海岛小花蝽对美洲棘蓟马的捕食作用研究

为了明确海岛小花蝽Orius maxidentex对美洲棘蓟马Echinothrips americanus的捕食情况及防治潜能,在27℃条件下研究了海岛小花蝽5龄若虫、雌成虫对美洲棘蓟马2龄若虫、伪蛹、成虫的捕食功能反应、自身密度干扰效应及喜好性。结果表明:海岛小花蝽对美洲棘蓟马的捕食功能符合HollingⅡ、HollingⅢ模型,采用HollingⅡ模型拟合,海岛小花蝽雌成虫及5龄若虫对美洲棘蓟马2龄若虫捕食能力(a′/Th)最强,分别为52.97和58.15,捕食上限最大,分别为47.38头/d和49.22头/d;采用HollingⅢ模型拟合,海岛小花蝽雌成虫及5龄若虫对美洲棘蓟马2龄若虫捕食上限最大,分别为27.50头/d和27.41头/d。海岛小花蝽在捕食时存在自身密度干扰情况,随着自身密度的增加单头捕食量逐渐减少,捕食作用率逐渐降低,分摊竞争强度逐渐增大,表明海岛小花蝽对美洲棘蓟马的捕食存在较强的种内干扰,符合Hassell-Varley干扰模型。捕食选择性试验表明,海岛小花蝽更偏向于捕食美洲棘蓟马2龄若虫,其次为成虫,对伪蛹偏好性最弱。综上所述,海岛小花蝽对美洲棘蓟马有较强的控害能力,是一种可应用于防治入侵昆虫美洲棘蓟马的本土天敌。

珍珠粟WOX家族全基因组鉴定及表达

WOX转录因子作为植物特异性转录因子,在植物生长发育及非生物胁迫响应过程中发挥了重要作用,探究珍珠粟WOX家族基因的详细特征及功能有助于进一步解析其在珍珠粟生长发育各个环节中的调控过程.本研究在珍珠粟基因组中共鉴定得到15个WOX家族基因成员.利用生物信息学方法对蛋白理化性质、亚细胞定位分析表明,珍珠粟WOX家族蛋白成员大部分为不稳定酸性亲水蛋白,大多定位在细胞核中.对基因上游启动子区域分析表明,在WOX家族基因启动子区域存在大量与光响应、植物激素响应、抗逆性、生长发育相关的顺式作用元件.保守基序分析发现了2个构成WOX家族基因成员特有结构域的基序.为探究珍珠粟与其他物种的进化关系,构建珍珠粟、拟南芥、水稻、紫象草物种间系统发育进化树并将其分为古代支、中间支、现代支,同一分支下基因成员基序的个数、次序具有相似性.实时荧光定量PCR检测表明,珍珠粟WOX家族基因成员的表达模式具有明显的组织特异性.本研究为深入探讨珍珠粟WOX家族基因的功能提供了有价值的信息.

我国新入侵外来害虫美洲棘蓟马的外部形态和分子鉴定

美洲棘蓟马Echinothrips americanus Morgan,1913是新入侵我国的种类。本文报道了该虫各发育阶段的外部形态和分子鉴定结果。首先利用体视显微镜对美洲棘蓟马不同虫态的外部形态进行了观察和拍照;再选择线粒体COⅠ基因中一段约430bp的序列进行PCR扩增和测序,将所得序列用于蓟马种类的分子鉴定。使用不同的矩阵和系统发育构建方法对待鉴定的蓟马以及另外38种蓟马进行了聚类分析,结果表明:基于线粒体COⅠ基因第1和2编码位点,利用NJ法构建的系统发育树可以较好地区别不同蓟马种类,可作为调查我国蓟马种类和分布的快速方便方法。最后对美洲棘蓟马的基本生物学特性和防控对策进行了综述。

美洲棘蓟马对不同蔬菜寄主的偏好性

比较了美洲棘蓟马对12种不同蔬菜和1种非蔬菜的偏好性,并通过对数线性模型和方差分析对结果进行了分析。结果显示美洲棘蓟马成虫对13种寄主植物的寄主偏好性及产卵选择性具有显著差异。该虫成虫在南瓜上分布最多,平均每株寄主植物达到23.5头,在油菜上的产卵量最大,每株达50.3粒。黄瓜、南瓜、油菜、黄豆和辣椒上成虫分布量每株均在10头以上,显著多于其他寄主;而上述5种寄主上的每株产卵量也均在30粒以上,显著多于除豆角以外的其它寄主。该虫在黄瓜上发育最快,15d左右即可完成其整个未成熟期;在辣椒上未成熟期存活率最高,为80.1%。上述结果将为该虫入侵风险的评估提供重要依据。

美洲钩虫及十二指肠钩虫细胞色素C氧化酶1基因测序

目的：比较美洲钩虫及十二指肠钩虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶１（ＣＯ１）基因序列，确定两种钩虫间ＣＯ１基因差异。方法：现场采集钩虫成虫样本，蛋白酶Ｋ消化抽提线粒体基因组ＤＮＡ，ＰＣＲ方法扩增ＣＯ１基因，ＤＮＡ测序及分析。结果：ＰＣＲ扩增获得约７００ｂｐ美洲钩虫及十二指肠钩虫ＣＯ１基因片段，其序列比较显示两种钩虫ＣＯ１基因同源性达８９．７％，存在特定的核苷酸差异。结论：ＣＯ１基因可作为鉴别两种人体钩虫虫种标记性基因。

美国桂花种子休眠原因的分析

通过对美国桂花种子的形态解剖、种皮结构电镜观察、种子透水性的测定及种子各组成部分抑制物的生物鉴定等试验,分析了美国桂花种子的休眠原因。结果表明:(1)美国桂花种子木质化种壳对种子的吸水透性有一定的阻碍作用,但不是引起种子休眠的主要原因;(2)美国桂花种子的胚没有休眠,离体胚在光照培养7 d开始萌动;(3)胚乳被严密包裹的机械作用使胚无法获得萌发所必需的水分和氧气,这可能是导致种子休眠的最主要的原因。

新药三苯双脒肠溶片治疗肠道线虫感染的效果观察

目的观察三苯双脒肠溶片对钩虫、蛔虫、鞭虫和蛲虫感染的驱虫效果和可能发生的不良反应。方法广东、江苏2省4县流行区的单纯钩虫、蛔虫、鞭虫、蛲虫感染者共629例,按统一的临床试验方案,随机双盲治疗522例,开放治疗107例。对钩虫感染者同时作虫卵计数、钩蚴培养及虫种鉴定。以阿苯达唑为对照药物,观察驱虫效果和不良反应。结果三苯双脒400mg和阿苯达唑400mg顿服,钩虫感染者的虫卵阴转率分别为89·5%(85/95)和70·6%(60/85)(P<0·01),其中对美洲钩虫感染者的虫卵阴转率分别为94·9%(37/39)和76·5%(26/34)(P<0·05);三苯双脒300mg和阿苯达唑400mg顿服,对蛔虫感染者的虫卵阴转率分别为97·4%(114/117)和98·9%(91/92)(P>0·05);三苯双脒400mg×3d和阿苯达唑400mg×3d对鞭虫感染者的虫卵阴转率分别为33·3%(25/75)和56·1%(23/41)(P<0·05);三苯双脒或阿苯达唑200mg顿服对儿童蛲虫感染者的虫卵阴转率分别为74·1%(60/81)和93·0%(40/43)(P<0·05)。治疗过程中未发现明显不良反应。结论三苯双脒肠溶片治疗钩虫、蛔虫等感染,疗效显著,服用方便,不良反应少而轻微。尤其对美洲钩虫感染的疗效优于阿苯达唑。

SYBR Green荧光PCR检测美洲钩虫方法的建立

目的建立荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法。方法提取虫体基因组DNA、根据GenBank中美洲钩虫ITS-2序列设计特异引物,PCR扩增ITS-2序列、克隆、测序和比对。常规PCR检验引物特异性。将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做灵敏性和重复性试验。结果构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,实验重复性良好。结论成功构建了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法,可用于快速、准确、定量检测美洲钩虫。

美国桂花种子低温层积过程中种子结构的变化

美国桂花种子属于深休眠类型,在自然条件下,需要经过2a才能萌发。研究了美国桂花种子低温层积过程中种子结构的变化。结果表明:在低温层积过程中随着层积时间的延长,美国桂花种子种壳中的种孔呈现不断变大、增多的趋势,这说明在自然条件下美国桂花种壳不会阻碍种子的吸水、透气,从而抑制种子的萌发;胚乳中内含物透射观察发现,随着层积时间的延长,细胞膜逐渐解体,到后期淀粉、脂粒大量出现。这表明,在低温层积过程中胚乳中营养物质不断分解,为种子萌发生长提供所需的物质和能量。

化疗控制美洲钩虫感染的效果和种群变化的研究

实验村社区居民钩虫感染率为52.2％,其中美洲钩虫感染占96％,159个居民的美洲钩虫平均虫负荷为2.8条。用数学模型算得的种群动力学参数负二项分布值(K)、密度依赖限制值(Z)、和基本繁殖率(R)值分别为0.52、0.907和1.854,美洲钩虫感染者经药物治疗后第4、7和12个月的再感染率分别为5.0％、9.2％和15.1％,再感染者的修正EPG值分别为140,144和164。理论感染率分别为22.7％、34.2％和42.8％,理论平均虫负荷数分别是0.254、0.528和0.926条,据此认为,单纯运用化疗措施来控制和消灭美洲钩虫流行的效果不理想。

伊维菌素驱除犬钩虫和人钩虫感染的效果观察

为观察伊维菌素驱治犬钩虫和人钩虫感染的效果,采用伊维菌素6.25、12.5和25μg/kg灌服治疗犬钩虫感染犬,同时用10.6mg/kg阿苯哒唑作对照;采用伊维菌素0.2mg/kg顿服治疗人钩虫感染者,并用400mg/次阿苯哒唑作对照。结果6.25、12.5和25μg/kg伊维菌素对犬钩虫治愈率分别为20%(1/5)、60%(3/5)和100.0%(5/5);而对照组阿苯哒唑对犬钩虫治愈率为0(0/5)。伊维菌素与阿苯哒唑对人钩虫感染者的治愈率分别为20.5%(9/44)和76.5%(26/34),对十二指肠钩虫较美洲钩虫敏感。因此,伊维菌素治疗犬钩虫感染疗效优于阿苯哒唑,治疗人钩虫感染疗效不及阿苯哒唑。

美国桂花种子低温层积过程中内源激素的动态变化

美国桂花种子属于深休眠类型,在自然条件下,隔年才能萌发。对美国桂花种子低温层积过程中内源激素的变化进行分析。结果表明:赤霉素(GA)的含量先降低后升高;生长素(IAA)的含量在最初的45天变化不明显,之后逐渐增加;脱落酸(ABA)的含量逐渐减少。赤霉素与脱落酸和生长素与脱落酸的比值呈现出基本增加的趋势。外源GA的浸泡对促进种子解除休眠有着重要影响,这进一步证实了赤霉素(GA)是美国桂花种子萌发的促进物质。

环介导等温扩增法检测人粪样中美洲钩虫的方法建立

目的建立一种快速、高效的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测粪样中美洲钩虫虫卵。方法根据美洲钩虫ITS基因序列,设计4条LAMP引物,建立LAMP检测法。利用LAMP法检测日本血吸虫、肝吸虫、鞭虫、猪蛔虫、蛲虫的DNA样本以验证LAMP方法的特异度。以美洲钩虫成虫DNA样本,倍比稀释以评价LAMP法的DNA最低检出量。现场采集55份人粪DNA样本,采用改良加藤法、LAMP法和普通PCR方法同时检测,评价LAMP法的敏感性和特异性。结果LAMP法可特异性扩增美洲钩虫DNA样本。LAMP法可检测最低DNA浓度为1.2 fg/mL。通过现场样本对LAMP进行评价,LAMP法敏感性相对于改良加藤法和PCR法分别是95.24%和100%。特异性分别是97.06%和100%。结论建立起以虫卵为检测材料的检测美洲钩虫病的LAMP法,为美洲钩虫病提供特异、敏感、高效的检测方法。

柑橘黄龙病病原菌非洲种和美洲种23S-5S rDNA序列的克隆及分析

【目的】克隆柑橘黄龙病病原菌非洲种和美洲种23S-5S rDNA序列并和亚洲种相应区域进行比对,阐明黄龙病3个种核糖体RNA操纵子之间的关系。【方法】根据亚洲种23S-5S rRNA基因区域序列的保守性设计引物,在非洲种和美洲种DNA样品上扩增,对PCR产物进行克隆和测序,并对新获得的序列进行序列验证和分析。【结果】非洲种获得了3 057 bp序列包括23S rRNA基因、细胞壁脱氢酶假基因和5S rRNA基因;美洲种获得了3 033 bp序列包括23S rRNA基因、glpK基因和5S rRNA基因。3个种核糖体基因顺序分别是:亚洲种16S rRNA、tRNAIle、tRNAAla、23S rRNA、细胞壁脱氢酶假基因、5S rRNA和tRNAMet;非洲种16S rRNA、tRNAIle、tRNAAla、23S rRNA、细胞壁脱氢酶假基因和5S rRNA;美洲种16S rRNA、tRNAIle、tRNAAla、23S rRNA、glpK基因和5S rRNA。【结论】黄龙病病原菌核糖体RNA基因有特殊的排列方式,即在23S rRNA和5S rRNA基因区间均有反向编码的细胞壁脱氢酶基因,其中亚洲种和非洲种为假基因,美洲种为glpK基因。

美国根霉改级新组合(英文)

在对性根霉原变种R. sexualis var. sexualis和美国性根霉变种Rhizopus sexualis var. americanus的模式菌株进行了比较研究后, 发现二者除都是同宗配合菌和在接合孢子囊和配囊柄的大形态上有一定相似性外, 在无论是孢子囊阶段抑或是接合孢子阶段的各个方面都存在着很大差异, 因此将美国性根霉变种提升为种, 取名美国根霉改级新组合R. americanus stat. nov.并重新进行了描述。过去研究过的许许多多的毛霉目中的接合孢子都是无色的, 只有性根霉和美国根霉的接合孢子被观察到分别为淡褐色和淡青色。有色的接合孢子此为首次报道。

美棘蓟马复眼的外部形态及内部超微结构

【目的】研究美棘蓟马雌雄成虫复眼的外部形态和内部超微结构,为探索缨翅目成虫复眼与其他全变态类昆虫复眼之间的进化关系提供依据。【方法】应用扫描与透射电子显微镜,对美棘蓟马成虫复眼的外部形态和内部超微结构进行观察。【结果】美棘蓟马复眼呈肾形,位于头部两侧的触角基部。雌、雄成虫复眼的小眼数量分别为70~76和68~75个;小眼呈椭圆形,表面光滑,外凸,小眼之间排列疏松,有分布不规律的感觉毛。成虫复眼类型属于并列像眼,每个小眼由1个叠层的角膜、1个真晶锥体、8个视网膜细胞、1对初级色素细胞、数个次级色素细胞和基膜组成,晶体周围、视网膜色素细胞内和基膜处均含有丰富的色素颗粒。【结论】美棘蓟马雌、雄成虫复眼在小眼数量上略有差异,雌虫略多于雄虫,小眼的大小及排列方式均无明显差异;雌、雄成虫复眼的内部超微结构无明显差异。

两种主要钩虫分类鉴定的研究进展

钩虫是全球广泛流行的寄生虫病,严重危害人类健康。十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫是寄生于人体的两种主要钩虫,可引起人体以缺铁性贫血和营养不良为主要临床表现的疾病。婴儿钩虫病亦可造成死亡。虫种的鉴别在流行病学、生态学、疾病防治及用药指导方面都有重要意义。该文从形态学、免疫学、分子生物学方面综述两种钩虫的鉴别方法及分类研究进展。

伊维菌素对钩虫感染的疗效及对虫体超微结构的影响

观察伊维菌素对钩虫、蛔虫、鞭虫感染的治疗效果 ,将服药后驱出的十二指肠钩虫及美洲钩虫与未服药的犬钩虫作对照 ,应用透射电镜观察虫体体壁、肠壁、睾丸和卵巢的超微结构变化。服用伊维菌素后钩虫各系统的超微结构均产生破坏作用 ,对体壁破坏较轻 ,对肠壁破坏较严重 ,纹状层的微绒毛断裂、粘连、中心层破坏 ;睾丸及卵巢的内部结构全部破坏成空泡或碎片。伊维菌素对上述三类肠道线虫均有较好疗效 。

红外三级鉴定法快速鉴别龙虾的4个品种

为鉴别不同龙虾(Panulirus),作者选用一维红外光谱(FTIR)、二阶导数谱(SDIR)和二维相关红外光谱(2DIR)来逐步提高谱图的分辨率,使得4个品种的差异性逐渐明显。结果表明:在一维谱图上,波士顿龙虾(Homarus americanus)没有酰胺Ⅱ带的特征峰;日本龙虾(Panulirus japonicus)在1 333 cm–1处有尖峰。在二阶导数谱上,日本龙虾在1 333 cm–1处尖峰更明显,且在1 535cm–1处有吸收峰,与其他品种的差异表现得更明显。波纹龙虾(Panulirus homarus)在1 567cm–1处有尖峰,锦绣龙虾(Panulirus ornatus)在1 567 cm–1处的峰弱而不明显,故可以区分出波纹龙虾和锦绣龙虾。在二维相关红外谱图上,进一步佐证了4种龙虾所含的氨基酸、蛋白质在种类和含量上有所差异。所以红外三级鉴定法可以对龙虾进行快速、有效的鉴别。

美洲钩虫第三期幼虫cDNA库的构建及分析(英文)

[目的 ]构建美洲钩虫cDNA库从而获得该钩虫的基因结构信息以便从中寻找目的基因。 [方法 ]从美洲钩虫第三期幼虫中提取mRNA ,以mRNA为模板合成cDNA并连接入载体λZAPII以构建cDNA库 ,随机从该cDNA库中挑选单克隆进行测序获得EST并与基因库中现有基因进行比较推导其编码蛋白。 [结果 ]成功地构建了美洲钩虫cDNA库 ,未扩增库的滴度为 1× 10 7,插入基因片断的大小为 75 0～ 30 0 0bp .,库的重组率高 ,并从库中获得 11个EST序列 ,其中 7个与现有基因库中的某些功能蛋白有同源性。 [结论 ]首次构建了代表性较高的美洲钩虫cDNA库并从中鉴定出某些功能基因。