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Diabetes and renal tubular cell apoptosis 被引量:9
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作者 Samy L Habib 《World Journal of Diabetes》 SCIE CAS 2013年第2期27-30,共4页
Apoptosis contributes to the development of diabetic nephropathy, but the mechanism by which high glucose induces apoptosis is not fully understood. Apoptosis of tubular epithelial cells is a major feature of diabetic... Apoptosis contributes to the development of diabetic nephropathy, but the mechanism by which high glucose induces apoptosis is not fully understood. Apoptosis of tubular epithelial cells is a major feature of diabetic kidney disease, and hyperglycemia triggers the generation of free radicals and oxidant stress in tubular cells. Hyperglycemia and high glucose in vitro also lead to apoptosis, a form of programmed cell death. High glucose similar to those seen with hyperglycemia in people with diabetes mellitus, lead to accelerated apoptosis, a form of programmed cell death characterized by cell shrinkage, chromatin condensation and DNA fragmentation, in variety of cell types, including renal proximal tubular epithelial cells. 展开更多
关键词 tubular cellS renal apoptosis DIABETES
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Effect and mechanism of adrenomedullin on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury
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作者 赵海红 《外科研究与新技术》 2011年第4期241-242,共2页
Objective To investigate the effect and mechanism of adrenomedullin ( AM ) on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury. Methods Thirty-two Wistar rats were random... Objective To investigate the effect and mechanism of adrenomedullin ( AM ) on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury. Methods Thirty-two Wistar rats were randomly divided into 4 groups: control group,IRI group, empty plasmid group and AM group. One week after re- 展开更多
关键词 cell Effect and mechanism of adrenomedullin on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury
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Chronic hepatitis B serum promotes apoptotic damage in human renal tubular cells 被引量:26
3
作者 Cun-Liang Deng Xin-Wen song +3 位作者 Hai-Jun Liang Chen Feng Yun-Jian Sheng Ming-Yong Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第11期1752-1756,共5页
AIM: To investigate the effect of the serum of patients with chronic hepatitis B (CHB) on apoptosis of renal tubular epithelial cells in vitro and to study the role of hepatitis B virus (HBV) and transforming gro... AIM: To investigate the effect of the serum of patients with chronic hepatitis B (CHB) on apoptosis of renal tubular epithelial cells in vitro and to study the role of hepatitis B virus (HBV) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in the pathogenesis of hepatitis B virus associated glomerulonephritis (HBV-GN). METHODS: The levels of serum TGF-β1 were measured by specific enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and HBV DNA was tested by polymerase chain reaction (PCR) in 44 patients with CHB ,and 20 healthy persons as the control. The normal human kidney proximal tubular cell (HK-2) was cultured together with the sera of healthy persons, CHB patients with HBV-DNA negative(20 cases) and HBV-DNA positive (24 cases) for up to 72 h. Apoptosis and Fas expression of the HK-2 were detected by flow cytometer. RESULTS: The apoptosis rate and Fas expression of HK-2 cells were significantly higher in HBV DNA positive serum group 19.01±5.85% and 17.58±8.35%, HBV DNA negative serum group 8.12±2.80% and 6.96 ± 2.76% than those in control group 4.25±0.65% and 2.33 ± 1.09%, respectively (P 〈 0.01). The apoptosis rate and Fas expression of HK-2 in HBV DNA positive serum group was significantly higher than those in HBV DNA negative serum (P 〈 0.01). Apoptosis rate of HK-2 cells in HBV DNA positive serum group was positively correlated with the level of HBV-DNA (r = 0.657). The level of serum TGF-β1 in CHB group was 163.05 ± 91.35 μg/L, signifi- cantly higher as compared with 81.40 ± 40.75 μg/L in the control group (P 〈 0.01).CONCLUSION: The serum of patients with chronic hepatitis B promotes apoptotic damage in human renal tubular cells by triggering a pathway of Fas up-regulation. HBV and TGF-β1 may play important roles in the mechanism of hepatitis B virus associated glomerulonephritis. 展开更多
关键词 renal tubular epithelial cells HBV TGF-Β1 apoptosis
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7,8-dihydroxyflavone protects human renal proximal tubular cells from hypoxia injury via inhibiting endoplasmic reticulum stress
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作者 马蕊 《China Medical Abstracts(Internal Medicine)》 2017年第1期49-,共1页
Objective To observe the effects of 7,8-dihydroxyflavone(7,8-DHF)on hypoxia induced endoplasmic reticulum stress(ERS)in human proximal tubular epithelial cells(HK-2).Methods The mRNA level of ERS associated biomarkers... Objective To observe the effects of 7,8-dihydroxyflavone(7,8-DHF)on hypoxia induced endoplasmic reticulum stress(ERS)in human proximal tubular epithelial cells(HK-2).Methods The mRNA level of ERS associated biomarkers was evaluated by RT-PCR assay 展开更多
关键词 DHF ERS HK dihydroxyflavone protects human renal proximal tubular cells from hypoxia injury via inhibiting endoplasmic reticulum stress Akt
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miR-15b-5p靶向FOXO1对缺氧/复氧诱导的人肾小管上皮细胞损伤的调控作用及其机制
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作者 李华锋 张鸿毅 +3 位作者 肖克兵 杨辉 李子峰 赵刚刚 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1311-1318,共8页
目的探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法取对数生长期HK-2细胞,设置:(1)对照组(正常培养)与H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态,采用实... 目的探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法取对数生长期HK-2细胞,设置:(1)对照组(正常培养)与H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mi-15b-5p、FOXO1 mRNA的表达,Western blotting检测FOXO1蛋白的表达。(2)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+mimic对照组(转染mimic对照质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-NC组(共转染mi R-15b-5p mimic和OE-NC质粒后H/R诱导培养)与H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和FOXO1过表达质粒后H/R诱导培养)。采用qRT-PCR检测mi-15b-5p的表达,Western blotting检测FOXO1、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。(3)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)与H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和OE-FOXO1后H/R诱导培养)。采用Western blotting检测LC3、p62、Beclin-1蛋白的表达,LC3免疫荧光检测细胞自噬水平。双荧光素酶报告实验检测miR-15b-5p与FOXO1之间的靶向关系。结果倒置显微镜下观察显示,对照组细胞数量较多,细胞大多呈典型鹅卵石形态,铺路石状生长;H/R组大部分细胞收缩变圆,贴壁细胞数量明显减少。与对照组比较,H/R组miR-15b-5p表达水平明显降低,FOXO1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示miR-15b-5p直接靶向作用于FOXO1的3'-UTR。miR-15b-5p过表达抑制H/R诱导的HK-2细胞活力,降低细胞凋亡,抑制细胞自噬(P<0.05)。与H/R+miR-15b-5p mimic组相比,H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组HK-2细胞存活率降低,细胞凋亡和自噬水平增高(P<0.05)。结论miR-15b-5p通过靶向抑制FOXO1降低细胞自噬减缓H/R诱导的HK-2细胞损伤。 展开更多
关键词 miR-15b-5p 叉头框蛋白O1 人肾小管上皮细胞 缺氧/复氧 自噬
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山茱萸总苷抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞系HK-2凋亡和氧化损伤
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作者 张晓东 李文冬 +1 位作者 陈景荷 张艳琴 《基础医学与临床》 CAS 2024年第12期1644-1650,共7页
目的探究山茱萸总苷(COG)调节E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路对高糖诱导的人肾小管上皮细胞系HK-2的凋亡和氧化损伤的影响。方法将人肾小管上皮细胞系HK-2分为对照组(control,5.5 mmol/L)、模型组(HG,30 mmol/L)、山茱萸总... 目的探究山茱萸总苷(COG)调节E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路对高糖诱导的人肾小管上皮细胞系HK-2的凋亡和氧化损伤的影响。方法将人肾小管上皮细胞系HK-2分为对照组(control,5.5 mmol/L)、模型组(HG,30 mmol/L)、山茱萸总苷低、中和高剂量组(L-COG、M-COG、H-COG),加入Nrf2通路抑制剂后,HK-2细胞分为H-COG组、ML385组。CCK8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、活化的胱天蛋白酶(cleaved-caspase3)、Nrf2/HO-1通路蛋白表达,DCFH-DA法检测活性氧(ROS)含量,ELISA法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果与对照组比较,模型组细胞活性、Bcl-2蛋白表达、GSH-Px及SOD活性明显降低,凋亡率、Bax、Nrf2、HO-1及cleaved-caspase3蛋白表达、ROS、IL-6、TNF-α含量明显增加(P<0.05);与模型组比较,L-COG、M-COG、H-COG组细胞活性、Bcl-2蛋白表达、GSH-Px、SOD活性明显增加,凋亡率、Bax、Nrf2、HO-1及cleaved-caspase3蛋白表达、ROS、IL-6、TNF-α含量明显降低(P<0.05)。与H-COG组比较,ML385组细胞活性、Bcl-2蛋白表达、GSH-Px活性、SOD活性明显增加,凋亡率、Bax及cleaved-caspase3蛋白表达、ROS、IL-6、TNF-α含量明显降低(P<0.05)。结论山茱萸总苷可能是通过抑制Nrf2/HO-1通路减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞氧化应激和炎性反应,进而减轻细胞凋亡。 展开更多
关键词 山茱萸总苷 高糖 肾小管上皮细胞系 凋亡 氧化应激
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敲低RIP3对缺氧/复氧诱导人肾小管上皮HK2细胞自噬、细胞焦亡和铁死亡的影响
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作者 何国斌 王焕 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1644-1653,共10页
目的:探讨敲低受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)对缺氧复氧(H/R)诱导下人肾小管上皮HK2细胞自噬、焦亡和铁死亡的影响。方法:将慢病毒干扰载体质粒shRIP3和阴性对照慢病毒干扰载体质粒shNC分别转染至HK2细胞中,分为shRIP3组和shNC组,另以正... 目的:探讨敲低受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)对缺氧复氧(H/R)诱导下人肾小管上皮HK2细胞自噬、焦亡和铁死亡的影响。方法:将慢病毒干扰载体质粒shRIP3和阴性对照慢病毒干扰载体质粒shNC分别转染至HK2细胞中,分为shRIP3组和shNC组,另以正常培养未转染的HK2细胞作为空白组,转染48 h后,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法验证慢病毒转染效果。将HK2细胞分为对照组、H/R组、shNC+H/R组和shRIP3+H/R组。CCK-8法检测各组HK2细胞存活率,免疫荧光染色法检测各组细胞中微管结合蛋白1轻链(LC)3B和含核苷酸结合结构域富亮氨酸重复序列(NLR)家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)蛋白荧光强度,Western blotting法检测各组HK2细胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin1、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、膜穿孔蛋白D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-1β和IL^(-1)8蛋白表达水平,试剂盒检测各组细胞中铁离子(Fe^(2+))水平。结果:与空白组和shNC组比较,shRIP3组HK2细胞中RIP3 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。CCK-8法检测,与对照组比较,H/R组HK2细胞存活率明显降低(P<0.05);与H/R组比较,shRIP3+H/R组HK2细胞存活率明显升高(P<0.05)。免疫荧光染色法检测,与对照组比较,H/R组HK2细胞中LC3B蛋白荧光强度明显降低(P<0.05),NLRP3蛋白荧光强度明显升高(P<0.05);与H/R组比较,shRIP3+H/R组HK2细胞中LC3B蛋白荧光强度明显升高(P<0.05),NLRP3蛋白荧光强度明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,H/R组HK2细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低(P<0.05),Beclin1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与H/R组比较,shRIP3+H/R组HK2细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P<0.05),Beclin1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与对照组比较,H/R组HK2细胞中Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL^(-1)8蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与H/R组比较,shRIP3+H/R组HK2细胞中Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL^(-1)8蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,H/R组HK2细胞中GPX4和SLC7A11蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与H/R组比较,shRIP3+H/R组HK2细胞中GPX4和SLC7A11蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,H/R组HK2中细胞Fe^(2+)水平明显升高(P<0.05);与H/R组比较,shRIP3+H/R组HK2细胞中Fe^(2+)水平明显降低(P<0.05)。结论:靶向敲低RIP3可诱导H/R诱导人肾小管上皮HK2细胞自噬,抑制细胞焦亡和减轻铁死亡。 展开更多
关键词 人肾小管上皮HK2细胞 缺氧/复氧 受体相互作用蛋白激酶3 自噬 焦亡 铁死亡
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肾小管HIF-1α/miR-23a通路在脓毒血症急性肾损伤中的作用机制
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作者 陈思宇 强立娟 +2 位作者 朱嘉兴 马世兰 陈占龙 《河北医药》 CAS 2024年第5期645-651,共7页
目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-... 目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-2细胞分为LPS组、NC siRNA组、HIF-1αsiRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1αsiRNA+miR-NC组、HIF-1αsiRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2细胞作为空白对照组(Control组)。采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达。结果与Control组比较,LPS组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与Control组比较,LPS组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组和anti-miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。结论肾小管HIF-1α通过调控miR-23a表达调节NF-κB信号通路,从而参与LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 脓毒血症急性肾损伤 肾小管上皮细胞 肾小管低氧诱导因子-1α miR-23a 炎性反应 细胞凋亡 NF-ΚB信号通路
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银杏内酯B调控miR-155-5p对高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 秦美灵 吴春丽 +3 位作者 陈延玲 廉波 尚海玉 韩英 《川北医学院学报》 CAS 2024年第2期150-155,共6页
目的:探讨银杏内酯B(GB)对高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞凋亡及炎症因子的影响及其可能作用机制。方法:采用HG诱导人肾小管上皮细胞HK-2建立细胞损伤模型,不同剂量的GB处理HK-2细胞,并将anti-miR-NC、anti-miR-155-5p分别转染至HK-2细... 目的:探讨银杏内酯B(GB)对高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞凋亡及炎症因子的影响及其可能作用机制。方法:采用HG诱导人肾小管上皮细胞HK-2建立细胞损伤模型,不同剂量的GB处理HK-2细胞,并将anti-miR-NC、anti-miR-155-5p分别转染至HK-2细胞后加入25 mmol/L葡萄糖处理24 h,将miR-NC、miR-155-5p mimics分别转染至HK-2细胞后加入100μmol/L GB与25 mmol/L葡萄糖共同处理24 h;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA法检测炎症因子IL-6、TNF-α的水平;RT-qPCR法检测miR-155-5p的表达量;Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤(Bcl-2)蛋白表达水平。结果:GB处理后,高糖诱导的HK-2细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平、miR-155-5p表达量和Bax蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染anti-miR-155-5p后,高糖诱导的HK-2细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平、miR-155-5p表达量和Bax蛋白表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);转染miR-155-5p mimics可减弱GB对HG诱导的HK-2细胞凋亡及炎症因子表达的影响。结论:GB可通过抑制细胞凋亡及炎症因子表达来减轻HG诱导的肾小管上皮细胞损伤,其作用机制可能与抑制miR-155-5p表达有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 人肾小管上皮细胞 银杏内酯B miR-155-5p 细胞凋亡 炎症
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远隔缺血预处理分离液对人肾小管上皮细胞缺氧性损伤的保护作用
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作者 戴文俊 裴汉军 《包头医学院学报》 CAS 2024年第2期87-92,共6页
目的:研究远隔缺血预处理(RIPC)分离液对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及机制。方法:将HK-2细胞分为时间对照组、H/R、RIPC处理组、自噬干预组。时间对照组细胞在正常条件下培养,RIPC组细胞使用RIPC分离液预处理,自... 目的:研究远隔缺血预处理(RIPC)分离液对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及机制。方法:将HK-2细胞分为时间对照组、H/R、RIPC处理组、自噬干预组。时间对照组细胞在正常条件下培养,RIPC组细胞使用RIPC分离液预处理,自噬干预组细胞在RIPC处理基础上,加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3MA),后三组细胞使用三气培养箱进行H/R构建损伤模型。模型成功后使用光学显微镜观察各组细胞状态,应用Western blot观察LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白、Beclin1蛋白的表达水平。结果:镜下示RIPC分离液可明显减轻H/R对HK-2细胞的损伤,加入自噬抑制剂,RIPC分离液对HK-2细胞H/R损伤的保护作用被阻断。Western blot结果显示,RIPC分离液可使HK-2细胞线粒体中的自噬特异性蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达水平增高。Real-time PCR结果显示,与H/R组比,RIPC组LC3及Beclin1的mRNA表达量明显升高;加入自噬抑制剂,HK-2细胞线粒体中的自噬特异性蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达降低,LC3及Beclin1的mRNA表达量同时也明显降低。结论:RIPC分离液对HK-2细胞H/R后损伤具有保护作用,作用机制可能与线粒体自噬相关。 展开更多
关键词 远隔缺血预处理分离液 人肾小管上皮细胞 缺氧/复氧 线粒体自噬
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1-磷酸鞘氨醇受体3对脂多糖处理大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响
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作者 吴晋 应静 《现代实用医学》 2024年第2期166-169,共4页
目的探讨1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)对脂多糖(LPS)处理大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将培养好的大鼠肾小管细胞(NRK-52E)分为对照组、LPS组、S1PR3激动剂+LPS组。对照组不做处理;LPS组予LPS(20μg/ml)刺激12h后做离心收集待检;S1PR... 目的探讨1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)对脂多糖(LPS)处理大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将培养好的大鼠肾小管细胞(NRK-52E)分为对照组、LPS组、S1PR3激动剂+LPS组。对照组不做处理;LPS组予LPS(20μg/ml)刺激12h后做离心收集待检;S1PR3激动剂+LPS组先用S1PR3激动剂KRX-725预处理2 h后再予LPS(20μg/ml)刺激12 h后做离心收集待检。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、钙离子表达及caspase-3表达的差异,ELISA试剂盒检测Calpain 1、Calpain 2的表达差异,Western Blot检测各组细胞中S1PR3的表达差异。结果LPS处理后脓毒症NRK-52E细胞模型成功建立,相比于对照组,LPS组和S1PR3激动剂+LPS组的细胞凋亡率、S1PR3表达、钙离子浓度、Calpain 1与Calpain2的表达、caspase-3表达均显著增加(均P<0.05);与LPS组相比,S1PR3激动剂+LPS组的细胞凋亡率、钙离子浓度、Calpain 1与Calpain2的表达、caspase-3表达均显著增加(均P<0.05),S1PR3表达显著增加(P<0.05)。结论S1PR3的激活能够增加肾小管上皮细胞内的钙离子浓度,从而激活caspase-3细胞凋亡信号通路,导致脓毒症肾小管上皮细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 脓毒症 1-磷酸鞘氨醇受体3 肾小管上皮细胞 凋亡
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环状RNA_0124644调控微小RNA-136对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响
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作者 蔡莉 侯保健 贺映侠 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2024年第5期444-450,共7页
目的:探讨环状RNA_0124644(circ_0124644)对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的影响。方法:收集29例糖尿病肾病患者及41例健康体检者的血浆,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circ_0124644和微小RNA(miR)-136的表达;验证circ_0... 目的:探讨环状RNA_0124644(circ_0124644)对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的影响。方法:收集29例糖尿病肾病患者及41例健康体检者的血浆,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circ_0124644和微小RNA(miR)-136的表达;验证circ_0124644和miR-136的靶向关系。将HK-2细胞随机分为正常糖(NG)组、HG组、HG+si-circ_0124644组、HG+si-NC组、HG+si-circ_0124644+anti-miR-136组、HG+si-circ_0124644+anti-miR-NC组。甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞抑制率;检测细胞凋亡率和活化的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)蛋白水平以及白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平。结果:与健康体检者相比,糖尿病肾病患者血浆中circ_0124644表达升高,miR-136表达降低(P<0.05)。HG可诱导的HK-2细胞中circ_0124644表达升高,miR-136表达降低,细胞抑制率、凋亡率、Cleaved caspase-3蛋白、Cleaved caspase-3平均荧光强度、IL-6、IL-1β、LDH和MDA水平及ROS活性升高,IL-10水平和SOD活性降低(P<0.05)。沉默circ_0124644后,HK-2细胞抑制率、凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达、Cleaved caspase-3平均荧光强度降低,IL-6、IL-1β水平降低,IL-10水平升高,SOD活性升高,LDH水平和MDA含量及ROS活性降低(P<0.05)。下调miR-136逆减弱了沉默circ_0124644对HG诱导的HK-2细胞的作用。结论:沉默circ_0124644可能通过调控miR-136抑制HG诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 环状RNA_0124644 微小RNA-136 肾小管上皮细胞 炎症因子 氧化应激 凋亡
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人近曲肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤模型的建立 被引量:16
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作者 杜逸亭 董文斌 +1 位作者 王明勇 航永伦 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期619-622,F0005,共5页
目的建立一种新的人近曲肾小管上皮细胞HK2缺氧/复氧损伤模型。方法本实验使用人近曲HK2。实验分为缺氧4、12和24h及缺氧24h后复氧4、12和24h组,每个实验组均设立空白对照组。采用经高温灭菌的液体石蜡覆盖法造成缺氧环境;苔盼兰摄取法... 目的建立一种新的人近曲肾小管上皮细胞HK2缺氧/复氧损伤模型。方法本实验使用人近曲HK2。实验分为缺氧4、12和24h及缺氧24h后复氧4、12和24h组,每个实验组均设立空白对照组。采用经高温灭菌的液体石蜡覆盖法造成缺氧环境;苔盼兰摄取法进行细胞计数及检测细胞存活率,生化法检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果人肾小管上皮细胞经过缺氧/复氧处理后,苔盼兰摄取率显著提高,细胞存活率显著下降,LDH含量升高。说明缺血再灌注损伤导致了细胞膜的完整性破坏,甚至细胞发生了不可逆转的损伤。结论采用液体石蜡覆盖法建立人近曲肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤模型,较其他制模方法操作简单、易行、可靠。 展开更多
关键词 人近曲肾小管 上皮细胞 缺氧/复氧损伤 动物模型 液体石蜡
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血管紧张素Ⅱ对肾小管上皮细胞凋亡的影响及冬虫夏草对其的干预作用 被引量:12
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作者 涂珊 周巧玲 +3 位作者 唐荣 汤天凤 胡赛 敖翔 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期67-72,共6页
目的:研究冬虫夏草提取液(Cordyceps sinensis,C.sinensis)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护机制。方法:C.sinensis(0,5,10,20,40 mg/L)与10-8mol/L AngⅡ共同孵育NRK-52E 24,48,72 h,了解C.sinensis对细... 目的:研究冬虫夏草提取液(Cordyceps sinensis,C.sinensis)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护机制。方法:C.sinensis(0,5,10,20,40 mg/L)与10-8mol/L AngⅡ共同孵育NRK-52E 24,48,72 h,了解C.sinensis对细胞增殖的影响,确定最佳干预浓度;取AngⅡ(0,10-12,10-10,10-8,10-6mol/L)与NRK-52E共同培育24 h及10-8mol/L AngⅡ与NRK-52E共同培养24,48,72 h,观察AngⅡ对NRK-52E凋亡的影响,确定AngⅡ最佳干预浓度、时间后设立对照组,AngⅡ(10-8mol/L)组,AngⅡ(10-8mol/L)+C.sinensis(40mg/L)组,AngⅡ(10-8mol/L)+福辛普利(10-5mol/L)组和AngⅡ(10-8mol/L)+C.sinensis(40 mg/L)+福辛普利(10-5mol/L)组,培养24 h后进行实验。MTT法检测不同浓度C.sinensis(0,5,10,20,40 mg/L)对NRK-52E作用24,48,72 h后的增殖情况,流式细胞仪Annexin V/PI双染检测凋亡率,比色法测定caspase-3酶活性。结果:C.sinensis(10~40 mg/L)在一定范围内可呈浓度依赖地促进培养的肾小管上皮细胞增殖(P〈0.05);AngⅡ呈浓度(10-10~10-6mol/L)和时间(12~24 h)依赖地诱导NRK-52E凋亡率增加,caspase-3酶活性增加(P〈0.05)。C.sinensis(10~40 mg/L)能部分地抑制AngⅡ诱导的NRK-52E凋亡和降低caspase-3酶活性(P〈0.01),与福辛普利对细胞凋亡的抑制无明显区别,二者联合用药效果与单用效果差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:C.sinensis对AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞凋亡具有一定抑制作用,可能与抑制NRK-52E中caspase-3的激活有关。 展开更多
关键词 冬虫夏草 血管紧张素Ⅱ 肾小管上皮细胞 凋亡 CASPASE-3
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冬虫夏草提取液对肾小管上皮细胞Klotho表达和凋亡的影响 被引量:10
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作者 唐荣 周巧玲 +4 位作者 舒金勇 汤天凤 敖翔 彭卫生 张义德 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期300-307,共8页
目的:研究冬虫夏草(cordyceps sinensis,CS)提取液及氯沙坦(losartan,Los)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中Klotho(Kl),P53,P21表达和凋亡的影响,探讨CS对AngⅡ诱导肾小管上皮细胞凋亡影响的机制。方法:CS(0,5... 目的:研究冬虫夏草(cordyceps sinensis,CS)提取液及氯沙坦(losartan,Los)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中Klotho(Kl),P53,P21表达和凋亡的影响,探讨CS对AngⅡ诱导肾小管上皮细胞凋亡影响的机制。方法:CS(0,5,10,20,40,80mg/L)单独或与AngⅡ(1×10-8mol/L)共同培养24h。确定CS的最佳干预浓度后设立对照组,AngⅡ(1×10-8mol/L)组,AngⅡ(1×10-8mol/L)+CS(40mg/L)组,AngⅡ(1×10-8mol/L)+Los(1×10-5mol/L)组和AngⅡ(1×10-8mol/L)+CS(40mg/L)+Los(1×10-5mol/L)组,培养24h后进行实验。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的增殖;分别用RT-PCR和Western印迹法检测Kl,P53和P21mRNA及蛋白的表达;分光光度法检测caspase-3的活性;AnnexinV-FITC双染法及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:一定浓度范围的CS单独作用可促进NRK-52E细胞增殖,还能拮抗AngⅡ对其增殖的抑制(P<0.01或P<0.05);AngⅡ可下调KlmRNA及蛋白表达,上调P53和P21mRNA及蛋白表达,增加caspase-3活性和细胞凋亡率(均P<0.01);加入CS或/和Los后,KlmRNA及蛋白表达明显上调,P53和P21mRNA及蛋白表达下调,caspase-3活性和细胞凋亡率明显降低(均P<0.05),各药物干预组间的作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CS可逆转AngⅡ诱导的Kl低表达,并抑制P53及P21的表达,从而抑制AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞凋亡,可能是其对高血压肾损害起保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 冬虫夏草 KLOTHO 血管紧张素Ⅱ 肾小管上皮细胞 凋亡
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镉引起肾脏毒性的细胞凋亡通路 被引量:8
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作者 余娜 钟志勇 +3 位作者 唐小江 刘圣兰 刘培庆 蒋建敏 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期407-412,共6页
肾近端小管是镉主要的作用靶器官,但人们对镉引起肾脏毒性的作用机制仍不清楚。在体内外的研究中,镉能够诱导肾近端小管上皮细胞的凋亡,这表明通过细胞凋亡通路引起上皮细胞的凋亡可能是镉引起肾脏毒性的关键环节之一。部分研究表明镉... 肾近端小管是镉主要的作用靶器官,但人们对镉引起肾脏毒性的作用机制仍不清楚。在体内外的研究中,镉能够诱导肾近端小管上皮细胞的凋亡,这表明通过细胞凋亡通路引起上皮细胞的凋亡可能是镉引起肾脏毒性的关键环节之一。部分研究表明镉在不同细胞可通过多个途径来引起细胞凋亡,包括线粒体介导的及死亡受体介导的凋亡通路。本篇综述将在以往镉相关及细胞凋亡的文献报道及其重大发现的基础上,特别是在肾脏及肾脏近端小管上皮细胞的研究基础上,来阐述镉通过细胞凋亡来诱导肾脏毒性的作用机制。 展开更多
关键词 肾毒性 细胞凋亡 肾小管上皮细胞
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氧化应激和P53参与波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡 被引量:13
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作者 李素娟 李剑敏 +4 位作者 汪洋 王万铁 邱晓晓 许益笑 金可可 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2302-2306,共5页
目的:探讨波动性高糖引起的肾小管上皮细胞凋亡的机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),给予稳定高糖或波动高糖干预,并使用抗氧化剂和P53特异性抑制剂验证氧化应激和P53在波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用;此外,SD大鼠... 目的:探讨波动性高糖引起的肾小管上皮细胞凋亡的机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),给予稳定高糖或波动高糖干预,并使用抗氧化剂和P53特异性抑制剂验证氧化应激和P53在波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用;此外,SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C)。采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹腔注射速效胰岛素,并错时给予葡萄糖,造成一天中血糖浓度大幅波动模型。采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法和Western blotting检测NADPH氧化酶4(Nox4)和P53蛋白表达,流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡。结果:(1)与稳定高糖比较,波动高糖引起更加明显的HK-2细胞凋亡,P53蛋白表达明显上调,同时培养上清液中MDA含量增加和SOD活性下降,抗氧化剂和P53抑制剂可明显抑制磷酸化P53蛋白表达和细胞凋亡。(2)在体动物实验制模12周后,与B组比较,C组肾组织Nox4表达明显增加,肾小管磷酸化P53蛋白表达上调,细胞凋亡数增加。结论:氧化应激和P53参与波动性高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 氧化性应激 P53 血糖波动 细胞凋亡 肾小管上皮细胞
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JNK在血糖波动的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用 被引量:8
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作者 郝卯林 戴雍月 +3 位作者 倪世容 汪大望 李素娟 金可可 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期309-312,388,共4页
目的:探讨血糖波动的糖尿病大鼠发生肾小管上皮细胞凋亡的信号转导机制。方法:健康SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C),采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹... 目的:探讨血糖波动的糖尿病大鼠发生肾小管上皮细胞凋亡的信号转导机制。方法:健康SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C),采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹腔注射速效胰岛素,并错时给予葡萄糖,造成一天中血糖浓度大幅度波动模型。制模12周后,采用比色法检测肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法和Western blot检测肾脏Nox4和JNK蛋白表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡。结果:与A组比较,B组和C组肾组织MDA含量增加、SOD活性下降,肾小管上皮细胞Nox4表达增加,肾小管磷酸化JNK(P-JNK)蛋白表达上调,细胞凋亡率明显增加,且C组的以上变化均较B组更加明显(P<0.05,P<0.01)。结论:波动性高血糖较稳定性高血糖更易促进糖尿病肾小管上皮细胞凋亡,其机制与JNK信号转导通路激活有关。 展开更多
关键词 JNK 血糖波动 凋亡 肾小管上皮细胞
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Netrin-1对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响 被引量:17
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作者 赵静 翟铁 梁宏霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期231-236,共6页
目的:研究netrin-1对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法:用高糖培养人肾小管上皮HK-2细胞,real-time PCR和Western blot测定细胞中netrin-1的表达水平。用过表达netrin-1慢病毒感染HK-2细胞,检测其对高糖环境下HK-2细胞中netri... 目的:研究netrin-1对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法:用高糖培养人肾小管上皮HK-2细胞,real-time PCR和Western blot测定细胞中netrin-1的表达水平。用过表达netrin-1慢病毒感染HK-2细胞,检测其对高糖环境下HK-2细胞中netrin-1表达的影响。流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定cleavedcaspase-3蛋白水平,2,4-二硝基苯肼法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法检测培养液中丙二醛(MDA)含量,ELISA法测定培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果:高糖处理后的HK-2细胞中netrin-1的mRNA和蛋白水平均明显下调(P <0.05)。过表达netrin-1慢病毒能够上调高糖环境下HK-2细胞中netrin-1的表达水平(P <0.05)。高糖可促进肾小管上皮细胞分泌IL-1β和TNF-α,提高细胞培养液中LDH和MDA的水平(P <0.05),使肾小管上皮细胞的caspase-3活化并诱导细胞凋亡;上调netrin-1的HK-2细胞经高糖诱导后,细胞分泌的IL-1β和TNF-α减少,细胞中活化的caspase-3蛋白水平降低,培养液中LDH和MDA水平降低,细胞凋亡减少(P <0.05)。结论:上调netrin-1减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞氧化损伤和炎性损伤,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 NETRIN-1 糖尿病肾病 氧化损伤 细胞凋亡
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外周血单个核细胞在乙肝相关性肾炎发病机制中的作用研究 被引量:4
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作者 宋新文 邓存良 +3 位作者 盛云建 陈枫 王明勇 史小玲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期681-682,685,共3页
目的通过观察外周血单个核细胞(PBMC)对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨PBMC在乙肝相关性肾炎发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测HBVDNA阳性血清与人近端肾小管上皮细胞(HK-2)培养时HK-2凋亡率作为对照,分别观察健康人及H... 目的通过观察外周血单个核细胞(PBMC)对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨PBMC在乙肝相关性肾炎发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测HBVDNA阳性血清与人近端肾小管上皮细胞(HK-2)培养时HK-2凋亡率作为对照,分别观察健康人及HBVDNA阳性患者PBMC对HK-2凋亡的影响。结果健康人PBMC组HK-2凋亡率明显低于对照组和HBVDNA阳性患者PBMC组(P<0.01)。结论健康人PBMC能抑制HK-2凋亡,而HBVDNA阳性患者PBMC此抑制作用降低,提示HBVDNA阳性患者PBMCs功能缺陷,可能是乙型肝炎相关肾炎(HBV-GN)的发病机制之一。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 外周血单个核细胞 乙型肝炎病毒 凋亡
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