补肾调经方对雄激素致不孕大鼠子宫转化生长因子β_1及其受体的影响

目的:探讨补肾调经方对雄激素致不孕大鼠(androgen-induced sterile rats,ASR)子宫转化生长因子β1及其受体(TGFβ1/TGFβRⅠ)表达的影响。方法:给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮(T),建立ASR模型。设乌鸡白凤口服液为阳性对照药。分为正常组、模型组、阳性药对照组和中药治疗组。ASR模型81日龄始灌服乌鸡白凤口服液、补肾调经方,连续7周,130、131日龄麻醉处死,采用UE染色及免疫组化技术分别观察子宫组织形态学及TGFβ1、TGFβRⅠ表达的变化。结果:补肾调经方可改善病理状态下子宫的形态结构,使模型大鼠子宫内膜、肌层TGFβ1以及肌层TGFβRⅠ的表达增强。结论:补肾调经方可通过提高ASR模型子宫内膜、肌层TGFβ1及肌层TGFβRⅠ的表达,促进子宫的发育,改善子宫内膜的分泌功能,有利于胚泡的植入。

补肾中药对雄激素致不孕大鼠胰岛素样生长因子-1及胰岛素样生长因子-1受体的影响

目的 :观察补肾中药治疗前后雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠胰岛素样生长因子 1(IGF 1)及胰岛素样生长因子 1受体 (IGF 1R)的变化。方法 :建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型 ,通过阴道涂片筛选各组大鼠 ;血清IGF 1测定采用放免法 ,IGF 1R的检测采用免疫组化法。结果 :( 1)血清IGF 1水平 :模型组 >模型服中药组 >正常组 ,但各组间比较差异无显著性。 ( 2 )胰腺、肝脏、卵巢和肾上腺IGF 1R免疫组化定量分析 :模型组 <模型服中药组 <正常组。结论 :雄激素致不孕大鼠存在着高水平血清IGF 1及主要靶器官低水平IGF 1R ,而补肾中药对其有一定的调节作用。由此推测 ,补肾中药对雄激素致不孕大鼠的促排卵作用可能是部分通过调节IGF 1/IGF

重组人促卵泡激素对雄激素致不孕大鼠局灶性脑缺血脑皮质RAS相关基因表达的影响

目的:探讨体内性激素的改变对局灶性脑缺血脑皮质肾素-血管紧张素(RAS)相关基因表达的影响。方法:建立雄激素致不孕大鼠(ASR)模型,给予果纳芬(rhFSH)后应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。大鼠随机分为ASR+假手术(sham)组、ASR+rhFSH+sham组、ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组,每组12只。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测大脑的缺血面积;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑皮质血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素受体1(AT1)和血管紧张素受体2(AT2)的mRNA表达。结果:TTC染色显示,ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组大鼠大脑均可见苍白色的缺血区域。ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组脑梗死面积均明显大于ASR+sham组及ASR+rhFSH+sham组(P<0.05),但ASR+rhFSH+MCAO组脑组织梗死面积明显小于ASR+MCAO组(P<0.05)。与ASR+sham组比较,ASR+rhFSH+sham组的AGT、ACE、AT1及AT2mRNA表达均无明显改变(P>0.05);而ASR+MCAO组大脑皮质缺血侧ACE、AT1及AT2mRNA的表达均明显增高(P<0.05),但AGT未见明显改变。与ASR+rhFSH+sham组比较,ASR+rhFSH+MCAO组缺血侧大脑皮质AGT、ACE、AT1及AT2mRNA的表达均无明显改变(P>0.05)。结论:雄激素的增高通过激活RAS系统参与了缺血性神经细胞的损伤,而rhFSH通过下调RAS系统减轻脑缺血损伤。

补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1及其受体表达的影响

目的:观察补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1/转化生长因子βⅠ型受体(TGF-β1/TGF-βRⅠ)表达的影响,探讨其治疗无排卵性疾病的作用机制。方法:建立雄激素致无排卵大鼠模型,设乌鸡白凤口服液为阳性对照药,分为正常组、模型组、阳性药对照组和中药治疗组,采用HE染色观察卵巢组织形态学变化,采用免疫组化法检测卵巢颗粒细胞、间质细胞TGF-β1/TGF-βRⅠ的表达强度。结果:补肾调经方可改善病理状态下模型大鼠卵巢的形态结构,使模型大鼠卵巢颗粒细胞高表达的TGF-β1、间质细胞高表达的TGF-β1/TGF-βRⅠ恢复接近正常。结论:补肾中药可通过对卵巢TGF-β1及其受体TGF-βRⅠ表达的影响,促进卵泡发育。

通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕模型大鼠卵巢基质金属蛋白酶-9的影响

目的:探讨通脉大生片治疗对雄激素致不孕大鼠模型(ASR)卵巢基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:采用雄激素致不孕大鼠模型(ASR模型),以原位杂交方法观察分析卵巢MMP-9 mRNA信号表达的情况。结果:由于药物的干预,各个用药组MMP-9阳性细胞的表达浓度和表达总量均高于模型组,以通脉大生片高剂量组卵巢MMP-9 mRNA表达尤其明显,与正常组水平接近,差异无统计学意义(P>0.05)。通脉大生片高剂量组卵巢MMP-9 mRNA表达亦明显优于氯米芬组,差异(P<0.05)。结论:通脉大生片可能通过促进肾虚排卵障碍不孕大鼠卵巢基质金属蛋白酶-9的表达,发挥其对不孕症的治疗作用,这可能是其促进卵泡发育和卵巢排卵的机制之一。

雄激素致不孕大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及相关酶caspase-3的研究

目的探讨ASR卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡相关酶caspase-3的表达。方法9日龄sD雌性大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮制造无排卵模型，3—4月龄时191道脱落细胞涂片选取动情前期处死大鼠，免疫组化法检测ASR卵巢颗粒细胞凋亡及相关酶caspase-3的表达。结果在ASR和正常大鼠均检测到颗粒细胞的凋亡及凋亡相关酶easpase-3的表达，模型组颗粒细胞凋亡及凋亡相关酶caspase-3的表达较强。结论卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡相关酶caspase-3的表达增强导致了排卵障碍性不孕症的发生。

雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1及其受体的变化

目的:探讨雄激素致无排卵大鼠卵泡发育的影响。方法:建立雄激素致无排卵大鼠模型,并设正常对照组,放免法测定血清睾酮(T),HE染色观察卵巢组织形态学变化,免疫组化法检测卵巢转化生长因子β1及其受体(TGFβ1/TGFβ1R)的表达。结果:①模型组血清T水平明显高于对照组;②模型组大鼠卵巢中卵泡囊状扩张,颗粒细胞层极薄;而对照组可见发育期各级卵泡及黄体形成;③模型组卵巢颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞TGFβ1/TGFβ1R的表达明显高于对照组。结论:雄激素致无排卵大鼠卵巢颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞TGFβ1/TGFβ1R的表达明显增高可能是导致卵泡发育障碍、无排卵的因素之一。

阴阳平补中药对雄激素致不孕大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响

目的 :观察阴阳平补中药治疗前后雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠肝细胞膜胰岛素受体的变化。方法 :建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型 ,采用阴道涂片的方法观察阴阳平补中药对不孕大鼠的促排卵作用 ;采用放射配体结合分析方法检测肝细胞膜胰岛素受体的数目与亲和力。结果 :阴阳平补中药对雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠的促排卵率为 43 1 % ,而服药与未服药的不孕大鼠 ,其肝细胞膜胰岛素受体的数目及亲和力均与正常大鼠相似。结论 :阴阳平补中药对雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠的促排卵作用不是通过影响胰岛素受体的结合而实现。

无排卵综合征大鼠肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体的鉴定

目的探讨高胰岛素高雄激素无排卵综合征的发病机制。方法采用放射配体结合分析法首次对雄激素致高胰岛素高雄激素无排卵大鼠（ＡＳＲ）肝脏、卵巢和肾上腺的的胰岛素受体作了鉴定，并与正常对照大鼠进行比较。结果ＡＳＲ肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体的数目及亲和力均与正常大鼠相似。结论ＡＳＲ不存在受体水平的胰岛素拮抗。

补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠腺垂体、卵巢影响的比较研究

目的观察补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠(ASR)腺垂体、卵巢形态及其分泌性激素的影响。方法 60只9日龄SD雌性大鼠随机选取10只为正常组,余50只皮下注射丙酸睾丸酮建立ASR模型,选取30只造模成功者,随机分为模型组、补肾调经方组(灌服补肾调经方混悬液)、逍遥丸组(灌服逍遥丸混悬液),每组10只,给药5周,择动情前期,断头法取血,放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH);HE染色后观察腺垂体、卵巢形态。结果与正常组比较,模型组血清E2、T升高,FSH、LH降低(均P<0.01);腺垂体、卵巢形态异常。与模型组比较,补肾调经方组和逍遥丸组E2、T降低,FSH、LH升高(P<0.05,P<0.01),且补肾调经方组E2、T,逍遥丸组FSH恢复正常(均P>0.05);两组受损的腺垂体、卵巢结构均得到不同程度修复。结论补肾调经方及逍遥丸可改善排卵障碍性疾病。

加味圣愈汤调经作用及机制研究

目的:探讨加味圣愈汤的调经作用及其机制。方法:大鼠去卵巢模型、雄激素致无排卵大鼠(ASR)模型灌胃加味圣愈汤1.06、0.53、0.265g/kg分别连续5周和8周,测定子宫、卵巢湿重并行HE染色观察组织形态学变化,放射免疫法测定去卵巢大鼠血清E2、P水平和ASR大鼠血清FSH、LH、E2、P水平;子宫平滑肌试验观察加味圣愈汤含药血清对大鼠离体子宫平滑肌收缩活动和加味圣愈汤十二指肠给药对家兔大体子宫平滑肌活动的影响,BL-420E生物机能系统记录活动曲线。结果:去卵巢大鼠和ASR大鼠子宫、卵巢湿重和系数均下降,两个模型大鼠子宫均有萎缩现象,且ASR大鼠卵巢卵泡发育迟缓,去卵巢大鼠血清E2、P水平及ASR大鼠血清E2、P、FSH水平均明显低于假手术组或溶剂对照组。与模型对照组比较,加味圣愈汤0.53、1.06g/kg能增加两个模型大鼠的子宫、卵巢湿重或脏器系数,1.06g/kg对子宫萎缩和ASR大鼠的卵巢卵泡发育抑制有改善作用;1.06g/kg能升高去卵巢大鼠血清E2水平及ASR大鼠血清LH水平,3个剂量对ASR大鼠血清FSH水平均有明显升高作用;50、100μl含药血清对大鼠离体子宫平滑肌收缩和加味圣愈汤1.06g/kg经十二指肠给药对家兔在体子宫平滑肌收缩均有促进作用,可提高其收缩频率、强度及活动力,与催产素无明显协同作用。结论:加味圣愈汤具有调经作用,灌胃模型大鼠0.265g/kg即起效,在0.265～1.06g/kg内呈较好的量-效正相关;作用机制与调节下丘脑-垂体-卵巢轴内分泌功能和雌激素样作用有关。