烯丙孕素在母猪繁殖生产中的应用研究进展

如今我国生猪养殖处于快速转型期,养殖户总数逐渐减少,但规模化养殖增加,养猪生产的工业化、流程化管理需求日益迫切,批次化生产管理体系得到广泛的认可和应用。烯丙孕素又称为四烯雌酮,是一种孕激素类似物,可以有效抑制促性腺激素的释放,使母猪卵巢停滞于小卵泡状态,达到母猪生理状态同步化的效果,已广泛应用于后备母猪同期发情。但在同期发情以外,烯丙孕素在妊娠调控、改善子宫环境等方面的作用尚未得到充分的认识和发挥。本文综述了烯丙孕素的作用机制以及不同阶段母猪的用药方案和效果,并对烯丙孕素在实际生产应用中存在的问题和前景进行了探讨,以期为深入研究烯丙孕素在母猪繁殖生产调控中的新应用提供参考。

不同来源烯丙孕素对有无初情期后备母猪定时输精效果的影响

为探究国内外两种不同品牌烯丙孕素对后备母猪定时输精效果的影响,随机选取67头有初情期和54头无初情期的后备母猪,将有初情期后备母猪分为国产药物A组(52头)、国外药物B组(15头),无初情期后备母猪分为国产药物A组(27头)、国外药物B组(27头),比较两种烯丙孕素对后备母猪发情率、发情持续时间、发情集中度、妊娠率、分娩率、产仔数、产活仔数、健仔数和仔猪初生重的影响。结果显示:无论母猪是否具有初情期,两种烯丙孕素药物组在发情和妊娠方面均无显著性差异(P>0.05),但国产药物A组要略优于国外药物B组。在产仔性能上,两种药物对有初情期后备母猪无显著性差异(P>0.05);对无初情期后备母猪,国产药物A组的产仔数显著高于国外药物B组(P<0.05),在产活仔数上,国产药物A组极显著高于国外药物B组(P<0.01)。综上,相较于国外烯丙孕素药物,国产药物可有效提高无初情期后备母猪的产仔数和产活仔数;此外,有初情期可在一定程度上提高后备母猪繁殖性能。

烯丙孕素缓释微球的制备及特性研究

为提高烯丙孕素的生物利用度,减少给药次数,降低猪场的养殖成本,旨在制备一种具有缓释长效性能的烯丙孕素缓释微球。以单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸共聚物(mPEG-PLA)为载体材料,采用乳化-溶剂挥发法制备烯丙孕素缓释微球,在模拟胃肠道环境的溶出介质中测定烯丙孕素缓释微球的体外释放情况,并对烯丙孕素缓释微球的药物稳定性进行考察。结果显示,烯丙孕素缓释微球的最佳制备条件为搅拌速度1000 r/min,水相中吐温-80含量0.2%,mPEG-PLA质量浓度0.07 g/mL,油水体积比0.6,水相中明胶含量1.0%;以最佳制备条件制得的烯丙孕素缓释微球平均包封率为(95.64±0.23)%,平均载药量为(9.83±0.61)%,mPEG-PLA对烯丙孕素的包埋效果最佳。烯丙孕素缓释微球呈球形或近球形,外观圆整,平均粒径为82.3μm。烯丙孕素缓释微球能在分别含1%吐温-80,pH 1.2、pH 4.1以及pH 6.8这3种不同溶出介质中持续释放4 h以上,且释放机理符合一级动力学方程。烯丙孕素缓释微球在高湿环境中的稳定性良好,但在高温和强光照射的条件下储存10 d时,烯丙孕素的含量分别下降3.00%和11.92%。烯丙孕素缓释微球具有缓释的性能,且制备方法简单,包封率高,载药量好,易于产业化生产,可进一步推动烯丙孕素在养猪业的开发利用。

烯丙孕素片的制备及质量研究

对烯丙孕素片的制备及质量进行研究。以药物的崩解时限和溶出度为主要指标,应用正交设计法对其处方进行优化,制备一种延缓崩解开始时间的烯丙孕素片,以适应不同猪场和环境的湿法饲喂需求。考察烯丙孕素片的外观性状、硬度、片重差异、脆碎度、崩解时限、溶出度、含量测定等,重点对烯丙孕素片的溶出度方法进行了研究。结果表明,烯丙孕素片外观性状、硬度、片重差异、脆碎度、崩解时限、溶出度、含量测定等结果符合要求,含量测定为标示量的90.0%~105.0%。崩解时限和溶出度结果表明,烯丙孕素片在遇水后7~15 min全部崩解完毕,溶出度大于90%。研究所得烯丙孕素片的崩解时限延长了5~10 min,且溶出度和含量均达标。由此确定研制的烯丙孕素片处方工艺可行,质量可控,符合拟定的质量标准。

不同厂商烯丙孕素对后备母猪同期发情及繁殖性能影响的研究

本研究旨在探讨不同厂商的烯丙孕素对后备母猪同期化发情及繁殖性能的影响。通过给后备母猪饲喂3个不同厂商(A、B和C)的烯丙孕素14 d或18 d,观察母猪的配种分娩指标以及繁殖性能指标。结果显示,A厂商烯丙孕素处理18 d的效果优于14 d的效果,与对照组相比,饲喂A厂商烯丙孕素18 d可以显著提高后备母猪的发情率、受胎率、分娩率、窝总产仔数和窝产健仔数(P<0.05),显著降低母猪的空胎率(P<0.05);饲喂B厂商烯丙孕素14 d可以显著提高后备母猪的发情率(P<0.05),其繁殖性能与对照组无显著差异(P>0.05);饲喂C厂商烯丙孕素14 d和18 d的效果相近,均可显著提高母猪的发情率(P<0.05),且饲喂18 d可以提高窝总产仔数,显著提高窝产健仔数(P<0.05)。该研究为后期养猪场选择烯丙孕素提供数据依据。

诱导家猫同期发情的试验报告

利用以烯丙孕素为主诱导家猫同期发情后进行超数排卵的方法,为家猫胚胎移植等繁殖技术在猫繁育与生产中的应用提供参考。通过给母猫口服烯丙孕素(ALT)后再进行超排处理,建立了一种新型调控母猫发情和超数排卵的方法。对卵巢形态状况进行分析,并对口服烯丙孕素后进行超排的母猫发情状况和卵子质量进行测定,结果表明,口服烯丙孕素的母猫超排后的卵巢囊肿率较低,卵巢排卵点数也有明显增多,较传统母猫同期发情调节后进行超排的方法有明显优势,为解决猫人工繁育技术的关键技术难点提供新途径。

高效液相色谱-串联质谱法测定猪可食性组织中烯丙孕素残留

目的:测定猪可食性组织(肌肉、肝脏、脂肪)中烯丙孕素残留。方法:试样经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解,乙腈提取,PRiME HLB固相萃取柱净化。以乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相,经Waters UPLC BEH C_(18)反相色谱柱分离后于电喷雾正离子模式下检测,基质匹配外标法定量。结果:烯丙孕素在1~50μg/L的质量浓度范围内线性良好,线性相关系数R^(2)>0.99;该方法在猪肌肉、肝脏、脂肪组织中检测限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg。在3个添加水平下(1.0,2.0,10.0μg/kg),平均回收率为60.9%~89.8%,日内变异系数为0.8%~7.1%,日间变异系数为2.5%~11.6%。结论:该方法操作简便,适用于猪可食性组织中烯丙孕素残留的定性与定量分析。

同期发情剂四烯雌酮的应用进展

四烯雌酮是一种具有口服活性的合成孕激素,可有效调控母畜发情周期,促进其同期发情。论文对四烯雌酮的药理学和毒理学特征等研究进展进行了综述,并分析和展望了其未来研究趋势,以期为该药的合理应用提供有价值的参考。

烯丙孕素口服液在猪体内的残留消除研究

本研究旨在分析烯丙孕素在猪体内的残留消除规律,为制定休药期提供依据。采集猪肝、肾、肌肉和脂肪样品,肝、肾样品经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解,然后用乙腈提取(肌肉和脂肪样品直接用乙腈提取),乙腈饱和正己烷溶液除脂,氮吹后残渣用乙酸乙酯复溶,后用10%碳酸钠溶液净化进行LC-MS/MS分析,外标法定量。结果表明:在1~200ng·mL^(-1)浓度范围内,烯丙孕素具有良好的线性关系,相关系数大于0.999,方法的检测限为0.5μg·kg^(-1),定量限为1μg·kg^(-1);在1、100、200μg·kg^(-1)添加水平下,化合物的平均回收率在68.9%~78.9%,相对标准偏差均小于11%。试验猪按0.4mg·kg^(-1)剂量内服给药,每天1次,连续给药18d,经取材检测,休药6h后各组织中烯丙孕素残留量最高,休药后第5天脂肪中烯丙孕素残留量低于最大残留限量,肌肉、肾中残留量低于定量限,休药第10天所有组织中烯丙孕素残留量均低于定量限。休药后相同时间点猪组织中烯丙孕素残留量规律为肝>肾>脂肪>肌肉;肝中烯丙孕素消除缓慢且消除时间最长。根据WT1.4软件按99%置信区间计算所得,建议母猪按0.4mg·kg^(-1)剂量内服给药,每天1次,连续18d,其休药期为9d。

超高效液相色谱-串联质谱法对河豚鱼、鳗鱼及烤鳗中烯丙孕素与氯地孕酮残留的同时测定

建立了同时测定河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中烯丙孕素和氯地孕酮的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品经30μL葡萄糖苷酸/硫酸酯酶水解后,采用乙腈提取,经乙腈饱和正己烷溶液去除脂肪后,用HLB固相萃取柱净化,采用Acquity BEHC18柱作为分离柱,以甲醇和乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾电离,正离子扫猫,多反应监测（MRM）模式检测,外标法定量。在添加浓度0.5-6.0μg/kg范围内,烯丙孕素和氯地孕酮的回收率为72%-111%,相对标准偏差为1.6%-11.7%。烯丙孕素和氯地孕酮在0.5-20.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.02μg/L,定量下限为0.5μg/kg。该方法快速、简便、准确、灵敏度高,可以满足河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中烯丙孕素、氯地孕酮残留的确证和定量分析。

烯丙孕素对乏情后备母猪繁殖性能的影响

为研究烯丙孕素对乏情后备母猪繁殖成绩的影响,将566头225日龄前未发情的长大二元杂种后备母猪分为2组,试验组饲喂烯丙孕素口服液5 m L,连喂18 d;对照组按猪场精液诱情、舍外运动场运动、限饲等流程处理。结果表明,与对照组相比,试验组后备母猪9月龄利用率提高33个百分点(P<0.01),配种分娩率提高11.41个百分点(P<0.01),胎均活仔数提高0.77头(P<0.01),胎均健仔数提高0.97头(P<0.01)。说明烯丙孕素能够显著提高225日龄未发情后备母猪的繁殖成绩。

QuEChERS-液相色谱串联质谱法测定猪肝中烯丙孕素残留量

目的建立QuEChERS-液相色谱-串联质谱法(QuEChERS-liquid chromatography-tandem mass spectrometry,QuEChERS-LC-MS/MS)检测猪肝中烯丙孕素残留量的分析方法。方法猪肝样品经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解后,用乙腈提取,提取液用以PSA和C_(18)为吸附剂的QuEChERS法净化,净化液经氮吹至干用5 mmol/L甲酸铵溶液:乙腈(6:4,V:V)溶液复溶后进行LC-MS/MS分析测定。采用Acquity BEH C_(18)色谱柱,以5 mmol/L甲酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,多反应监测模式检测,外标法定量。结果方法的检出限(limit of detection,LOD)和定量限(limit of quantitation,LOQ)分别为0.03μg/kg和0.10μg/kg。在烯丙孕素浓度为0.01~5.0μg/L的范围内,线性相关系数(r)为0.9997,3个浓度水平加标回收率在73.0%~87.5%之间,批内相对标准偏差为2.6%~4.8%,批间相对标准偏差为4.1%~4.6%。结论该方法简单快捷、灵敏度高、准确可靠,适用于猪肝中痕量烯丙孕素残留量的分析。

高效液相色谱法测定烯丙孕素微囊中烯丙孕素的含量

建立了烯丙孕素微囊中烯丙孕素的高效液相色谱含量测定方法,采用Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以流动相水-乙腈(30∶70,V/V)、检测波长236 nm、流速1.0 mL/min、柱温30℃、进样量20μL为色谱条件,无水乙醇为溶剂对微囊进行加热超声提取。结果表明,在烯丙孕素保留时间无干扰峰出现,在5~30μg/mL的浓度范围内线性关系良好(R 2=0.9993),回归方程为A=21468 C-10887;总平均回收率为(100.96±1.14)%,RSD为1.13%;三个浓度水平下RSD分别为0.83%、1.16%和1.8%。该方法准确可靠、选择性好、简便、快速,可用于烯丙孕素微囊含量测定及质量评价。

烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性研究

研究国产烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性,为其新兽药注册和临床合理应用提供依据。通过发情间隔、发情率、发情集中度、妊娠率等指标评价烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床效果;通过比较给药前后的临床体征、血常规指标、血清生化指标及组织病理学变化,评价烯丙孕素内服溶液对靶动物母猪的安全性。实验性临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液高(25 mg·d-1)、中(20 mg·d-1)、低(10 mg·d-1)剂量组以及空白对照组的母猪从停药到出现发情反应的间隔时间分别为(3.45±0.81)(3.35±0.66)(5.21±2.65)和(11.71±5.39)d,发情率分别为100%(20/20)、100%(20/20)、95%(19/20)、70%(7/10)。扩大临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液组和进口药物对照组的母猪在药物调控下均表现出良好的同期发情效果,发情间隔分别为(3.59±1.07)d和(3.75±1.22)d,发情率分别为96.72%(59/61)和98.33%(59/60)。靶动物安全性试验中,国产烯丙孕素内服溶液在5倍推荐剂量(100 mg·d-1)范围内对母猪的血液生理生化功能和主要脏器未造成明显的不良影响。结果表明,国产烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情,一次量20 mg,连续给药18 d,临床应用安全、有效。

烯丙孕素口服液对靶动物猪的安全性研究

为评价烯丙孕素口服液对猪的安全性,将24头达到性成熟的苏姜母猪随机分为4组,每组6头,采用多剂量水平给药进行靶动物安全性研究,其中受试药物设最大推荐剂量每头动物每日20 mg烯丙孕素(相当于每次5 m L)、2倍最大推荐剂量每头动物每日40 mg烯丙孕素(相当于每次10 m L)和3倍最大推荐剂量每头动物每日60 mg烯丙孕素(相当于每次15 m L)三个剂量组;另设一空白对照组,每头动物每日15 m L洁净自来水,体积相当于3倍受试药推荐剂量的体积。通过一般临床观察、各组动物体重、血液学和血液生化学参数等指标及组织病理学检测或观察,评价烯丙孕素在临床用药的安全性。结果表明,试验期间各组猪均未死亡且健康良好,期间临床表现正常,3倍最大推荐剂量组剖检动物各组织器官未发现病理变化。在血液生理指标及生化指标方面,推荐剂量组、2倍推荐剂量组、3倍最大推荐剂量组与空白对照组相比,除少部分指标外,其他各指标并无显著差异。试验结果说明,烯丙孕素在推荐剂量下使用在靶动物猪上具有较高的安全性。

超高效液相色谱-串联质谱法检测猪肌肉组织中烯丙孕素残留

建立了测定猪肌肉组织中烯丙孕素残留的超高效液相色谱-串联质谱方法。试样经乙腈和乙酸乙酯提取,低温冷冻去除脂类。采用C18反相色谱柱进行分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源正离子模式下多反应监测模式检测,基质匹配外标法定量。结果表明,烯丙孕素在1~50ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数大于0.99;该方法在猪肌肉组织中检测限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.3μg/kg和1.0μg/kg。加标回收率68.5%~87.9%,日内变异系数1.1%~6.0%,日间变异系数5.5%~10.7%。方法快速、准确、灵敏度高,能满足猪肌肉组织中烯丙孕素残留定性定量分析。

母猪批次化管理关键激素研究进展

生殖激素是参与调控动物体内一系列复杂生殖过程并影响动物繁殖性能的重要激素。生殖激素可以诱导母猪发情、排卵,还可以通过监测生殖激素优化猪场母猪配种、妊娠、分娩等方面的管理。猪场应通过提高母猪批次化管理水平,使养猪业向集约化、规模化方向发展。文章对母猪批次化管理中控制母猪发情(烯丙孕素、孕马血清促性腺激素、PG600)、排卵(促性腺激素释放激素、人绒毛膜促性腺激素、猪促黄体素)以及控制母猪分娩(前列腺素)等关键生殖激素的研究进展进行综述,以期为猪场更好地组织生产和人为控制母猪繁殖进程提供依据。

UPLC-MS/MS法测定猪体内烯丙孕素的血药浓度

建立猪血浆中烯丙孕素含量的UPLC-MS/MS测定法。血浆中烯丙孕素以液液萃取法提取,采用Inertsil C4(3.0×150mm,5μm)色谱柱和梯度洗脱对待测样品中各成分进行分离,三重四级杆质谱仪的多重反应监测(MRM)模式进行定量分析,内标法定量。流动相A为5mmol/L甲酸铵水溶液,B为乙腈,流速为0.4mL/min,进样量为10μL。建立的烯丙孕素检测方法在1ng/mL^100ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.999 2。烯丙孕素3个空白血浆添加浓度样品(1、50、100ng/mL)的批间回收率分别为93.1%±3.98%、92.7%±5.75%、88.9%±3.69%,日内变异系数分别为3.50%~14.35%、3.43%~6.20%和2.88%%~4.15%,日间变异系数在5.11%~8.86%之间。方法的检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.5ng/mL和1ng/mL。基质效应对烯丙孕素的含量测定有增强作用,烯丙孕素在低浓度(1ng/mL)为114.65%,中浓度(50ng/mL)为109.23%,高浓度(100ng/mL)为113.59%。待测样品预处理后在样品室(4℃)放置8h的时间内,低、中、高3个添加浓度水平的变异系数均小于11%,表明药物在样品室测定期间有较高的稳定性。将样品反复冻融3次后,低、中、高3个浓度添加水平的变异系数均小于9%,表明血浆样品中烯丙孕素经3个循环冻融后仍可保持较高的稳定性。该方法可用于准确检测猪血浆中烯丙孕素的含量。

烯丙孕素-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精包合物制备工艺优选

研究烯丙孕素-β-环糊精包合物以及烯丙孕素-羟丙基-β-环糊精包合物制备工艺。采用正交试验法优选β-环糊精以及羟丙基-β-环糊精对烯丙孕素的包合工艺。选用圆二色谱法对包合物进行表征,并考察包合物的稳定性。以包合物中收率和包合率为指标,筛选出最佳包合条件为烯丙孕素与β-环糊精投料摩尔比为1∶3,65℃加热搅拌3 h;烯丙孕素与羟丙基-β-环糊精投料摩尔比为1∶6,55℃加热搅拌4 h。经圆二色谱法鉴定,已经形成包合物,并且具有一定稳定性。试验得出的制备工艺稳定可行。

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉和猪肝中烯丙孕素残留

目的建立猪肉和猪肝中烯丙孕素残留测定的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)。方法肌肉和肝脏样品,经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解、乙腈提取、乙腈饱和正己烷溶液除脂;经乙酸乙酯溶解后,用10%碳酸钠溶液净化,UPLC-MS/MS测定,外标法定量。结果烯丙孕素在猪肉和猪肝中的检测限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg;在1.0、2.0和5.0μg/kg浓度添加的回收率为68.8%~87.6%、日内相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.8%~8.9%,日间RSD为1.8%~6.9%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,适用于猪肌肉、肝脏中烯丙孕素残留物含量测定。