中频交变微电流影响人乳腺癌细胞耐药性的初步研究

目的:探究中频交变微电流是否可以改变人乳腺癌细胞株耐药性;针对实验结果,分析其可能机制。方法:对人乳腺癌细胞MCF-7施加不同参数中频交变微电流,选出较优参数。测定人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr的IC50值。将处于对数生长期的人乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr接板,分为化疗药物组和联合处理组,施加不同的处理方法。CCK-8法检测以上各组细胞存活率,分析中频交变微电流对乳腺癌细胞株耐药性的影响。将处于对数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7分为对照组和电刺激组,用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)定性观察荧光标记的耐药蛋白P-gp,Western blot法半定量P-gp,流式细胞仪FITC标记定量测定荧光标记的P-gp。结果:中频交变微电流能降低耐药株MCF-7/Adr的IC50和耐药指数(≥80μg/ml,协同作用)。定性、半定量和定量三种方法均显示中频交变微电流刺激后,细胞P-gp蛋白表达量均有下降趋势。结论:中频交变微电流能够增强人乳腺癌耐药细胞药物敏感性,有可能成为辅助化疗的治疗手段,其机制尚不明确,有可能是通过降低细胞P-gp的表达,抑制细胞内药物外排发挥作用的。

中频交变电流抑制肿瘤细胞的体外增殖

目的:初步探究新型物理治疗技术中频交变电流对肿瘤细胞和正常细胞体外存活率的影响;设置不同实验参数(频率、电流、时间),观察影响效果;针对实验结果,分析中频交变电流抑制肿瘤细胞体外增殖的可能机制。方法:将对数生长期的细胞悬液接种于24孔培养板,贴壁后(24 h)施加不同参数的中频电流刺激,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;以人乳腺癌细胞MCF-7为例,观察中频交变电流对细胞生存环境温度和pH的影响,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术定量检测细胞凋亡/死亡情况,扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察细胞结构变化。结果:中频交变电流能降低肿瘤细胞的体外存活率,诱导其凋亡,但不影响正常细胞(L929)存活率;MCF-7细胞体外实验最适参数是100 kHz,50 mA,每天30 min;电刺激后MCF-7细胞表面微绒毛减少,细胞线粒体肿胀,有多泡体及溶酶体形成。结论:中频交变电流能抑制肿瘤细胞增殖,但不影响正常细胞(L929);抑制效果和电刺激的频率、电流和时间有关;抑制机制可能是中频交变电流能够诱导细胞凋亡,影响细胞膜表面蛋白功能,但不影响细胞生存环境。中频交变电流抑制肿瘤体外增殖为实体瘤等增生性疾病的治疗提供了新的思路。

中频交变微电流联合紫杉醇抗A549细胞作用的研究

目的:研究中频交变微电流联合紫杉醇注射液抗A549细胞的作用及机制。方法:对处于对数生长期的肺腺癌A549细胞施加电刺激、紫杉醇及电刺激联合紫杉醇三种不同处理,采用MTT法检测A549细胞存活率,并利用流式细胞仪测量分析各组细胞凋亡/死亡比例及细胞周期状态。结果:通过不同参数的中频交变微电流刺激A549细胞,得到的最低细胞存活率(参数150 kHz、90 m A、30 min)为78.02±0.73%(P<0.01);联合紫杉醇注射液半抑制浓度(IC50)干预后,细胞存活率为32.87±0.94%(P<0.01);同时发现中频交变微电流联合紫杉醇注射液能促进A549细胞凋亡,阻滞细胞于S期、G2/M期。结论:中频交变微电流可抑制A549细胞增殖、促进凋亡,但对细胞周期影响不明显;与紫杉醇注射液联合应用时具有协同增强抗肿瘤作用。