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双特异抗体COC183B_2×anti-CD28对卵巢上皮癌细胞杀伤效力的研究 被引量:1
1
作者 顾莹 冯捷 +5 位作者 周志勇 张众 李小平 林晴 叶雪 黄华粱 《现代妇产科进展》 CSCD 2002年第4期241-244,I001,共5页
目的 :检测双特异抗体 (bispecificantibody ,BsAb)COC183B2 ×anti CD2 8在体外介导预激活的外周血单个核细胞 (PBMC)对卵巢上皮癌细胞系SKOV3的杀伤效力。方法 :在大肠杆菌中对用基因工程方法构建的COC183B2 ×anti CD2 8进... 目的 :检测双特异抗体 (bispecificantibody ,BsAb)COC183B2 ×anti CD2 8在体外介导预激活的外周血单个核细胞 (PBMC)对卵巢上皮癌细胞系SKOV3的杀伤效力。方法 :在大肠杆菌中对用基因工程方法构建的COC183B2 ×anti CD2 8进行诱导表达 ,用ELISA方法测定表达产物与卵巢癌抗原和CD2 8抗原结合的活性后 ,与SKOV3和预激活的PBMC共孵育。 6h后用非放射性细胞毒分析试剂测定预激活的PBMC对SKOV3细胞毒性作用 ,并在镜下观察SKOV3的形态学改变。结果 :ELISA结果显示 ,COC183B2 ×anti CD2 8可与卵巢癌抗原和CD2 8抗原双向结合 ;细胞毒性试验显示 ,在体外COC183B2 ×anti CD2 8能介导预激活的PBMC特异杀伤SKOV3细胞 ;4h时镜下可见玫瑰花环形成 ,12h可见肿瘤细胞溶解。结论 :COC183B2 ×anti CD2 展开更多
关键词 COC183B2×anti-cd28 卵巢上皮癌 双特异抗体 卵巢肿瘤 外周血单个核细胞 细胞毒性试验 生物治疗
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IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生 被引量:14
2
作者 范艳莹 吴长有 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期353-357,共5页
目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(E... 目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。 展开更多
关键词 IL-23 IFN-γ TH2细胞因子 抗IL-12Rβ1 mab anti-cd3
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T细胞表面分子CD28及其信号通路的研究
3
作者 李永琴 文梅 《贵阳医学院学报》 CAS 1996年第1期1-4,共4页
用免疫磁性阴极选择法从正常人外周血单个核细胞中择取 T 细胞,经 CD28单克隆抗体和(或)乙酰肉豆蔻佛波酯刺激,Western 印渍免疫沉淀反应,白细胞介素-2和白细胞介素-2受体等检测,结果表明 CD28单抗和乙酰肉豆蔻佛波酯复合刺激具有诱导 c... 用免疫磁性阴极选择法从正常人外周血单个核细胞中择取 T 细胞,经 CD28单克隆抗体和(或)乙酰肉豆蔻佛波酯刺激,Western 印渍免疫沉淀反应,白细胞介素-2和白细胞介素-2受体等检测,结果表明 CD28单抗和乙酰肉豆蔻佛波酯复合刺激具有诱导 c-Rel 核内移位和磷酸化、增强白细胞介素-2受体表达和白细胞介素-2分泌的作用,证明 CD28信号途径有诱导环孢素 A 抵抗-非钙依赖和环孢素A敏感-钙依赖的传导通路,对 T 细胞活化有重要意义。 展开更多
关键词 T细胞活化 酷氨酸磷酸化 CD28 单克隆抗体
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CD28单抗对γδT细胞增殖和杀伤胃癌细胞的增强作用 被引量:3
4
作者 冯永波 周忠海 +3 位作者 陈复兴 徐涛 徐晶 费素娟 《现代消化及介入诊疗》 2013年第1期1-4,共4页
目的探讨CD28单克隆抗体对人外周血γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌BCG823、SGC7901细胞活性的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别在有或无CD28单抗(20μg/ml)参与的条件下,加入到含帕米膦酸、IL-2的RPMI1640完全培养基中诱... 目的探讨CD28单克隆抗体对人外周血γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌BCG823、SGC7901细胞活性的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别在有或无CD28单抗(20μg/ml)参与的条件下,加入到含帕米膦酸、IL-2的RPMI1640完全培养基中诱导培养γδT细胞。在培养的第10天用台盼蓝染色计数细胞;采用流式细胞术检测各组γδT细胞的纯度及其穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达;用CCK-8试剂盒检测γδT细胞对胃癌细胞BCG823的体外杀伤效应。结果在诱导培养10d后,两组γδT细胞纯度均达到70%以上,与无CD28单抗对照组相比,CD28单抗组γδT细胞纯度显著高于对照组;CD28单抗组γδT细胞扩增倍数、穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达及对胃癌细胞BCG823和SGC7901的杀伤活性均显著高于无CD28单抗对照组。结论 CD28共刺激能增强γδT细胞增殖并通过上调穿孔素和颗粒酶B的表达增强其抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 CD28单抗 ΓΔT细胞 增殖 杀伤效应
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N-乙酰-D-乳糖胺、抗CD28单克隆抗体对肺癌患者来源的CIK细胞增殖及杀伤功能的影响 被引量:1
5
作者 石晓娟 乔永涛 +5 位作者 杨黎 杨双宁 黄建敏 赵璇 李红 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期176-179,共4页
目的:观察N-乙酰-D-乳糖胺联合抗CD28单克隆抗体对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖及杀伤功能的影响。方法:提取32例肺癌患者的外周血单个核细胞,分为对照组、抗CD28单克隆抗体组、N-乙酰-D-乳糖胺组及抗CD28单克隆抗体和N-乙酰-D... 目的:观察N-乙酰-D-乳糖胺联合抗CD28单克隆抗体对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖及杀伤功能的影响。方法:提取32例肺癌患者的外周血单个核细胞,分为对照组、抗CD28单克隆抗体组、N-乙酰-D-乳糖胺组及抗CD28单克隆抗体和N-乙酰-D-乳糖胺联合组(联合组),依据CIK细胞培养流程培养和分组处理后于第4、8、10、12、14天测定各组细胞增殖,第14天测定IL-2、IL-10、γ干扰素及肿瘤坏死因子-α的分泌及对K562细胞的杀伤作用。结果:抗CD28单克隆抗体、N-乙酰-D-乳糖胺单独作用均能促进CIK细胞增殖及IL-2及肿瘤坏死因子-α的分泌,增加效应细胞(CD3^+CD8^+细胞)的比例,增强CIK细胞对K562细胞的杀伤能力(P<0.05),但二者联合没有协同效应(P>0.05)。结论:N-乙酰-D-乳糖胺与抗CD28单克隆抗体均能增强CIK细胞增殖及杀伤功能,但二者无协同作用。 展开更多
关键词 N-乙酰-D-乳糖胺 CIK细胞 抗CD28单克隆抗体 细胞增殖 杀伤功能 肺肿瘤
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Tca8113-4-1BBL细胞联合CD28单抗在口腔鳞癌免疫治疗中的作用 被引量:1
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作者 张淼 岳磊 +4 位作者 孙顺涛 罗娟 杨辉俊 黄冬兰 杨宏宇 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2009年第5期446-450,共5页
目的:探讨转4-1BBL肿瘤细胞联合抗CD28单抗体外诱导抗肿瘤活性的能力。方法:通过脂质体法将重组载体pEGFP/neo-h4-1BBL转染人舌鳞癌细胞Tca8113,经G418(400μg/mL)筛选及有限稀释后,获得稳定高表达克隆,分别用RT-PCR和Western印迹检测... 目的:探讨转4-1BBL肿瘤细胞联合抗CD28单抗体外诱导抗肿瘤活性的能力。方法:通过脂质体法将重组载体pEGFP/neo-h4-1BBL转染人舌鳞癌细胞Tca8113,经G418(400μg/mL)筛选及有限稀释后,获得稳定高表达克隆,分别用RT-PCR和Western印迹检测转染细胞中h4-1BBLmRNA和蛋白的表达。将转染与未转染4-1BBL基因的Tca8113细胞用丝裂霉素C(MMC)处理后,制成肿瘤细胞瘤苗。联合抗CD28单克隆抗体与经体外抗CD3mAb诱导的人外周血T淋巴细胞共同培养,测定T细胞增殖、CTL杀伤活性及产生细胞因子(IL-2和IFN-γ)的能力。实验数据以SPSS12.0软件包进行方差分析。结果:h4-1BBL基因真核表达载体在Tca8113细胞中获得稳定表达。转染h4-1BBL基因的Tca8113细胞联合抗CD28单抗能显著刺激T细胞活化、增殖(P<0.01),促进IL-2、IFN-γ分泌(P<0.01),并能有效地诱导CTL的特异性杀伤活性(P<0.01)。结论:转4-1BBL肿瘤细胞联合抗CD28抗体能显著增强肿瘤细胞的免疫原性,诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 4-1BBL 抗CD28单克隆抗体 抗肿瘤免疫 细胞毒性T细胞
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CD28单抗对CD3-AK细胞增殖和肿瘤杀伤活性的实验研究(英文)
7
作者 Wen qing Wei Jing Liu +1 位作者 Mancang Zhao Yan Zhang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2012年第8期469-471,共3页
Objective:The aim of this study was to costimulate the CD3-AK cells with anti-CD28 monoclonal antibody (mAb), observe the effect of cell proliferation and cytotoxicity and explore the regulatory role of CD28 mAb on th... Objective:The aim of this study was to costimulate the CD3-AK cells with anti-CD28 monoclonal antibody (mAb), observe the effect of cell proliferation and cytotoxicity and explore the regulatory role of CD28 mAb on the CD3-AK tumoricidal activity. Methods:To prepare CD3-AK cells, observe the number and morphology of the activated T cells with the inverted microscope and detect the inhibitory rate of the myeloma cells by methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide (MTT). Results:Adding the anti-CD28 mAb to the CD3-AK cells, the number of cells increased significantly (P < 0.05) and the cytotoxic activity of the cells was significantly higher (P < 0.05). Conclusion:The addition of anti-CD28 mAb has a strong synergistic effect, which can effectively enhance the tumoricidal activity of CD3-AK. 展开更多
关键词 CD28 monoclonal 抗体(mab ) CD3-AK 骨髓瘤房间
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不同刺激物对细胞因子诱导的杀伤细胞分泌细胞因子的影响 被引量:4
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作者 李静 王菲 +5 位作者 刘艳芬 王丽萍 许钰杰 王盟 张斌 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第2期166-168,共3页
目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进... 目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进行活化,使用ELISA方法检测细胞因子IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α的分泌水平,并用胞内细胞染色法检测CD3+CD8+T细胞中IFN-γ、穿孔素的表达水平。以50μg/L佛波酯联合750μg/L离子霉素共刺激的CIK细胞作对照。结果:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗组CIK细胞IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α分泌水平和胞内穿孔素表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗共刺激对CIK细胞细胞因子的分泌无影响,临床上可选择1.0 mg/L抗CD3单抗联合0.5 mg/L抗CD28单抗活化淋巴细胞。 展开更多
关键词 抗CD3单抗 抗CD28单抗 细胞因子 细胞因子诱导的杀伤细胞
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Th17细胞在胰岛移植中的作用 被引量:3
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作者 熊俊杰 陆慧敏 +2 位作者 杜晓炯 柯能文 胡伟明 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期638-643,共6页
目的研究Th17细胞在胰岛移植免疫排斥反应中的作用,探讨IL-23R抗体联合应用Anti-CD154mAb诱导胰岛移植免疫耐受的可行性。方法体外实验分为5组:空白对照组,SD大鼠胰岛细胞单独培养;A组,大鼠胰岛细胞混合淋巴细胞培养,不加IL-23R抗体;B、... 目的研究Th17细胞在胰岛移植免疫排斥反应中的作用,探讨IL-23R抗体联合应用Anti-CD154mAb诱导胰岛移植免疫耐受的可行性。方法体外实验分为5组:空白对照组,SD大鼠胰岛细胞单独培养;A组,大鼠胰岛细胞混合淋巴细胞培养,不加IL-23R抗体;B、C、D组,将大鼠胰岛细胞混合淋巴细胞培养,分别加IL-23R抗体0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL。作细胞甩片后,行丫啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色、胰岛素和胰高血糖素免疫组化染色、胰岛素刺激实验。体内实验(将分离纯化的胰岛移植于小鼠左肾包膜下)分成4组:对照组,胰岛移植后不予任何干预;IL-23R抗体(200μg)治疗组;Anti-CD154mAb(200μg)治疗组;联合治疗组。监测移植后小鼠血糖,取移植肾作HE染色及胰岛素、胰高血糖素免疫组化染色。结果共培养3 d后,在胰岛素刺激实验中,空白对照组的葡萄糖刺激指数为3.66±0.10,与A、B、C、D组相比升高(P<0.05)。D组刺激指数高于其他各组,达到1.95±0.75。胰岛素和胰高血糖素免疫组化染色,体外和体内实验显示各实验组移植物有功能存活明显好于对照组。移植3 d后,对照组血糖与各实验组相比升高(P<0.05),各实验组血糖比较无明显差异。结论 Th17细胞参与了胰岛移植的免疫排斥反应。通过阻断IL-23R能有效的下调IL-17的表达,阻断效果呈剂量依赖性。Anti-CD154mAb和IL-23R抗体联合应用能在一定程度上防止胰岛移植物的急性排斥反应,但与单独使用Anti-CD154mAb治疗相比无明显差异。 展开更多
关键词 IL-23R anti-cd154mab TH17细胞 胰岛移植 免疫排斥
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共刺激分子对全身炎症反应综合征中细胞因子的影响 被引量:1
10
作者 贺琼 常盈 +7 位作者 黄鹤 孙宇 徐兰 张秀春 朱蕴兰 魏颖 王晓春 王月丹 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第7期1217-1219,共3页
目的:探讨全身炎症反应综合征(SIRS)中相关共刺激分子的表达及其调控因素,并对共刺激分子在全身炎症反应综合征发展及治疗中的作用及机制进行初步探究。方法:腹腔注射脂多糖(LPS)建立全身炎症反应综合征的小鼠动物模型后,将BALB/c模型... 目的:探讨全身炎症反应综合征(SIRS)中相关共刺激分子的表达及其调控因素,并对共刺激分子在全身炎症反应综合征发展及治疗中的作用及机制进行初步探究。方法:腹腔注射脂多糖(LPS)建立全身炎症反应综合征的小鼠动物模型后,将BALB/c模型小鼠随机分为生理盐水(NS)、LPS、CD28+LPS三组,进行脾淋巴细胞的分离,通过RT-PCR、ELISA等方法检测共刺激分子在不同组别中的表达。结果:经CD28活化型单克隆抗体(CD28mAb)刺激后的BALB/c小鼠组中共刺激分子CD40配体(CD40L)、杀伤性T细胞相关抗原-4(CTLA-4)的表达量较生理盐水组明显增高。结论:共刺激分子CD28对于全身炎症反应综合征有促进的作用。 展开更多
关键词 全身炎症反应综合征 共刺激分子 CD28 CD28mab
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