3.0T HR-MRI联合血清MMP9、AGR2对宫颈癌FIGO分期诊断价值

目的:探讨3.0T高分辨磁共振成像(HR-MRI)联合血清基质金属蛋白9(MMP9)、前梯度蛋白2(AGR2)诊断宫颈癌FIGO分期价值。方法:选取2016年3月-2022年10月本院诊疗的122例宫颈癌患者临床资料,依据FIGO分期系统分为Ⅰ~Ⅱ期64例、Ⅲ~Ⅳ期58例,均行3.0T HR-MRI检查,并采用酶联免疫吸附法检测血清MMP9、AGR2水平。采用一致性Kappa检验分析HR-MRI单独及联合血清MMP9、AGR2与术后病理结果的一致性,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标诊断宫颈癌FIGO分期效能;结果:FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期宫颈癌患者血清MMP9、AGR2水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05)。血清MMP9、AGR2诊断宫颈癌Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的曲线下面积(AUC)分别为0.789(95%CI0.708-0.869)、0.836(95%CI0.765-0.906),特异度分别为76.6%、73.4%,敏感度分别为72.4%、81.3%,截断值分别为178.83ng/ml、13.18ng/ml。HR-MRI检查与术后病理结果一致性较高,Kappa值为0.739,HR-MRI联合血清MMP9、AGR2检查与术后病理结果一致性极高,Kappa值为0.868(均P<0.05)。HR-MRI联合血清MMP9、AGR2诊断宫颈癌患者FIGO分期的特异度(95.3%)、阳性预测值(94.6%)显著高于各单独指标诊断,敏感度(91.4%)、阴性预测值(92.4%)高于血清MMP9,准确度(93.4%)高于血清MMP9、AGR2(P<0.05)。结论:3.0T HR-MRI联合血清MMP9、AGR2对宫颈癌FIGO分期的诊断价值较高。

血清AGR2、ESM-1水平对晚期NSCLC患者EGFR-TKI治疗后预后的预测价值

目的探讨血清前梯度蛋白2(AGR2)及内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)对晚期非小细胞癌(NSCLC)患者经过表皮生长因子受体-络氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)联合化疗后的水平变化,及对EGFR-TKI联合化疗后的疗效与预后的预测价值。方法选取2020年1月至2022年1月由本院收治,EGFR突变检测均为阳性的NSCLC患者188例为观察组,对观察组患者进行EGFR-TKI联合治疗,另选取88例健康人群作为对照组。采用酶联免疫法检测化疗前及化疗后的血清AGR2、ESM-1水平。采用Kaplan-Meier法分析血清AGR2、ESM-1表达与患者预后的关系。采用多因素Logistic回归分析NSCLC患者EGFR-TKI治疗后预后的影响因素。结果EGFR-TKI联合化疗疾病控制率(DCR)为67.02%。观察组治疗前后血清AGR2、ESM-1水平均明显高于对照组(P<0.05),且治疗后血清AGR2、ESM-1水平较治疗前明显下降(P<0.05)。治疗有效组患者血清AGR2、ESM-1水平较治疗前明显下降(P<0.05),治疗无效组与治疗前差异无统计学意义(P>0.05)。患者TNM分期中,IV期血清AGR2、ESM-1表达水平高于III期(P<0.05),血清AGR2、ESM-1表达水平在患者年龄、性别、病理类型、肿瘤直径及分化程度中差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier分析显示,EGFR-TKI治疗后,血清AGR2、ESM-1高表达的患者1年生存率显著低于低表达患者(P<0.05)。AGR2、ESM-1为晚期NSCLC患者EGFR-TKI联合治疗后的独立危险因素。结论AGR2、ESM-1水平与晚期NSCLC患者EGFR-TKI治疗后的预后紧密相关,对评估患者治疗疗效及预后有重要的临床价值。

蝾螈AGR2基因的生物信息学分析

研究旨在揭示蝾螈前梯度蛋白2(AGR2)基因的结构与功能,利用多种在线软件分析了5种蝾螈AGR2基因的生物信息学特征。结果显示:5种蝾螈AGR2基因的开放阅读框均为501 bp(编码166个氨基酸),编码产物分子量均为18 kD左右,理论等电点为8.87~9.20,不稳定指数均小于40,脂溶指数为93.37~102.77,平均亲水性指数为-0.368~-0.286。蝾螈AGR2具有一个信号肽,主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,具有一个保守的硫氧还原蛋白类超家族结构域,其氨基酸序列与非洲爪蟾同源性最高。系统进化分析结果显示,蝾螈AGR2与非洲爪蟾AGR2亲缘关系最近。研究表明,蝾螈AGR2为可分泌蛋白,具有高度保守的硫氧还原蛋白类超家族结构域,与非洲爪蟾亲缘关系最近。

茶碱类药物对哮喘小鼠肺组织AGR2和Muc5ac蛋白表达的影响

目的观察氨茶碱、多索茶碱对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠肺组织中AGR2蛋白和Muc5ac蛋白表达的影响,探讨茶碱类药物在哮喘气道黏液过度分泌中的作用。方法 32只雌性小鼠随机分为哮喘组、正常对照组、氨茶碱组和多索茶碱组,每组8只。免疫组织化学法分别检测4组小鼠肺组织AGR2和Muc5ac蛋白的表达。收集支气管肺泡灌洗液(BALF),酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测其中白细胞介素(IL)-13的水平。结果哮喘小鼠肺组织中AGR2蛋白(0.544±0.039)和Muc5ac蛋白(0.556±0.045)的表达,较正常对照组(0.388±0.053,0.188±0.086)均明显升高(P<0.01)。多索茶碱组AGR2蛋白(0.491±0.029,P<0.05)和Muc5ac蛋白(0.446±0.044,P<0.01)的表达水平与哮喘组比较明显下降。结论多索茶碱可能通过下调哮喘小鼠AGR2、Muc5ac蛋白的表达,缓解哮喘气道黏液过度分泌。

AGR2在卵巢上皮性癌患者血清及癌组织中的表达及意义

目的:探讨卵巢上皮性癌血清和癌组织中人前梯度蛋白2(AGR2)的表达水平与卵巢上皮性癌发生、发展的关系及用于其诊断的意义。方法:采用ELISA法和电化学发光法检测40例卵巢上皮性癌、10例卵巢交界性肿瘤、20例卵巢良性肿瘤及17例健康体检者血清AGR2、CA125水平;采用免疫组化法检测各种卵巢肿瘤组织及因宫颈癌切除卵巢的15例正常卵巢组织中AGR2的表达情况,并结合临床病理参数进行分析。结果:①卵巢上皮性癌及卵巢交界性肿瘤组织AGR2的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织(P<0.05,P<0.01)。②卵巢上皮性癌及卵巢交界性肿瘤血清中AGR2水平明显高于卵巢良性肿瘤及健康体检者(P<0.05)。③卵巢上皮性癌血清AGR2水平及癌组织中AGR2的阳性表达率均与临床分期及淋巴结转移相关。④联合检测血清AGR2和CA125曲线下面积与单独检测CA125、AGR2比较,差异均无统计学意义(P均<0.05)。结论:AGR2与卵巢上皮性癌的发生、发展有关。联合检测血清AGR2和CA125对卵巢上皮性癌的早期诊断有参考价值。

稳定干扰AGR2乳腺癌细胞系的建立及其功能

将AGR2基因的shRNA表达序列连接到pSUPER质粒中,获得pSUPER-shAGR2质粒,经测序鉴定后,将pSUPER-shAGR2和pSUPER质粒通过Lipofectamine2000转染MCF7细胞,经流式细胞仪和600μg.mL-1G418筛选获得稳定干扰AGR2的MCF7细胞系和对照细胞系,Western blot检测其RNA干扰效果,MTT检测细胞生长情况;用无血清酚红培养基饥饿12 h后,25 ng.mL-1EGF处理15 min,Western blot检测ERK活化和PARP水平。测序结果证实AGR2shRNA核苷酸链序列插入正确,RNA干扰能有效降低MCF7细胞中AGR2的蛋白表达水平;稳定干扰AGR2的MCF7细胞系,细胞生长缓慢,ERK活化水平显著降低,而凋亡核心蛋白PARP也明显上调。稳定干扰AGR2的MCF7细胞系成功建立,发现RNA干扰AGR2抑制其生长和促进其凋亡,为AGR2作为乳腺癌预后与治疗研究靶点提供更充分的理论依据。

抗AGR2单克隆抗体18A4抑制细胞外AGR2诱导的肿瘤细胞活性

在两种自身不表达肿瘤相关蛋白AGR2的黑色素瘤细胞A375和B16-F10中加入AGR2以增强肿瘤细胞活性,观察以AGR2为靶点的单克隆抗体18A4对细胞外AGR2诱导的肿瘤细胞活性的抑制作用。用MTT法和克隆形成实验检测AGR2,18A4抗体单用和联合作用对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测AGR2,18A4抗体单用和联合作用对细胞周期的影响;划痕实验检测细胞迁移能力;鬼笔环肽染色检测细胞形态变化;Western blot和免疫荧光染色检测细胞内p53表达量。结果表明,单克隆抗体18A4能够抑制细胞外AGR2诱导的肿瘤细胞增殖速度加快,G1/S细胞周期转化,迁移速度加快和细胞形态的变化。Western blot和免疫荧光染色检测发现在化疗药物阿霉素处理的细胞中,细胞外AGR2降低细胞内p53的表达量,而18A4能够抑制这一现象。实验结果表明18A4能够抑制细胞外AGR2诱导的多种肿瘤细胞活性,是一种潜在的抗肿瘤药物。

人γδT细胞能够识别肿瘤相关蛋白AGR2

目的筛选人外周血γδT细胞识别的肿瘤相关蛋白配体,为阐明γδT细胞的抗原识别机制及抗肿瘤免疫效应机制奠定基础。方法以3种特异性结合肿瘤的CDR3δ序列合成肽为探针,通过人类全蛋白质组芯片筛选CDR3δ合成肽相互作用的蛋白;流式细胞术检测蛋白在肿瘤细胞系的表达;原核表达纯化肿瘤相关蛋白AGR2(前梯度2蛋白),ELISA验证其与探针肽的结合;固相化包被蛋白,检测人外周血单个核细胞中γδT细胞的活化相关分子的表达;乳酸脱氢酶释放法检测蛋白对γδT细胞体外细胞毒活性的作用。结果生物素标记的CDR3δ肽,共筛选到与蛋白质组芯片结合的候选蛋白配体共6种,分别是PHF21A、LDB3、SYF2、PPP1R14A、AGR2和SYAP1;流式结果显示AGR2在几种肿瘤细胞系细胞中均有表达,但表达水平不一致;ELISA结果显示GST-AGR2能特异性地结合CDR3δ肽OT3;固相包被GST-AGR2,能显著促进γδT细胞活化相关分子CD69、CD25的表达;与GST-AGR2预孵育能在体外显著促进γδT细胞对MDA-MB-231和MCF-7细胞的细胞毒作用。结论肿瘤相关蛋白AGR2能够在体外促进γδT细胞的活化,增强γδT细胞对乳腺癌细胞的细胞毒活性,可能是γδT细胞识别的肿瘤相关蛋白配体。

晚期非小细胞肺癌化疗前后的血清AGR2水平变化及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗前后血清前梯度蛋白2(AGR2)水平变化及其对预后的影响。方法选取本院2013年6月至2015年9月收治的35例NSCLC患者为实验组,接受吉西他滨联合顺铂方案化疗;选取20例健康人群为正常对照组。采用ELISA法分别检测肺癌组化疗前后及正常对照组的血清AGR2水平,分析血清AGR2水平与NSCLC临床病理特征及预后的关系。结果实验组化疗前的血清AGR2水平为(15.63±5.20)ng/ml,高于正常对照组的(3.65±1.38)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.01);实验组化疗后血清AGR2水平为(8.56±2.66)ng/ml,低于化疗前水平(P<0.01);NSCLC患者化疗前后的血清AGR2水平与肿瘤直径、临床分期有关(P<0.05);Cox比例风险回归模型分析显示,化疗前血清AGR2水平是影响患者生存期的独立危险因素。结论血清AGR2水平在评估NSCLC患者的化疗疗效及预后有着潜在的临床价值。

扶正解毒汤辅助克唑替尼对晚期非小细胞肺癌患者血清Pokemon及AGR2表达的影响

【目的】探讨扶正解毒汤辅助克唑替尼治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的疗效及其对血清Pokemon、前梯度蛋白2(AGR2)表达的影响。【方法】将118例晚期非小细胞肺癌患者随机分为观察组和对照组,每组各59例。对照组给予克唑替尼治疗,观察组在对照组的基础上给予扶正解毒汤治疗,连续治疗3个月。观察2组患者治疗前后免疫功能指标、血清Pokemon及AGR2水平的变化情况,比较2组患者的实体瘤疗效、中医证候疗效及末次随访时的无进展生存时间(PFS)。【结果】(1)实体瘤疗效方面,治疗3个月后,观察组的肿瘤控制率为84.75%(50/59),对照组为74.58%(44/59),组间比较,观察组的实体瘤疗效优于对照组(P<0.05)。(2)中医证候疗效方面,治疗3个月后,观察组的中医证候总改善率为77.97%(46/59),对照组为47.46%(28/59),组间比较,观察组的中医证候疗效明显优于对照组(P<0.05)。(3)免疫功能指标方面,治疗后,2组患者的T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均较治疗前降低(P<0.05),CD8^(+)水平均较治疗前升高(P<0.05);组间比较,观察组的CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均明显高于对照组(P<0.05)。(4)血清Pokemon及AGR2方面,治疗后,2组患者不同肿瘤直径和临床分期的血清Pokemon、AGR2水平均较治疗前降低(P<0.05),而2组患者治疗前后不同分化程度和病理类型的血清Pokemon及AGR2水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);组间比较,观察组不同肿瘤直径和临床分期的血清Pokemon、AGR2水平均明显低于对照组(P<0.05)。(5)随访情况方面,截止至随访时间,观察组患者的中位PFS为9.0(4.2~13.3)个月,高于对照组的8.0(3.5~11.6)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】扶正解毒汤辅助克唑替尼治疗晚期非小细胞肺癌患者疗效确切,能有效控制病情进展,缓解症状和体征,改善机体免疫功能,降低血清Pokemon及AGR2水平,延长患者的生存时间。

宫颈癌患者手术前后血清及病变组织AGR2水平变化及其临床意义

目的检测宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者手术前后血清及病变组织前梯度蛋白2(AGR2)水平变化,并探讨其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别对30例宫颈癌患者(宫颈癌组)和20例CIN患者(CIN组)手术前后血清及病变组织,另选20例正常健康体检女性血清样本以及因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的正常宫颈组织为对照组检测AGR2水平。结果宫颈癌患者手术前血清及癌组织AGR2水平明显高于CIN和正常对照组(均P<0.01),宫颈癌及CIN患者术后血清AGR2水平较术前明显降低(均P<0.01);宫颈癌组织及血清AGR2水平与肿瘤大小、FIGO分期、淋巴结转移相关(P<0.01或0.05);Pearson宫颈癌及CIN患者术前血清AGR2与术后血清AGR2水平呈正相关(r=0.747,P=0.000),宫颈组织AGR2水平与手术前后血清AGR2水平均呈正相关(r=0.789,P=0.000;r=0.700,P=0.000)。结论宫颈癌患者血清及病变组织AGR2增高,与肿瘤大小、FIGO分期、淋巴结转移相关,可为临床手术疗效和预后的判断提供一定的参考依据。

DCE-MRI联合血清sE-cadherin、AGR2检测诊断前列腺癌的临床价值

目的:探讨动态增强磁共振(dynamic contrast enhanced MRI,DCE-MRI)扫描联合血清上皮钙黏蛋白(soluble E-cadherin,sE-cadherin)、前梯度蛋白2(anterior gradient-2,AGR2)对前列腺癌(prostatic cancer,PCa)的诊断价值。方法:选择2015年02月至2018年02月我院收治的行前列腺穿刺活检经病理确认诊断为前列腺癌(PCa)患者98例记为PCa组,104例前列腺增生(BPH)患者记为BPH组,同时以同期的92例在我院体检的健康男性为对照组。比较PCa组和BPH组的DCE-MRI容量转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、血管外细胞外间隙容积比(Ve)、血浆内对比剂容积分数(Vp)以及三组的血清sE-cadherin、AGR2情况。以Logistics回归模型拟合联合诊断,并通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析各指标诊断价值。结果:PCa组的血清sE-cadherin、AGR2水平均高于BPH组和对照组(P<0.05),且BPH组高于对照组(P<0.05)。PCa组的Ktrans、Kep、Ve均高于BPH组(P<0.05);两组的Vp比较无统计学差异(P>0.05)。联合诊断的灵敏度82.65%也显著高于Ktrans(60.20%)、Kep(66.33%)、Ve(65.31%)、sE-cadherin(63.27%)、AGR2(58.16%)单独检测,差异均具有统计学意义(P<0.05)。联合检测ROC曲线下面积0.867(95%CI:0.826~0.908),高于Ktrans 0.650(95%CI:0.577~0.722)、Kep 0.693(95%CI:0.621~0.764)、Ve 0.826(95%CI:0.776~0.876)、sE-cadherin 0.807(95%CI:0.753~0.861)、AGR20.759(95%CI:0.701~0.817)分别单独检测。结论:采用DCE-MRI检查血管渗透性参数和血清sE-cadherin及AGR2水平对于前列腺癌诊断具有重要意义,且三者联合检测能够提高诊断的灵敏度和准确度,为前列腺癌的临床诊断提供新的检测依据。

AGR2在乳腺癌中的表达及其功能的生物信息学初步分析

目的:利用生物信息学方法分析前梯度蛋白2(anterior gradient protein-2,AGR2)在乳腺癌中的表达情况,并分析预测其所涉及的生物学功能及分子信号通路。方法:挖掘Oncomine和GEPIA数据库中AGR2在乳腺癌和正常乳腺组织中的表达情况,分析CCLE数据库中AGR2在乳腺癌细胞系中的表达水平,同时利用HPA数据库分析AGR2蛋白在正常和乳腺癌组织中的表达水平,并分析其表达与预后关系。Progno Scan分析AGR2表达与预后的关系从CCLE下载乳腺癌相关基因芯片并用R语言筛选AGR2共表达基因,利用GO功能富集分析和KEGG信号通路分析对AGR2相关共表达基因进行功能注释。结果:Oncomine和GEPIA数据分析显示AGR2基因在乳腺癌组织中高表达,CCLE数据分析表明AGR2在乳腺癌细胞系中显著高表达,HPA数据库免疫组化结果显示乳腺癌组织AGR2蛋白相对于正常乳腺组织高表达;Progno Scan分析显示AGR2高表达提示乳腺癌预后不良。利用R软件共筛选出946个在乳腺癌中同AGR2共表达的基因,GO功能富集分析显示,共表达基因主要涉及蛋白定位到细胞周围、蛋白定位到细胞膜、细胞连接组装、细胞基质黏附、细胞连接组成等生物学功能;KEGG分析显示共表达基因主要参与乳腺癌和胃癌进程,并和蛋白聚糖在癌症中的作用及缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸降解通路相关。结论:AGR2在乳腺癌组织和细胞中均高表达,其可能是乳腺癌中潜在的促癌基因,有望成为乳腺癌治疗的新靶标。

Effect of Dexamethasone on Expression of AGR2 Protein in Asthmatic Mice

This study examined the expression of the anterior gradient-2 （AGR2） protein and Muc5ac protein in the lung tissues of asthmatic mice and the effect of dexamethasone, with an at- tempt to explore the role of AGR2 in the over-secretion of mucus in the airway. Eighteen BALB/c mice were divided into asthma group, control group and dexamethasone group. In dexamethasone group, dexamethasone was intraperitoneally administered. Expression of AGR2 protein and Muc5ac protein in the murine lung tissues was immunohistochemically detected. IL-13 level was determined in the bronchoalveolar lavage fluid （BALF） by ELISA. The results exhibited that the expression of AGR2 protein in asthma group （0.522±0.041） was significantly higher than that in normal controls （0.361±0.047） （P〈0.01） and bore a positive linear relationship to the expression of Muc5ac protein （r=0.873, P〈0.05） and IL-13 level （r=0.828, P〈0.05）. Expression of AGR2 protein in the dexa- methasone group （0.456±0.049） was significantly lower than that in the asthma group. It was concluded that： （1） the expression of AGR2 protein was significantly higher in asthmatic mice as com- pared with their normal counterparts; （2） the expression was obviously related to the expression of Muc5ac protein and IL-13; （3） dexamethasone could down-regulate the expression of AGR2 protein. Our findings suggested that AGR2 might be involved in the over-secretion of mucus in the airway in asthma.

AGR2在慢性萎缩性胃炎和胃腺癌中的表达及其意义

目的:研究观察Agr2基因及其相应的AGR2蛋白质在胃癌中的表达,并探讨其相关的临床意义。方法:收集76例患者在胃镜下取活检的胃组织,做免疫组织化学染色及HE染色并作出相应的病理分析。结果:通过免疫组织化学染色,AGR2蛋白质的表达在慢性萎缩性胃炎和胃腺癌中比较,呈逐渐明显下降的趋势(94.12%和73.53%,P<0.05)。结论:①AGR2蛋白质的表达在慢性萎缩性胃炎和胃腺癌中比较,呈逐渐明显下降的趋势。②Agr2基因及其相应的AGR2蛋白质在胃癌的发生发展和胃癌的临床诊断及治疗中可能有一定的临床应用价值,AGR2蛋白质可能是一个潜在的有用的分子标记物。

AGR2在结直肠癌中的表达及意义

目的初步探讨前梯度蛋白2(Anterior Gradient-2,AGR2)在结直肠癌组织中的表达及临床意义。用以定义新的结直肠癌的生物标志物。方法结直肠癌组织与癌旁组织中蛋白质表达谱由二维色谱与质谱联用技术(LCMS)完成,蛋白表达情况通过免疫印迹验证。结果被筛选的结直肠癌组织和癌旁组织中的差异蛋白共39个,其中19个为上调表达蛋白。结论 AGR2在结直肠癌组织中表达上调,可能是新的结直肠癌的生物标志物。

血清AGR2在垂体腺瘤诊断及鉴别诊断中的意义

目的研究人前梯度蛋白2(AGR2)在垂体腺瘤及非垂体腺瘤鞍区病变患者血清中的表达,评价其在鞍区病变诊断、鉴别诊断中的潜在价值。方法收集自2013年12月至2014年12月经手术治疗的垂体腺瘤患者和非垂体腺瘤鞍区病变患者,分别为163例和43例,选择前列腺癌患者7例和正常人20例作为阴性对照组。收集相关人员的血液并用ELISA法检其血清中AGR2表达水平。结果垂体腺瘤患者血清AGR2水平明显高于非垂体腺瘤鞍区病变患者及正常人血清AGR2的水平(分别为P=0.017、P<0.001)。非垂体腺瘤鞍区病变患者血清AGR2水平也明显高于正常人血清AGR2的水平(P=0.002)。不同亚型垂体腺瘤患者血清中AGR2的水平无明显统计学差异(P>0.05)。结论 AGR2可以作为垂体腺瘤诊断、鉴别诊断以及判断其预后的一个重要生物学标志物。

AGR2、CD3在卵巢交界性肿瘤鉴别诊断中的价值分析

目的:检测卵巢交界性肿瘤患者血清中前梯度蛋白2(AGR2)、CD3^(+)T细胞水平,并探讨血清中两者水平对卵巢交界性肿瘤鉴别诊断的价值。方法:选取2017年07月至2019年12月本院收治并明确诊断的49例卵巢交界性肿瘤患者为研究对象(卵巢交界性肿瘤组);同期选取68例良性上皮性肿瘤患者为对照(良性上皮性肿瘤组),最终诊断由病理结果作为依据。两组患者一般资料分析。采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测患者血清中AGR2水平,流式细胞仪检测患者血清中T细胞亚群CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞水平;分析影响卵巢交界性肿瘤发生的因素;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析AGR2、CD3^(+)T细胞水平对卵巢交界性肿瘤的诊断价值。结果:两组患者年龄、孕次、产次、临床表现比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。卵巢交界性肿瘤组患者AGR2水平显著高于良性上皮性肿瘤组,CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞水平显著低于良性上皮性肿瘤组(P<0.05);患者AGR2水平是发生卵巢交界性肿瘤的危险因素,CD3^(+)T细胞水平是发生卵巢交界性肿瘤的保护因素(P<0.05),血清AGR2、CD3^(+)T细胞水平诊断卵巢交界性肿瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.833(95%CI:0.750~0.925)、0.800(95%CI:0.721~0.879),特异性分别为98.5%、79.4%,敏感度分别为65.3%、67.3%;二者联合诊断卵巢交界性肿瘤的AUC为0.892(95%CI:0.828~0.956),特异性为94.1%,敏感度为73.5%。结论:血清中AGR2、CD3^(+)T细胞水平参与了卵巢交界性肿瘤病情的发生、发展,对卵巢交界性肿瘤的诊断有一定的潜在应用价值。

AGR2在垂体腺瘤组织中的表达及其与肿瘤侵袭性的关系

目的研究人类前提度蛋白2(AGR2)在垂体腺瘤组织中的表达和分布;评价AGR2与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法收集2013年5月至2014年7月经手术切除的垂体腺瘤新鲜标本,共117例。按照侵袭性分类标准将其分为侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤,行免疫组化染色、Western blot、免疫荧光染色等方法观察AGR2在垂体腺瘤细胞中的表达和分布。结果在117例垂体腺瘤组织标本中,AGR2在非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达明显高于侵袭性垂体腺瘤中的表达(P<0.05);在不同亚型的垂体腺瘤组织中AGR2的表达无显著差异(P>0.05);AGR2在垂体腺瘤细胞中定位位于细胞浆及细胞膜。结论 AGR2在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤组织中含量有显著的差异。AGR2不仅可以作为研究垂体腺瘤侵袭性的一个靶标,还可以作为垂体腺瘤诊断、靶向治疗以及判断其预后的一个重要的潜在的指标。

前梯度蛋白2干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响

目的:构建前梯度蛋白2(AGR2)基因干扰重组质粒及建立AGR2基因沉默的鼻咽癌细胞及动物模型,检测AGR2对鼻咽癌细胞的生物学功能的影响。方法:首先以real-time PCR和Western blot验证AGR2在鼻咽癌细胞系5-8F和6-10B中的表达,以高表达AGR2的5-8F细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建shRNA表达载体pSR-GFP/Neo-AGR2-shRNA,将其转染至5-8F鼻咽癌细胞系中,通过Transwell小室迁移及侵袭实验来检测其迁移和侵袭功能的变化。结果:与6-10B细胞比较,AGR2在5-8F中的表达显著上调(P<0.05);干扰鼻咽癌细胞5-8F中的AGR2可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱(P<0.05),使其体外成瘤能力显著降低(P<0.05)。结论:AGR2在鼻咽癌细胞系5-8F中明显高表达;pSR-GFP/Neo-AGR2-shRNA可成功干扰5-8F中AGR2的表达;AGR2可抑制5-8F细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力。