神经生长因子凝胶抗炎抑菌作用初探

目的观察神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)凝胶剂的抗炎抑菌作用。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠耳廓肿胀法研究抗炎作用;以稀释法研究NGF凝胶的体外抑菌作用。结果NGF凝胶有明显的抑制炎症模型小鼠耳廓肿胀的作用。对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、大肠埃希菌(ATCC25922)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、乙型溶血性链球菌(ATCC32210)有良好的抑菌作用。结论NGF凝胶具有良好的抗炎抑菌作用。

神经生长因子抗体亲和柱的制备与应用

利用已分离纯化的神经生长因子（ＮｅｒｖｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）为抗原，制备兔抗ＮＧＦ抗血清，用饱和（ＮＨ４）２ＳＯ４盐析和ＰｒｏｔｅｉｎＡ亲和层析的方法，纯化其中的ＩｇＧ组分，再将其偶联到经ＣＮＢｒ活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ上，制成抗ＮＧＦＩｇＧ免疫亲和柱。应用此亲和柱可一步纯化蛇毒中的ＮＧＦ，大大简化了ＮＧＦ纯化工艺。

ELISA对毒理实验动物血清中神经生长因子抗体动态的研究

用 ELISA法对神经生长因子 (NGF)毒理实验动物犬和大鼠血清作了抗 - NGF抗体检测 .结果表明在大鼠血清中没有发现抗 - NGF抗体 ,但犬血清中有相应的抗体产生 ,并随注射剂量增加和注射时间延长而逐渐升高 .另外 ,对 EL ISA间接法和竞争抑制法进行了比较 ,结果表明 ,竞争抑制法明显优于间接法 ,而且是一种简便、特异的好方法 .

小鼠βNGF纯化、抗体制备和活性鉴定

自雄性成年小鼠颌下腺分离纯化 β NGF,用 SDS- PAGE、等电聚焦电泳、高效凝胶过滤层析、高效毛细管电泳手段对其定性分析。以此为抗原免疫家兔 ,制备 β NGF抗血清 ,经亲和层析纯化得到 β NGF抗体 ,采用鸡胚背根神经节培养法测定了 β NGF及其抗体的生物学活性。

抗神经生长因子抗体对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎症的影响

目的:探讨鼻腔滴入抗神经生长因子抗体对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎症的影响。方法:将40只SD大鼠随机分成实验组30只和对照组(A组)10只,实验组大鼠采用卵清蛋白致敏和激发制成变应性鼻炎大鼠模型,再将大鼠模型随机分为变应性鼻炎组(B组)、抗神经生长因子抗体处理组(C组)、布地奈德治疗组(D组)3组。各组鼻腔给予卵清蛋白激发,每日1次,共7次。C组在激发之前鼻腔给予抗神经生长因子抗体处理,D组在激发之前鼻腔给予布地奈德处理,B组在激发之前鼻腔内以生理盐水代替药物处理。在末次激发之后,通过行为学观察、鼻黏膜病理切片、鼻腔灌洗液和血清中IL-4的含量等指标来评价抗神经生长因子抗体对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎症的影响。结果:C组和D组行为学评分低于B组,A组无特殊反应;B组鼻黏膜呈典型变应性鼻炎病理改变,可见较多嗜酸粒细胞浸润,鼻腔灌洗液上清液和血清中IL-4的含量均高于A组(P<0.05);C组和D组动物的鼻黏膜病理性改变减轻,嗜酸粒细胞浸润减少,鼻腔灌洗液上清液和血清中IL-4的含量较B组下降明显(P<0.05)。结论:鼻腔滴入抗神经生长因子抗体可有效缓解变应性鼻炎大鼠鼻腔局部症状,减轻鼻黏膜病理性改变,并减少大鼠IL-4的合成与分泌。

NGF中和抗体、DAPT对食管癌Eca109细胞p75^(NTR) 核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响

目的探究神经生长因子(NGF)中和抗体、γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对食管癌Eca109细胞p75神经营养因子受体(p75^(NTR))核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法采用免疫荧光细胞化学技术,检测NGF中和抗体、DAPT处理Eca109细胞前后p75^(NTR)、Ki67的表达变化;分别采用CCK-8法和Transwell细胞侵袭实验,检测NGF中和抗体、DAPT单独或联合处理Eca109细胞前后其增殖能力及侵袭能力的变化。结果免疫荧光细胞化学技术检测结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后,p75^(NTR)核表达的细胞数量均减少,且NGF中和抗体和DAPT联合处理细胞后,p75^(NTR)核表达的细胞数量最少,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8法及Transwell细胞侵袭实验结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后,细胞增殖、侵袭能力较处理前均相应减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NGF中和抗体、DAPT抑制p75^(NTR)的核转移,降低p75^(NTR)的核表达率,减弱细胞增殖、侵袭能力。

深浅不同针刺对慢性束缚应激大鼠抑郁样行为及皮质神经营养因子的影响

目的:观察深浅不同针刺用于慢性束缚应激抑郁大鼠的抗抑郁效应及对皮质神经营养因子的影响。方法:24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、深刺组及浅刺组,每组6只。除对照组外,均采用21 d慢性束缚应激的方法建立抑郁模型,深刺组和浅刺组分别给予“太冲”穴直刺和“太冲”穴平刺治疗,1次/d,持续21 d。通过大鼠第21天体质量、旷场实验和新环境抑制进食实验来评价抑郁造模和治疗效果。采用荧光定量PCR法及Western Blot法检测大鼠皮质神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA及蛋白的表达情况。结果:模型组大鼠体质量显著低于对照组(P<0.01),与模型组比较,深刺组体质量显著增加(P<0.05)。模型组大鼠5 min总运动距离、边缘区运动距离、中央区运动距离、总平均速度、边缘区平均速度和中央区平均速度均显著低于对照组(P<0.01);深刺组总运动距离、边缘区运动距离、总平均速度、边缘区平均速度显著高于模型组(P<0.05)。模型组进食潜伏期显著高于对照组(P<0.01);与模型组比较,深刺组和浅刺组进食潜伏期均显著缩短(P<0.01),深刺组较浅刺组潜伏期更短(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠皮质中NGF、BDNF mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05,P<0.01);与模型组大鼠比较,深刺组皮质NGF、BDNF mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。结论:深刺“太冲”穴能显著改善慢性束缚应激大鼠抑郁样行为,优于浅刺治疗,其作用机制可能与改善皮质NGF和BDNF异常表达有关。

抗神经生长因子抗体用于改善子宫腺肌病小鼠宫腔内环境的研究

目的:探讨抗神经生长因子抗体(anti-NGF)对改善子宫腺肌病(AM)小鼠宫腔内环境的作用。方法:将15只雌性ICR小鼠随机分为AM治疗组(A组)、AM溶剂对照组(B组)及正常对照组(C组),A、B组使用口服他莫昔芬法建立AM小鼠模型。A组小鼠腹腔注射anti-NGF,B组以等体积的生理盐水替代,C组不作任何处理。3组小鼠于动情前期处死取双子宫称量后检测缓激肽受体1(BKR-1)、神经激肽1受体(NK-1R)、同源框基因转录因子A10(HOXA10)及芳香化酶(aromatase)基因与蛋白的表达。结果:A组子宫相对重量同B组,且均明显高于C组(P<0.05);A组BKR-1基因及蛋白和NK-1R基因水平较B组明显降低(P<0.05),与C组比较无统计学差异(P>0.05);A组HOXA10基因及蛋白水平较B组明显增高(P<0.05),与C组比较无统计学差异(P>0.05);A组芳香化酶基因及蛋白水平较B组减低(P<0.05),但仍高于C组(P<0.05)。结论:anti-NGF可显著缓解AM模型小鼠子宫炎症,改善内膜容受性、抑制芳香化酶表达,但短期使用不能抑制病灶增殖。