G蛋白信号调节体-G alpha相互作用蛋白C端2通过上调SNIAL1表达及促进胃癌细胞增殖、侵袭与迁移

目的利用胃癌细胞株、患者胃癌组织及基因表达谱(GEPIA)数据库中相关数据确定G蛋白信号调节体-G alpha相互作用蛋白C端2(GIPC2)蛋白在胃癌中的表达量,探讨其在体外对胃癌细胞增殖及迁移的作用.方法将GIPC2的短发卡RNA(shRNA)以及过表达质粒分别转染GIPC2高表达及低表达的细胞株BCG803及AGS中,利用细胞增殖和迁移实验探讨GIPC2在胃癌细胞株中的作用,同时探讨GIPC2对化疗药物敏感性的影响.两组间比较采用t检验,两组以上的比较采用单因素方差分析.使用Spearman秩相关检验验证GIPC2与SNAIL1的表达是否存在线性相关.结果GIPC2在胃癌细胞株及胃癌患者组织中(相对表达量胃癌组织比正常对照:2.844±1.201比1.601±0.612,P<0.05)高表达,GIPC2可以促进胃癌细胞的增殖和迁移,并使细胞周期相关蛋白(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)及转移相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达增加.其中划痕实验显示,敲低组迁移率明显低于对照组(0.812±0.012、0.525±0.016,P<0.05);迁移侵袭实验显示,高表达组细胞迁移率和侵袭率分别是对照组的4.5、3.9倍(P<0.05);同时,GIPC2能够降低肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,使细胞中化疗药物敏感性相关基因CD133、CD44和性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-2(SOX-2)表达均增加.机制上,在上皮-间充质转化(EMT)中发挥重要作用的转录因子SNAIL1蛋白在表达上与GIPC2呈正相关(r=0.435,P<0.05);敲低组SNAIL1蛋白表达量(0.121±0.011)明显低于对照组SNAIL1蛋白表达量(1.032±0.011,P<0.05);过表达组mRNA水平(3.351±0.121)明显高于对照组mRNA水平(1.021±0.031,P<0.05).结论GIPC2具有促进胃癌细胞增殖和迁移的作用,这一作用主要是通过SNAIL1蛋白来实现的.

带3蛋白C端和血型糖蛋白A相互作用及其抗原相关性的研究

采用高效液相色谱法分离鉴定了红细胞膜蛋白质跨膜域的亲水性肽链 ,结果显示血型糖蛋白A (GPA)Lys10 1～Asp130与带 3蛋白有相关性 .为进行深入研究 ,采用RT PCR方法从K5 6 2细胞中扩增了 410bp的GPA基因 ,分别克隆到酵母双杂交BD端表达质粒和杆状病毒转移载体上 .同时 ,以含有带 3蛋白全长基因的质粒为模板扩增了 34 8bp的带 3蛋白C端基因 ,将其克隆到酵母双杂交AD端表达质粒 .经酵母双杂交营养缺陷培养选择和 β半乳糖苷酶检测证实GPA与带 3蛋白之间存在相互作用 .GPA表达产物分别经抗带 3蛋白和抗GPA抗体进行蛋白质印迹分析 ,表明二者具有免疫交叉反应 .上述结果表明带 3蛋白与GPA在结构与功能上存在着密切联系 .

酵母双杂交筛选与果蝇C(2)M相互作用的蛋白

同源染色体联会时形成的联会复合体(Synaptonemal complex,SC)是由减数分裂前期Ⅰ多种蛋白质聚集而成的超级复合结构。生殖细胞特异性的核蛋白C(2)M(Crossover suppressor on 2 of Manheim)在染色体上高度聚集可以诱导SC的形成。本文采用酵母双杂交方法,利用C(2)M的诱饵表达载体筛选果蝇c DNA文库,共发现40个可能与C(2)M相互作用的蛋白,包括多种DNA及组蛋白结合蛋白、ATPase、转录调节因子。从筛选的结果中,选取wech和Psf1基因构建了转基因果蝇,并在生殖细胞中进行了基因沉默,结果显示联会复合体的消失受到延迟。上述结果表明Wech和Psf1蛋白可能与C(2)M形成复合物,共同参与联会复合体的形成或其稳定性的维持。

Bcl2相互作用蛋白3在子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜异位症发病中的意义

目的探究Bcl2相互作用蛋白3(BCL2 Interacting Protein 3,BNIP3)表达变化与正常子宫内膜周期的关系及在子宫内膜异位症(EMs)发病中的意义。方法从GEO数据库获得GSE51981、GSE6364、GSE4888、GSE25628的基因表达谱,通过生物信息学手段比较正常子宫内膜周期组增殖期到分泌期基因表达变化,分析基因富集情况以及BNIP3在正常子宫内膜月经周期中的表达变化;比较数据集中正常子宫内膜周期组人群与内异症病人差异趋势表达基因以及各样本中BNIP3的表达,总结其在EMs发病中的意义;取23例Ⅲ⁃ⅣEMs病人正位及异位子宫内膜组织,以及25例因子宫肌瘤行子宫切除术病人的子宫内膜组织作为正常对照,通过实时荧光定量qRT⁃PCR及蛋白质印迹法(Western Blot)检测BNIP3在各组织中的表达,验证BNIP3表达变化同EMs发病的关系。结果GSE4888、GSE6364、GSE51981数据集中,BNIP3在增殖期与分泌期相对表达量分别为100.22±16.54、332.80±32.29,487.68±100.09、1425.83±157.47,8.36±0.69、9.82±0.71,均差异有统计学意义(P<0.0001);GSE25628数据集中,BNIP3在正常子宫内膜组织、EMs病人正位、EMs病人异位子宫内膜组织中的表达量分别为(10.11±0.72)、(9.19±0.56)、(8.52±0.57),三组间对比差异有统计学意义;临床样本中,正常内膜组织、EMs正位内膜组织、EMs异位内膜组织中BNIP3的mRNA表达量分别为1.15±0.57、0.56±0.19、0.36±0.08,三组间对比差异有统计学意义;BNIP3蛋白在正常子宫内膜组织、EMs正位内膜组织、EMs异位内膜组织中的表达水平分别为1.00±0.41、0.58±0.20、0.38±0.12,三组间对比均差异有统计学意义。结论BNIP3在子宫内膜组织中的表达降低与EMs的发生具有相关性。

基质金属蛋白酶-2C端片段pex的克隆、测序及真核表达载体的构建

目的 :克隆小鼠基质金属蛋白酶 - 2 ( MMP- 2 ) C端片断 pex编码区的 c DNA序列 ,并构建其真核表达载体 ,为进一步研究其抑制肿瘤作用奠定基础。方法 :根据基因 Gen Bank中 MMP- 2基因的碱基序列 ,利用 RT- PCR的方法从 NIH3T3细胞中分别扩增信号肽及目的基因 pex,然后用多重 PCR的方法将两个片段拼接起来 ,再将拼接起来的目的片段 sig- pex与 p MD1 8T载体连接作全自动测序 ,利用亚克隆的方法将 sig- pex c DNA片段克隆到 pc DNA3.1载体中。结果 :DNA测序证实该片断序列与文献报道完全一致。结论 :成功构建出 pc DNA3.1 - sig-

C2神经酰胺对帕金森病模型鼠多巴胺能神经元的保护作用

背景:C2神经酰胺可减少Alpha突触核蛋白(Alpha-Synuclein,α-Syn)寡聚体的形成,其作为蛋白磷酸酶2A激动剂在中枢神经系统对细胞老化具有重要调节作用。目的:探究C2神经酰胺对多巴胺能神经元的保护作用机制。方法:将25只C57BL/6系小鼠随机分为对照组、模型组及C2神经酰胺低、中、高剂量组,每组5只。除对照组之外,其他各组均通过左侧纹状体注射突变型A53Tα-Syn寡聚体建立帕金森病小鼠模型,在纹状体注射第30天后,3个C2神经酰胺各剂量组小鼠一次性经胃灌注溶于生理盐水中的各剂量C2神经酰胺(1,5,10μg/g),对照组及模型组同法灌注等量生理盐水,于造模后第30-90天,连续每天给药,共60 d,期间观察各组小鼠行为学变化。在纹状体注射第90天后,在适度麻醉条件下对各组小鼠灌注取脑,以免疫组织化学染色分析小鼠中脑黑质多巴胺能神经元的变化,以ELISA法检测小鼠中脑α-Syn寡聚化和磷酸化水平,并分析影响α-Syn磷酸化的相关酶活性变化。结果与结论:①C2神经酰胺对经纹状体注射的突变型A53Tα-Syn寡聚体所导致的小鼠帕金森病样运动障碍具有改善作用,且C2神经酰胺高剂量组对帕金森病模型鼠运动障碍的改善作用更为明显(P<0.01);②突变型A53Tα-Syn寡聚体致使小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数目明显减少(P<0.01),而C2神经酰胺高剂量组黑质多巴胺能神经元数目则明显增多(P<0.01);③与模型组相比,C2神经酰胺高剂量组小鼠中脑内α-Syn寡聚体和磷酸化α-Syn水平明显降低(P<0.01),而神经酰胺的水平增高(P<0.05),蛋白磷酸酶2A活力明显上调(P<0.01);④上述数据说明,C2神经酰胺可通过改善小鼠中脑组织α-Syn的磷酸化修饰环境,缓解了由寡聚的α-Syn所诱导的神经毒性作用,保护了小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数量的减少,从而减轻帕金森病的运动障碍程度。

人基质金属蛋白酶-2C端片段PEX的高效表达及活性研究

将人的PEX基因克隆到表达载体pET-15b上,构建重组工程菌BL21(DE3)/pETPEX。采用5L发酵罐补料分批培养,当菌体密度增长到OD600为35时,用IPTG诱导,PEX蛋白形成包涵体,最终OD600达到90,PEX的表达水平达2.2g/L。包涵体蛋白经过纯化、复性后,获得生物活性。PEX能够有效抑制HUVECs的增殖,加药96h后,20nmol/L PEX对HUVECs生长有77.9%的抑制率;PEX能阻断bFGF诱导的鸡胚尿囊膜血管生成,抑制率为85%;小鼠实验表明,当给药剂量为5mg/kg时,PEX对S180肉瘤有31.4%的抑瘤率(P<0.05)。PEX是一个有效的抑制新血管生成和肿瘤生长的蛋白质因子。

拓扑法分析丙型肝炎病毒包膜糖蛋白E_1、E_2的C端膜锚着区

在宿主细胞内,成熟的丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E1、E2滞留在内质网腔内,而不是在细胞质内和细胞膜上,曾有报道认为这与E1、E2的C端有关。

人MASP1和MASP2 C端片段的原核表达

目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1、2(MASP1、MASP2)C端片段。方法采用PCR技术从分别含人MASP1、MASP2cDNA的质粒pGEM-MASP1、pGEM-MASP2中扩增MASP1、MASP2C端基因片段,将其插入原核表达载体pET17b,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达MASP1、MASP2C端蛋白,通过Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE、Western blot和ELISA进行鉴定。结果分别从pGEM-MASP1和pGEM-MASP2中扩增到约1300bp的基因片段,构建成重组表达载体,经酶切出现约3300bp和1300bp片段,测序结果与预期的完全一致。纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr40000蛋白带,该蛋白可与抗His抗体反应。结论获得了重组人MASP1和MASP2C端片段蛋白及其表达菌株,为MASP分子的进一步研究提供了条件。

表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组腺病毒的构建

为研制表达猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组腺病毒疫苗,根据PCV-2ORF2(Cap)基因序列和耶尔森菌侵袭素C端(InvC)序列,克隆获得Cap和InvC基因后,插入pAdShttle-CMV载体构建重组穿梭载体pAdShttle-Cap-InvC,经PmeI线性化后,转化入BJ5183感受态细菌与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-Cap-InvC。重组质粒经PacⅠ线性化后,转染HEK293细胞,连续传代后获得重组腺病毒。应用PCR、Western blot和间接免疫荧光(IFA)技术分别检测重组腺病毒中Cap和InvC基因及表达。结果表明,成功构建了表达PCV-2Cap蛋白和InvC的重组腺病毒rAd-CapInvC,经过噬斑纯化和连续传代,重组腺病毒TCID50可达10-9.32/mL,为PCV-2重组腺病毒活载体疫苗的研发提供了基础材料。

褪黑素对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制

目的研究褪黑素(MLT)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用,并探讨其机制。方法将H9c2心肌细胞随机分为对照组、H/R组、MLT组和受体相互作用蛋白激酶3抑制剂(GSK-872)组。对照组用不含药物的DMEM处理,H/R组对H9c2细胞进行缺氧4 h/复氧6 h处理,MLT组和GSK-872组细胞在H/R前2 h分别给予100μmol/L MLT和5μmol/L GSK-872预处理。采用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,碘化丙啶(PI)染色观察细胞坏死情况,Western blot检测RIPK3和磷酸化钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶(p-CaMK)Ⅱ的表达。结果与对照组比较,H/R组细胞存活率显著下降(P<0.01),培养液中LDH含量明显升高(P<0.01),坏死细胞数量显著增多(P<0.01),RIPK3和p-CaMKⅡ蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与H/R组比较,MLT组和GSK-872组细胞存活率明显提高(P<0.01),LDH含量显著降低(P<0.01),坏死细胞明显减少(P<0.01),RIPK3和p-CaMKⅡ蛋白的表达明显下调(P<0.01)。而MLT组与GSK-872组上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论褪黑素可减轻H9c2心肌细胞的H/R损伤,其机制可能与抑制RIPK3/CaMKⅡ信号通路有关。

用酵母单杂交系统筛选人IL-2Rα基因NIRS元件结合蛋白的cDNA

目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和βgal活性;测序后分析发现它们分别属于4个不同蛋白的cDNA克隆。其中一个是已知的反式作用因子Ku抗原,另一个是RNA聚合酶Ⅰ的转录终止因子。它们的C末端分别含有SAP和SANTDNA结合结构域。结论在Jurkat细胞中存在与NIRS元件相互作用的结合蛋白,相关的研究正在进行中。

绝经后2型糖尿病患者骨硬化蛋白、PINP、CTX与骨密度相关性研究

目的比较绝经后2型糖尿病患者骨质疏松组、低骨量组、骨量正常组血清骨硬化蛋白(sclerostin,SO)水平,探讨SO与Ⅰ型前胶原氨基末端(N端)前肽(procollagen typeⅠN-terminal propetide,PINP)、Ⅰ型胶原C端肽(typeⅠcollagen carboxyterminal peptide,CTX)、骨密度(bone mineral density,BMD)的关系。方法比较绝经后2型糖尿病患者骨质疏松症组、低骨量组、骨量正常组3组间年龄、绝经年限、糖尿病病程、体重指数、股骨颈及平均腰椎BMD、空腹血糖、糖化血红蛋白、25-(OH)D3、SO、PINP、CTX各指标的差异,并做SO与上述指标的单因素相关性分析和多元线性回归分析。结果 (1)骨质疏松症组年龄、绝经年限显著高于低骨量组、骨量正常组(P均=0.000),低骨量组明显高于骨量正常组(P=0.009、0.002);(2)绝经后2型糖尿病患者中25-(OH)D3缺乏113例(90.4%);(3)骨质疏松症组SO、PINP水平显著高于低骨量组、骨量正常组(P=0.000),低骨量组SO水平明显高于骨量正常组(P=0.045);(4)SO与PINP、年龄、绝经年限正相关(r=0.978、0.194、0.205),与股骨颈BMD、平均腰椎BMD、体重指数负相关(r=-0.518、-0.349、-0.249),多元线性回归分析显示SO与PINP呈正相关(β=7.015,P=0.000)、与股骨颈BMD呈负相关(β=-11.245,P=0.023)。结论 (1)绝经后2型糖尿病合并骨质疏松者SO水平明显增高,与PINP水平呈显著正相关,与股骨颈BMD呈显著负相关;(2)25(OH)D3在绝经后2型糖尿病患者中普遍缺乏。

ERK5和JNK参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化

目的研究细胞外信号调节激酶5(ERK5)和c-Jun N端激酶(JNK)在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法利用重组腺病毒将BMP9基因导入C3H10T1/2细胞,Western blot法检测加入BMP9及不同浓度ERK5特异性抑制剂BIX02189或JNK特异性抑制剂SP600125后ERK5和JNK的激活情况;实时定量PCR(qRT-PCR)检测BMP9诱导1周后心肌特异性基因肌细胞增强因子2C(MEF2C)、GATA结合蛋白4(GATA4)表达;Western blot法检测经BMP9诱导3周后心肌特异性蛋白缝隙连接蛋白43(CX43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达和免疫荧光技术检测CX43、cTnT在细胞内的表达。结果在转染效率达50%左右的情况下,BMP9可过度激活ERK5和JNK,使其磷酸化水平显著增高(P<0.05);BIX02189抑制ERK5激活后,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的心肌分化标志物MEF2C、GATA4、CX43、cTnT均受到显著抑制(P<0.05),JNK特异性抑制剂SP600125也可抑制MEF2C、GATA4、CX43、cTnT表达,但对MEF2C及GATA4的抑制不如BIX02189显著(P<0.05)。结论 ERK5和JNK的过度激活参与了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞向心肌样细胞的分化。

NT-proBNP、hs-CRP和同型半胱氨酸对诊断2型糖尿病合并冠心病的意义

目的探讨联合测定N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、同型半胱氨酸(Hcy)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)三种心肌损伤标志物对2型糖尿病合并冠心病的早期诊断价值。方法正常对照组40例、2型糖尿病患者40例、2型糖尿病合并冠心病组85例均检测NT-proBNP、Hcy和hs-CRP,并对结果统计分析。结果①T2DM-CHD组NT-proBNP、Hcy和hsCRP水平与正常对照组及T2DM比较均显著升高(P<0.05)。②三种指标单项检测NT-proBNP、Hcy和hs-CRP预测CHD的敏感性分别为70.2%、67.3%、69.8%,特异性为78.5%、79.1%、70.2%。③三种指标联合检测可将特异性提高到90.0%。结论 NT-proBNP、Hcy和hs-CRP检测水平在2型糖尿病合并冠心病患者中明显升高,且联合检测可提高特异性,有助于2型糖尿病合并冠心病的诊断、治疗及风险评估。

2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者血清CTRP9、SFRP5、TXNIP水平变化的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并颈动脉粥样硬化(CAS)患者血清脂肪细胞因子C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白(CTRP9)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、硫氧环蛋白相互作用蛋白(TXNIP)水平的变化及其意义。方法选取我院2015年1月至2017年1月收治的140例初诊T2DM患者(T2DM组)、选取70例健康体检对象作为对照组,检测两组对象的血清CTRP9、SFRP5、TXNIP水平,并根据颈动脉超声检查结果将T2DM组分为CAS组、非CAS组进行亚组分析。结果 T2DM组患者的血清CTRP9、SFRP5水平均显著的低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05); T2DM组患者的血清TXNIP水平显著的高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05); CAS组患者的血清CTRP9、SFRP5水平均显著的低于非CAS组,差异有统计学意义(P<0.05); CAS组患者的血清TXNIP水平、IMT值显著的高于非CAS组,差异有统计学意义(P<0.05); T2DM合并CAS患者的血清CTRP9、SFRP5水平与患者的IMT呈显著的负相关关系,差异有统计学意义(P<0.05); CAS组患者的血清TXNIP水平与IMT值呈正相关关系(P <0. 05)。结论 T2DM合并CAS患者血清CTRP9、SFRP5、TXNIP水平显著的升高,并且与患者颈动脉斑块形成有关。

稳定或不稳定骨折愈合与巨噬细胞及骨形态发生蛋白2的关系

目的:研究稳定或不稳定骨折愈合过程中巨噬细胞和骨形态发生蛋白2 (BMP - 2 )的分布与作用,探讨不同力学条件下骨折愈合的细胞与分子机理。方法:60只成年雄性SD大鼠随机分为固定组和非固定组,每组30只。麻醉后,采用三点弯曲法造成右胫骨中段闭合性骨折模型。固定组行髓内钉固定,非固定组不做任何固定。处理后不同时间取材行组织学及免疫组化检查和分析,测定骨折愈合过程中骨折断端巨噬细胞分化抗原(CD68)和BMP - 2阳性细胞计数和浓度值变化。结果:两组CD68表达第1天均为阳性,第2天下降,第4天达到高峰,以后下降,第8天固定组表达消失,第1 0天非固定组表达也消失。固定组CD68计数均高于非固定组,差异有显著性(P <0 .0 5)。两组BMP - 2表达第4天均存在,第8天达高峰,以后下降,第2 8天仍有表达。其中第4、5、8天固定组BMP - 2计数均高于非固定组,差异有显著性(P <0. 0 5) ,第1 4、2 1、2 8天非固定组BMP - 2计数均高于固定组,差异有显著性(P <0.0 5)。结论:骨折处力学条件能影响胞外基质分子的表达和巨噬细胞的迁入,并改变参与骨折愈合的细胞间的相互作用。巨噬细胞在软组织和骨愈合中都是一个重要因素。BMP -

人CtBP2与CCNH相互作用的初步研究

CtBP2(E1AC-terminal binding protein 2)作为辅阻遏物与多种转录因子联系而参与到很多生物过程中,如细胞分化、凋亡、发育和肿瘤发生等,然而其中许多作用机制尚不明了.为了对CtBP2进行深入研究,利用高通量酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵,与含有1000个人肝基因克隆的酵母双杂交文库进行接合筛选获得了一个与它相互作用的猎物蛋白CCNH(Cyclin H).通过GST-pull down、免疫共沉淀和亚细胞共定位等实验进一步证明了这两个蛋白在体外和体内的相互作用.

核苷酸结合寡聚化结构域2—受体相互作用蛋白2—核因子-κB信号通路在肺曲霉病中的表达情况及意义

目的研究核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)—受体相互作用蛋白2(RIP2)—核因子-κB(NF-κB)信号通路在肺曲霉病患者肺泡灌洗液中的表达水平及其作用机制。方法选取2016年1月至2018年12月福建省老年医院呼吸与危重症医学科收治的62例肺曲霉病患者,男34例,女28例,年龄(53.58±12.34)岁,年龄范围为41~68岁,根据2008年美国感染病学会曲霉病诊治临床实践指南的分级诊断标准中的组织病理、微生物结果、临床症状等资料,将患者分为侵袭性肺曲霉病(IPA)组(n=28)和非侵袭性肺曲霉病(NIPA)组(n=34),并选取20例健康志愿者为健康组,男12例,女8例,年龄(50.23±6.59)岁,年龄范围为43~62岁。采用荧光定量——聚合酶链式反应(PCR)法检测NOD2 mRNA、RIP2 mRNA、NF-κB mRNA表达,采用Western blot法检测NOD2、RIP2、NF-κB蛋白表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺泡灌洗液上清液超敏C反应蛋白(hs-CRP)与白细胞介素6(IL-6)表达水平,并探讨其相关性。结果IPA组NOD2 mRNA(7.46±1.86)、RIP2 mRNA(11.21±4.01)、NF-κB mRNA(58.80±14.23)和NIPA组NOD2 mRNA(3.38±0.97)、RIP2 mRNA(7.87±0.94)、NF-κB mRNA(39.10±9.84)的表达水平均高于健康组[(1.28±0.42)、(1.43±0.23)、(12.10±4.36)];IPA组NOD2(2.04±0.42)、RIP2(1.54±0.34)、NF-κB(1.33±0.31)和NIPA组NOD2(1.76±0.36)、RIP2(1.15±0.29)、NF-κB(1.03±0.31)蛋白的表达水平均高于健康组[(0.75±0.21)、(0.63±0.18)、(0.51±0.12)];IPA组IL-6[(23.72±6.54)μg/L]、hs-CRP[(17.38±4.42)mg/L]和NIPA组IL-6[(18.62±5.35)μg/L]、hs-CRP[(9.64±3.01)mg/L]均高于健康组[(5.02±1.64)μg/L、(3.63±1.61)mg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,NOD2 mRNA与NF-κB mRNA呈正相关(r=0.483);RIP2 mRNA与NOD2 mRNA呈正相关(r=0.655);hs-CRP与NOD2 mRNA呈正相关(r=0.572);NOD2 mRNA与IL-6呈正相关(r=0.347),差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺曲霉病患者支气管灌洗液中NOD2、RIP2、NF-κB mRNA和蛋白表达均升高,与hs-CRP、IL-6炎症指标呈正相关性,NOD2可能通过RIP2依赖的NF-κB信号通路介导肺曲霉病患者致炎过程。