紫杉醇外泌体的载药工艺优化及体外抗肿瘤作用研究

目的优化紫杉醇(PTX)外泌体给药系统的载药工艺并评价其有效性和安全性,为开发新型抗肝癌制剂提供依据。方法采用超速离心法提取骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exo);电穿孔法包载紫杉醇,以药物包封率作为评价指标,通过响应面法优化载药工艺;高效液相色谱法测定紫杉醇外泌体(Exo-PTX)的载药量及考察释药行为;CCK-8法检测Exo-PTX对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用;溶血实验评价Exo-PTX的安全性。结果Exo-PTX的最佳电穿孔法载药工艺条件为:PTX药物浓度81.80μg·mL^(-1)、电压0.6 mV、电击次数8次,Exo-PTX的平均包封率为(22.38±0.08)%。同时Exo-PTX具有良好的缓释性能,且在微酸性的肿瘤微环境下可加速释放,在模拟正常体液和肿瘤环境下,48 h时的累计释放度分别为(49.35±0.67)%、(61.94±0.43)%。Exo-PTX对体外HepG2细胞具有显著的抑制作用且无溶血风险。结论在最佳载药工艺条件下制备的Exo-PTX具有较好的体外抗肝癌作用,并呈明显的浓度依赖性,缓释性良好,为PTX制剂的二次开发提供了依据。

抗艾滋病细胞株的交叉耐性及抑制细胞凋亡

目的 体外研究奈非那韦耐性细胞株对其它抗艾滋病药及抗癌药的反应及与细胞凋亡的关系。方法 通过将成人T细胞白血病细胞株Jurkat培养于含有奈非那韦浓度不断增加直至 14 μm的培养液中培养 50d以获得耐奈非那韦的亚系细胞株JurkatrN。药敏试验用四唑嗡染色法 (类似XTT法 )并用流式细胞仪检测抗凋亡蛋白Bcl -2在母本和耐性Jurkat细胞中的表达。结果 发现JurkatrN细胞对d4T及新近报道的抗艾滋病药K -3 7的交叉耐性与母本细胞相比提高到 5倍左右。对抗肿瘤药CDDP ,VCR ,DOX和VP -16的交叉耐性也提高到 2 5倍以上。并且耐性细胞中心Bcl -2蛋白的荧光密度增加。结论 在用HIV -1蛋白酶抑制物奈非那韦作用后 。