梅花鹿角盘胶原蛋白的鉴定及其理化性质

本研究以梅花鹿角盘为原料,利用酸法和酶法提取梅花鹿角盘酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),研究其结构和理化性质,为开发胶原蛋白新资源,提高鹿产品附加值提供理论依据。结果表明,梅花鹿角盘ASC和PSC符合Ⅰ型胶原蛋白氨基酸的特征分布。其中蛋氨酸含量最低,羟基化程度较高,分别为45.69%和46.30%。ASC和PSC至少由两条α链(α1和α2)组成,β链含量较高,并含有少量的γ链。ASC和PSC二级结构相似,均出现酰胺A、B、Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的特征吸收峰,保存着三螺旋结构。ASC和PSC在280 nm处基本无吸收,其最大吸收峰位于219.0 nm和224.0 nm处。ASC和PSC溶液的pH越接近pI值,其溶解性、乳化能力和乳化稳定性越小。当NaCl浓度为0~2 mol/L时,增加盐量可以增大ASC和PSC的溶解性、起泡性;盐浓度在0~0.4 mol/L范围内,能提高ASC和PSC乳化性和乳化稳定性。蛋白浓度0.5%时,两者的乳化稳定性最大,蛋白浓度4%时,两者的乳化稳定性最小。

鹿角脱盘物质基础及药理研究进展

鹿角脱盘作为鹿茸、鹿角的附属产物,一直以来未得到有效的开发利用,浪费较大。历年来其被《中华人民共和国药典》按中药材鹿角收载,但实际二者之间的物质基础、药理毒理等差别较大,不能混为一谈。鹿角脱盘的主要活性成分为多肽类,未来的研究方向为靶向生物小分子多肽方向。此研究认为鹿角脱盘多肽对乳腺癌、乳腺增生、乳腺炎及骨质疏松等疾病的治疗效果较佳。目前市面上尚无鹿角脱盘相关产品,根据乳腺疾病及骨质疏松症治疗药物的发展现状及前景分析,尤其建议研发鹿角脱盘多肽缓释乳房透皮吸收制剂及相关医疗器械等,市场潜力较大。

鹿角与鹿角脱盘显微鉴定研究

目的:利用显微特征参数,分析比较鹿角与鹿角脱盘显微结构差异,为鹿角粉与鹿角脱盘粉鉴别,以及两者质地差异性提供显微结构基础。方法:采用光学显微镜观察鹿角脱盘、鹿角及鹿骨粉末显微特征,并测定和比较三者的骨陷窝长/短径比值和骨陷窝面积占比显微特征数。结果:鹿角脱盘骨陷窝长/短径比值为2.04~2.38、骨陷窝面积比为35.04%~45.82%;鹿角的骨陷窝长/短径比值为1.69~2、骨陷窝面积比为40.60%~61.77%;鹿骨骨陷窝长/短径比值为1.54、骨陷窝面积比为71.8%。结论:鹿角、鹿角脱盘及鹿骨中三者显微鉴定参数均具有明显的差异性;表明骨陷窝长/短径比与骨陷窝面积比,不仅可作为鹿角与鹿角脱盘显微鉴定参数;也阐释了鹿角脱盘角质地比鹿角更为坚硬的组织结构基础,即随着骨陷窝形态由圆变长、骨陷窝面积比降低,其骨化程度增加、质地更加坚硬。

梅花鹿鹿花盘对小鼠抗疲劳作用的研究

试验研究了梅花鹿鹿花盘蛋白、鹿花盘胶、鹿花盘霜对小鼠的抗疲劳作用。结果表明:鹿花盘胶和鹿花盘霜组均显著延长了小鼠游泳时间,鹿花盘蛋白组极显著地延长了游泳时间;3组均能显著降低血尿素氮含量并且极显著增加肝糖原含量;鹿花盘霜和鹿花盘蛋白组能显著增强乳酸脱氢酶活力;鹿花盘胶和鹿花盘蛋白对血乳酸含量有显著影响。梅花鹿鹿花盘具有较好的抗疲劳功能,其效果以鹿花盘蛋白为最佳。

响应曲面法优化鹿角盘胶原蛋白酶解提取工艺研究

【目的】采用响应曲面法对鹿角盘胶原蛋白酶解提取工艺进行优化。【方法】以马鹿鹿角盘为原料,胶原蛋白提取率为指标,选取料液比、pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间5个因素进行单因素试验,确定各因素的最优提取条件。在单因素试验的基础上,选取pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间为影响因素,进行4因素3水平的Box-Behnken试验设计,采用响应曲面法分析4个因素对胶原蛋白提取率的影响。【结果】单因素试验结果表明:料液比1∶20、pH值1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间为6h时胶原蛋白提取率最高。响应曲面法得到的最佳提取工艺为:pH 1.77、加酶量3.94%、酶解温度36.78℃、酶解时间5.39h,考虑到实际情况,对模型预测得到的马鹿鹿角盘胶原蛋白最优提取工艺进行修正,修正后的工艺为:pH 1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间5h。在此条件下,马鹿鹿角盘胶原蛋白提取率达到83.32%。4个因素对胶原蛋白提取率影响的重要性顺序为:酶解温度>加酶量>pH值>酶解时间。【结论】建立了酶解法提取鹿角盘胶原蛋白的二次多项式模型,获得了胶原蛋白提取率较高的最佳工艺参数,有效缩短了胶原蛋白的提取时间。

鹿角脱盘蛋白的提取工艺研究

目的建立鹿角脱盘蛋白提取工艺。方法采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE),考察不同pH值、不同料液比、不同浸提时间、不同盐浓度等影响因素对蛋白提取效果的影响。结果鹿角脱盘蛋白的提取工艺为:pH值12的缓冲液(含50mMEDTA、0.5MNaCl)浸提,料液比为1∶5,浸提时间为3h,浸提次数2次。结论验证实验结果表明,鹿角脱盘总蛋白收率可达2%,纯度可达80%。优选出的工艺稳定、合理、可行。

鹿角盘天然活性成分和药理功能研究的新进展

鹿角盘为我国传统名贵中药鹿茸的副产品,其药用价值一直被忽视。近年来,随着科学技术的进步,许多科学家对鹿角盘的生物活性物质和药理作用进行了研究。文章综述了近年来鹿角盘的生物活性成分、药理功能和临床应用的研究进展情况,以期为鹿角盘的进一步研究和开发利用提供科学依据,从而有助于推进鹿产业的大力发展。

复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠子宫、卵巢重量影响及作用机制的研究

目的:观察复方鹿花盘胶囊对实验性乳腺增生小鼠子宫、卵巢及血清促卵泡雌激素(FSH)的影响。方法:采用苯甲酸雌二醇腹腔注射制造乳腺增生模型,观察复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠子宫、卵巢重量及重量指数的变化和对血清FSH含量的影响。结果:高剂量组能使乳腺增生小鼠子宫重量及其指数恢复接近正常,中、高剂量组均能升高FSH含量。结论:复方鹿花盘胶囊能不同程度的影响乳腺增生小鼠子宫、卵巢重量,其作用机理之一是调节FSH含量。

梅花鹿鹿角盘多肽双酶水解工艺及优化研究

鹿角盘是一味中药,具有温补肝肾、益脾胃、强筋骨、活血化瘀、治疗乳痈初起等功效。研究以鹿角盘粉为原料,用水解度和多肽得率作为衡量最佳提取工艺的指标,筛选出最佳双酶组合,水解制得鹿角盘多肽,在单因素实验的基础上,应用Box-Benhnken的中心组合实验设计和响应面(RSM)分析法,确定了最佳酶解工艺为:温度49℃、p H8.0、加酶量11000 U/g、酶活比(木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶)为2∶1、底物质量浓度为6 g/100 m L、水解时间270 min。在此条件下,水解度达到15.91%。

马鹿鹿角盘胶原蛋白特性研究

目的以马鹿鹿角盘为原料提取胶原蛋白,对其胶原蛋白的结构、分子量分布和氨基酸组成进行研究,为今后马鹿产品开发奠定基础。方法采用乙酸和胃蛋白酶结合法提取马鹿鹿角盘胶原蛋白;利用紫外扫描、红外光谱分析、SDS-PAGE垂直电泳和高效液相色谱法研究马鹿鹿角盘胶原蛋白的结构、分子量分布和氨基酸组成。结果紫外扫描分析显示,马鹿鹿角盘胶原蛋白在205 nm处有最大吸收峰,符合胶原蛋白的特性。红外光谱显示,马鹿鹿角盘胶原蛋白保留了完整的三股螺旋结构。SDS-PAGE垂直电泳显示,胶原蛋白含有α1、α2和β链3条链。氨基酸分析表明,马鹿鹿角盘胶原蛋白具有典型Ⅰ型胶原蛋白的氨基酸组成。结论从马鹿鹿角盘中提取的胶原蛋白属于Ⅰ型胶原蛋白。

鹿角帽水溶性提取物双相调节乳腺癌细胞增殖

初步探讨SAB抑制乳腺癌增殖的剂量特征和机制.采用MTT法检测不同浓度SAB对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,进一步利用RT-PCR、Western blot等方法观察细胞周期蛋白、细胞凋亡相关因子、ER-α36、ER-α66等表达的变化.结果显示,低剂量(0.25mg/mL)的SAB促进MCF-7细胞的增殖,高剂量的SAB才能抑制MCF-7细胞的增殖,促进细胞凋亡,并且将细胞周期阻滞在S期.提示SAB通过影响不同ER亚型的表达介导不同的ER信号通路,从而起到对乳腺癌细胞的双相调节作用.

鹿花盘蛋白对乳腺增生模型小鼠作用研究

目的:观察鹿花盘蛋白对乳腺增生小鼠雌激素水平及免疫功能方面的影响。方法:采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮制备动物模型,饲喂鹿花盘蛋白,检测每组小鼠血清雌二醇含量、子宫系数,以及免疫器官系数。结果:与模型组比较,鹿花盘蛋白组能够显著降低乳腺增生小鼠血清雌二醇含量及子宫系数(P<0.05),并能明显增加胸腺系数及脾脏系数(P<0.05)。结论:鹿花盘蛋白能够调节乳腺增生小鼠雌激素分泌,增强机体免疫水平。

复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠乳腺组织形态学影响及作用机制的研究

目的:观察复方鹿花盘胶囊对实验性乳腺增生小鼠乳腺组织形态学及血清黄体生成素(LH)含量的影响。方法:采用苯甲酸雌二醇腹腔注射制造乳腺增生模型,观察复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠乳腺组织形态学的变化及对血清性激素LH含量的影响。结果:三个剂量组能不同程度的降低乳腺增生小鼠乳腺组织形态方面的各项指标,并呈现一定的剂量依赖性,而高剂量组有降低血清LH含量的作用。结论:复方鹿花盘胶囊能改善乳腺增生小鼠乳腺组织形态学各项指标,以高剂量组效果较显著,并且高剂量组有降低LH含量作用,总体好于西药他莫昔芬。

响应曲面法优化梅花鹿鹿角盘胶原蛋白提取工艺

目的以梅花鹿鹿角盘为原料,运用响应曲面法优化鹿角盘胶原蛋白提取工艺;方法以胶原蛋白提取率为指标,在单因素的基础上,选取pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间4个因素进行4因素4水平的BoxBehnken试验设计,采用响应曲面法分析4个因素对胶原蛋白提取率的影响;结果鹿角盘胶原蛋白的最佳提取工艺,根据实际情况修正为:pH1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间4 h,在此条件下,鹿角盘胶原蛋白提取率可达到80.10%。结论鹿角盘胶原蛋白的提取受很多因素的影响,因此,对多种因素进行单因素和交互影响分析,优化实验方法及条件,会大大提高鹿角盘胶原蛋白的提取率。

鹿角脱盘5种提取部位对H_(22)荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的评价鹿角脱盘5种提取部位对肝癌H_(22)荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法将90只SPF级昆明种小鼠随机分成正常阴性对照组、模型组、阳性对照组、鹿角脱盘酸(盐酸)、碱(氢氧化钠)、盐(氯化钠)、醇(乙醇)和水5种提取部位组和鹿角脱盘原粉组共9组,每组10只。分别以脾脏组织病理变化、外周血和脾脏CD4^+和CD8^+T淋巴细胞百分比、血清中细胞因子IL-6、IL-12和抗体IgE、IgG、IgM水平为指标,评价鹿角脱盘的盐酸、氢氧化钠、氯化钠、乙醇和水5种提取部位提高荷瘤小鼠免疫功能的作用。结果与模型组比较,鹿角脱盘5种提取部位能够保护荷瘤小鼠脾脏结构;提高脾脏和外周血CD4^+/CD8^+比值(P<0.05);提高荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12和抗体IgE、IgG、IgM的水平(P<0.05)。结论鹿角脱盘碱溶液提取部位效果最好;鹿角脱盘可能通过提高荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的功能,逆转肿瘤发生发展对机体免疫功能的抑制作用,发挥抗肿瘤作用。

响应曲面法优化梅花鹿鹿角盘胶原蛋白提取工艺

以梅花鹿鹿角盘为原料,运用响应曲面法优化鹿角盘胶原蛋白提取工艺。以胶原蛋白提取率为指标,在单因素的基础上,选取p H值、加酶量、酶解温度、酶解时间4个因素进行4因素4水平的Box-Behnken试验设计,采用响应曲面法分析4个因素对胶原蛋白提取率的影响,得出鹿角盘胶原蛋白的最佳提取工艺,根据实际情况修正为p H 1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间4 h。在此条件下,鹿角盘胶原蛋白提取率可达到80.10%。

鹿花盘蛋白质的提取与生物活性测定

采用盐提、热变性处理及凝胶过滤法从鹿花盘中提取鹿花盘蛋白质 (PSAB)。 PSAB经 SDS-PAGE电泳呈现 5条谱带 ,测定其分子量分别为 6 5 .5 7KD、2 8.179KD、2 1.2 6 5 KD、16 .75 8KD、13.79KD;氨基酸分析表明 ,鹿花盘蛋白质含有 17种氨基酸。动物实验表明 ,鹿花盘蛋白质能显著地增强机体的抗疲劳作用和提高肾上腺功能 ;对油漆应激小鼠有明显保护作用 ,能显著增加小鼠红细胞数和血红蛋白的含量。表明 PSAB具有滋补强壮、养气补血的作用 ,是鹿花盘的活性成分之一。

微切变-助剂互作技术制备鹿角盘微切助粉及其活性物质的检测

[目的]检测鹿角盘微切助粉中与骨质疏松症有关的活性物质的含量。[方法]采用微切变-助剂互作技术制备鹿角盘微切助粉,通过与中药粉碎技术相比,考察该技术对鹿角盘颗粒粒径、形态的影响并检测其中活性成分的含量。[结果]经微切变-助剂互作技术处理后,鹿角盘粒径在1~30μm范围内的颗粒数占82.73%,且细胞已被充分破碎,有效成分呈释放的状态。鹿角盘微切助粉中含有丰富的性激素（包括雌二醇、睾酮、孕酮）、类胰岛素样生长因子-1、柠檬酸钙和钙,且含量均高于其粗粉组,说明微切变-助剂互作技术有利于鹿角盘中活性成分的释放,体现了该技术的优越性。[结论]该研究可为合理开发利用鹿角盘提供一种新的粉碎技术,并为阐明鹿角盘防治骨质疏松症提供理论依据。

响应面法优化超滤提纯梅花鹿角盘多肽工艺

采用超滤法分离梅花鹿角盘多肽溶液,考察了超滤操作压力、操作时间和料液质量分数对膜渗透通量的影响,在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken响应曲面法对影响梅花鹿角盘多肽超滤效果的关键因素进行优化探讨,确定最佳分离工艺条件:料液质量分数1.44%、操作压力0.13 MPa、操作时间60 min。在此条件下,膜渗透通量为1.72 L/m2·h,分离后的样品中多肽含量为45.2%,达到了较好的提纯效果。

微切变-助剂互作技术与超微粉碎技术加工的鹿角盘粉保健功能研究

为了研究不同加工技术制备的鹿角盘粉末的保健功能,试验采用微切变-助剂互作技术和传统的超微粉碎技术处理鹿角盘,并研究鹿角盘微切助粉和超微粉对小鼠多种保健功能的影响。结果表明:鹿角盘具有提高小鼠机体免疫力、抗疲劳、抗炎、镇静、催眠的作用,且鹿角盘微切助粉的各种保健效果优于超微粉。说明不同的加工技术有助于推进鹿产业的发展,为鹿角盘的进一步合理利用提供科学依据。