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THE IMMOBILIZATION OF AMINOACYLASE AND THE RESOLUTION OF D,L-PHENYLALANINE 被引量:1
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作者 韩际宏 姜坪 何炳林 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1991年第6期641-650,共10页
<正> A polymer with suitable physical characters and matched functional groups was synthesized,and used as a supporter to immobilize aminoacylase. The results showed that this supporterhad high immobilizing capa... <正> A polymer with suitable physical characters and matched functional groups was synthesized,and used as a supporter to immobilize aminoacylase. The results showed that this supporterhad high immobilizing capacity and high selectivity for aminoacylase. Immobilized amino-acylase had high specific activity. In this paper, we determine the physical and chemicalcharacters of aminoacylase for resolution of D,L--phenylalanine, including its optimum tem-perature, pH, ion concentration, activated ion, substrate concentration, thermal stability anddenaturation. The immobilized aminoacylase was used to resolve the D,L-phenylalaninecontinuously. Thc resolved products was separated and purified with ion-exchange resins. L-phenylalanine solution was concentrated by vacuum evaporation and its hydrochloride wasformed. Checking of final product with polarimeter showed high yield and purity. 展开更多
关键词 aminoacylase immobilization PHENYLalanine RACEMATE resolution
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Surface Modification of Silica Gels as Carrier for AminoacylaseImmobilization
2
作者 Liu, LJ Qiu, GS +1 位作者 Zhuo, RX Pan, ZT 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1998年第2期161-163,共3页
The surface of silica gels was modified by an diethylamino group and an hydroxy group, simultaneously. The activity of the aminoacylase immobilized on such amino-hydroxy-silica gels was 316.8 U/g. By its catalysis, th... The surface of silica gels was modified by an diethylamino group and an hydroxy group, simultaneously. The activity of the aminoacylase immobilized on such amino-hydroxy-silica gels was 316.8 U/g. By its catalysis, the conversions of tested N-acetyl-D,L-amino acids to L-amino acids were 85%. 展开更多
关键词 immobilized aminoacylase silica gels surface modification resolution amino acid
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IMMOBILIZED ASPERGILLUS ORYZAE CELLS AND THEIR ACTIVITIES
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作者 宋正孝 李晓敏 +1 位作者 王诤 彭英 《Transactions of Tianjin University》 EI CAS 1997年第2期14-18,共5页
Aminoacylase was immobilized on the mycelium cells of Aspergillus oryzae by using ethylenediamine, gelatin and glutylalhyde. The proper immobilized condition was studied by orthogonal experimental design. The immo... Aminoacylase was immobilized on the mycelium cells of Aspergillus oryzae by using ethylenediamine, gelatin and glutylalhyde. The proper immobilized condition was studied by orthogonal experimental design. The immobilized cells with excellent activity and stability for optically resoluting N acetyl DL alanine were obtained. The effects of pH, temperature, ion concentration and substrate concentration on the reactive activity of immobilized cells were studied. The continuous optical resolution of N acetyl DL alanine was investigated respectively in an immobilized cells column (ICC) and in a novel couple immobilized cells bed & membrane reactor(CICBMR). The results indicate that the immobilized cells are suitable for industrial applications. 展开更多
关键词 immobilization ASPERGILLUS aminoacylase optically resolution
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米曲氨基酰化酶的纯化及固定化酶法拆分D,L-丙氨酸 被引量:10
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作者 王晓平 刘一鸣 +2 位作者 王丽娟 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1998年第4期81-84,共4页
利用硫酸铵分级与双水相萃取结合的方法从米曲霉中提取米曲氨基酰化酶,并将其固定在DEAE-SephadexA-25上,用于拆分D,L-丙氨酸。
关键词 氨基酰化酶 固定化酶法 丙氨酸 米曲霉 氨基酸
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固定化米曲霉氨基酰化酶反应动力学及其连续拆分DL-蛋氨酸实验 被引量:10
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作者 王淑豪 李晓峰 +3 位作者 吴艳玲 宋正孝 马忠海 元英进 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期293-296,共4页
探讨了用明胶-戊二醛固定化米曲霉菌球氨基酰化酶反应动力学,对固定化菌体连续光学拆分DL-蛋氨酸进行了研究. 当底物浓度小于200 mmol/L时,没有底物抑制现象,此时拆分反应速率符合Michaelis-Menten方程. 在37℃时, 米氏常数和最大反... 探讨了用明胶-戊二醛固定化米曲霉菌球氨基酰化酶反应动力学,对固定化菌体连续光学拆分DL-蛋氨酸进行了研究. 当底物浓度小于200 mmol/L时,没有底物抑制现象,此时拆分反应速率符合Michaelis-Menten方程. 在37℃时, 米氏常数和最大反应速率分别为11.9 mmol/L和1.3 mmol/L. 在连续拆分反应中反应物体积流量为7.5 ml/h,底物浓度为200和400 mmol/L时,L-蛋氨酸的转化率分别为93%和78%. 随体积流量的增加,L-蛋氨酸转化率降低. 固定化菌体的操作半衰期为82 d. 展开更多
关键词 固定化米曲霉 氨基酰化酶 反应动力学 拆份 蛋氨酸
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固定化细胞酶法拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸 被引量:6
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作者 熊吉滨 刘均忠 +1 位作者 刘茜 焦庆才 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1560-1563,共4页
利用氨基酰化酶固定化细胞酶法拆分了N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸.考察了温度、pH值、底物浓度、金属离子和拆分时间对酶促反应的影响.确定了氨基酰化酶固定化细胞手性拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸的最佳工艺条件为pH=7.0、反应温度50... 利用氨基酰化酶固定化细胞酶法拆分了N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸.考察了温度、pH值、底物浓度、金属离子和拆分时间对酶促反应的影响.确定了氨基酰化酶固定化细胞手性拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸的最佳工艺条件为pH=7.0、反应温度50℃及底物浓度500mmol/L.10-4mol/L的Co2+和Mg2+对氨基酰化酶有显著激活作用,Cu2+和Zn2+对酶促反应有明显抑制作用.在最佳条件下,氨基酰化酶固定化细胞对N-乙酰-L-3-甲氧基丙氨酸的摩尔转化率达96%. 展开更多
关键词 氨基酰化酶 D L-3-甲氧基丙氨酸 固定化细胞 手性拆分
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氨基酰化酶固定化细胞光学拆分DL-丙氨酸 被引量:2
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作者 刘鹏刚 张飞 +2 位作者 刘均忠 李天童 焦庆才 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期345-347,359,共4页
用具有氨基酰化酶基因的大肠杆菌工程菌构建固定化细胞,并对DL-丙氨酸进行酶拆分进行了实验研究。考察了温度、pH、底物浓度、金属离子和时间对酶促反应的影响。确定了氨基酰化酶固定化细胞光学拆分DL-丙氨酸中酶促反应的最佳工艺条件:p... 用具有氨基酰化酶基因的大肠杆菌工程菌构建固定化细胞,并对DL-丙氨酸进行酶拆分进行了实验研究。考察了温度、pH、底物浓度、金属离子和时间对酶促反应的影响。确定了氨基酰化酶固定化细胞光学拆分DL-丙氨酸中酶促反应的最佳工艺条件:pH=7.5,温度50℃,反应时间6h,Co2+离子浓度5×10-4mol/L,在该条件下,D-丙氨酸产率为87.2%,光学纯度为98.0%。 展开更多
关键词 氨基酰化酶 固定化细胞 DL-丙氨酸 L-丙氨酸 D-丙氨酸 拆分 生物工程
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固定化米曲霉菌体填充床拆分DL-丙氨酸的动力学行为 被引量:3
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作者 王燕 张凤宝 +3 位作者 宋正孝 张国亮 王诤 赵林 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期131-136,共6页
分析了固定化米曲霉拆分DL-丙氨酸的动力学特性,通过间歇反应器的实验数据处理,获得了酶促反应的动力学参数. 应用填充床的一维稳态轴向扩散模型进行数值求解,得到了模型计算值,与实验结果比较表明,提出的模型能较好地描述固定化菌体连... 分析了固定化米曲霉拆分DL-丙氨酸的动力学特性,通过间歇反应器的实验数据处理,获得了酶促反应的动力学参数. 应用填充床的一维稳态轴向扩散模型进行数值求解,得到了模型计算值,与实验结果比较表明,提出的模型能较好地描述固定化菌体连续拆分DL-丙氨酸过程. 展开更多
关键词 固定化 米曲霉菌体 DL-丙氨酸 拆分 填充床 动力学
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固定化米曲霉氨基酰化酶拆分DL-茶氨酸 被引量:3
9
作者 吴晓燕 刘茜 焦庆才 《广西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2008年第4期107-111,共5页
研究固定化米曲霉Aspergillus oryzae AS3.381氨基酰化酶细胞拆分DL-茶氨酸制备L-茶氨酸的最佳工艺条件。将DL-茶氨酸乙酰化为N-乙酰-DL-茶氨酸,利用固定化米曲霉细胞立体专一性去乙酰化,可以获得L-茶氨酸,并分析固定化条件对比酶活的... 研究固定化米曲霉Aspergillus oryzae AS3.381氨基酰化酶细胞拆分DL-茶氨酸制备L-茶氨酸的最佳工艺条件。将DL-茶氨酸乙酰化为N-乙酰-DL-茶氨酸,利用固定化米曲霉细胞立体专一性去乙酰化,可以获得L-茶氨酸,并分析固定化条件对比酶活的影响。结果显示:最适固定化条件为戊二醛浓度0.5%、交联时间2 h、温度55°C、pH8.0、底物0.2 mol/L、菌液比12 g菌体/100 mL戊二醛溶液,此时拆分率可达98%以上。菌体重复操作7批次,固定化细胞仍保留最高酶活的75%。与直接利用游离菌体转化相比,本法具有反应温度高、酶活高且稳定、能反复利用、酶活损失少等优点。 展开更多
关键词 L-茶氨酸 N-乙酰-DL-茶氨酸 氨基酰化酶 固定化细胞 光学拆分
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酶法拆分N-乙酰-D,L-丙氨酸反应控制步骤 被引量:1
10
作者 宋正孝 李晓敏 +1 位作者 王诤 彭英 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第6期686-691,共6页
研究了固定化米曲霉菌光学拆分N-乙酰-D,L-丙氨酸反应过程的速率控制步骤。在近似无限浴的条件下,通过测量间歇拆分反应产生的L-丙氨酸的浓度变化规律,判断反应过程中的速率控制步骤。结果表明,底物浓度和反应温度是影响速率控制步骤的... 研究了固定化米曲霉菌光学拆分N-乙酰-D,L-丙氨酸反应过程的速率控制步骤。在近似无限浴的条件下,通过测量间歇拆分反应产生的L-丙氨酸的浓度变化规律,判断反应过程中的速率控制步骤。结果表明,底物浓度和反应温度是影响速率控制步骤的重要因素,用得到的有效扩散系数进行模型计算,结果与实验值基本一致。 展开更多
关键词 光学拆分 米曲霉菌 氨基酰化酶 丙氨酸 乙酰
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固定化米曲霉催化拆分丙氨酸消旋体的反应特性 被引量:1
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作者 宋正孝 王诤 +1 位作者 李晓敏 宋文筠 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第6期508-512,共5页
研究了溶液pH、搅拌强度、催化剂用量、底物浓度及产物浓度对固定化米曲霉催化拆分N乙酰DL丙氨酸反应的影响.结果表明,低底物浓度(S<02mol/L)时反应符合MM方程.底物浓度S>02mol/L时,有底物抑制现象.当... 研究了溶液pH、搅拌强度、催化剂用量、底物浓度及产物浓度对固定化米曲霉催化拆分N乙酰DL丙氨酸反应的影响.结果表明,低底物浓度(S<02mol/L)时反应符合MM方程.底物浓度S>02mol/L时,有底物抑制现象.当产物浓度P>10mmol/L时反应存在产物抑制现象. 展开更多
关键词 米曲霉菌 氨基酰化酶 乙酰丙氨酸 拆分 丙氨酸
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Improved Method for Lacosamide Synthesis with Chemoenzymatic Method
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作者 WANG Zhi-yuan XU Li-sheng +4 位作者 LIU Jun-zhong ZHANG Hong-juan GAO Ji LIU Qian JIAO Qing-cai 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2012年第5期833-836,共4页
Lacosamide was prepared by chemical method coupled with enzymatic method. N-Acetyl-D, L-3-methoxy-alanine, derived from D,L-3-methoxy-alanine, was used in the resolution process catalyzed by immobilized Escherichia co... Lacosamide was prepared by chemical method coupled with enzymatic method. N-Acetyl-D, L-3-methoxy-alanine, derived from D,L-3-methoxy-alanine, was used in the resolution process catalyzed by immobilized Escherichia coli cells with aminoacylase(EC3.5.1.14) activity. N-Acetyl-D-3-methoxy-alanine and L-3- methoxy-alanine were obtained from the resolution system. Lacosamide was synthesized by the amidation of N-acetyl-D-3-methoxy-alanine with benzylamine. 展开更多
关键词 LACOSAMIDE aminoacylase N-Acetyl-D L-3-methoxy-alanine Immobilized cell
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青霉素酰化酶法制备D-丙氨酸 被引量:1
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作者 李天童 刘鹏刚 +1 位作者 刘茜 焦庆才 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1066-1069,共4页
报道了青霉素酰化酶法制备D-丙氨酸的研究结果,为D-丙氨酸的制备提供了一种方法。考察了pH、温度、DL-丙氨酸与苯乙酰氯的摩尔比、反应时间对制备结果的影响。确定了制备N-苯乙酰-DL-丙氨酸的最佳反应条件:pH=9.5,n(DL-丙氨酸)∶n(苯乙... 报道了青霉素酰化酶法制备D-丙氨酸的研究结果,为D-丙氨酸的制备提供了一种方法。考察了pH、温度、DL-丙氨酸与苯乙酰氯的摩尔比、反应时间对制备结果的影响。确定了制备N-苯乙酰-DL-丙氨酸的最佳反应条件:pH=9.5,n(DL-丙氨酸)∶n(苯乙酰氯)=1.1∶1;酶促反应最佳条件为:pH=7.5,温度37℃条件下反应6h,其产物为N-苯乙酰-D-丙氨酸和苯乙酸的混合物。该混合物用c(HC l)=6 mol/L的盐酸高温回流6 h得D-丙氨酸盐酸盐,再经717阴离子树脂处理得D-丙氨酸。光学纯度为95.3%,总收率为72.5%。 展开更多
关键词 固定化青霉素酰化酶 DL-丙氨酸 L-丙氨酸 D-丙氨酸 拆分 生物工程
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DEAE-E/H固定化氨基酰化酶
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作者 郭红彦 赵林 +1 位作者 阎晓敏 宋正孝 《化学工业与工程》 CAS 2006年第3期206-210,共5页
对树脂DEAE-E/H(功能基化甲基丙烯酸环氧丙酯共聚物)固定化氨基酰化酶进行了研究。考察了树脂功能基含量、比表面和孔径对固定化酶活的影响。筛选出树脂Ⅱ进行了固定化条件的研究,具体分析了酶液溶度、吸附方式和吸附时间等影响因素。... 对树脂DEAE-E/H(功能基化甲基丙烯酸环氧丙酯共聚物)固定化氨基酰化酶进行了研究。考察了树脂功能基含量、比表面和孔径对固定化酶活的影响。筛选出树脂Ⅱ进行了固定化条件的研究,具体分析了酶液溶度、吸附方式和吸附时间等影响因素。结果表明当酶液质量浓度为2.0mg/mL),循环吸附8 h时,树脂Ⅱ固定化酶的酶活为980 U/g。并通过电子扫描电镜(SEM)观察分析了DEAE-E/H的结构。 展开更多
关键词 聚甲基丙烯酸环氧丙酯 DEAE-E/H 酶法拆分 固定化氨基酰化酶
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