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Amnion epithelial cells——a novel therapy for ischemic stroke? 被引量:3
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作者 Megan A.Evans Brad R.S.Broughton +5 位作者 Grant R.Drummond Henry Ma Thanh G.Phan Euan M.Wallace Rebecca Lim Christopher G.Sobey 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第8期1346-1349,共4页
Stroke is a leading cause of death and disability and new therapies are desperately needed. Given the complex nature of ischemic brain injury, it has been postulated that cell-based therapies may be useful. However, c... Stroke is a leading cause of death and disability and new therapies are desperately needed. Given the complex nature of ischemic brain injury, it has been postulated that cell-based therapies may be useful. However, cell resources, invasive extraction procedures, immunological rejection, tumorigenesis and ethical challenges make it unlikely that many stem cell types could serve as a practical source for therapy. By contrast, these issues do not pertain to human amnion epithelial cells(h AECs), which are placenta-derived stem cells. We recently assessed the effects of systemically delivered hAECs on stroke outcome using four animal models of stroke. We demonstrated that when injected intravenously after ischemia onset, hAECs migrate preferentially to the spleen and injured brain to limit apoptosis and inflammation, and attenuate early brain infiltration of immune cells, progression of infarction and systemic immunosuppression and to ultimately ameliorate functional deficits. When administration of hAECs is delayed by 1-3 days poststroke, long-term functional recovery can still be enhanced in young and aged mice of either sex. Moreover, our proof-of-principle findings suggest that h AECs are effective at limiting post-stroke infarct development in non-human primates. Overall, the results suggest that hAECs could be a viable clinical stroke therapy. 展开更多
关键词 ischemic stroke cerebral infarction stem cells human amnion epithelial cells INFLAMMATION IMMUNOSUPPRESSION brain repair MOUSE non-human primate
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Neuronal-like differentiation of single versus multiple treatments with human amnion-derived mesenchymal stem cells induced by basic fibroblast growth factor 被引量:3
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作者 Hongliang Jiao Fangxia Guan +7 位作者 Xiang Hu Jianbin Li Hong Shan Wei Li Jun Li Ying Du Bo Yang Yunfan Zhou 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第9期694-698,共5页
BACKGROUND: Cultures from multiple portions of umbilical cord blood mesenchymal stem cells have been shown to undergo more rapid proliferation and attachment than single portions. OBJECTIVE: To observe growth of bas... BACKGROUND: Cultures from multiple portions of umbilical cord blood mesenchymal stem cells have been shown to undergo more rapid proliferation and attachment than single portions. OBJECTIVE: To observe growth of basic fibroblast growth factor (bFGF)-induced cultures of human amnion-derived mesenchymal stem cells (AMSCs) and differentiation into neuronal-like cells. DESIGN, TIME AND SETTING: Comparative observation. The study was performed at the Laboratory of Microbiology and Immunology, Basic Medical School of Zhengzhou University from January to May 2008. METHODS: Amnia from full-term, uterine-incision delivery were donated by 12 healthy women. AMSCs were obtained by cell separation and culture techniques, and were passaged and induced by bFGF. From the third passage, a total of 1 mLAMSCs, at a density of 1.0 × 10^4/mL, was separately harvested from six samples, which served as group A. A total of 1 mL AMSCs, at a density of 1.0 × 10^4/mL, was harvested separately from the remaining six samples, which served a group B. A total of 0.5 mL from the six samples of group A and 0.5 mL from the six samples of grot, B were combined to form group C. MAIN OUTCOME MEASURES: Differences in cell quantity among the three groups were compare by cell quantification and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) analysis. Expression of a glial cell marker, neuron-specific enolase, and nestin was detected in the three groups by immunocytochemistry. RESULTS: Cell quantification and MTT analysis of live cells, as well as AMSC absorbance, were significantly greater in group C compared with groups A and B at 18 days of culture (P 〈 0.05), anc no significant difference was observed between groups A and B. Glial fibrillary acidic protein, neuron-specific enolase, and nestin were expressed in all groups following bFGF induction. CONCLUSION: Mixed AMSC cultures promoted proliferation, and bFGF-induced AMSCs differentiated into neuronal-like cells. 展开更多
关键词 amnion mesenchymal stem cells induction mixed culture
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Human amnion tissue injected with human umbilical cord mesenchymal stem cells repairs damaged sciatic nerves in rats 被引量:5
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作者 Dehua Li Changhui Wang +3 位作者 Wei Shan Ruixia Zeng Yan Fang Pan Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第23期1771-1778,共8页
Human umbilical cord mesenchymal stem cells,incorporated into an amnion carrier tubes,were assessed for nerve regeneration potential in a rat nerve defect model.Damaged nerves were exposed to human amnion carriers con... Human umbilical cord mesenchymal stem cells,incorporated into an amnion carrier tubes,were assessed for nerve regeneration potential in a rat nerve defect model.Damaged nerves were exposed to human amnion carriers containing either human umbilical cord mesenchymal stem cell (cell transplantation group)or saline(control group).At 8,12,16 and 20 weeks after cell implantation,the sciatic functional index was higher in the cell transplantation group compared with the control group.Furthermore,electrophysiological examination showed that threshold stimulus and maximum stimulus intensity gradually decreased while compound action potential amplitude gradually increased.Hematoxylin-eosin staining showed that regenerating nerve fibers were arranged in nerve tracts in the cell transplantation group and connective tissue between nerve tracts and amnion tissue reduced over time.Gastrocnemius muscle cell diameter,wet weight and restoration ratio were increased.These data indicate that transplanted human umbilical cord mesenchymal stem cells,using the amnion tube connection method,promote restoration of damaged sciatic nerves in rats. 展开更多
关键词 umbilical cord mesenchymal stem cells cell transplantation amnion sciatic nerve injury RESTORATION stem cells neural regeneration
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Interaction between porcine granulosa and thecal cells in steroidogenesis in an amnion dual chamber culture system 被引量:3
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作者 吴尔若 王向力 +1 位作者 曾陶 肖碧莲 《生殖医学杂志》 CAS 1997年第S1期32-38,共7页
Objective: To study the interaction between granulosa and thecal cel1s in steroidogenesis in an am-nion dual chamber in comparison with the cellulose dual chamber.Method: A dual chamber culture system was designed and... Objective: To study the interaction between granulosa and thecal cel1s in steroidogenesis in an am-nion dual chamber in comparison with the cellulose dual chamber.Method: A dual chamber culture system was designed and prepared with amnion membrane from human term placenta. The isolated porcine granulosa and thecal cells were grown on both sides of the amnion membrane, with granulosa cells in the inner chamber and thecal cells in the outer chamber. The concentrations of estradiol (E,), progesterone (P) and testosterone (T) in the culture media were mea-sured by radioimmunoassay.Results: The growth of both cells and their steroidogenic function were more active in amnion dual chamber system than in cellulose dual chamber system: (1) more T produced by thecal cells in the outer chamber, passing into inner chamber through the amnion membrane. T was used by granulosa cells as the substrate of aromatization, so that granulosa cells produced more E2 (up to 2 435 pmol/L); (2) the production of P (52. 5 μmol/L) and T (10. 2μmol/L) by granulosa cells cultured in the amnion mem-brane dual chamber system were also higher.Conclusions:The dual chamber system made of amnion mpmbrane showed better effect in studying steroidogenesis than with cellulose dual chamber system, and can be used as a model for studying paracrine regulatory interaction between granulosa and thecal cells in vitro. 展开更多
关键词 GRANULOSA cellS Thecal cellS amnion membrane DUAL CHAMBER system Steroidogenesis
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Mesenchymal stromal cells from human perinatal tissues: From biology to cell therapy 被引量:16
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作者 Karen Bieback Irena Brinkmann 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2010年第4期81-92,共12页
Cell-based regenerative medicine is of growing interest in biomedical research. The role of stem cells in this context is under intense scrutiny and may help to define principles of organ regeneration and develop inno... Cell-based regenerative medicine is of growing interest in biomedical research. The role of stem cells in this context is under intense scrutiny and may help to define principles of organ regeneration and develop innovative therapeutics for organ failure. Utilizing stem and progenitor cells for organ replacement has been conducted for many years when performing hematopoietic stem cell transplantation. Since the first successful transplantation of umbilical cord blood to treat hematological malignancies, non-hematopoietic stem and progenitor cell populations have recently been identified within umbilical cord blood and other perinatal and fetal tissues. A cell population entitled mesenchymal stromal cells (MSCs) emerged as one of the most intensely studied as it subsumes a variety of capacities: MSCs can differentiate into various subtypes of the mesodermal lineage, they secrete a large array of trophic factors suitable of recruiting endogenous repair processes and they are immunomodulatory.Focusing on perinatal tissues to isolate MSCs, we will discuss some of the challenges associated with these cell types concentrating on concepts of isolation and expansion, the comparison with cells derived from other tissue sources, regarding phenotype and differentiation capacity and finally their therapeutic potential. 展开更多
关键词 Mesenchymal STROMAL cellS Umbilical CORD CORD blood Regenerative medicine cell therapy Stem cellS amnion CHORION PERINATAL Discarded tissue Fetal membranes
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Has_circ_0008717在羊膜间充质干细胞上清促血管生成中的作用研究
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作者 翟家彬 袁乙钦 +3 位作者 高洋 陆史俊 钱文慧 唐子春 《口腔生物医学》 2024年第2期91-96,共6页
目的:探究has_circ_0008717在人羊膜间充质干细胞上清(hAMSC-CM)促进人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成过程中的作用。方法:通过划痕实验、Transwell实验及成管实验检测hAMSC-CM对HUVECs迁移及成管能力的影响,实时荧光定量RT-PCR筛选上... 目的:探究has_circ_0008717在人羊膜间充质干细胞上清(hAMSC-CM)促进人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成过程中的作用。方法:通过划痕实验、Transwell实验及成管实验检测hAMSC-CM对HUVECs迁移及成管能力的影响,实时荧光定量RT-PCR筛选上调的circRNA(has_circ_0008717);小干扰RNA(siRNA)下调HUVECs内has_circ_0008717水平后,实时荧光定量RT-PCR检测血管内皮生长因子A(VEGFA)表达水平变化,划痕实验、Transwell实验及成管实验观察其对hAMSC-CM促进HUVECs迁移及成管的影响。结果:hAMSC-CM可明显促进HUVECs迁移及成管能力(P<0.05),HUVECs中has_circ_0008717升高最为明显(P<0.05),而敲低has_circ_0008717可明显抑制hAMSC-CM促进HUVECs迁移、成管和VEGFA的表达(P<0.05)。结论:hAMSC-CM可通过has_circ_0008717增强HUVECs的成管能力。 展开更多
关键词 has_circ_0008717 羊膜间充质干细胞 血管生成 血管内皮生长因子A
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诱导骨髓间质干细胞分化为角膜上皮样细胞的初步研究 被引量:13
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作者 黄丹平 葛坚 +2 位作者 高楠 卢蓉 高前应 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期999-1003,共5页
目的:观察人骨髓间质干细胞(MSCs)移植到兔角膜基质后的分化发育情况,探讨MSCs分化为角膜上皮细胞的可行性。方法:24只新西兰兔随机分为2组。实验组:将人MSCs接种在保存人羊膜上培养4d,用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植到兔角膜基质;... 目的:观察人骨髓间质干细胞(MSCs)移植到兔角膜基质后的分化发育情况,探讨MSCs分化为角膜上皮细胞的可行性。方法:24只新西兰兔随机分为2组。实验组:将人MSCs接种在保存人羊膜上培养4d,用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植到兔角膜基质;对照组:采用保存羊膜移植到兔角膜基质。分别于移植后1、2、3、4、6和8周,摘取各组实验眼行组织学和免疫组织化学检查,检查移植到兔角膜基质的MSCs的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况;免疫组织化学检测移植到角膜基质的带有BrdU标记的细胞角蛋白K3/12(CK3/CK12)和角蛋白K13(CK13)的表达。结果:MSCs接种到羊膜后能在羊膜上生长,与羊膜共培养4d后,MSCs贴附羊膜生长迅速,组织学特征无明显改变。羊膜负载MSCs移植到兔角膜基质表面,术后免疫组织化学检测角膜上皮层CK3/CK12表达阳性,CK13表达阴性,在重建的角膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞并同时表达角膜上皮细胞特异性表面标志蛋白K3/K12,未发生免疫排斥反应,未见异常增殖细胞。结论:羊膜负载MSCs移植到兔眼表角膜基质后,MSCs能存活、增殖并向角膜上皮样细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 羊膜 上皮 角膜 细胞分化
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人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究 被引量:8
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作者 蔡哲 潘琳 +5 位作者 舒峻 张岚 郭艳茹 耿同超 牟亮 左萍萍 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第12期965-967,i0001,共4页
目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-N... 目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达。结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vi mentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vi mentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞。结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达。 展开更多
关键词 人类羊膜细胞 神经前体细胞 巢蛋白 MUSASHI-1
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人羊膜组织细胞的神经干细胞特性形态学研究 被引量:5
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作者 蔡哲 舒峻 +11 位作者 潘琳 张岚 徐波 郭艳如 黄小杰 向青 耿同超 胡景伟 周忠蜀 徐杨 高艳 崔晓惠 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1077-1081,1085,共6页
目的:利用形态学研究方法,探讨神经干细胞特异性标志蛋白的表达和增殖分化特性,鉴定人类羊膜组织中神经干/前体细胞的存在。方法:利用免疫组织化学法,检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神... 目的:利用形态学研究方法,探讨神经干细胞特异性标志蛋白的表达和增殖分化特性,鉴定人类羊膜组织中神经干/前体细胞的存在。方法:利用免疫组织化学法,检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达,利用BrdU掺入实验鉴定羊膜组织来源神经干/前体细胞的增殖分化能力。结果:免疫组织化学检测证实人羊膜组织表达nestin、musashi-1、CD133和vimentin等神经干细胞特异性标志蛋白,主要分布于羊膜组织的间质层。培养羊膜细胞的免疫荧光化学染色显示nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM阳性细胞的存在。BrdU掺入的组织形态学实验显示培养羊膜细胞中存在BrdU标记阳性细胞,其中具有BrdU与nestin、musashi-1、vimentin双标阳性细胞,显示羊膜细胞中存在具有增殖活性神经干细胞标记蛋白表达阳性细胞;而BrdU与β-tubullinIII、TH和GFAP双标阳性细胞的存在,表明神经元和胶质细胞是由培养羊膜细胞增殖分化的。结论:羊膜组织中存在神经干细胞特异性标记蛋白Nestin、Musashi-1、CD133、PSA-NCAM和Vimentin表达阳性细胞,BrdU掺入的组织形态学结果不仅证实羊膜细胞中Nestin、Musashi-1、Vimentin阳性细胞具有增殖活性,而且其中存在已分化的神经元和胶质细胞,提示羊膜组织细胞内存在神经干/前体细胞。 展开更多
关键词 羊膜细胞 神经干细胞 巢蛋白
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羊膜上皮细胞促进共培养神经干细胞存活及分化 被引量:6
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作者 孟晓婷 陈东 +1 位作者 刘佳梅 路来金 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期184-187,F002,共5页
目的 :探讨羊膜上皮细胞是否能在体外促进胚胎脑神经干细胞的存活及分化。方法 :Neurosphere法分离、克隆 E1 2~ 1 4 d Wistar大鼠脑组织的神经干细胞 ,同时从羊膜中分离羊膜上皮细胞。将神经干细胞与羊膜上皮细胞在不同条件下共培养 ... 目的 :探讨羊膜上皮细胞是否能在体外促进胚胎脑神经干细胞的存活及分化。方法 :Neurosphere法分离、克隆 E1 2~ 1 4 d Wistar大鼠脑组织的神经干细胞 ,同时从羊膜中分离羊膜上皮细胞。将神经干细胞与羊膜上皮细胞在不同条件下共培养 ,通过免疫组织化学法对羊膜上皮细胞及神经干细胞的分化进行检测。结果 :羊膜上皮细胞表达神经干细胞及神经元、神经胶质细胞表面抗原 ;与羊膜上皮细胞共培养的神经干细胞克隆的分化细胞总数、分化为神经元的百分率及神经元初级突起长度明显高于对照组。结论 :羊膜上皮细胞与神经干细胞具有一定的同源性 ;羊膜上皮细胞能促进体外培养的神经干细胞的分化 ,且主要向神经元分化 ,并促进神经元初级突起的生长。 展开更多
关键词 神经干细胞 羊膜 上皮细胞 细胞分化
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不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖 被引量:4
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作者 刘亮 王磊 +9 位作者 童亚林 莫永亮 吕璐 陈云鹏 杨文贤 吕礼芳 詹球 朱富军 辛海明 龚震宇 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第20期3218-3222,共5页
背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代... 背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。结果与结论:人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002)ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P<0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P>0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。 展开更多
关键词 组织构建 组织工程 人羊膜匀浆上清液 许旺细胞 细胞增殖 细胞活力 周围神经 细胞生长曲线 MTT法 国家自然科学基金
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羊膜细胞移植对帕金森病鼠纹状体中多巴胺神经元的促再生作用 被引量:7
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作者 刘斌 田新良 +1 位作者 王晓雯 杨飞 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期358-360,共3页
目的 探讨羊膜细胞移植治疗帕金森病 (PD)的作用机制。方法 通过 6-羟基多巴胺 (6- OHAD)立体定向注射破坏一侧黑质 ,制成PD大鼠模型 ,然后将鼠成活羊膜细胞悬液植入受损侧纹状体 ,并与死羊膜细胞移植及生理盐水假移植对照。结果 活... 目的 探讨羊膜细胞移植治疗帕金森病 (PD)的作用机制。方法 通过 6-羟基多巴胺 (6- OHAD)立体定向注射破坏一侧黑质 ,制成PD大鼠模型 ,然后将鼠成活羊膜细胞悬液植入受损侧纹状体 ,并与死羊膜细胞移植及生理盐水假移植对照。结果 活羊膜细胞移植可减少大鼠的异常旋转行为 ,尤其有意义的是在活羊膜细胞移植靶点周围出现了来源于宿主的酪氨酸羟化酶 (TH)阳性神经纤维。结论 活羊膜细胞移植能够增加PD鼠纹状体中多巴胺 (DA)神经纤维的数目 ,到底是纹状体残存多巴胺神经元的再生 ,还是羊膜细胞分泌的营养因子激活了脑内神经干细胞的生长还有待进一步研究。 展开更多
关键词 羊膜细胞移植 帕金森病 营养因子 神经干细胞 多巴胺 神经元
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大鼠羊膜上皮细胞体外培养的初步研究 被引量:6
13
作者 金玲 陈剑 +4 位作者 吴静 徐锦堂 王彦平 赵松槟 郑佩娥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1036-1038,共3页
目的:研究大鼠羊膜上皮细胞(AECs)在体外培养时的形态变化和其生长特性,探讨EGF和血清对AECs生长和增殖性的影响。方法:分别取妊娠中期SD大鼠(12-14 d)和妊娠晚期SD大鼠(18-19 d)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用DMEM/F12培养液培养、传代... 目的:研究大鼠羊膜上皮细胞(AECs)在体外培养时的形态变化和其生长特性,探讨EGF和血清对AECs生长和增殖性的影响。方法:分别取妊娠中期SD大鼠(12-14 d)和妊娠晚期SD大鼠(18-19 d)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用DMEM/F12培养液培养、传代。光镜、扫描电镜下观察其生长的形态变化;MTT法检测EGF和血清对AECs生长和增殖性的影响。结果:妊娠中期和晚期AECs在体外培养时均生长良好、增殖活跃,但妊娠晚期AECs生长周期相对较短。结论:EGF和血清均能促进AECs增殖,其中EGF促进AECs的增殖更为显著。这为利用AECs进行细胞治疗和组织工程技术奠定了实验基础。 展开更多
关键词 大鼠 羊膜 上皮细胞 细胞培养
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羊膜对人脐血干细胞分化为多巴胺能神经元的作用 被引量:7
14
作者 李荣平 季凤清 +4 位作者 孙海梅 王丹妮 曾小蓓 赵春礼 杨慧 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期790-794,共5页
目的探讨羊膜上皮细胞对人脐血干细胞定向分化为多巴胺能神经元的作用。方法体外分离、原代培养人羊膜上皮细胞,通过高速离心制备成条件培养液(CM)对P1代脐血干细胞进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,应用免疫荧光染色和免疫... 目的探讨羊膜上皮细胞对人脐血干细胞定向分化为多巴胺能神经元的作用。方法体外分离、原代培养人羊膜上皮细胞,通过高速离心制备成条件培养液(CM)对P1代脐血干细胞进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,应用免疫荧光染色和免疫印迹法检测其酪氨酸羟化酶(TH)及多巴胺转运体(DAT)蛋白的表达情况。结果P1代脐血干细胞经羊膜上皮细胞条件培养液诱导后,TH及DAT阳性细胞率明显高于对照组,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),免疫印迹分析结果与免疫荧光染色结果一致。结论羊膜上皮细胞能诱导人脐血间充质干细胞定向分化为多巴胺能神经元。 展开更多
关键词 干细胞 诱导分化 多巴胺能神经元 羊膜上皮细胞 免疫组织化学 人脐带血
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大气中不同粒径颗粒物诱导人羊膜FL细胞UDS的研究 被引量:4
15
作者 原福胜 邢权 马亚萍 《环境与健康杂志》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 1994年第2期49-51,共3页
本研究以诱导人羊膜细胞UDS为指标,对太原市大气不同粒径的颗粒物提取液进行了致突变性检验,结果表明,不同粒径颗粒物的提取液均可产生一定的遗传毒性,尤以3.3μm以下的颗粒物的遗传毒性较强。
关键词 大气监测 颗粒物 人羊膜细胞 UDS
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胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境中分化潜能的研究 被引量:14
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作者 刘爱军 黄锦桃 +1 位作者 朱永红 李海标 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期253-256,共4页
目的探讨胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境中的分化情况,为研究其在不同微环境中的分化潜能和稳定性及寻找新的皮肤工程种子细胞奠定基础。方法129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4d,定向诱导其分化为呈β1整合素、CK15和CK19... 目的探讨胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境中的分化情况,为研究其在不同微环境中的分化潜能和稳定性及寻找新的皮肤工程种子细胞奠定基础。方法129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4d,定向诱导其分化为呈β1整合素、CK15和CK19阳性的表皮样干细胞克隆,无菌手术下移植入129小鼠双侧肾被囊内,术后4周、6周和8周取材。对移植后细胞的分化情况进行形态学和CEA和CK18免疫组织化学观察。结果小鼠胚胎干细胞源性表皮干细胞在129小鼠肾被囊内4周,分化为由单层或复层上皮样细胞构成的管状和泡状结构,种植6周和8周,除上述结构外,可见角化复层扁平上皮、汗腺样、皮脂腺样及毛囊样等结构。免疫组化结果汗腺样结构呈CEA和CK18阳性。结论研究结果表明小鼠胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境下,可具有分化为角化复层上皮、汗腺样、皮脂腺样及毛囊样结构的潜能。 展开更多
关键词 表皮干细胞 分化潜能 微环境 小鼠胚胎干细胞 免疫组织化学 种子细胞 定向诱导 细胞克隆 免疫组化 研究结果 CEA 皮脂腺 结构 稳定性 共培养 整合素 形态学 上皮 复层 汗腺 阳性 毛囊 羊膜 植入
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人羊膜诱导胚胎干细胞向表皮样干细胞的定向分化 被引量:24
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作者 张仁礼 李海标 +2 位作者 黄冰 陈系古 李树浓 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期325-328,I002,共5页
【目的】探索体外定向诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )分化为表皮样干细胞的条件 ,为研究其分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。【方法】将小鼠胚胎干细胞单独 (对照组 )或与人羊膜共培养 4~ 5d ,观察其形态分化 ,分别用β1整... 【目的】探索体外定向诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )分化为表皮样干细胞的条件 ,为研究其分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。【方法】将小鼠胚胎干细胞单独 (对照组 )或与人羊膜共培养 4~ 5d ,观察其形态分化 ,分别用β1整合素免疫组化和流式细胞仪检测胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化。【结果】与人羊膜共培养 4~ 5d后 ,ES细胞分化为表皮细胞样的单层细胞 ,细胞排列紧密 ,呈多边形 ,免疫组织化学染色后 ,多数细胞呈现 β1整合素阳性 ,对照组大量细胞死亡 ,未见 β1整合素阳性细胞 ;流式细胞仪检测结果显示 :实验组和对照组β1整合素阳性细胞分别为 81 4%和 8 4% ,两者比较差异显著 ,Z检验P <0 0 1。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 表皮样干细胞 羊膜 抗原 CD29 定向分化
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不同消化分离方法分离人羊膜间充质干细胞效果比较 被引量:10
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作者 肖盼 陈剑 +4 位作者 王彦平 吴静 郭娴吟 杨筱曦 刘小勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1033-1037,共5页
目的:比较不同消化分离方法提取人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)的分离效果,以供选择一种更有效的分离方法。方法:将新鲜羊膜组织分成4片6cm×6cm大小的组织块,采用4种不同方法进行消化分离:第1组:先刮除+胶原酶Ⅱ组;第2组:先刮除+胶原... 目的:比较不同消化分离方法提取人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)的分离效果,以供选择一种更有效的分离方法。方法:将新鲜羊膜组织分成4片6cm×6cm大小的组织块,采用4种不同方法进行消化分离:第1组:先刮除+胶原酶Ⅱ组;第2组:先刮除+胶原酶Ⅳ组;第3组:先剪碎+胶原酶Ⅱ组;第4组:先剪碎+胶原酶Ⅳ组。对这4组原代培养HAMSCs进行存活数、形态学观察比较,第3代HAMSCs抗原检测及成脂成骨诱导分化实验。结果:第1组和第2组的HAMSCs存活数高于第3组和第4组(P<0.05)。第1组和第2组的HAMSCs成份较第3组和第4组纯净,后2组夹杂着一些团状的人羊膜上皮细胞(HAECs)。抗原结果显示CD29、CD44、CD73、CD90、CD105表达阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达阴性,Vimentin、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、telom-erase结果阳性。成脂成骨诱导分化实验成功。结论:通过先将人羊膜用胰蛋白酶+EDTA消化液消化后,再将HAECs刮除干净,然后剪碎再用胶原酶消化的改进方法对HAMSCs保护较好,较易提取,获取细胞量和纯度均较传统方法高。胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅳ2种消化酶对HAMSCs的提取影响不大。 展开更多
关键词 羊膜 间充质干细胞 细胞分离
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体外定向诱导人羊膜间充质干细胞向骨、软骨及脂肪细胞的分化 被引量:8
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作者 李豫皖 朱喜忠 +5 位作者 金瑛 王胜民 杨继滨 熊华章 邹刚 刘毅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第1期122-127,共6页
背景:人羊膜间充质干细胞属于成体干细胞,在体外不同条件下诱导分化为骨、软骨及其他结缔组织,较其他类型间充质干细胞,因其来源广泛,分离无创伤,较低的免疫原性、生长周期短等特点,是组织工程种子细胞的重要来源。目的:探讨人羊膜间充... 背景:人羊膜间充质干细胞属于成体干细胞,在体外不同条件下诱导分化为骨、软骨及其他结缔组织,较其他类型间充质干细胞,因其来源广泛,分离无创伤,较低的免疫原性、生长周期短等特点,是组织工程种子细胞的重要来源。目的:探讨人羊膜间充质干细胞是否具有间充质干细胞特性及诱导成骨、软骨及脂肪细胞诱导分化的能力。方法:取足月产胎盘羊膜组织,酶消化法分离人羊膜间充质干细胞,取第3代细胞分别加入成骨、成软骨及成脂诱导液的培养基进行诱导。结果与结论:(1)茜素红染色显示,成骨诱导后细胞存在多个矿化结节,细胞中碱性磷酸酶活性明显增加;(2)甲苯胺蓝染色显示,成软骨诱导后细胞基质中分泌大量的糖胺聚糖;(3)油红O染色显示,成脂诱导后,细胞浆内可见脂滴;(4)实时荧光PCR结果显示,成骨、成软骨及成脂诱导21 d后,相关基因表达较7 d时明显增高;(5)结果人羊膜间充质干细胞具有向成骨细胞,软骨细胞及脂肪细胞的潜能,可选作为组织工程学的种子细胞。 展开更多
关键词 干细胞 分化 人羊膜间充质干细胞 成骨细胞 成软骨细胞 成脂细胞 体外诱导
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体外培养人羊膜间充质细胞的神经生物学特点 被引量:5
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作者 胡景伟 蔡哲 +10 位作者 周忠蜀 张岚 舒峻 潘琳 黄小杰 徐波 向青 贺春 徐杨 高艳 崔晓慧 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1070-1073,1086,I0002,共6页
目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)... 目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)、神经干细胞标记蛋白(Nestin、PSA-NCAM)、神经细胞标记蛋白(β-tubulin-Ⅲ、TH)和神经分化相关蛋白(math-1、mash-1)的表达。结果:MTS分析法显示hAMCs在接种后第6-8天增殖速度最快,第8-24天活细胞数基本保持稳定;BrdU和PCNA的免疫荧光染色结果显示体外培养hAMCs中具有大量BrdU和PCNA阳性细胞存在;体外培养的hAMCs表达间充质干细胞特异性标记物STRO-1和Vimentin,也表达神经干细胞标记物Nestin和PSA-NCAM,同时还可见神经元特异性标记物β-tubulin-Ⅲ和TH,以及神经元分化相关蛋白math-1和mash-1的表达;体外培养hAMCs中存在有TH/BrdU和β-tubulin-Ⅲ/BrdU双阳性细胞。结论:体外培养的hAMCs表达间充质干细胞、神经干细胞、神经元的特异性标记蛋白,同时具有增殖活性:hAMCs表达神经元分化相关蛋白。 展开更多
关键词 人羊膜间充质细胞 神经细胞 增殖
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