抗细胞膜DNA抗体联合抗核抗体检测在系统性红斑狼疮诊断中的价值

目的探讨抗细胞膜DNA(cmDNA)抗体联合抗核抗体(ANA)检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用价值。方法选取2016 年1 月—2017 年12 月海南省中医院检验科确诊的182 例SLE 患者为观察组,纳入同期确诊的85 例其他自身免疫性疾病患者为疾病对照组,包括类风湿关节炎患者29 例、原发干燥综合征患者33 例、脊柱关节病患者12 例、其他结缔组织病患者11 例,纳入50 例健康志愿者为健康对照组。采用间接免疫荧光法检测3 组对象ANA 及抗cmDNA 抗体,采用欧蒙印迹法测定抗史密斯(Sm)抗体、抗核小体抗体(AnuA)。结果观察组抗cmDNA 抗体、ANA、抗Sm 抗体、AnuA 阳性率均高于其他各组(P <0.05)。各抗体对诊断SLE 敏感性,ANA 最高,其次为AnuA、抗cmDNA 抗体,抗Sm 抗体最低;特异性,抗Sm 抗体和AnuA 最高,其次为抗cmDNA 抗体,ANA 最低;阳性预测值,AnuA 最高,其次为抗Sm 抗体和抗cmDNA抗体,ANA 最低;阴性预测值,ANA 最高,其次为AnuA 和抗cmDNA 抗体,抗Sm 抗体最低,上述总体差异有统计学意义(P <0.05)。观察组中ANA、抗Sm 抗体、AnuA 阴性者,抗cmDNA 检出率分别54.55%、64.54%和59.57%。抗cmDNA 抗体并联常规方案诊断SLE 的敏感性最高,抗cmDNA 抗体串联ANA 诊断SLE 的特异性最高。结论抗cmDNA 抗体有助于检出ANA、抗Sm 抗体及AnuA 阴性的SLE 患者,抗cmDNA 抗体联合常规方案诊断SLE 具备较可靠的诊断效能。

抗细胞膜DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的应用价值

目的探讨抗细胞膜DNA(mDNA)抗体在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用价值。方法选择SLE患者137例(SLE患者组),同期其他自身免疫性疾病患者72例(其他自免疾病组),同期健康体检者84例(健康对照组)。采用间接免疫荧光法检测抗mDNA抗体和抗核抗体(ANA),采用ELISA法检测抗双链DNA(ds-DNA)抗体,采用免疫印迹法检测核糖体P蛋白(Rib-P)抗体、抗史密斯(Sm)抗体及抗核小体抗体(AnuA)等其他自身抗体,评价各自身抗体指标在3组血清中的灵敏度和特异度,以寻找诊断SLE的最佳免疫学指标组合。结果抗mDNA抗体在SLE患者组中的灵敏度(62.8%)明显高于其他自免疾病组(12.5%)和健康对照组(2.4%),也明显高于抗ds-DNA抗体(40.9%)、Rib-P抗体(21.2%)、抗Sm抗体(18.2%)和AnuA(17.5%),差异均有统计学意义(P<0.05)。137例SLE患者血清中抗ds-DNA抗体、Rib-P抗体、抗Sm抗体、AnuA分别与抗mDNA抗体联合检测的灵敏度明显高于其自身单独检测的灵敏度,差异均有统计学意义(均P<0.01)。在抗ds-DNA抗体、Rib-P抗体、抗Sm抗体、AnuA4种抗体均阴性的SLE患者中,抗mDNA抗体的阳性率达65.9%,联合其他抗体能明显提高SLE的阳性率(87.6%)。结论抗mDNA抗体是一种灵敏度较高、特异度强的SLE血清学标志之一,与其他抗体联合检测在SLE诊断中有良好的互补作用,可明显提高灵敏度,从而提高SLE的临床诊断。

IIF法检测血清抗cmDNA抗体诊断SLE价值的系统评价

目的评价间接免疫荧光法（IIF）检测血清中抗细胞膜DNA（cmDNA）抗体诊断系统性红斑狼疮（SLE）的价值。方法检索1970—2009年PubMed、中国期刊全文数据库，检索词为：系统性红斑狼疮、SLE、自身抗体、细胞膜DNA，收集关于抗cmDNA抗体诊断SLE价值的相关研究文献，根据Whiting等制定的QUADAS文献质量评价工具对文献进行质量评价，使用MetaDisc1．4进行异质性分析、Meta分析及绘制SROC曲线。结果共纳入文献7篇，合计2447例，其中经金标准确认的SLE患者共824例。Meta分析异质性检验辟0．0009，F=73．5％；合并敏感度为69．0％，95％CI为66．0％～72．0％；合并特异度为97．0％，95％CI为96．0％-98．0％；合并阳性似然比＋LR=21．37，95％CI为12．17—37．54；合并阴性似然比-LR=0．28，95％CI为0．18～0．45；SROC曲线下面积AUC=0．9336（SE=0．0607）。结论目前间接免疫荧光法检测血清中抗cmDNA抗体诊断SLE有一定的价值，可作为诊断SLE的特异性指标。

抗细胞膜DNA抗体、抗核抗体、抗心磷脂抗体诊断系统性红斑狼疮的临床价值及与病情发展的关系

目的探讨抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)、抗核抗体(ANA)、抗心磷脂抗体(ACA)诊断系统性红斑狼疮(SLE)的临床价值及与病情发展的关系。方法选取2020年3月至2020年12月收治的50例SLE患者作为观察组,同期选取50例其他自身免疫性疾病患者和50例健康体检者,分别作为疾病对照组和健康对照组。比较三组研究对象的cmDNA、ANA及ACA阳性表达情况;分析cmDNA、ANA及ACA单独诊断与联合诊断对SLE患者的诊断效能;比较SLE活动期与非活动期患者的cmDNA、ANA及ACA阳性表达情况。比较cmDNA、ANA及ACA阳性与阴性患者肾脏损害、关节炎及血管炎发生情况。结果观察组的cmDNA、ANA及ACA阳性率均高于疾病对照组和健康对照组,且疾病对照组高于健康对照组(P<0.05)。cmDNA、ANA及ACA联合检测的灵敏度、阴性预测值均高于cmDNA、ACA检测,特异度、阳性预测值均高于ANA、ACA检测(P<0.05)。SLE活动期患者的cmDNA、ANA及ACA阳性率均高于SLE非活动期患者(P<0.05)。cmDNA、ANA及ACA阳性患者的关节炎、血管炎发生率与阴性患者比较,差异无统计学意义(P>0.05);cmDNA、ANA及ACA阳性患者的肾脏损害发生率均高于阴性患者(P<0.05)。结论cmDNA、ANA及ACA能够有效诊断SLE,也能反映病情发展情况,可作为诊治SLE的参考指标。

疏水网格滤膜技术检测食源性致病菌的研究进展

疏水网格滤膜技术利用膜的疏水性黏附细菌细胞,通过膜的过滤作用截留细菌细胞,然后将膜进行选择性培养,达到检测鉴定待测菌的目的。主要概述了疏水网格滤膜技术的原理和特点,以及该技术与分子生物学技术、免疫学技术偶联在食源性致病菌检测中的应用。

抗细胞膜DNA抗体的测定及其在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的建立抗细胞膜DNA(m DNA)抗体测定的方法,研究其在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的敏感性和特异性,以及与SLE临床特点及免疫学异常的关系。方法检测SLE患者、疾病对照组和正常对照组血清中的抗m D NA抗体,并分析SLE患者的各种临床表现及实验室指标与抗m DNA抗体的关系。同时研究细胞膜DNA分子在不同细胞表面的表达,用DN A酶、RNA酶及胰酶鉴定抗原性质。结果抗m DN A抗体在SLE中检测敏感性73.3%(152/207),特异性96.4%,疾病对照组阳性率5.4%(9/167),82名正常对照组均为阴性,抗m DN A抗体阳性率在SLE组明显高于疾病对照组和正常对照组(P<0.01)。抗m DN A抗体在其他自身抗体阴性的SLE患者中有较高的检出率,在抗双链D NA(dsDN A)抗体、抗Sm抗体、快速狼疮因子(DNP)、抗组蛋白抗体(AH A)、抗核小体抗体(AnuA)阴性的SLE患者中抗m DNA抗体的阳性率分别是73.8%、62.7%、65.3%、57.8%和51.6%。该抗体阳性组SLE患者皮疹,脱发,关节痛,白细胞和C3、C4减低及IgG、IgA、IgM升高较为常见,但与SLE患者病情活动指数无关。本文还证实细胞膜DNA在人B细胞、T细胞上均有表达,以R aji细胞株表达较好。用D NA酶预处理的细胞涂片再行检测后膜荧光图形消失,而用RN A酶、胰酶预处理后并不消失,证实其为膜D NA抗原。结论抗m DN

抗细胞膜DNA抗体在三种自身抗体阴性系统性红斑狼疮中的诊断价值

目的研究抗细胞膜 DNA(mDNA)抗体在抗 Sm 抗体、抗双链 DNA(dsDNA)抗体和抗核小体抗体(AnuA)等特异性自身抗体阴性的系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断意义。方法随机选择145例 SLE 患者。以 Raji 细胞为底物,采用间接免疫荧光法检测 SLE 患者血清抗 mDNA 抗体和抗dsDNA 抗体,采用免疫印迹法检测抗 Sm 抗体,酶联免疫吸附法测定 AnuA。分析抗 mDNA 抗体在其他特异性自身抗体阴性 SLE 患者中的诊断价值。结果抗 mDNA 抗体在 SLE 中的阳性率为69.7%,明显高于抗 Sm 抗体(19.7%)、抗 dsDNA 抗体(31.9%)和 AnuA(45.8%,均 P<0.01)。在抗 dsDNA抗体阴性的 SLE 患者中,抗 mDNA 抗体的阳性率达64.3%;在抗 Sm 抗体阴性的 SLE 患者中,抗mDNA 抗体的阳性率为70.2%;而 AnuA 阴性的 SLE 患者中,抗 mDNA 抗体的阳性率为60.3%。结论抗 mDNA 抗体是一种敏感性较高的 SLE 血清学标志之一,尤其对抗 Sm 抗体、抗 dsDNA 抗体或AnuA 阴性 SLE 的诊断具有重要参考意义。

抗细胞膜DNA抗体与其他自身抗体的检测及相关分析

目的分析抗细胞膜DNA(m DNA)抗体与其他自身抗体的相关性,评价其对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断意义。方法收集2015年1月-8月就诊的254例自身免疫性疾病患者血清,包括SLE 106例,类风湿关节炎(RA)80例,混合性结缔组织病(MCTD)32例,干燥综合征(SS)29例,多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)7例;另再收集20例正常对照者血清。分别用间接荧光免疫法检测抗m DNA抗体、抗双链DNA(ds DNA)抗体、抗核抗体(ANA)及抗角蛋白抗体(AKA),酶联免疫吸附测定法检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体,速率散射比浊法检测类风湿因子(RF),免疫印迹法检测抗Sm抗体。结果抗m DNA抗体在SLE中的阳性率为72.6%(77/106),显著高于RA[5.0%(4/80)]、MCTD[18.7%(6/32)]、SS[14.7%(4/29)]、PM/DM[0.0%(0/7)]以及健康对照组[0.0%(0/20)],差异有统计学意义(P<0.001);抗m DNA抗体对SLE诊断的灵敏度、特异度和诊断效率分别为72.6%、91.7%和84.3%;抗m DNA抗体与ANA、抗ds DNA抗体及抗Sm抗体显著相关(P<0.001),与抗CCP抗体、AKA及RF无相关性(P>0.05)。结论抗m DNA抗体与SLE相关自身抗体密切相关,对SLE诊断具有高度灵敏度和特异度。

淋病奈瑟球菌表面蛋白A基因疫苗的构建及其诱导小鼠的免疫应答

目的构建淋病奈瑟球菌表面蛋白A(NspA)基因疫苗,并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法将NspA基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/NspA,并经PCR、双酶切及测序鉴定。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分别检测NspA基因转染细胞后mRNA和蛋白的表达。以pcDNA3.1(+)/NspA重组质粒免疫45只雄性BALB/c小鼠,试管凝集法检测免疫小鼠抗体滴度,EIASA检测IFN-γ水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测脾淋巴细胞增殖。提取接种部位股四头肌总DNA,PCR检测BALB/c小鼠肌细胞内NspA基因。结果成功构建pcDNA3.1(+)/NspA基因疫苗,能在真核细胞中转录和表达。pcDNA3.1(+)/NspA免疫组的抗体滴度达1:640,pcDNA3.1(+)和PBS免疫组均无特异性抗体检出。空载体pcDNA3.1(+)组IFN-γ为(23.79±11.85)pg/mL,pcDNA3.1(+)/ NspA免疫组为(169.71±30.52)pg/mL(P<0.01);脾淋巴细胞增殖的刺激指数(SI)分别为1.05±0.30和1.94±0.74(P<0.01)。并证实NspA基因可在小鼠肌细胞中稳定存在。结论构建淋病奈瑟球菌NspA基因疫苗,将其免疫BALB/c小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫应答,为进一步用于淋病预防奠定了基础。