤总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增并成功获得了中华白色羊驼MC1R基因cDNA序列,长度为1081 bp,编码317个... 为了获取羊驼MC1R基因序列,探索MC1R基因表达水平与羊驼毛色之间的相关性,根据GenBank已发表序列(EU1358800)设计1对引物,以羊驼皮肤总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增并成功获得了中华白色羊驼MC1R基因cDNA序列,长度为1081 bp,编码317个氨基酸,与已发表序列进行对比,同源性为99%,发现7处突变。根据所克隆序列设计引物,采用实时荧光定量PCR技术(QRT-PCR),分析MC1R基因在白色和棕色羊驼皮肤中的基因表达量,并对结果进行统计分析。结果表明:经过内参基因校正后,棕色羊驼皮肤中MC1R基因的相对表达量是白色羊驼相对表达量的4.32倍(P<0.01)。MC1R基因表达量的差异与羊驼毛色表型之间可能存在一定的相关性。 展开更多
关键词 羊驼 MC1R基因 克隆 QRT-PCR 基因表达水平
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青年羊驼耳部和背部皮肤组织中miRNA差异表达研究 被引量:17
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作者 赫晓燕 郝欢庆 +5 位作者 刘丹丹 范瑞文 曹靖 朱芷葳 董彦君 邢海权 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1016-1022,共7页
羊驼是毛用型经济动物,其耳部和背部的毛发品质和生长速度存在差异.MicroRNA(miRNA)是新发现的一类在转录后水平调控基因表达的非编码RNA分子,为比较miRNA在羊驼耳部和背部皮肤的表达差异,从而探讨miRNA在羊驼皮肤和毛囊发育过程中的调... 羊驼是毛用型经济动物,其耳部和背部的毛发品质和生长速度存在差异.MicroRNA(miRNA)是新发现的一类在转录后水平调控基因表达的非编码RNA分子,为比较miRNA在羊驼耳部和背部皮肤的表达差异,从而探讨miRNA在羊驼皮肤和毛囊发育过程中的调控作用,本实验提取羊驼皮肤总RNA,制备了羊驼皮肤miRNA芯片,通过与Affymetrix多物种miRNA芯片跨物种杂交对耳部和背部皮肤的miRNA进行筛选,并通过实时荧光定量PCR进行了验证,同时利用在线生物信息软件预测miRNA靶基因.结果显示,羊驼耳部和背部皮肤中高表达差异2倍以上的miRNA有39个,实时荧光定量PCR检测let-7b和miR-24在2个部位皮肤中的差异表达量与miRNA基因芯片结果一致;预测到let-7b和miR-24的靶基因中包含有与毛囊生长发育和毛发品质相关的基因,提示这些miRNA可能参与羊驼皮肤和毛囊的生长发育、更新以及毛发品质的调控. 展开更多
关键词 羊驼 耳部 背部 皮肤 MIRNA芯片 微RNA 差异表达
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Wnt3a在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位 被引量:12
15
作者 宋云飞 田雪 +7 位作者 卢绪秀 郭青云 张丹丽 解晓晶 于秀菊 贺俊平 王海东 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期785-790,共6页
本研究旨在探索Wnt3a在羊驼皮肤中的表达与定位。以不同毛色的成年羊驼为研究对象,应用荧光定量PCR技术分析不同毛色羊驼皮肤Wnt3a基因的相对表达量,并运用Western blotting及免疫组织化学法对Wnt3a蛋白在不同毛色羊驼皮肤中进行表达和... 本研究旨在探索Wnt3a在羊驼皮肤中的表达与定位。以不同毛色的成年羊驼为研究对象,应用荧光定量PCR技术分析不同毛色羊驼皮肤Wnt3a基因的相对表达量,并运用Western blotting及免疫组织化学法对Wnt3a蛋白在不同毛色羊驼皮肤中进行表达和定位研究。结果:荧光定量PCR结果显示棕色羊驼中Wnt3amRNA相对表达量是白色羊驼的2.970 2倍;Western blotting结果表明,羊驼皮肤组织组蛋白提取物中存在相对分子质量约39ku的产物,棕色羊驼皮肤平均蛋白表达量显著高于白色羊驼;免疫组织化学结果显示Wnt3a在羊驼皮肤毛囊的根鞘和毛球部呈阳性表达,根据光密度值分析得出Wnt3a在棕色和白色羊驼毛囊中的表达差异显著(P<0.05)。通过以上研究显示Wnt3a可能与羊驼毛色形成具有相关性。 展开更多
关键词 WNT3A 羊驼 皮肤 免疫组化 荧光定量PCR Westernblotting
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CDK5对羊驼皮肤黑色素细胞TYR和MITF mRNA表达的调节 被引量:10
16
作者 张瑞娜 范瑞文 +5 位作者 程志学 田雪 刘佳 高磊 马峥 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1712-1717,共6页
为了证实CDK5是否参与羊驼毛色的形成,本研究主要对CDK5在羊驼黑色素细胞中调节TYR和MITF的表达进行了研究。本研究首先采用免疫组织化学方法检测CDK5在羊驼皮肤黑色素细胞中的定位,再通过脂质体将CDK5转染于羊驼皮肤黑色素细胞,之后通... 为了证实CDK5是否参与羊驼毛色的形成,本研究主要对CDK5在羊驼黑色素细胞中调节TYR和MITF的表达进行了研究。本研究首先采用免疫组织化学方法检测CDK5在羊驼皮肤黑色素细胞中的定位,再通过脂质体将CDK5转染于羊驼皮肤黑色素细胞,之后通过Western blot和qRT-PCR的方法检测转染后黑色素细胞中CDK5蛋白、TYR和MITF mRNA的表达。免疫组化结果显示CDK5位于黑色素细胞的胞质和细胞核内;West-ern blot结果显示转染组黑色素细胞中CDK5蛋白表达量明显高于对照组;qRT-PCR结果显示CDK5可下调MITF的表达,同时上调TYR的表达,转染组黑色素细胞中MITF和TYR mRNA的表达水平分别是对照组细胞的0.264 9和3.931 3倍。结果揭示CDK5可能通过调节黑色素细胞核中TYR和MITF mRNA的表达,从而参与调控羊驼毛色形成。 展开更多
关键词 CDK5 TYR MITF 黑色素细胞 毛色 羊驼
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酪氨酸酶在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达与定位 被引量:15
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作者 姜俊兵 于秀菊 +1 位作者 贺俊平 董常生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2555-2560,共6页
【目的】研究酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)在不同毛色羊驼皮肤组织中的表达与定位,为揭示羊驼被毛颜色形成的机制奠定基础。【方法】采用半定量RT-PCR方法检测TYR mRNA在不同毛色羊驼皮肤组织中的相对表达量,采用免疫组织化学技术对TYR在... 【目的】研究酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)在不同毛色羊驼皮肤组织中的表达与定位,为揭示羊驼被毛颜色形成的机制奠定基础。【方法】采用半定量RT-PCR方法检测TYR mRNA在不同毛色羊驼皮肤组织中的相对表达量,采用免疫组织化学技术对TYR在羊驼皮肤中的表达进行定位。【结果】不同毛色羊驼皮肤组织中均有TYR基因mRNA的表达,有色被毛皮肤组织中TYR的基因mRNA表达量显著高于白色被毛组织的表达量;在有色被毛皮肤组织中,TYR阳性反应区主要集中于毛球部位,即毛根成形部;而白色被毛组织中,TYR阳性反应区主要位于毛根壶腹部及膨大部,即毛根永久部。【结论】综合分析TYR基因mRNA表达量及蛋白定位结果可知,TYR是成熟黑色素细胞的标记分子之一,羊驼毛色形成取决于成熟黑色素细胞在毛囊组织中的相对数量及分布部位。 展开更多
关键词 羊驼 被毛颜色 酪氨酸酶 半定量RT-PCR 免疫组织化学
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IGF-1对羊驼皮肤成纤维细胞作用的研究 被引量:10
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作者 王婷 邢海权 +4 位作者 曹靖 王海东 申艳 于秀菊 赫晓燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期880-887,共8页
旨在通过研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对羊驼皮肤成纤维细胞的作用来了解IGF-1对羊驼毛皮生长发育的调控作用。本研究中,(1)利用免疫组织和细胞化学技术,研究IGF-1及其受体IGF-1R在成年羊驼皮肤和培养的成纤维细胞中的表达;(2)观察不... 旨在通过研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对羊驼皮肤成纤维细胞的作用来了解IGF-1对羊驼毛皮生长发育的调控作用。本研究中,(1)利用免疫组织和细胞化学技术,研究IGF-1及其受体IGF-1R在成年羊驼皮肤和培养的成纤维细胞中的表达;(2)观察不同浓度体外重组人IGF-1对成纤维细胞增殖形态学的影响;(3)采用QRT-PCR技术检测添加不同浓度IGF-1对成纤维细胞的IGF-1R、转化生长因子β1(TGF-β1)和角质细胞生长因子(KGF)基因表达量的影响。结果:(1)IGF-1及其受体IGF-1R蛋白在成年羊驼皮肤和培养的成纤维细胞中均有表达;(2)添加IGF-1对成纤维细胞的数量和形态都有明显促进作用,10ng·mL-1组的效果最显著;(3)IGF-1影响成纤维细胞的IGF-1R、TGF-β1和KFG基因的表达。与对照组相比,10ng·mL-1时KGF基因表达水平是3.332倍,IGF-1R基因表达水平是4.479倍。TGF-β1基因表达水平最低为0.405倍,1ng·mL-1时为0.813倍,100ng·mL-1时为0.434倍。结果表明,成纤维细胞既是IGF-1作用的靶器官,又是内分泌器官。IGF-1促进细胞增殖,同时提高其IGF-1R和KGF基因表达量,降低TGF-β1基因表达量,提示IGF-1可通过调节其受体和内分泌因子的表达量而调控羊驼毛的生长发育。 展开更多
关键词 羊驼 毛发生长 IGF-1 成纤维细胞
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羊驼皮肤黑素细胞体外培养鉴定 被引量:8
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作者 白瑞 于志慧 +4 位作者 范瑞文 杨刚 董彦君 贺俊平 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期549-556,共8页
旨在探讨羊驼皮肤黑素细胞体外培养和鉴定的方法,为建立羊驼皮肤黑素细胞系奠定基础,也为毛色基因功能和体细胞克隆等研究提供理想的生物材料。采用DispaseⅡ酶和胰酶/EDTA两步消化法获取羊驼皮肤黑素细胞,并进行体外原代和传代培养。... 旨在探讨羊驼皮肤黑素细胞体外培养和鉴定的方法,为建立羊驼皮肤黑素细胞系奠定基础,也为毛色基因功能和体细胞克隆等研究提供理想的生物材料。采用DispaseⅡ酶和胰酶/EDTA两步消化法获取羊驼皮肤黑素细胞,并进行体外原代和传代培养。观察细胞各个阶段的形态,通过生长曲线等手段研究羊驼皮肤黑素细胞的增殖能力,利用多巴(Dopa)染色、免疫细胞化学染色、电镜、及RT-PCR等方法对所获得的细胞进行鉴定。在生长培养基作用下,细胞增殖旺盛;多巴染色、电镜、RT-PCR及免疫组化染色结果均表明培养黑素细胞的生物学功能正常,保持了正常的生物学特性。本研究体外成功建立了羊驼皮肤黑素细胞培养体系。 展开更多
关键词 羊驼 黑素细胞 体外培养 鉴定
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内皮素-3对羊驼黑色素细胞特征及细胞内毛色基因表达的影响 被引量:8
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作者 耿建军 白俊明 +3 位作者 范瑞文 杨姗姗 庞亚妙 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1070-1077,共8页
为了研究内皮素-3(Endothelin-3,EDN3)对羊驼皮肤黑色素细胞内毛色形成相关基因的影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中添加不同浓度(0、10-9、10-8、10-7 mol·L-1)的EDN3,通过MTT法、紫外分光光度法、qRT-PCR和Western b... 为了研究内皮素-3(Endothelin-3,EDN3)对羊驼皮肤黑色素细胞内毛色形成相关基因的影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中添加不同浓度(0、10-9、10-8、10-7 mol·L-1)的EDN3,通过MTT法、紫外分光光度法、qRT-PCR和Western blotting技术分别检测黑色素细胞活力、黑色素产量、相关基因和蛋白(包括内皮素受体B(Endothelin receptor B,EDNRB)、KIT、小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcriptionfactor,MITF)和酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR))的表达情况。结果表明,在羊驼皮肤黑色素细胞添加EDN3 72h后,黑色素细胞呈双树突或三树突状,且细胞数量明显增加;在添加适当浓度10-8 mol·L-1时,细胞具有明显的增殖,细胞内EDNRB、KIT、MITF和TRY在转录水平和蛋白水平的表达量被上调,黑色素细胞产生黑色素的量也被上调,且与对照组相比,差异显著(P<0.05)。EDN3对羊驼黑色素细胞内黑色素的产生具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 EDN3 羊驼 黑色素细胞
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