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Annexin 5刺激大鼠睾丸Leydig细胞后的差异表达蛋白的研究 被引量:3
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作者 靖俊 伊男 +1 位作者 林钗英 姚兵 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期29-34,共6页
目的:研究annexin 5作用于大鼠睾丸Leydig细胞后的差异表达蛋白。方法:原代培养大鼠睾丸Leydig细胞,1 nmol/L的annexin 5处理Leydig细胞24 h,提取细胞蛋白用二维电泳分离蛋白并进行比较。选择与对照组有明显差异表达的蛋白点,进行质谱... 目的:研究annexin 5作用于大鼠睾丸Leydig细胞后的差异表达蛋白。方法:原代培养大鼠睾丸Leydig细胞,1 nmol/L的annexin 5处理Leydig细胞24 h,提取细胞蛋白用二维电泳分离蛋白并进行比较。选择与对照组有明显差异表达的蛋白点,进行质谱分析。结果:获得了分辨率和重复性均很好的差异蛋白图谱。筛选出的显著差异表达的50个蛋白点,共有36个蛋白点被成功鉴定,其中annexin 5处理组中高表达的为23个,低表达的为13个。结论:初步建立了annexin 5作用于大鼠睾丸Leydig细胞后的差异蛋白谱,筛选并鉴定出的这些蛋白质可能是影响睾丸Leydig细胞合成睾酮过程中的关键蛋白,研究结果为阐明annexin 5调控大鼠睾丸Leydig细胞分泌睾酮的具体机制奠定了基础。 展开更多
关键词 annexin 5 睾酮 LEYDIG细胞 二维凝胶电泳 质谱
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StarD7与Wnt/β-catenin信号通路对Annexin 5刺激大鼠Leydig细胞睾酮分泌的影响 被引量:2
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作者 伏海燕 靖俊 +4 位作者 伊男 余时超 恽时峰 梁元姣 姚兵 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期518-523,共6页
目的:研究StarD7以及Wnt/β-catenin信号通路促进睾酮合成的内在机制,探索睾酮合成的调控新途径。方法:用1 nmol/L的Annexin 5处理大鼠原代Leydig细胞24 h,化学发光法检测睾酮含量,利用RT-PCR和Westernblot方法分析StarD7和β-catenin在... 目的:研究StarD7以及Wnt/β-catenin信号通路促进睾酮合成的内在机制,探索睾酮合成的调控新途径。方法:用1 nmol/L的Annexin 5处理大鼠原代Leydig细胞24 h,化学发光法检测睾酮含量,利用RT-PCR和Westernblot方法分析StarD7和β-catenin在mRNA和蛋白水平上的表达变化,并利用免疫荧光法对β-catenin进行定位。结果:在Annexin 5的刺激作用下,与对照组相比,睾酮合成水平明显增加了176%[(7.83±0.32)vs.(21.6±1.1),P<0.05];在Annexin 5作用下,与对照组相比,StarD7在mRNA水平表达增加55%[(1.12±0.08)vs.(1.74±0.11),P<0.05],β-catenin表达增加48%[(1.15±0.08)vs.(1.70±0.05),P<0.05]。在蛋白水平上,与对照组相比,StarD7增加42%[(1.06±0.09)vs.(1.51±0.07,P<0.05)],β-catenin增加55%[(1.02±0.01)vs.(1.58±0.02),P<0.05],此外在Annexin 5作用下,β-catenin有入核积聚的趋势。结论:在Annexin 5作用下,StarD7和β-catenin的表达均有显著增加,且β-catenin有入核积聚的趋势,提示StarD7和β-catenin对Annexin 5刺激Leydig细胞睾酮的合成均有调控作用,该过程可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路,从而促进StarD7表达上升,最终导致睾酮合成增加。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 睾丸间质细胞 睾酮 信号传导 磷蛋白类
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光照应激对SD大鼠小肠中annexin 5表达的影响 被引量:1
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作者 时姗姗 卢坤刚 +3 位作者 柳海燕 陶晓倩 林钗英 姚兵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期221-223,共3页
目的观察光照应激状态下SD大鼠小肠黏膜组织中annexin 5的分布和表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24 h持续光照,分为短期光照应激(2、3、4、7 d)和长期光照应激(14、21、28 d),分别取应激组和相应对照组的大鼠小肠组织,采用免疫... 目的观察光照应激状态下SD大鼠小肠黏膜组织中annexin 5的分布和表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24 h持续光照,分为短期光照应激(2、3、4、7 d)和长期光照应激(14、21、28 d),分别取应激组和相应对照组的大鼠小肠组织,采用免疫组织化学和western blot技术分析annexin 5在各时间段大鼠小肠组织中的分布和表达。结果western blot结果显示,与对照组相比,持续光照2、3、4、7 d,实验组大鼠小肠中annexin 5表达无明显变化;持续光照14 d和21 d,实验组大鼠小肠中annexin 5的表达量显著高于对照大鼠,具有统计学意义(P<0.05);持续光照28 d,实验组大鼠小肠中annexin 5表达量虽仍高于对照鼠,但无显著性差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,annexin 5在大鼠小肠中的分布未见明显改变,但光照应激后期实验组(14、21、28 d)annexin 5免疫组化显色较深。结论在光照应激后期(14、21 d)annexin 5的表达量明显增加。随着应激时间的延长(28 d),机体内代偿机制的建立,实验组annexin 5逐渐恢复至正常水平。说明大鼠小肠中annexin 5参与了应激过程。 展开更多
关键词 光照 应激 小肠 annexin5
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光照应激对SD大鼠睾丸中Annexin 5表达的影响 被引量:1
4
作者 时姗姗 王大勇 +7 位作者 柳海燕 陶晓倩 韩雪峰 卢坤刚 张艳梅 戈一峰 崔英霞 姚兵 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期189-191,共3页
目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和West... 目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和Western blotting技术分析annexin5免疫定位和蛋白相对表达。结果Western blotting结果显示:短期光照应激组(2、3、4、7d)的实验组大鼠睾丸annexin5表达与对照组相比无明显变化;在持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量与对照组相比分别从3.09提高到4.16,从4.20提高到5.28(P<0.01,P<0.05);而持续光照28d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量(4.87)与对照组(4.13)比较无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,annexin5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但光照应激长期实验组(14、21、28d)annexin5免疫组化显色较深,说明annexin5表达升高,这与Westernblotting的结果基本一致。结论长期光照应激使大鼠睾丸annexin5的表达量明显增加。annexin5参与了应激过程,并可能参与了睾丸中某些重要生理功能的调节。 展开更多
关键词 应激 annexin 5 基因
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坐骨神经选择性损伤应激对大鼠颌下腺中annexin 5表达的影响 被引量:1
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作者 卢坤刚 韩雪峰 +7 位作者 张艳梅 柳海燕 陶晓倩 时姗姗 戈一峰 崔英霞 李晓军 姚兵 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期558-560,564,共4页
目的研究坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激态下SD大鼠颌下腺中annexin 5表达的变化。方法72只SD大鼠随机均分为3组:手术组、假手术组和对照组(每组24只)。手术组:用氯胺酮(40mg/kg)腹腔注射麻醉后,切开左后肢侧面皮肤和股二头肌,... 目的研究坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激态下SD大鼠颌下腺中annexin 5表达的变化。方法72只SD大鼠随机均分为3组:手术组、假手术组和对照组(每组24只)。手术组:用氯胺酮(40mg/kg)腹腔注射麻醉后,切开左后肢侧面皮肤和股二头肌,暴露大鼠坐骨神经干及其3个分支:胫神经、腓总神经和腓肠神经,结扎并切断胫神经和腓总神经,保留腓肠神经以建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型。假手术组:只暴露坐骨神经干及其分支而不损伤神经。对照组:不做任何处理。分别于手术后14、21、28d从各组中取8只大鼠,麻醉后处死,分离颌下腺组织置于液氮内保存备用。然后通过免疫组织化学和Western blotting检测坐骨神经选择性损伤后14、21、28d时各组大鼠颌下腺中annexin 5蛋白定位及表达的变化。结果免疫组化结果显示,annexin 5主要定位在颌下腺润管、分泌管及排泄导管上皮细胞中。术后14d,annexin 5在颌下腺的定位明显减少,Western blotting结果显示术后14d时与对照组比较,手术组大鼠颌下腺中annexin 5表达水平显著降低(P<0.01),与假手术组比较,手术组annexin 5表达水平也显著下降(P<0.05)。但术后21和48d手术组与对照组、假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激能下调SD大鼠颌下腺中annexin 5的表达,annexin 5可能参与了颌下腺对应激的反应。 展开更多
关键词 神经损伤 应激 annexin 5 颌下腺 模型 动物
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Annexin 5对雄性SD大鼠应激损伤的保护作用 被引量:1
6
作者 林钗英 时姗姗 +3 位作者 陶晓倩 柳海燕 靖俊 姚兵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期381-383,共3页
目的研究膜联蛋白5(annexin 5,A5)对坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激致雄性SD大鼠生殖损伤的保护作用。方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组,分别建立对照组、假手术组、手术组和手术+A5组模型。手术+A5组于术后第2天腹腔注射15μg/k... 目的研究膜联蛋白5(annexin 5,A5)对坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激致雄性SD大鼠生殖损伤的保护作用。方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组,分别建立对照组、假手术组、手术组和手术+A5组模型。手术+A5组于术后第2天腹腔注射15μg/kg剂量的A5,其他实验组腹腔注射等量的pH 8.0 Tris-HCl,每日1次,连续21 d。分别测各组SD大鼠体重、称重睾丸和附睾,计算其脏器系数,并对附睾尾进行精子计数。HE染色观察睾丸组织结构变化。用化学发光法检测各组大鼠血清中睾酮浓度。结果手术组大鼠与对照组相比,睾丸系数、附睾系数以及精子相对计数均降低(P<0.05);睾酮水平下降显著[(5.10±2.61)vs(22.40±4.30)mmol/L,P<0.01)];病理切片见睾丸生精细胞与腔内精子数量明显减少。假手术组大鼠与对照组比,上述指标均无统计学差异。手术+A5组与手术组比,精子相对计数与睾酮含量[(19.67±2.02)vs(5.10±2.61)mmol/L,P<0.01]均显著提高,其他参数均有不同程度的恢复,睾丸生精细胞与腔内精子数量减少程度显著恢复。结论 A5对慢性疼痛应激引起的生殖损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 慢性疼痛应激 睾酮 神经损伤 大鼠
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荧光定量RT-PCR检测去下颌下腺大鼠睾丸annexin 5 mRNA和Bax mRNA的表达
7
作者 王晨阳 马百坤 +5 位作者 侯林 徐会茹 黄祝 蒋超 黄宇烽 姚兵 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期106-110,共5页
目的观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)和Bax mRNA表达的影响。方法切除大鼠下颌下腺,分别于术后14d、28d和42d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量RT-PCR检测annexin 5和Bax mRNA的表达... 目的观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)和Bax mRNA表达的影响。方法切除大鼠下颌下腺,分别于术后14d、28d和42d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量RT-PCR检测annexin 5和Bax mRNA的表达。结果荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,切除下颌下腺14d和28d后,实验组大鼠睾丸annexin 5 mRNA分别升高了38.5%和55.3%,但无显著性差异;实验组大鼠睾丸Bax mRNA分别升高了70.6%和80.5%,其升高具有显著性差异(P<0.05和P<0.01);切除下颌下腺42d时,实验组大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA分别升高5.6%和2.3%,几乎恢复到与对照组相同的水平。结论下颌下腺切除后14d和28d可造成大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA的表达升高;切除后42d,annexin 5和Bax mRNA又恢复到正常水平。 展开更多
关键词 下颌下腺 睾丸 annexin 5 BAX 荧光定量RT-PCR 大鼠
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急性疼痛应激对SD大鼠胃及颌下腺中annexin 5 mRNA表达的影响
8
作者 卢坤刚 韩雪峰 +4 位作者 张艳梅 时姗姗 柳海燕 陶晓倩 姚兵 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第32期3328-3331,共4页
目的:研究在甲醛(formalin)致炎的急性疼痛应激状态下SD大鼠胃及颌下腺中annexin 5 mRNA表达水平的变化.方法:单侧后足底皮下注射0.2mL,甲醛溶液(50g/L),建立SD大鼠的急性疼痛应激模型,对照组注射等量的生理盐水.实验组与其相应的对照... 目的:研究在甲醛(formalin)致炎的急性疼痛应激状态下SD大鼠胃及颌下腺中annexin 5 mRNA表达水平的变化.方法:单侧后足底皮下注射0.2mL,甲醛溶液(50g/L),建立SD大鼠的急性疼痛应激模型,对照组注射等量的生理盐水.实验组与其相应的对照组大鼠分别在注射后1、6、24和72h用氯胺酮(50mg/kg)麻醉处死.通过荧光定量PCR分析急性疼痛应激对大鼠胃及颌下腺中annexin 5 mRNA表达水平的影响.结果:荧光定量PCR结果表明,在甲醛注射后1h胃中annexin 5 mRNA水平与对照组相比显著升高(7.43±2.67vs1.00±0.00,P<0.01),至6h恢复到正常水平(P>0.05);注射后1h,颌下腺中annexin 5 mRNA水平也显著升高(4.33±1.50vs1.00±0.00,P<0.01),并持续到24h,至72h恢复到正常水平.结论:annexin 5可能是消化系统应激反应蛋白,急性疼痛可能通过annexin 5影响胃及颌下腺的功能. 展开更多
关键词 疼痛应激 甲醛 颌下腺 annexin 5 荧光定量PCR
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Annexin 5对人精子线粒体功能的影响
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作者 林钗英 靖俊 姚兵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期138-139,共2页
目的观察膜联蛋白5(annexin5)对人精子线粒体功能的影响。方法收集38例少弱精症患者精液标本。精子与an-nexin5共温育,用罗丹明(Rh123)和碘化吡啶(PI)染色并用流式细胞术检测人精子线粒体功能。结果添加annexin5组与对照组相比,线粒体... 目的观察膜联蛋白5(annexin5)对人精子线粒体功能的影响。方法收集38例少弱精症患者精液标本。精子与an-nexin5共温育,用罗丹明(Rh123)和碘化吡啶(PI)染色并用流式细胞术检测人精子线粒体功能。结果添加annexin5组与对照组相比,线粒体功能良好的活精子百分率[(38.77±9.20)%vs(26.12±10.09)%,P<0.05]和线粒体荧光值[(509.72±45.02)vs(452.88±39.39),P<0.05]均有显著性升高。结论体外添加annexin5能增强精子线粒体的活性。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 线粒体 流式细胞术 精子 罗丹明 碘化吡啶
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坐骨神经选择性损伤对SD大鼠胃中annexin 5表达的影响
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作者 朱小蔚 卢坤刚 +9 位作者 韩雪峰 张艳梅 陶晓倩 柳海燕 时姗姗 崔英霞 李晓军 黄宇烽 戈一峰 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2009年第6期570-573,I0003,共5页
目的:疼痛特别是慢性疼痛,是战争创伤引起的常见症状,也是近年来影响人们身心健康的主要因素之一,但其对消化系统功能的影响仍没有系统的研究。因此,文中通过建立坐骨神经选择性损伤模型研究慢性疼痛应激状态下SD大鼠胃中annexin 5表达... 目的:疼痛特别是慢性疼痛,是战争创伤引起的常见症状,也是近年来影响人们身心健康的主要因素之一,但其对消化系统功能的影响仍没有系统的研究。因此,文中通过建立坐骨神经选择性损伤模型研究慢性疼痛应激状态下SD大鼠胃中annexin 5表达的变化。方法:72只SD大鼠随机分成3组,手术组大鼠结扎并切断胫神经和腓总神经,但保留腓肠神经以建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型;假手术组只暴露坐骨神经干及其分支而不损伤神经;正常对照组不做任何处理。然后通过免疫组织化学和Western blot方法分别研究坐骨神经选择性损伤后14 d、21 d和28 d时大鼠胃中annexin 5蛋白定位及表达的变化。结果:免疫组化结果显示annexin 5存在于胃上皮及胃腺细胞中。术后14d,手术组胃黏膜上皮细胞中annexin 5的定位明显减少;Western blot结果显示,在坐骨神经分支选择性损伤引起的慢性疼痛应激状态下,14 d时手术组annexin 5蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.01)和假手术组(P<0.05),21 d时手术组annexin 5蛋白表达水平也显著低于对照组和假手术组(P<0.05),而48 d时手术组与其对应的对照组和假手术组相比均无显著性差异(P>0.05)。结论:坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激能下调SD大鼠胃中annexin 5的表达,annexin 5可能参与了胃对疼痛应激的反应。 展开更多
关键词 神经损伤 应激 annexin5 动物模型
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ERK MAPK是annexin 5调节大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的重要途径 被引量:3
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作者 张稳 陶晓倩 +3 位作者 林钗英 柳海燕 时姗姗 戈一峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期435-437,共3页
目的研究膜联蛋白5(annexin 5)调控大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮是否经由胞外信号调节激酶(ERK)促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路。方法培养的大鼠睾丸间质细胞用无血清培养基培养2 h后,用1 nmol/L annexin 5处理0、5、10、30、60、90 min,w... 目的研究膜联蛋白5(annexin 5)调控大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮是否经由胞外信号调节激酶(ERK)促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路。方法培养的大鼠睾丸间质细胞用无血清培养基培养2 h后,用1 nmol/L annexin 5处理0、5、10、30、60、90 min,western blotting检测磷酸化ERK(P-ERK)、总ERK(T-ERK)的蛋白质表达水平;分别用pH 8.0的Tris-HCl、ERK抑制剂PD98059(50μmol/L)、annexin 5和annexin 5+PD98059作用于培养细胞,分析并比较培养细胞3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)蛋白质表达水平及上清液中睾酮含量。结果 annexin 5刺激间质细胞5 min后P-ERK水平开始升高(P<0.05),在10 min时达到峰值,比对照组升高了33%[(0.89±0.06)vs(0.67±0.05),P<0.01],60 min恢复至正常水平;加入PD98059后,与对照组比较,3β-HSD下降了15%[(1.08±0.14)vs(1.27±0.10),P<0.05],睾酮水平下降了68%[(12.89±0.93)vs(40.86±4.07),P<0.01]。用annexin 5刺激PD98059预处理过的间质细胞,与annexin 5组相比,3β-HSD表达量和睾酮水平仍维持在低水平,分别下降了19%[(1.16±0.09)vs(1.43±0.05),P<0.01]和68%[(17.47±3.19)vs(54.09±4.50),P<0.05]。结论 ERK MAPK途径可能是annexin 5调控睾丸间质细胞中睾酮分泌的重要信号通路,其调控睾酮分泌是通过影响3β-HSD的合成而实现的。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 睾丸间质细胞 细胞外信号调节激酶 促分裂原活化蛋白激酶 睾酮
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血清ANXA5、SFRP5、STAT6与支气管哮喘患儿1年内再入院的关系分析
12
作者 刘悦欣 张舒晨 《检验医学与临床》 CAS 2024年第10期1377-1380,1386,共5页
目的分析血清膜联蛋白A5(ANXA5)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、信号转导转录激活因子6(STAT6)与支气管哮喘患儿1年内再入院的关系。方法选取2018年1月至2022年8月该院收治的210例支气管哮喘患儿作为研究对象,根据支气管哮喘患儿1年内... 目的分析血清膜联蛋白A5(ANXA5)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、信号转导转录激活因子6(STAT6)与支气管哮喘患儿1年内再入院的关系。方法选取2018年1月至2022年8月该院收治的210例支气管哮喘患儿作为研究对象,根据支气管哮喘患儿1年内是否再入院分为再入院组和未再入院组,再入院组30例,未再入院组180例。比较再入院组和未再入院组首次入院时血清ANXA5、SFRP5、STAT6水平,采用多因素Logistic回归分析支气管哮喘患儿1年内再入院的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANXA5、SFRP5、STAT6对支气管哮喘患儿1年内再入院的预测价值。结果再入院组血清ANXA5、SFRP5水平低于未再入院组,血清STAT6水平高于未再入院组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清ANXA5、SFRP5水平升高是支气管哮喘患儿1年内再入院的保护因素(OR<1,P<0.05),血清STAT6水平升高是支气管哮喘患儿1年内再入院的危险因素(OR>1,P<0.05)。血清ANXA5、SFRP5、STAT6单项预测支气管哮喘患儿1年内再入院的曲线下面积(AUC)均>0.700,且3项联合检测预测的AUC为0.856。结论血清ANXA5、SFRP5、STAT6水平与支气管哮喘患儿1年内再入院密切相关,对预测患儿1年内再入院有一定价值。 展开更多
关键词 支气管哮喘 膜联蛋白A5 分泌型卷曲相关蛋白5 信号转导转录激活因子6 再入院 预测价值
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Annexin5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中StarD7表达的影响 被引量:4
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作者 靖俊 林钗英 +2 位作者 伊男 伏海燕 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第2期123-128,共6页
目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾... 目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中的StarD7(START domain containing 7)表达的影响,探讨annexin 5影响睾酮分泌的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,1nmol/L的annexin 5处理间质细胞24h,分别提取细胞总mRNA和总蛋白。RT-PCR检测StarD7的mRNA表达改变。Western blotting方法分析睾丸间质细胞中StarD7的蛋白表达变化。收取细胞爬片,利用免疫细胞化学的方法对StarD7在睾丸间质细胞中进行定位。结果与对照组相比,在mRNA水平上,加药组StarD7 mRNA的表达增加了44.5%(1.10±0.02 vs 1.59±0.09,P<0.05)。在蛋白水平上,加药组StarD7蛋白的表达增加了44.3%(1.49±0.10 vs 2.15±0.16,P<0.05)。StarD7主要定位在大鼠睾丸间质细胞的胞浆内,加药组的染色强度明显强于对照组。结论 StarD7在基因和蛋白水平均受annexin 5的调控,结合先前发现annexin 5可调控睾丸间质细胞睾酮合成的结果,提示annexin 5调控睾酮合成可能是通过调控StarD7的表达来实现的。 展开更多
关键词 annexin 5 StarD7 睾酮 间质细胞
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Annexin5、ET-1、vWF在子痫前期患者胎盘中的表达 被引量:1
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作者 任春丽 唐兴国 任磊 《中国实验诊断学》 2014年第7期1141-1144,共4页
目的研究子痫前期患者胎盘中Annexin5、ET-1、vWF的表达水平,并探讨子痫前期发病机制。方法采用免疫组化方法检测子痫前期患者84例(轻度29例、早发重度型27例、晚发重度型28例)及对照组29例胎盘组织中Annexin5、ET-1、vWF的表达水平。... 目的研究子痫前期患者胎盘中Annexin5、ET-1、vWF的表达水平,并探讨子痫前期发病机制。方法采用免疫组化方法检测子痫前期患者84例(轻度29例、早发重度型27例、晚发重度型28例)及对照组29例胎盘组织中Annexin5、ET-1、vWF的表达水平。结果①胎盘中Annexin 5在子痫前期各组表达强度明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。虽表达强度早发型﹤晚发型﹤轻度组,但各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。②胎盘中ET-1在子痫前期各组表达强度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。而子痫前期患者各组间随病情的加重ET-1水平呈上升趋势,早发型>晚发型>轻度子痫前期患者,差异仍有统计学意义(P<0.05)。③胎盘vWF在痫前期各组中表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重度子痫前期组(早发型与晚发型)显著高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);而早发型重度子痫前期组与晚发型重度子痫前期组比较,虽早发型胎盘组织vWF的表达虽有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论胎盘中Annexin 5、ET-1、vWF的表达可能与子痫前期发病机制有关,通过影响胎盘中凝血-纤溶系统及血管内皮系统,参与子痫前期发生、发展的病理生理过程。 展开更多
关键词 子痫前期 annexin 5 ET-1 VWF 免疫组化
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5-aza-2dC诱导白血病细胞分化及对Annexin A1/A2表达和甲基化状态的影响 被引量:4
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作者 肖艳华 易红 +3 位作者 谭潭 梁婷 陈主初 肖志强 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2008年第3期185-191,F0003,共8页
目的:观察甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxyc ityd ine,5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞系HL-60细胞分化及对膜联蛋白A1/A2(Annexin A1/A2)表达和甲基化状态的影响。方法:瑞氏染色和流式细胞术检测5-aza-2dC对H... 目的:观察甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxyc ityd ine,5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞系HL-60细胞分化及对膜联蛋白A1/A2(Annexin A1/A2)表达和甲基化状态的影响。方法:瑞氏染色和流式细胞术检测5-aza-2dC对HL-60细胞分化的影响;RT-PCR法检测药物处理HL-60细胞前后Annexin A1和A2基因mRNA的表达水平;甲基化特异性PCR(m ethylation-spec ific PCR,MSP)检测药物处理HL-60细胞前后An-nexin A1和A2基因启动子区域CpG岛的甲基化水平。结果:5-aza-2dC处理后HL-60细胞的髓系分化抗原CD11b的表达增强,细胞向成熟分化,且在0.5μmol/L时其促分化作用最明显;Annexin A1和A2基因在HL-60细胞中低表达,0.5μmol/L 5-aza-2dC处理HL-60细胞72 h后,Annexin A1和A2基因mRNA表达水平明显上调,而其启动子区域CpG岛甲基化水平明显降低。结论:5-aza-2dC具有促进白血病细胞分化的作用,Annexin A1和A2基因启动子去甲基化可能与5-aza-2dC诱导白血病细胞分化有关。 展开更多
关键词 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 白血病 annexin A1 annexin A2 甲基化 分化
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Expression of annexin A5 in serum and tumor tissue of patients with colon cancer and its clinical significance 被引量:4
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作者 Chong-Bing Sun Ai-Yan Zhao +4 位作者 Shuai Ji Xiao-Qing Han Zuo-Cheng Sun Meng-Chun Wang Fu-Chang Zheng 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2017年第39期7168-7173,共6页
AIM To investigate the expression of annexin A5 in serum and tumor tissue of patients with colon cancer and to analyze its clinical significance.METHODS Ninety-three patients with colon cancer treated at our hospital ... AIM To investigate the expression of annexin A5 in serum and tumor tissue of patients with colon cancer and to analyze its clinical significance.METHODS Ninety-three patients with colon cancer treated at our hospital between February 2013 and March 2016 were included in an observation group, and 40 healthy individuals were included in a control group. Enzyme-linked immunosorbent assay was performed to determine the serum level of annexin A5, while immunohistochemistry was performed to determine the expression of annexin A5 in cancer tissues.RESULTS The serum level of annexin A5 was 0.184 ± 0.043 ng/m L in the observation group, which was significantly higher than that in the control group(P < 0.05). Annexin A5 expression was detected in 79.31% of the patients with lymph node metastasis, which was significantly higher than that in patients without lymph node metastasis(P < 0.05). Moreover, annexin A5 expression was detected in 86.96% of the patients with stage Ⅲ to Ⅳ disease, which was significantly higher than that in patients with stage Ⅰ to Ⅱ disease(P < 0.05). The serum level of annexin A5 was 0.215 ± 0.044 ng/m L in patients whose tumors were positive for annexin A5 expression, which was significantly higher than that in patients whose tumors were negative for annexin A5 expression(P < 0.05). The serum level of annexin A5 was correlated with annexin A5 expression in colon cancer tissues(r= 0.312, P < 0.05). When a cutoff value of > 0.148 ng/m L for serum level of annexin A5 was used in the diagnosis of colon cancer, the sensitivity was 83.90%, and the specificity was 57.50%.CONCLUSION For patients with colon cancer, annexin A5 expression in cancer tissues is related to lymph node metastasis and tumor grade. Serum level of annexin A5 is related to annexin A5 expression in cancer tissues and is of diagnostic relevance. 展开更多
关键词 IMMUNOHISTOCHEMISTRY annexin A5 结肠癌 浆液
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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响 被引量:13
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作者 陶晓倩 王大勇 +6 位作者 柳海燕 林钗英 韩雪峰 时姗姗 崔英霞 戈一峰 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2010年第4期342-346,共5页
目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标... 目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01);浓度为10-8mol/L时,睾酮水平虽也有升高趋势,但无显著性差异;而Western blotting结果显示,浓度为10-9mol/L时,3β-HSD表达量升高了63%(2.19±1.00vs1.34±0.19,P<0.05),浓度为10-10mol/L和10-8mol/L时,3β-HSD表达量无显著性差异;睾酮分泌与3β-HSD的表达呈显著正相关(r=0.430,P<0.05)。10-9mol/L的an-nexin5处理细胞不同时间,与对照组相比,6h和12h后睾酮的分泌虽有升高,但无统计学意义(P>0.05);24h后睾酮的分泌量显著升高了18%[(12.59±0.41)nmol/Lvs(10.70±0.09)nmol/L](P<0.01);而处理36h后,睾酮分泌量下降了21%[(14.44±1.65)nmol/Lvs(17.46±0.31)nmol/L](P<0.01)。结论在大鼠睾丸间质细胞中,annexin 5对睾酮分泌具有调节功能且呈剂量和时间依赖性;3β-HSD是该调节过程中的关键酶之一。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 间质细胞 睾酮 3β-羟基类固醇脱氢酶
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促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响 被引量:15
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作者 戈一峰 王大勇 +7 位作者 蒋超 张艳梅 韩雪峰 卢坤刚 崔英霞 黄宇烽 黄祝 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2008年第11期1138-1142,共5页
目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH... 目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH拮抗剂(GnRH-antagonists,GnRHant)(10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)处理细胞,提取细胞总RNA,反转录,设计特异性引物和Tagman探针,荧光定量PCR检测膜联蛋白5(annexin 5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的改变。结果:荧光定量PCR结果显示,与未加GnRH类似物的对照组相比,当GnRHa的终浓度为10-5mol/L、10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA分别升高了38.89%和35.29%,均具有统计学意义(P<0.05);当GnRHa的浓度为10-5mol/L时,3β-HSD mRNA也显著升高了46.43%(P<0.01)。同样,与对照组相比,当GnRHant的浓度为10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA下降了45.45%(p<0.05),当GnRHant的浓度为10-6mol/L,10-7mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA也分别显著地降低了63.64%(P<0.01)和50%(P<0.05),其余各组与对照组相比,差异无统计学意义。结论:GnRH类似物能够调控大鼠睾丸间质细胞annexin5和3β-HSD mRNA表达,GnRH类似物可能与睾丸间质细胞上GnRH受体结合后,通过特定的生理机制,进而影响annexin5和3β-HSDmRNA表达,为揭示GnRH类似物调控间质细胞分泌睾酮的作用机制提供了一定的依据,其内在的机制还有待进一步研究。 展开更多
关键词 GNRH类似物 荧光定量PCR 大鼠睾丸间质细胞 膜联蛋白5 3β-羟类固醇脱氢酶
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去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响 被引量:8
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作者 王晨阳 侯林 +7 位作者 徐会茹 蒋超 黄祝 崔英霞 戈一峰 黄宇烽 恽时锋 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期700-703,788,共5页
目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对... 目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对照组相比,切除颌下腺14 d和28 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5的表达分别升高了27.5%和35.2%,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);切除颌下腺42 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5又恢复到与对照组几乎相同的水平。免疫组织化学显示,annexin 5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但实验组annexin 5免疫组化显色较深,说明annexin 5的表达升高,这与Western blotting的结果基本一致。结论:颌下腺切除影响大鼠睾丸annexin 5的表达,颌下腺切除早期(14、28 d)颌下腺分泌的某些生物活性物质缺乏,而造成睾丸内annexin 5表达的升高。颌下腺切除后期(42 d),机体内因颌下腺切除而缺乏的某些物质在体内又重新得到了补偿,对睾丸annexin 5的影响消除,睾丸annexin 5的表达也恢复到正常水平。其内在具体机制尚待进一步阐明。 展开更多
关键词 颌下腺 睾丸 膜联蛋白5 大鼠
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大鼠膜联蛋白5的重组表达及其对人精子体外运动功能的影响 被引量:5
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作者 陶晓倩 柳海燕 +3 位作者 时姗姗 韩雪峰 林钗英 姚兵 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期400-404,共5页
目的:先前研究发现促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白5(annex-in5)的翻译和转录水平都有一定的影响,推测annexin5可能是睾酮分泌调节中的一个信号分子。为研究annexin5在雄性生殖调节中的作用,本研究拟获得... 目的:先前研究发现促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白5(annex-in5)的翻译和转录水平都有一定的影响,推测annexin5可能是睾酮分泌调节中的一个信号分子。为研究annexin5在雄性生殖调节中的作用,本研究拟获得具有活性的大鼠annexin5重组蛋白,并观察其对人精子运动功能的影响。方法:化学合成法合成大鼠annexin5的编码基因序列,将该基因插入组氨酸标签(HIS)融合表达载体pET28a中,在T7启动子控制下,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达HIS融合蛋白;以亲和层析法纯化表达融合蛋白并用活化部分凝血激酶时间(APTT)交叉试验法验证该蛋白的抗凝血活性。15例供精者的精液标本一式2份,1份加重组蛋白annexin5(终浓度为10-8mol/L),1份做对照,分别处理20和60min,用计算机辅助精液分析系统(CASA)分析精子活力、活动率;处理20min后,做精子爬高试验。结果:合成的目的基因产物长度为974bp,插入序列与annexin5的序列完全一致。在IPTG诱导下,BL21(DE3)重组菌高效表达出相对分子质量为36000的融合蛋白,经纯化获得95%纯度的融合蛋白,纯化蛋白具有很强的抗凝血活性。Annexin5处理20min后精子活动率提高了21%(P<0.05),活力提高了40%(P<0.01),而处理60min后精子活力、活动率与对照组比较均无显著性差异;精子爬高高度与对照组比较具有极显著差异[(37.84±6.35)mmvs(49.5±12.27)mm,P<0.01]。结论:成功构建了大鼠annexin5重组表达载体并在大肠埃希菌中高效表达annexin5蛋白,且该蛋白体外处理精子20min时提高精子的运动能力。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 精子 表达 活力 活动率 爬高试验
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