多模态影像学方法评估布依药鹿角壮骨煎液的骨折疗效

目的 运用多模态影像学方法评估布依药鹿角壮骨煎液的骨折疗效。方法通过手术方式制作新西兰白兔左下肢胫骨中下段骨折模型30只,随机分成实验组15只给予布依药鹿角壮骨煎液灌胃治疗,对照组15只给予等量0.9%生理盐水灌胃治疗。在造模后当天、第7d、15d、21d、30d、42d随机选择2只模型兔分别行常规DR摄片、常规CT及双能量CT扫描,并对CT扫描数据行冠矢状位及骨髓成像后处理,对比不同影像学方法对实验组及对照组骨折端的对显示情况。结果与对照组比较,实验组在X平片、CT平扫、双能量骨髓成像评估中均有统计学差异(P>0.05),且CT平扫结合双能量骨髓成像对骨折愈合评估更加敏感、准确;对于骨折治愈周期比较,实验组较对照组愈合周期明显缩短,7天时间点骨折的修复评分较对照组提高97.3%。结论布依药鹿角壮骨煎液可促进骨痂生长,缩短骨折病程,且CT平扫结合双能骨髓成像对骨折愈合的评估更加敏感、准确。

基于单细胞转录组测序的鹿茸生长中心细胞异质性研究

为了从单细胞水平探究梅花鹿鹿茸生长中心中细胞类型和基因表达的差异,即细胞异质性,试验采用单细胞转录组测序的方法,对生长75 d的梅花鹿鹿茸生长中心进行单细胞转录组分析,鉴定细胞类型,并对不同类型细胞进行基因表达模式、基因功能富集分析。结果表明:鹿茸生长中心包含了内皮细胞、周细胞、间充质细胞、免疫细胞、软骨细胞和成骨细胞等6种细胞类型,其中内皮细胞特异性表达PECAM1和VWF基因;周细胞特异性表达ABCC9和KCNJ8基因;间充质细胞高表达PRRX1和POSTN基因;免疫细胞特异性表达PTPRC和LCP1基因;成骨细胞特异性表达PHEX基因;软骨细胞特异性表达IGF1R基因。说明鹿茸的生长中心有着丰富的细胞类型,鹿茸的生长发育需要这些细胞的协调作用。

鹿茸多肽多功效研究进展

鹿茸作为传统名贵中药材,医用历史悠久,功效广泛,针对肾阳不足、精血亏虚、阳痿滑精、宫冷不孕、腰脊冷痛、筋骨痿软、崩漏等症状均有良好疗效。研究发现鹿茸的多重功效与其最主要的活性成分鹿茸多肽密切相关。作为代表性动物源中药多肽,鹿茸多肽的相关研究揭示了鹿茸的物质基础和作用机制,不断为我们展现传统中药的现代奥秘。鹿茸多肽的提取方式需要保证活性和营养的最大保存,主要采用酶解法、溶液萃取法、CO_(2)超临界提取法等。笔者通过查阅国内外相关文献,系统性地归纳与总结了鹿茸多肽在人体多个系统中重要的治疗作用和保健价值,对鹿茸多肽修复神经、改善血管心肌、减轻肝细胞损伤、调节骨骼活动等多重功效进行重点介绍。为进一步挖掘开发动物药资源宝库提供理论参考,为源自动物药多肽创新药的研发提供新思路。

基于BMP-2/Runx2信号通路探讨鹿茸多肽防治PMOP机制研究

目的:探索中药单体鹿茸多肽防治PMOP机制研究。方法:选取SD雌性大鼠,去卵巢方法建立绝经后骨质疏松症模型。给药6周,测定股骨骨密度;HE染色观察骨小梁微结构;ELISA法测定P1NP、β-CTX含量、Western Blotting法测定BMP-2、Runx2蛋白表达水平、micro-CT分析骨微结构。结果:与正常及假手术组相比,OVX组大鼠骨密度明显降低,说明PMOP模型建立成功。鹿茸多肽高、中剂量组能明显提高骨密度,P<0.05。OVX组大鼠HE染色结果显示,骨小梁结构混乱,髓腔增大,骨小梁断裂,盲端增多。VAPs各组能明显改善骨小梁微结构,缩小髓腔,断裂盲端减少。对照组大鼠血清β-CTX、P1NP含量较假手术组相比显著升高,骨代谢表现为"高转换"型,VAPs中剂量组能显著降低β-CTX、P1NP含量水平,下调"高转换"型的骨代谢水平。western blotting法测定结果显示:VAPs各组能够显著提高BMP-2、Runx-2蛋白表达含量,模型组大鼠股骨大鼠矿化能力降低,骨小梁间隔增加,骨小梁Tb.Th及Tb.N.降低,Tb.Sp.升高,骨小梁结构杆状化。给药后,通过3D模式图可见,骨小梁走向一致,结构较为紧密,出现更为完整的网格状结构。结论:鹿茸多肽可能通过BMP-2/Runx2信号通路防治绝经后骨质疏松症。

基于Label-free技术的鹿角与鹿骨蛋白组分比较

旨在利用Label-free技术对天山马鹿的鹿角与鹿骨蛋白组分进行比较分析。以脱盘后130d的马鹿鹿角和鹿骨为研究对象,利用Label-free蛋白质组学技术和生物信息学方法解析比较鹿角与鹿骨的蛋白质组分。结果共成功鉴定1 138种蛋白质,其中鹿骨蛋白934种、鹿角蛋白835种。通过对成功鉴定到的蛋白质进行功能注释发现,鹿骨蛋白特异富集到了低密度脂蛋白受体代谢、黑质体发育、血管再生、细胞凋亡信号通路调节等过程;而鹿角特有蛋白富集到了肽类激素加工过程、活化T细胞增殖调节等生物学过程,其中肽类激素加工过程主要蛋白有CPE、CPN1、ECE1,活化T细胞增殖调节蛋白主要有IGF2、PRKAR1A、PYCARD。利用SPSS软件筛选鹿角与鹿骨显著差异表达蛋白(差异倍数>2,P<0.05),共筛选出差异蛋白质335种,其中75种蛋白在鹿骨中表达上调,260种蛋白在鹿角中表达上调,其中cathelicidin 1与cathelicidin 5在鹿角中为高表达,而cathelicidin 6在鹿骨中高表达。该试验结果弥补了鹿角与鹿骨蛋白质组分研究的空白,为进一步研究鹿角与鹿骨的有效成分奠定基础。

内蒙古哈民忙哈遗址出土骨、角、牙制品的初步研究

哈民忙哈遗址位于内蒙古自治区通辽市科左中旗,根据碳十四测年结果,其年代为距今5500—5000年前,共出骨、角、牙制品近百件,种类包括骨柄石刃刀、骨鱼镖、骨镞、骨针筒、骨针、骨匕、骨锥、骨簪、号角、角锥、角钻、牙饰等,还发现20余件骨角料。本次研究将从几种骨、角、牙制品的选料取材、加工工艺流程等方面进行,并对具有代表性的骨、角、牙制品进行详细研究,分析其痕迹来源、制作工艺。通过以上研究,了解原始居民所使用骨、角、牙制品的特点,推测原始居民的工具加工水平,加深对当地生产生活状况的认识。

鹿茸多肽对人骨髓间充质干细胞BMP-2和Runx2表达的影响

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中骨形态发生蛋白2(BMP-2)和骨特异性转录因子2(Runx2)基因和蛋白表达的影响,阐明其对骨合成及hBMSCs向成骨细胞方向分化的作用机制。方法:体外培养的hBMSCs分为对照组和5、10、15、20g·L-1 VAP组,通过检测各组hBMSCs中碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测对照组和10g·L-1 VAP组hBMSCs增殖情况;荧光定量PCR法与Western blotting法测定对照组和10g·L-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因与蛋白的表达。结果:VAP各组细胞中ALP活性均高于对照组,其中以10g·L-1 VAP组细胞中ALP活性最高(P<0.01);CCK-8法,10g·L-1 VAP组hBMSCs增殖率明显高于对照组(P<0.05),VAP诱导培养第9天hBMSCs增殖率最高,且进入平台期,之后hBMSCs的增殖率开始下降;荧光定量PCR和Western blotting检测,10g·L-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因及蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VAP能够提高hBMSCs中ALP活性,促进hBMSCs增殖分化,上调hBMSCs中BMP-2及其下游Runx2基因和蛋白的表达,这可能是VAP对hBMSCs骨形成及骨代谢影响的分子调控机制之一。

三种鹿茸片中氨基酸质量分数的比较

通过对东北梅花鹿茸片、新西兰鹿茸片以及东北梅花鹿茸骨片中氨基酸质量分数的比较测定,结果表明:东北梅花鹿茸片中的氨基酸质量分数高于其余两种茸片中的氨基酸质量分数,从而为合理选购和使用鹿茸片提供科学理论依据。

鹿茸多肽提取物抗去卵巢大鼠骨质疏松作用的研究

目的研究鹿茸多肽提取物对去卵巢大鼠所致骨质疏松症的影响。方法 Wistar雌性大鼠60只,适应性饲养1周,自由饮食饮水。按体重分为假手术组、模型组、阳性组、鹿茸多肽提取物高剂量组、鹿茸多肽提取物中剂量组、鹿茸多肽提取物低剂量组。采用摘除双侧卵巢法建立骨质疏松模型,造模2周后开始灌胃(Ig)给药,给药13周后观察鹿茸多肽提取物对大鼠骨密度(BMD)、血清中碱性磷酸酶(ALP)、雌二醇(E2)、磷(P)、钙(Ga)、肌酐(Gr)等指标,以及肾、子宫、阴道指标的影响。结果与模型组比较,鹿茸多肽提取物能够明显改善去卵巢大鼠骨密度、血清中E_2、P、Ga、Gr以及ALP指标的变化。结论鹿茸多肽提取物能有效的治疗去卵巢大鼠骨质疏松症状。

德国旧石器时代晚期骨角器研究及启示

骨角器在旧石器时代晚期欧亚大陆普遍出现,主要包括工具、穿孔装饰品和雕刻艺术品。这类物品通过比较固定而复杂的技术,仔细且精致地加工而成,具有较规范统一的形状,并且具有一系列新的或独特的功能,其原材料、类型、数量及与其他文化遗物的组合在时间和地理分布上呈现多样性。本文主要介绍德国旧石器时代晚期的骨角器及相关研究,透过原材料——动物资源的开发利用、开料或取坯技术、整形加工方法,展示中、西欧旧石器时代晚期骨角器工业和人类行为特点。同时,本文指出未来结合遗址中动物遗存分析以及实验和微痕观察的方法,对我国及东亚地区骨角器工业进行系统的研究,从而更好地认识区域环境中人类行为和文化发展的特点。

茸骨富钙片补钙作用的研究

目的:研究茸骨富钙片(RGB)的补钙作用。方法:大白鼠模型骨质疏松,口服RGB,以钙片为阳性对照,在2个月和4个月时测定大白鼠全身骨矿盐总量(BMC)和骨矿盐密度(BMD),4个月时测定股骨比重、股骨灰分重和股骨钙含量等。结果:①RGB4.0g/kg剂量组口服2个月和4个月时,BMC增加6.4%和8.5%,BMD增加2.9%和7.8%;2.0g/kg剂量组,BMC增加5.9%和5.6%,BMD增加2.6%和4.7%。②4.0g/kg剂量组使股骨湿比重和干比重增加4.1%和6.2%;2.0g/kg剂量组使股骨湿比重和干比重增加2.2%和2.8%。③4.0g/kg剂量组使单位体积股骨内灰分重和Ca含量增加4.2%和6.3%;2.0g/kg剂量组使单位体积股骨内灰分重量和Ca含量增加3.0%和3.9%。结论:RGB对模型骨质疏松大白鼠有明显的补钙作用,并显著改善大白鼠骨质疏松症状。

塔里木马鹿生茸期机体骨骼Ca^(2+)变化规律研究

为了确定不同年龄段塔里木马鹿生茸期机体骨骼中Ca^(2+)的变化规律,试验选取老、中、青三个年龄段的塔里木马鹿各3头,分别于生茸前期、生茸期、骨化期三个不同时期屠宰后取其机体各部位骨骼,采用火焰原子吸收分光光度法进行骨中Ca^(2+)含量的检测。结果表明:中年组塔里木马鹿在三个不同时期Ca^(2+)含量均最高,其次是老年组,最后是青年组;老、中、青三个组机体骨骼Ca^(2+)含量随鹿茸的生长及骨化均呈下降趋势,这表明其对鹿茸生长与骨化均有供钙作用;但各类骨骼中肋骨Ca^(2+)在整个生茸期内变化幅度最大,其对鹿茸生长及骨化的贡献值最高。

重庆玉米洞遗址发现的骨角牙制品初步研究

在狩猎采集经济的旧石器时代,古人类依赖动物而生存。作为动物资源的副产品,骨角牙制品是古人类对肉食资源深度开发利用的表现。玉米洞遗址是重庆巫山县新发现的一处文化面貌特殊的旧石器时代洞穴遗址,其骨角牙制品颇具特色。本文主要对该遗址的骨角牙制品进行初步的类型学研究,将观察的材料分为骨器(n=104)、骨片(n=2)、骨断块(n=5)、牙器(n=6)和角器(n=3)进行详细记述;同时试图从操作链角度分析该遗址骨角牙制品的制作技术和反映的人类行为,显示出古人类简单粗放、灵活高效的技术特征和生存策略;最后对该遗址出土骨角牙器的时代及古人类行为现代性问题进行了探讨,认为玉米洞的骨角牙器的时代介于中更新世-早全新世,简单加工骨角牙制品与精致加工骨角器之间存在连续或断续的发展演变关系,以骨角器的发现作为衡量中国古人类"行为现代性"的标准需要重新考量。

鹿茸发生和再生的组织基础及其研究进展

通过对鹿茸生长发育机理研究的整理和总结，阐述了鹿茸发生和再生过程中的组织变化，特别是关于生茸区骨膜和角柄骨膜的研究，取得了重要的成果．生茸区骨膜切除后不能发生角柄和鹿茸，而被移植了生茸区骨膜的位置则生长角柄和鹿茸，证明了生茸区骨膜是鹿茸发生的组织基础，确定了生茸区骨膜中存在鹿茸再生干细胞，为进一步研究鹿茸的生长发育机理提供了重要的依据和参考．

鹿茸多肽对人骨髓间质干细胞体外增殖的影响

为探讨鹿茸多肽 (PAP)对人骨髓间质干细胞 (MSCs)体外增殖的影响 ,采用密度梯度离心法分离扩增骨髓间质干细胞 ,并用流式细胞术检测其表面标志 ;用MTT比色、免疫组化检测增殖细胞核抗原 (PCNA)、流式细胞术检测细胞周期等方法来反映MSCs的增殖。结果CD3 4 、CD45表达阴性 ,CD2 9、CD90 表达阳性 ;1 0 μg/ml时PAP获得最佳促进MSCs增殖效应 ,且PAP能消除MSCs在体外连续培养过程中异倍体的产生。说明PAP对人MSCs的增殖有明显促进作用 ,且能防止MSCs在体外连续培养过程中异行性的产生 ,为种子细胞的优化提供了理论和实验依据。

鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其机制

目的:制备鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,探讨其对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其可能机制。方法:将胶原溶液和壳聚糖溶液充分混匀,采用戊二醛交联法制备复合材料,扫描电子显微镜(SEM)下观察复合材料的微观结构。选择36只家兔建立兔下颌骨单侧缺损模型,分为实验组和对照组,每组又设4、8和12周亚组,每亚组各6只家兔。实验组家兔植入鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,对照组家兔不植入任何材料。分别于术后4、8和12周采用CT观察家兔造模部位的组织学及周围神经重建情况,免疫组织化学法检测家兔骨组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达量,SEM下观察骨缺损处的超微结构。结果:复合材料呈现规则的层状皱褶结构,支架内部孔径变大且以片状结构为主,是生物材料理想的结构。术后4周,实验组家兔有新骨生成,新生骨样组织致密材料大部分降解,VEGF呈高表达;术后8周,实验组家兔中的骨缺损部位骨小梁明显增多,VEGF表达呈下降趋势;术后12周,实验组家兔新骨形成且密度基本与正常组织一致,VEGF表达恢复正常。术后各时间点实验组家兔骨缺损愈合程度和成骨速度明显优于对照组。结论:鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合具有明显的促进作用,其机制可能与促进VEGF表达有关。

鹿瓜多肽注射液对去卵巢大鼠骨密度及松质骨中骨形态发生蛋白表达的影响

目的探讨鹿瓜多肽(松梅乐)注射液肌肉注射对去卵巢大鼠骨密度及松质骨中骨形态发生蛋白(BMP2)表达的影响。方法将8月龄未经产雌性二级SD大鼠30只,随机分为假手术(SHAM)组、去势(VOX)组、去势+鹿瓜多肽(VOX+SML)组。VOX+SML组大鼠术后第2天开始给药。术后20周处死各组大鼠,对各组大鼠骨密度进行检测。利用免疫组织化学染色及图像分析方法对各组大鼠松质骨切片图像进行灰度分析,观察鹿瓜多肽注射对去势大鼠腰椎松质骨中BMP2表达的影响。结果①去势组与SHAM组相比较,灰度值降低,而(VOX+SML)治疗组较VOX组灰度值降低,表明VOX大鼠松质骨中骨小梁周围及髓腔内BMP2表达阳性细胞数明显多于SHAM组;而(VOX+SML)治疗组骨小梁周围及髓腔内BMP2表达阳性细胞数多于VOX组,且染色加深。②与SHAM组相比,VOX组股骨近端、股骨干、腰椎的骨密度明显降低(P<0.01);(VOX+SML)治疗组各部位的骨密度高于VOX组(P<0.05),但未达到SHAM组水平(P>0.05)。结论鹿瓜多肽注射液可抑制和延缓骨质疏松形成,对雌激素缺乏引起的骨质疏松具有预防作用。

聚丙交酯-乙交酯微球搭载鹿茸多肽联合骨髓间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用及其机制

目的:观察聚丙交酯-乙交酯(PLGA)微球搭载的鹿茸多肽(VAP)联合骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对大鼠坐骨神经损伤的修复作用,探讨其相关作用机制。方法:横断法复制大鼠外周神经损伤模型。60只大鼠随机分为坐骨神经横断对照组(对照组)、VAP微球组(VAP组)、BMMSCs移植组(BMC组)和VAP微球联合BMMSCs移植组(VAP-BMC组),每组15只。造模7d后,对照组大鼠在横断坐骨神经区域注射PBS溶液,VAP组大鼠在相同位置注射含有载药PLGA微球的PBS溶液,BMC组大鼠注射含有BMMSCs的PBS溶液,VAP-BMC组大鼠注射含有载药PLGA微球和BMMSCs的PBS溶液。3个月后采用Basso、Breattie和Bresnahan (BBB)运动评级量表评估各组大鼠的神经功能,HE染色检测各组大鼠坐骨神经组织形态表现,Western blotting法检测各组大鼠坐骨神经组织中二硫键异构酶(PDI)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP-78)和半胱胺酸蛋白酶12 (Caspase-12)蛋白表达水平。结果:BBB运动评级量表评估,与对照组比较,VAP组、BMC组和VAP-BMC组大鼠BBB评分升高(P<0.01),以VAP-BMC组大鼠BBB评分升高最明显。HE染色,与对照组比较,VAP组、BMC组和VAP-BMC组大鼠坐骨神经纤维更粗,轴突直径更长(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,VAP组、BMC组和VAP-BMC组大鼠坐骨神经组织中PDI和Caspase-12蛋白表达水平明显降低(P<0.01),VAP-BMC组大鼠坐骨神经组织中GRP-78蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:PLGA微球搭载VAP联合BMMSCs可促进受损坐骨神经的修复,其作用机制可能与抑制内质网应激有关联。

谈新发现的鹿角骨刻辞

新近发现一件鹿角骨,该鹿角骨经过整治,上刻有一写法特殊的"鱼"字,"鱼"字上加注有"午"声,跟以往卜辞中发现的"鲁"字所从的"鱼"字也从"午"声相合。推测鹿角骨的用途或是作为纪念品或吉祥物,或是作为游戏或赌博的工具。

梅花鹿骨钙素的原核表达与活性研究

目的利用基因工程技术表达纯化梅花鹿骨钙素重组蛋白(Bone gla protein,BGP)并初步研究其活性,为研究梅花鹿茸生长发育提供技术支撑。方法通过PCR技术获取BGP基因,构建p GEX-BGP-His表达载体,并转化至Rosseta(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达。经Ni Sephrose 6 Fast Flow分离纯化,SDS-PAGE鉴定纯化产物。MTT法分析BGP对鹿茸软骨细胞chon-sv40的生物活性。结果经双酶切、测序证实p GEX-BGP-His表达载体构建成功;成功诱导表达相对分子量33.5 KDa的重组蛋白;以37℃,0.1 mmol/L IPTG诱导5 h条件下重组蛋白表达量较高;蛋白纯化后纯度可达95%;重组蛋白对鹿茸软骨细胞chon-sv40具有明显促增殖作用。结论骨钙素与鹿茸软骨细胞chon-sv40的增殖密切相关,为后续BGP在骨代谢机制以及鹿茸有效成分的研究奠定基础,对鹿茸生长机制的研究具有重要意义。