中缅边境地区部分传疟按蚊蚊种的形态学及分子鉴定

目的通过形态学特征和ITS2序列扩增分析对中缅边境地区部分按蚊进行蚊种鉴定,分析其传疟潜力。方法从中缅边境地区采集部分按蚊标本,首先根据其形态学特征进行蚊种鉴定;然后提取基因组DNA,进行ITS2区段PCR扩增和测序;通过NCBI Blast分析所测序列与Gen Bank中不同按蚊的序列同源性;最后利用MEGA5软件将测序结果与Gen Bank中其他按蚊的ITS2序列进行序列比对,并构建系统进化树。综合以上形态学特征和分子鉴定结果,确定按蚊种类,分析其传疟潜力。结果经形态学鉴定为微小按蚊、带足按蚊及可赫按蚊的ITS2序列分别为506、575 bp和517 bp。BLAST结果提示,根据ITS2序列进行的按蚊蚊种分子鉴定结果均与之前的形态学鉴定一致。通过与Gen Bank中其他按蚊的ITS2序列进行比对,系统进化树显示捕获的微小按蚊、带足按蚊及可赫按蚊分别形成单独的支系。结论本研究综合利用传统形态学鉴定和分子生物学技术明确了中缅边境地区部分按蚊蚊种为微小按蚊、带足按蚊及可赫按蚊。

吉林省延边地区图们江流域按蚊形态学及基因特征分析

目的了解吉林省延边朝鲜族自治州(延边州)图们江流域按蚊种类,掌握常见按蚊形态特征和基因特征。方法于2012-2013年5-10月选择吉林省延边州图们市月晴镇、曲水镇和龙井市开山屯镇3个边境村,利用诱蚊灯法采集当地按蚊雌成虫,提取其基因组DNA,利用其核糖体核酸内转录间隔2区段(r DNA ITS2)基因特征,应用PCR基因鉴别技术,确定其种类。对按蚊基因组DNA扩增产物进行测序,与GenBank中按蚊序列进行同源性分析,进一步确定延边地区图们江流域按蚊基因特征。根据分子生物学鉴定结果,反向分析其形态特征。结果在延边州图们江流域共发现赫坎按蚊种团(Anopheles hycranus group)类中华按蚊、克莱按蚊、雷氏按蚊、暗灰按蚊(近黑按蚊)和比伦按蚊,其蚊种基因组DNA扩增序列与GenBank中已发表相应按蚊序列的同源性达97%~100%。克莱按蚊、暗灰(近黑)按蚊和雷氏按蚊的亚缘脉白斑、亚尖端白斑、尖端白斑和翅5.2纵脉末端繸斑(fringe)在形态学上存在明显种特异性。结论在延边州图们江流域未发现中华按蚊和朝鲜按蚊。比伦按蚊为该地首次发现,与已发现的克莱按蚊同为该地首次纪录种。将原纪录种嗜人按蚊订正为雷氏按蚊,原八代按蚊订正为暗灰按蚊。利用按蚊雌成虫翅白斑种特异性可对克莱按蚊、暗灰(近黑)按蚊和雷氏按蚊等新蚊种和近缘种快速、便捷地进行形态学鉴定。