三例氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA测序分析

应用PCR扩增产物直接对3名氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA进行序列分析，结果表明，他们的线粒体DNA均存在第1555位核苷酸A－G的突变．因此认为该突变是人体对氨基精甙类抗生素致聋遗传易感性的分子基础，与氨基糖甙类抗生素共同作用造成耳聋。

66例氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA1555位突变检测

目前认为 mt DNAA15 5 5 G突变与氨基糖甙类抗生素致聋 (AAID)有关。通过调查采集了 6 6例 AAID病例 ,采外周血作 PCR- RFL P分析 ,对照组为 30例正常人 ,分析 mt DNAA15 5 5 G突变在 AAID中的作用。研究发现 :6 6例AAID患者中 ,14例具有 A15 5 5 G突变 ,而其余的 5 2例和对照组均无此突变。这表明 mt DNAA15 5 5 G突变是人体对氨基糖甙类抗生素遗传易感性的分子基础之一 ,基因和环境因素的相互作用可能在 AAID的发生中起重要作用。

氨基糖苷类抗生素致聋的遗传异质性

目的 :确定线粒体 DNA1 2 S r RNA基因的 1 5 5 5位点 A→ G的突变与药物性致聋的关系。方法 :采用 PCR- RFLP的方法分析家族性和散发性氨基糖苷类抗生素 ( Am An)致聋的易感性与 1 2 SRNA的相关性。结果 :在一个典型的 Am An致聋的家系中 ,全部患者均未检出 1 2 SRNA基因 1 5 5 5 G的突变 ,在 1 88例散发 Am An致聋的患者中仅有 5 .32 %携带 1 5 5 5 G的突变。而在一个母系遗传的进行性感音神经性耳聋 ( SNHL)家系中却检到了 1 5 5 5 G的突变。结论 :Am An致聋具有遗传异质性 ,Am An致聋可能还有线粒体基因的其它位点的突变参与。

一个氨基糖苷类抗生素致聋家系线粒体DNA突变研究

应用PCR、PCR -SSCP和DNA序列分析等分子生物学技术,对一个有明确氨基糖苷类抗生素应用史的母系遗传耳聋家系共8人(包括聋人和听力正常者)的线粒体DNA进行研究 ,结果显示,家系中有4份样品存在线粒体DNA12SrRNA1555位点A→G的突变。提示线粒体DNA点突变是导致该家系致聋的主要因素之一。

氨基苷类抗生素致聋家系线粒体基因突变的检测

目的 :研究氨基苷类抗生素致聋 (AAID)与线粒体基因突变的关系 ,建立相应的基因诊断方法。方法 :应用缺口 连接酶链反应对 3个有明确氨基苷类抗生素应用史的耳聋家系 (共 2 0例 )及 5 6例听力正常个体的线粒体DNA突变进行分析研究。结果 :3个家系中的母系成员均检测到线粒体DNA 15 5 5位点A→G的阳性突变 ,而 5 6例正常个体均无突变。结论 :AAID与线粒体基因 15 5 5位点突变相关 ,在此基础上建立一种特异、简便、适合批量检测AAID患者的基因诊断方法 。

湖北土家族氨基糖甙类抗生素致聋患者的mtDNA1555位突变检测

为进一步证明遗传因素在氨基糖甙类抗生素致聋 (AAID)发生中的作用 ,探讨该病的发病机理 ,我们通过问卷调查湖北恩施市聋校学生及恩施市医学部分散发病例 ,对确诊为AAID的 48例患者 ,采外周血作PCR RFLP分析 ,对照组为当地 2 0例正常土家族人。研究发现 :48例AAID患者中 ,6例具有mtDNA15 5 5G均质性突变 ,10例具有异质性突变 ,而对照组均无此突变。本文首次报道了该位点的异质性突变。

一个氨基甙类抗生素致聋家系线粒体DNA序列分析

目的：通过对一个氨基甙类抗生素致聋家系１１名成员的线粒体ＤＮＡ进行分析，探讨该病的遗传方式及与线粒体ＤＮＡ突变的关系。方法：对１１名成员外周血线粒体ＤＮＡ进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ及测序分析。结果：８例标本的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ结果异常，测序表明其均存在１５５５位点Ｃ－Ｔ突变。结论：氨基甙类抗生素致聋与线粒体ＤＮＡ突变有关，该家系呈典型母系遗传。

阿米卡星致聋大鼠鼓阶壁上皮超微结构的改变

目的观察大鼠经氨基糖苷类抗生素硫酸阿米卡星注射致聋后,耳蜗鼓阶壁上皮超微结构的改变;探索干细胞移植进入鼓阶后,干细胞在内耳发生迁移的结构基础。方法出生7天的SD大鼠30只,随机分为实验组(20只)与对照组(10只)。实验组连续7天经腹腔按照200mg/kg/day的剂量腹腔注射硫酸阿米卡星注射液;对照组注射相同体积的生理盐水。在停药后0天、7天、14天、21天、28天取耳蜗组织,随机选择其中一侧行扫描电镜观察耳蜗底回鼓阶的上皮的变化,另一侧耳蜗做冰冻切片、HE染色进行形态学观察。结果腹腔硫酸阿米卡星在引起大鼠耳聋的同时,鼓阶上皮细胞的超微结构也随着时间发生变化,上皮细胞经历了炎性渗出、细胞间隙扩大和上皮细胞恢复的形态变化过程。结论氨基糖带类抗生素硫酸阿米卡星除引起内耳柯蒂氏器的细胞死亡之外,还可以引起附着在内耳鼓阶骨壁的上皮细胞形态发生超微结构的改变。这种变化规律,有可能成为通过鼓阶进行干细胞移植的结构基础,并且为经耳蜗鼓阶移植干细胞治疗内耳疾病的时间提供参考。

应用LCR技术检测氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体基因的突变

目的：研究线粒体 Ｄ Ｎ Ａ 突变与氨基糖甙类抗生素致聋（ Ａ Ａ Ｉ Ｄ） 的关系，建立相应的基因诊断方法。方法：应用连接酶链反应（ Ｌ Ｃ Ｒ） 对一个 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系的所有成员（ 共１１ 人） 及５６ 例听力正常对照个体的线粒体 Ｄ Ｎ Ａ（ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ） 突变进行研究。结果： Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系中检出７ 例突变个体，而５６ 例听力正常对照个体均无突变。结论：本研究建立了一种特异、简便、适合批量检测 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 中ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 点突变的方法，通过对一个 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 点突变的研究，为探讨 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 发病的分子遗传学机制提供科学依据。

突变敏感性分子开关检测线粒体DNA A1555G位点的条件优化

目的对高保真酶介导的突变敏感性分子开关技术检测线粒体DNA（mt DNA）A1555G位点条件进行优化。方法利用3＇硫代磷酸化修饰的突变型引物和野生型引物作为下游引物,在其上游设计一条公共引物分别构成突变引物对和野生引物对,以构建好的包含mt DNA A1555G位点的突变型质粒和野生型质粒为模板,进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应,对PCR体系中的退火温度、引物浓度、模板浓度等条件优化,通过凝胶成像系统对其PCR结果进行分析确定最佳反应条件。结果分子开关技术检测mt DNA A1555G位点的最佳PCR条件：退火温度为61.0℃,引物浓度为0.6μmol/L,检测模板浓度为103~106copies/μL。结论确定了分子开关技术检测mt DNA A1555G位点的最佳反应条件,为该技术在线粒体DNA的突变筛查中的应用提供依据。

鄂西苗族氨基糖甙类抗生素致聋患者的mtDNA1555位点突变研究

目的 为探讨遗传因素在鄂西苗族氨基糖甙类抗生素致聋 (AAID)发生中的作用 ,从分子水平研究该病的发病机制。方法 对鄂西苗族部分家系及医学散发病例通过问卷调查和进行听力测试 ,确诊为AAID的 82名患者 ,采外周血作PCR -RFLP分析 ,对照组为正常苗族 5 0名。结果 82名患者中 2 7例具有mtDNA15 5 5 A→G异质性突变 ,10例为均质性突变 ,该位点突变率为 4 5 1% ,其中异质性突变占 72 9% ,而对照组均无此突变。结论 mtDNA15 5 5 A→G突变是鄂西苗族个体对氨基糖甙类抗生素易感致聋的分子基础 。