铝对体外培养大鼠神经细胞凋亡的研究

目的研究铝对体外培养大鼠神经细胞凋亡的作用。方法体外培养0-3天大鼠单纯神经元、神经胶质细胞及混合培养神经细胞,并用不同浓度AlCl3.6H2O处理,分为对照组、低、中、高剂量组（分别为0、0.5、1.0和2.0mmol/L）,做光镜观察、荧光染色及流式细胞检测。结果①在光镜下和荧光染色法观察,可以见到神经元有凋亡细胞的典型形态学改变,但在神经胶质细胞及混合培养细胞中没有观察到凋亡的典型形态学改变。②神经元的流式检测结果显示,铝可以诱导神经元凋亡,且其早期、晚期及总凋亡率与铝的作用剂量有关;而神经胶质细胞的流式检测结果在染毒剂量组中未发现凋亡率的显著升高,其凋亡率在各组间差异均无显著性;混合培养神经细胞的流式检测结果在染毒剂量组中亦有凋亡率的显著升高,但其凋亡率升高的程度远低于神经元。结论低浓度铝可诱导神经元细胞凋亡。

慢性氟中毒大鼠胸髓神经细胞凋亡的研究

目的:探讨慢性氟中毒大鼠胸髓神经细胞的凋亡及其发生机制。方法:60只Wistar大鼠饲养1周后随机分为2组,每组30只,实验组饮氟化水(氟化钠200mg/L),对照组饮蒸馏水,每组分别于4周、8周、12周时用不锈钢代谢笼收集24h尿液并取血测定血、尿氟含量;实验组在分组后和处死前行脊柱CT检查;12周时将两组大鼠全部处死,取胸段脊髓约5mm长,连续横切片,片厚5μm,行苏木素-伊红(HE)染色、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)对凋亡细胞进行标记、免疫组化检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达。结果:饲养12周后对照组大鼠门齿呈瓷白色半透明,实验组大鼠门齿全部出现斑釉;各时间点实验组大鼠血、尿氟含量与对照组大鼠比较明显升高,差异有显著性(P<0.01);实验组大鼠12周时胸椎CT未见椎管狭窄,无脊髓受压;实验组大鼠12周时胸髓HE染色显示神经细胞空泡变性和固缩改变;,TUNEL染色可见神经细胞凋亡明显,阳性细胞数为3.17±0.23个/10个高倍视野,对照组偶见阳性细胞,阳性细胞数为0.14±0.02个/10个高倍视野,两组比较有显著性差异(P<0.01);对照组偶有Caspase-3表达,其阳性细胞数为0.13±0.01个/10个高倍视野,实验组Caspase-3阳性细胞数为2.67±0.37个/10个高倍视野,两组有显著性差异(P<0.01)。结论:慢性氟中毒大鼠的胸髓神经细胞凋亡明显,Caspase-3的参与和过度表达可能是慢性氟中毒时胸髓神经细胞发生凋亡的原因之一。

丹参酮ⅡA对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的保护作用及机制研究

新生儿缺血缺氧性脑损伤（hypox iaischemic brain dam-age，HIBD）是引发新生儿死亡及神经系统功能障碍的主要原因之一，发病率高，严重影响患儿的生存质量。目前国内外治疗HIBD的主要方法为亚低温治疗胆，但该法在降温和复温幅度、方式等方面差异较大，患儿在治疗后死亡率仍高达50％，且伴严重神经系统受损、心肺功能下降及肝肾损害，因此，亚低温疗法存在较大的争议和挑战。目前其他单一措施也不能达到完全保护，治疗HIBD的研究就显得十分必要。

铝作用下大鼠海马神经细胞凋亡与bcl-2和bax基因转录的关系

目的探讨铝引起大鼠海马神经细胞凋亡与bcl2、baxmRNA表达变化的关系。方法健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水组、Al3+2.5、5.0、10.0mgkg组。染毒60天后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,RTPCR法检测bcl2、baxmRNA的表达,用凝胶成像系统进行结果分析。结果与对照组相比,Al3+5.0mgkg、10.0mgkg组大鼠海马神经细胞凋亡率显著升高(P<005),而Al3+2.5mgkg组与对照组相比凋亡率升高,但差异无显著性;3个染毒组bcl2mRNA表达均显著下降(P<0.05);3个染毒组baxmRNA表达显著升高(P<0.05);海马神经细胞凋亡指数与bcl2mRNA表达呈负相关(r=-0.909,P<0.01),与baxmRNA表达呈正相关(r=0.871,P<0.01)。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,其机制与bcl2mRNA表达下调,baxmRNA表达上调有关。

铝对大鼠海马神经细胞线粒体酶的影响

目的探讨线粒体酶在铝致大鼠凋亡神经细胞中的改变。方法健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水、Al3+2.5、51、0 mg/kg组。腹腔注射染毒60 d后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,电镜观察线粒体结构的改变,用试剂盒测定线粒体超氧化物歧化酶(SOD),琥珀酸脱氢酶(SDH),三磷酸腺苷(ATP)酶(总ATP、Na+-K+ATP,Ca2+ATP和Mg2+ATP酶)活力。结果随染铝剂量的增高,凋亡指数(AI)逐渐升高(P<0.05),Na+-K+ATP酶、Ca2+ATP酶、Mg2+ATP酶和SOD均降低(P<0.05);海马神经细胞SDH均数降低,但差异无显著性(P>0.05)。海马神经细胞凋亡指数与Na+-K+ATP酶、Ca2+ATP酶、Mg2+ATP酶和SOD呈负相关(r=-0.439,-0.501,-0.530,-0.815,P<0.05),与SDH没有相关性(r=0.287,P>0.05)。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,并引起线粒体结构和线粒体酶活力的改变。

红景天苷对癫痫持续状态大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:研究红景天苷对癫痫持续状态大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法:50只SD大鼠随机分成5组,每组10只,分别为对照组、癫痫持续状态组(SE组,注射和红景天苷等量的DMSO)和A组、B组、C组(在造模前15 min分别腹腔注射0.5、1.0、1.5 g/kg红景天苷),腹腔内注射氯化锂和匹罗卡品构建癫痫模型,并测定大鼠癫痫发作潜伏期。取大鼠海马组织,采用相应试剂盒检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测活化的Caspase-12(Cleaved-Caspase-12)、活化的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,SE组大鼠海马组织中CAT、SOD、GSH水平均降低,神经细胞凋亡数升高,Cleaved-Caspase-12、Cleaved-Caspase-3、CHOP、GRP78蛋白表达水平升高(P<0.05)。与SE组比较,A组、B组、C组大鼠癫痫发作潜伏期延长,海马组织中CAT、SOD、GSH水平升高,神经细胞凋亡数减少,Cleaved-Caspase-12、Cleaved-Caspase-3、CHOP、GRP78蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:红景天苷可抑制癫痫持续状态大鼠海马神经细胞凋亡,作用机制可能与抑制氧化应激从而减少内质网应激有关。

丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的研究丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注海马区神经细胞凋亡的影响。方法采用大脑中动脉栓塞(MCAO)再通法建立大鼠脑缺血再灌注模型,进行海马区病理组织形态学观察,利用末端标记法(TUNEL),检测海马区神经细胞凋亡的变化。结果与假手术组相比,模型组神经细胞凋亡指数(AI)和凋亡神经细胞积分光密度(IOD)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),海马区存活细胞数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,丹龙醒脑片组神经细胞AI和凋亡神经细胞IOD明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),海马区存活细胞数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05),病理损害减轻。结论抑制由缺血再灌注损伤诱导的脑神经细胞凋亡可能是丹龙醒脑片脑保护作用的机制之一。