Study on Ultrasonic Extraction of Total Flavonoids from Angelica keiskei Koidzumi

[Objective] This study aimed to optimize the ultrasonic extraction process of total flavonoids from Angelica keiskei Koidzumi. [Method] Using the yield of total flavonoids as an indicator, the ultrasonic extraction process of total flavonoids from A. keiskei was optimized by orthogonal experimental design. [ Result ] Among four factors in orthogonal experimental design, extraction time exhibited the most significant effect on the extraction result; ethanol concentration exhib- ited a significant effect on the extraction result; ultrasonic power and solid-to-liquid ratio had no significant effect. The optimal conditions for ultrasonic extraction of total flavonoids from A. keiskei were extraction time of 25 min, ethanol concentration of 80%, ultrasonic power of 60 W, solid-to-liquid ratio of 1：20 （g/ml）, under which the yield of total flavonoids reached 1.56%. [ Conclusion] This study provides the basis for further development and utilization of total flavonoids from A. keiskei.

Effect of Angelica keiskei chalcone on the expression of apoptosis-regulating proteins of mice hepatocarcinoma cells

Objective: The aim of our study was to investigate the effect of Angelica keiskei chalcone (AC) on the expression of Caspase-3 and Bax in mice hepatocarcinoma cells. Methods: Fifty mice inoculated hepatocarcinoma 22 cells were divided into five groups, 10 mice per group. Mice were given 5, 20, 40 mg/kg AC daily by mouth in low, middle and high dose groups respectively. Saline were given to the tumor control group by mouth. Twenty mg/kg cytoxan (CTX) by injection every other day were given to the positive control group. Ten days later, all mice were sacrificed. The levels of the Caspase-3 and Bax protein expression were measured by immunohistochemistry method and the proliferation activity of hepatocarcinoma cells was determined by MTT assay. Results: The expression level of Caspase-3 and Bax protein in tumor control group were 5.00% and 4.68%, respectively, and those of the high-dose group were 38.52% and 35.76%. The differences between two groups were significant (P < 0.05). The cell proliferation activity of tumor control group and high-dose group were 1.135 ± 0.032 and 0.716 ± 0.018. The difference was significant (P < 0.05). Conclusion: AC can increase the expression of Caspase-3 and Bax protein, and inhibit the proliferative activity of mice hepatocarcinoma cells.

不同浸种及催芽处理对明日叶种子萌发的影响

明日叶(Angelica keiskei)是一种经济价值极高、开发前景广阔的食药两用蔬菜.然而由于土壤及温湿度条件等因素限制,明日叶种子出苗率低,制约明日叶的栽培生产.以山东新产的绿茎明日叶种子为材料,通过不同水温浸种及不同浓度KNO_(3)、植物激素、强氧化剂的外源添加,研究了提高种子的萌发处理方法.结果表明,温水(55℃)浸种、KNO_(3)溶液、植物激素、强氧化剂处理均可不同程度地促进种子萌发.与清水浸种相比,在KNO_(3)溶液处理组中,750 mg·L^(-1)处理的发芽率和发芽势分别为83.82%和59.56%(p<0.05),为组内最高;在植物激素处理组中,100 mg·L^(-1)GA_(3)溶液处理发芽率最高,达到81.19%(p<0.05);在强氧化剂处理组中,500 mg·L^(-1)KMnO4溶液处理的发芽率和发芽势分别为84.92%和46.03%(p<0.05),为组内最高.在这三种外源添加处理条件下,750 mg·L^(-1)KNO_(3)溶液处理的幼苗下胚轴长1.08cm,根长2.09 cm;100 mg·L^(-1)GA_(3)溶液处理的幼苗下胚轴长2.41 cm,根长2.01 cm;500 mg·L^(-1)KMnO4溶液处理的幼苗下胚轴长度1.21 cm,根长1.63 cm.综合比较发现,100 mg·L^(-1)GA_(3)溶液处理条件下明日叶种子发芽率高,且植株幼苗的根长及下胚轴长度也最好.本研究结果可为明日叶种植及同类种子繁育提供借鉴.

短直链淀粉基复合颗粒包埋明日叶黄酮乳液体系制备与表征

该文通过添加短直链淀粉对玉米醇溶蛋白和果胶进行改性,探究了不同短直链淀粉添加量对三元复合颗粒结构和乳化性的影响,同时采用傅立叶红外光谱、高效凝胶排阻色谱等方法对三元复合颗粒进行了表征。进一步利用正交试验优化了包埋明日叶黄酮的皮克林乳液的制备参数,开发一种明日叶黄酮的递送系统,提高生物利用度。研究结果表明,短直链淀粉的加入有效改善了玉米醇溶蛋白和果胶的两亲性,短直链淀粉添加量为0.4 g,即短直链淀粉,玉米醇溶蛋白和果胶三者添加质量比为0.16:1:1时,形成的三元复合颗粒粒径最小仅为592.6 nm,电位低至-45.8 mV,形成紧密堆积的网络结构,且该复合颗粒能有效稳定皮克林乳液,并保护明日叶黄酮耐受口腔及胃的消化环境,有效提高其生物利用度,达49.35%。该研究为短直链淀粉基皮克林乳液的开发、在递送体系方面的应用及黄酮类化合物生物利用度的提高提供了理论参考。

采用紫外-可见光谱法对明日叶根鉴别的研究

目的:为明日叶根的光谱鉴别方法的制定提供参考。方法:采用紫外-可见光谱鉴别方法。结果:明日叶根不同的溶剂、不同提取方法所得的提取液,其特征吸收峰各有特点。结论:本实验为明日叶根的光谱鉴别控制方法提供了参考的依据。

明日叶根、茎、叶红外光谱法鉴别的比较

目的:通过对明日叶根、茎、叶的红外光谱法鉴别的比较,找出其各自红外光谱法鉴别方法和异同点。方法:红外光谱法。结果:明日叶的根、茎、叶红外光谱特征图谱各有不同,其10批不同产地的红外光谱的特征图谱存在一定的差异,但差别不大。结论:为今后明日叶三个药用部位的鉴别提供参考依据。

基于高通量测序的明日叶不同组织内生菌群落结构分析

【目的】分析明日叶不同组织内生菌的群落结构和多样性,为探究明日叶和内生菌互作机制及功能菌株筛选提供参考。【方法】以四川宜宾栽培的药食兼用型明日叶为试材,采用Illumina MiSeq高通量测序技术确定根、茎、叶和果实组织内生真菌和内生细菌群落多样性。【结果】根据97%的序列相似性水平,将内生真菌和细菌的reads分别归类为1023和1871个操作分类单元(OTU)。韦恩图和热图显示明日叶各组织内生真菌和内生细菌群落结构差异性较高,种群丰度存在一定的差异。α多样性分析发现明日叶的叶内生真菌种类数最多,根内生真菌群落多样性最低,果实内生真菌群落丰富度最低;而根含有内生细菌种类数最多,茎内生细菌群落多样性最低,果实内生细菌群落丰富度最低。β多样性分析表明,组织特征对明日叶内生真菌或内生细菌群落结构有显著影响。明日叶4个不同组织中的优势真菌门和细菌门分别为子囊菌门(Ascomycota)和变形菌门(Proteobacteria)。根、茎、叶和果实中内生真菌优势属分别为Serendipita、Paramycosphaerella、多臂菌属(Trichomerium)和Apiotrichum,内生细菌优势属分别为罗尔斯通菌属(Ralstonia)、罗尔斯通菌属、甲基杆菌属(Methylobacterium)和弧菌属(Vibrio)。线性判别分析(LEfSe)表明,除根外,明日叶的茎、叶和果实中内生真菌重要差异指示种分别是Paramycosphaerella、苍白尾孢属(Pallidocercospora)和横断孢属(Strelitziana);茎、叶和果实中内生细菌重要差异指示种分别是罗尔斯通菌属、甲基杆菌属和亮杆菌属(Leucobacter)。经FUNGuild和COG功能预测发现,不同组织内生菌群功能丰富,除具有固氮、促生和抑菌等功能的菌群外,还存在较大比例未知功能菌群。【结论】明日叶中蕴含丰富多样的内生菌群,在不同组织中的群落结构、多样性、优势菌属及差异指示种存在保守性与差异性,组织特征差异是影响内生菌群的重要因素;不同组织内生菌群生态功能亦差异较大,且大量为未鉴定出种属和未定义的功能菌群。

明日叶查尔酮对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究明日叶查尔酮(AC)对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将60只BALB/c雄性小鼠随机分为正常对照组,酒精模型组,AC低(5 mg/kg)、中(15 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量组,每组12只。灌胃给予受试物,体积为10μL/g,每天1次,连续30 d,正常对照组与酒精模型组给予等体积生理盐水。末次给药12 h后,除正常对照组外,其余4组小鼠均一次性灌胃50%酒精,灌胃量为12 m L/kg。灌胃12 h后,眼球取血,分离血清,分别测定肝脏损伤指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),脂质代谢指标低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和细胞凋亡相关指标,并进行肝脏组织病理学观察。结果:与正常对照组相比,酒精模型组小鼠肝脏系数显著升高(P<0.05),肝脏出现明显的炎性细胞浸润;血清转氨酶活性、TC、TG和LDL-C含量均显著升高(P<0.05),而HDL-C水平明显降低(P<0.05);血清SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05);肝细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与酒精模型组相比,中、高剂量AC组小鼠的肝脏系数显著降低(P<0.05),肝细胞炎性细胞浸润明显改善;血清转氨酶活性、TC、TG和LDL-C含量均显著降低(P<0.05),而HDL-C水平明显升高(P<0.05);血清SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05);肝细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论:AC对酒精引发的急性肝损伤具有良好的防护作用,其机制可能与抑制脂质代谢紊乱,减轻氧化损伤,抑制细胞凋亡有关。

超声协同天然低共熔溶剂法提取明日叶查尔酮工艺优化及其抗衰老作用研究

目的优化超声协同天然低共熔溶剂法提取明日叶查尔酮的工艺,并研究其抗衰老作用。方法以明日叶查尔酮得率为指标,采用单因素和响应面实验,优化超声协同天然低共熔溶剂法的提取工艺条件,并设计了水提法、醇提法、微波辅助法、超声辅助法与超声协同天然低共熔溶剂法的对比实验。同时将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、维生素C(vitamin C,VC)阳性对照组、明日叶查尔酮低、中、高剂量组。除正常对照组外,其余5组注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型。测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、脏器指数和小鼠皮肤组织中的SOD、过氧化氢酶(catalase,CAT)、三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)活性和脂褐素(lipofuscin,LPF)、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)、Ⅰ型胶原蛋白含量。结果最佳提取工艺条件为:液固比30:1(mL/g)、超声功率400 W、超声时间35 min,此条件下明日叶查尔酮得率为0.94%,此法的提取效果优于其他4种单一的提取方法。明日叶查尔酮对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老实验结果表明:明日叶查尔酮能有效增强小鼠血清中SOD、T-AOC活性,降低MDA含量,提高各脏器指数,增强小鼠皮肤组织中SOD、CAT和ATPase活性,及HYP和Ⅰ型胶原蛋白含量,减少LPF的生成。结论该研究获得了明日叶查尔酮的最佳提取工艺,得到的明日叶查尔酮对D-半乳糖致衰小鼠具有较强的抗衰老作用。

酵母菌发酵制备明日叶酵素的工艺优化

以明日叶冻干粉为原料,酵母菌为发酵菌种,考察酵母菌接种量、明日叶冻干粉添加量、发酵时间等单因素对发酵液中总黄酮含量和γ-氨基丁酸含量的影响,并进一步利用响应面设计对发酵工艺进行优化。结果表明,明日叶酵素的最佳发酵工艺条件为酵母菌接种量1.5%、明日叶冻干粉添加量17 g(底物浓度87.2 g/L)、发酵时间98 h。在此工艺条件下得到的明日叶酵素产品的总黄酮含量为1.40 g/L,γ-氨基丁酸含量为8.46 g/L,酵素色泽均一稳定,口感良好并具有明日叶的特殊风味,感官评分为81.40。本结果可为深度开发利用我国新食品原料资源明日叶提供理论依据。

明日叶的研究进展

明日叶为伞形科当归属草本植物,是一种从国外引入的药食两用植物,目前主要应用于食品、保健品行业,其生理活性丰富,具有重要的研究意义和开发前景。通过查阅中国知网、维普、万方、Pubmed等国内外多个数据库,文章对近年来关于明日叶的化学成分、提取方法及药理作用的相关文献进行分类和总结,经分析后归纳成综述。文章介绍了明日叶查尔酮、类黄酮、香豆素类等化学成分,综述了明日叶总黄酮、查耳酮成分的提取方法以及明日叶降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等生理活性的研究进展,为明日叶相关产品的研究与开发提供了科学依据和参考。

明日叶/薏仁米营养保健面条的研制

为了满足人们对饮食既有营养又有保健功能的要求,本文以薏仁米粉、芭蕉芋淀粉、明日叶汁和小麦粉为主要原料制备具有保健功能的营养面条。考察了薏仁米粉、芭蕉芋淀粉、明日叶汁、黄原胶和食盐不同添加比例对明日叶/薏仁米营养面条品质的影响。通过正交实验、感官评定和物性测定确定该营养面条的最佳配方为:薏仁米粉14%,芭蕉芋淀粉10%,黄原胶0.3%,食盐1.7%,小麦粉74%的混合粉,添加混合粉质量40%的明日叶汁进行和面制作面条。按最佳配方制作的面条表面光滑、富有弹性、断条率和溶出率低、口感细腻,营养丰富且具有保健功能。

明日叶叶水溶性总黄酮提纯工艺

比较水浴加热、直接加热煮沸、微波辅助浸提3种水浸提取方法,确定明日叶叶总黄酮提取率最高的水浸提工艺条件,得到粗提液,并进一步考察大孔树脂类型、粗提液上样量、乙醇洗脱液pH值、乙醇体积分数、洗脱液用量等条件对水溶性总黄酮提纯结果的影响。结果表明:水浴加热浸提的提取率最高,其最佳浸提条件为水浴温度95℃,加热时间10min。HP-20大孔树脂对明日叶叶中总黄酮具有较好吸附与解吸性能,最佳提纯工艺条件为质量浓度为2.445mg/mL的粗提液上样量为40mL,洗脱液乙醇体积分数70%、pH2、洗脱用量为8BV。提纯产物总黄酮含量比明日叶叶干粉的含量提高了约6.8倍。

明月草营养成分的分析及评价

对明月草的氨基酸、矿质元素及其他营养成分进行了分析测定,并进行了营养评价。结果表明,明月草中水分、蛋白质、粗脂肪、总糖、粗纤维、灰分、维生素C与总黄酮的含量为92.70%、1.99%、0.35%、0.21%、0.68%、1.40%、0.08 mg/g与4.79 mg/g;含有氨基酸15种,氨基酸总量(TAA)为20.01%。EAA/TAA为43.83%,EAA/NEAA为78.02%,各种人体必需氨基酸种类齐全,且比例均衡,比值系数分(SRC)为65.10。在各种人体必需氨基酸中,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸;P、K、Ca、Mg、Fe、Zn、Cu、Mn矿质元素的含量为322、4210、1441、478、38、2.36、1.14、55.70 mg/kg,经分析明月草氨基酸、矿质元素及其他营养成分含量丰富,具有很好的开发与利用价值。

明日叶中营养成分及生物活性物质的检测分析

目的:对明日叶中的营养成分和生物活性物质查尔酮的含量进行检测分析。方法:采用国标法对明日叶中的营养成分含量进行检测分析,并用紫外可见分光光度法测定明日叶中查尔酮的含量。结果:明日叶中含有蛋白质4.71%、还原糖1.65%、粗纤维3.64%、脂肪0.19%、水分84.79%、灰分0.72%,VB10.02mg/100g、VB20.71mg/100g、VC45.90mg/100g、叶酸0.30mg/100g、VB123.20μg/100g,钾110.00mg/100g、钙140.21mg/100g、镁1.50mg/100g、铁14.03mg/100g、锗20.67μg/100g;测得的18种氨基酸含量为2.85g/100g,其中8种人体必需氨基酸含量为1.11g/100g,占18种氨基酸总量的38.9%;生物活性物质查尔酮含量为0.75%。结论:明日叶中含有多种有益于人体健康的营养成分,其中蛋白质含量比常见蔬菜高,其氨基酸模式较为理想,且含有丰富的粗纤维、VC、VB2和叶酸,维生素在叶中的含量尤其丰富,还有植物少有的VB12和有机锗及罕见的生物活性物质查尔酮,具有较高的研究价值和保健功效,应用前景广阔。

明日叶黄酮类物质泡腾饮片的研制

目的:研究以富含黄酮的明日叶乙醇浸提物为原料制备明日叶黄酮类物质泡腾饮片的工艺。方法:明日叶黄酮类物质泡腾饮片制备工艺采用非水制粒法,通过单因素试验确定明日叶黄酮类物质泡腾饮片适宜配方。结果:明日叶黄酮类物质泡腾饮片适宜配方各组分含量(质量分数)为:明日叶总黄酮浸提粉包合物18%、乳糖9.75%、柠檬酸34.00%、碳酸氢钠31.00%、木糖醇4.90%、三氯蔗糖0.10%、纯胶0.25%、PEG8000 2.00%、PVP 0.06mL/g。本实验制备的明日叶黄酮类物质泡腾饮片口感宜人,营养丰富,具有独特的明日叶清新甘甜的口味,便于携带和食用,易被消费者接受。

超声波辅助提取明日叶查尔酮的工艺优化

探讨超声波辅助萃取技术在明日叶查尔酮提取应用中的最佳工艺,并测定明日叶中查尔酮的含量。采用单因素实验研究超声功率、乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对明日叶查尔酮提取率的影响,在此基础上,利用正交试验确定超声波辅助提取明日叶中查尔酮的最佳工艺条件。在所探讨的因素中,对明日叶中查尔酮提取的影响程度为:料液比>乙醇浓度>提取温度>提取时间>超声功率。最佳工艺参数:超声波功率300 W,乙醇浓度为70%,提取温度为50℃,料液比为1∶50,萃取时间为20 min,提取二次后吸光值为1.191,查尔酮得率为7.53 mg/g。明日叶中查尔酮含量较高,优化的提取工艺简便、高效、节能、可行,为明日叶查尔酮的工业化提取提供参考。

明日叶的茎与叶主要抗氧化成分含量及抗氧化性比较

以明日叶茎杆与叶子为研究对象,在测定其乙醇提取物总酚酸及总黄酮含量的基础上,以芦丁为阳性对照,测定其乙醇提取物总抗氧化能力,铁离子还原/抗氧化力,以及对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH有机自由基的清除作用,并对茎杆与叶子乙醇提取物进行抗氧化活性比较。结果表明:叶乙醇提取物总酚酸和总黄酮的含量分别是茎乙醇提取物的2.2倍和5.2倍。在总黄酮质量浓度相同的条件下,叶乙醇提取物和茎乙醇提取物的抗氧化活性均与其总黄酮质量浓度呈正相关,且叶乙醇提取物的抗氧化性大于茎乙醇提取物。与芦丁相比较,芦丁对羟基自由基的清除能力大于叶乙醇提取物,其他抗氧化活性均小于叶乙醇提取物而大于茎乙醇提取物。结果表明,明日叶的叶乙醇提取物可以作为一种新型有效的天然抗氧化物质进行开发利用。

明日叶的保健功能及其产品开发的研究进展

明日叶为一种药食兼用型植物,有利于促进人体健康,日益受到人们关注。本文综述了明日叶查尔酮、香豆素、类黄酮等功能成分,归纳了明日叶"五抗"、"四降"、"三改善"、"二预防"、"一提高"的保健作用及其最新研究进展,并对明日叶保健茶、保健酒、保健饮料、保健胶囊等几种典型产品作了简要介绍,以期为明日叶资源的开发利用提供参考。

明日叶中总黄酮的微波辅助提取工艺和检测方法研究

对明日叶中总黄酮的提取工艺和检测方法进行了研究。采用微波法,利用单因素和正交实验对明日叶中总黄酮的提取工艺进行了优化,分别通过AlCl3和A(lNO3)3显色法,建立了明日叶中总黄酮的分光光度检测方法。结果表明,AlCl3显色法的最佳提取条件为:乙醇浓度85%、提取3次、料液比1:25(g/mL)、微波功率600W、提取80s,样品中总黄酮的得率为1.48%;A(lNO3)3显色法的最佳提取条件为:乙醇浓度40%、提取3次、料液比1:25(g/mL)、微波功率700W、提取80s,样品中总黄酮的得率为1.67%。另外,对两种显色方法的显色稳定性进行了初步探讨。