ATG-F培养体系制备CIK细胞的表型特点及其对K562细胞的杀伤作用

目的:探讨抗人T细胞兔免疫球蛋白-费森尤斯(anti-human T lymphocyte rabbit immunoglobulin-Fresenius,ATG-F)和IFN-γ、IL-2组成的培养体系诱导细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞的性能并用于临床细胞治疗的可行性。方法:采集分离健康供者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),依照激活抗体的不同分组分别培养CIK细胞,在第7和14天计数总细胞数量。流式细胞术检测ATG-F组、CD3组和TG(抗人胸腺细胞兔免疫球蛋白,Thymoglobulin)组CIK细胞组成及细胞表面活化性、抑制性受体分子的比例,还检测第14天时ATG-F高剂量组、CD3组和TG组CIK细胞对K562靶细胞的杀伤性能。结果:使用ATG-F、IFN-γ、IL-2培养体系成功诱导出CIK细胞。第14天时高剂量ATG-F(F-H)组增殖倍数明显高于TG组(27.25±1.25 vs 16.60±1.72,P<0.01);其CD3^+CD56^+细胞比例与CD3组无统计学差异(P<0.05),但CD3-CD56^+的NK细胞显著高于TG组及CD3组([11.19±2.60)%vs(5.66±1.00)%、(1.42±0.51),P<0.01]、CD4^+T细胞比例显著低于CD3、TG组([4.35±1.47)%vs(26.88±5.01)%、(14.52±6.22)%,P<0.01]、CD56^+CD94^+、CD56^+CD158a^+、CD56^+CD158b细胞比例均明显高于CD3组(均P<0.01);F-H组在靶效比为1∶10时对K562的杀伤效力显著高于CD3组([60.52±2.05)%vs(30.02±6.67)%,P<0.01]。结论:ATG-F培养体系制备的CIK细胞比常规培养体系所得CIK细胞具有更高的NK细胞比例,其活化受体对K562细胞更强的细胞毒性。

抗人T细胞兔免疫球蛋白联合他克莫司减轻肾移植术后急性排斥反应的作用

目的探究抗人T细胞兔免疫球蛋白联合他克莫司减轻肾移植术后急性排斥反应的作用。方法选取90例肾移植术后急性排斥反应患者为研究对象,随机分为对照组、观察组,每组45例。对照组采用他克莫司治疗,观察组采用他克莫司联合抗人T细胞兔免疫球蛋白治疗,两组疗程为7 d。使用T磁珠分离法检测人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)、人类白细胞抗原Ⅱ(HLA-Ⅱ)表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中免疫球蛋白G(IgG)表达,采用荧光定量PCR法检测血清人白细胞介素-12P70(IL-12P70)、白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)表达,统计两组患者治疗前、后HLA及血清免疫球蛋白水平不良反应、治疗有效率。结果观察组治疗后患者HLA及血清免疫球蛋白水平低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后IL-12P70、IL-4、IFN-γ水平低于治疗前(P<0.05)。观察组治疗后IL-12P70、IL-4、IFN-γ水平低于对照组治疗后(P<0.05)。观察组治疗后不良反应发生率低于对照组治疗后(P<0.05)。结论抗人T细胞兔免疫球蛋白联合他克莫司能减轻肾移植术后急性排斥反应,降低HLA-I、HLA-II、IL-12P70、IL-4、IFN-γ、免疫球蛋白水平表达,改善患者临床症状。

抗人T细胞兔免疫球蛋白对降钙素原的影响

目的:探讨PCT在ATG使用期间对细菌感染特异性的预测价值,以及在此期间指导抗生素使用的临床意义。方法:采取回顾性分析的方法,收集我院2018年8月1日至2020年12月31日所有使用ATG的患者共279例。将其分为A、B两组,A组用药前PCT高于正常值(19例),B组用药前PCT值正常(260例)。两组患者均应用了抗生素。统计并比较使用ATG前3天、用药后第1天至第9天两组患者的PCT检测值。结果:B组患者使用ATG前后PCT检测值具有显著性差异(P<0.05);ATG使用后即使3天内无其他明确感染指征,当日起即可引起PCT检测值迅速升高,第2天达到峰值,随后缓慢回落,截止用药后第9天,PCT检测值仍未恢复正常。A组患者因用药前已有细菌感染,存在其他感染指征,故使用ATG后PCT检测值亦始终高于正常水平。结论:应用ATG会导致PCT检测值升高,故在此期间不可将该指标的升高作为细菌感染的特应性指标及使用抗生素的依据。对于ATG使用前无明确细菌感染指征的患者,如无其他明确的感染依据及指征,无需使用抗生素,特别是不提倡升级使用特殊级抗生素或盲目增加抗生素的联合使用。

生物免疫诱导剂对肾移植术后炎症指标的影响分析

目的探讨和比较两种生物免疫诱导剂抗人T细胞兔免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte rabbit immunoglobulin,ATG)与巴利昔单抗在肾移植术后对C反应蛋白(C reactive protein,CRP)与降钙素原(procalcitonin,PCT)等炎症指标的影响。方法回顾性分析本院2016年1月—2016年12月使用了ATG或巴利昔单抗进行免疫诱导治疗的115例肾移植患者资料。比较分析肾移植术后1~4 d、5~7 d及>7 d三个阶段的CRP、PCT水平等相关指标。结果肾移植手术后两组的CRP和PCT均先升高后归正。在对CRP影响上,仅在1~4 d这一阶段ATG组引起CRP较巴利昔单抗组高(P<0.05),在CRP归正时间上,两组也无显著差异(P>0.05)。在对PCT的影响上,ATG组与巴利昔单抗组相比,移植术后每个阶段的PCT值有显著差异(P<0.001),在归正时间上,两组也有显著差异,分别为(9.2±3.8)d和(4.1±2.5)d。结论在肾移植中,ATG组显著增加PCT并延长其归正时间。在肾移植围术期评估感染和排斥反应时,必须考虑生物免疫诱导剂对炎症指标的影响。

抗人T淋巴细胞兔免疫球蛋白预防异基因造血干细胞移植中急性移植物抗宿主病的临床研究

目的探讨异基因造血干细胞移植中抗人T淋巴细胞兔免疫球蛋白（ATG）联合环孢霉素A（CsA）、霉酚酸酯（MMF）、甲氨蝶呤（MTX）对促进移植植入和预防急性移植物抗宿主病（aGVHD）的作用。方法15例恶性血液病及5例重型再生障碍性贫血（SAA）患者实施血缘相关供者异基因造血干细胞移植，其中8例为人类白细胞抗原（HLA）配型全相合，12例HLA配型为单倍体相合。在移植前5d至前2d应用ATG 10．0mg／kg。供者应用重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）5μg／（kg·d），连续应用5d后采集外周血干细胞，单个核细胞（MNC）计数中位数为5．3×10^8／kg，CD34^＋细胞计数中位数为6．0×10^6／kg。结果移植后所有受者均获得造血重建，中性粒细胞（ANC）≥0．5×10^9／L和血小板（Plt）≥20×10^9／L中位时间分别为12d和14d。出现aGVHD7例，其中Ⅰ度皮肤aGVHD 3例；Ⅱ度肠道aGVHD 2例；Ⅲ度及Ⅳ度肠道aGVHD各1例。结论ATG在促进造血干细胞的植入，预防aGVHD的发生和降低其严重程度方面具有明显的效果。

两种免疫诱导方案在DCD供肾移植中的有效性和安全性研究

目的观察巴利昔单抗和抗人T细胞兔免疫球蛋白在心脏死亡器官捐献(DCD)供肾移植免疫诱导治疗中的有效性和安全性。方法回顾性分析2015年12月~2017年12月在潍坊市人民医院行同种异体肾移植72例患者的临床资料,比较急性排斥反应发生例数、术后肺部感染、移植肾功能延迟恢复+例数、随访术后半年移植肾带/失功情况。结果巴利昔单抗组和ATG-F组在DCD供肾移植中术后急性排异发生率分别为5.71%,10.81%,DGF发生率分别为8.57%,13.51%,半年内移植肾存活率分别为97.1%,97.2%,以上3方面比较,差异均无显著性。巴利昔单抗组术后肺部发生感染1例,ATG-F组发生感染7例,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论 (1)巴利昔单抗和ATG-F在DCD供肾移植中术后AR发生率、DGF发生率,半年内在移植肾存活方面无明显差别。(2)巴利昔单抗能显著减少DCD供肾移植术后肺部感染的发生率,明显优于ATG-F组。