Apelin-13抑制巨噬细胞M1极化缓解全身炎症性骨丢失

背景:Apelin-13因具有抗炎和抗氧化等生物活性,在神经炎症、心血管损伤和肺炎等临床常见疾病中发挥着有效的治疗作用,然而对于Apelin-13在治疗炎症性骨丢失中是否同样具有良好的疗效目前尚无相关基础研究。目的:探究Apelin-13对炎症性骨丢失的治疗作用及其机制,以期探究治疗炎症性骨丢失的潜在药物。方法:①体外实验:将RAW264.7细胞分为3组:对照组,脂多糖组和治疗组。对照组只加入DMEM完全培养基;脂多糖组加入脂多糖(100 ng/mL)诱导炎症DMEM培养基;治疗组加入10 nmol/L Apelin-13+脂多糖诱导炎症DMEM培养基。诱导炎症24 h后,使用Western Blot检测M1型巨噬细胞的标志蛋白诱导型一氧化氮合酶和CD86的表达,并使用细胞免疫荧光染色检测诱导型一氧化氮合酶的表达。并在对照组、脂多糖组和治疗组中同时加入等量的核因子κB受体活化因子配体(50 ng/mL)诱导破骨细胞,诱导6 d后使用抗酒石酸酸性磷酸酶染色和F-actin染色评估破骨细胞诱导的结果。②体内实验:将18只C57BL/6雄性小鼠随机分为3组:假手术组、脂多糖组、治疗组。假手术组连续1周在小鼠腹腔内注射0.1 mL的PBS;脂多糖组注射0.1 mL含脂多糖(5 mg/kg)的PBS稀释液;治疗组注射0.1 mL含脂多糖(5 mg/kg)+Apelin-13(100μg/kg)的PBS稀释液。3组小鼠连续腹腔注射7 d,于第8天处死小鼠,收集每只小鼠的2个股骨,一半进行micro-CT扫描和骨参数分析,另一半进行苏木精-伊红染色。结果与结论:①体外实验:Western Blot结果显示,脂多糖组诱导型一氧化氮合酶和CD86的表达较对照组明显增多,而Apelin-13能够显著抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1极化,细胞免疫荧光的结果也显示治疗组诱导型一氧化氮合酶的表达较脂多糖组减少,同时抗酒石酸酸性磷酸酶染色和F-actin染色结果显示Apelin-13抑制脂多糖诱导的破骨细胞异常活化及骨吸收能力。②体内实验:micro-CT结果显示全身炎性导致股骨远端骨质出现明显丢失,而Apelin-13则能够显著抑制骨质的流失,苏木精-伊红染色结果也表明Apelin-13能够有效缓解炎症诱导的小鼠股骨远端骨质流失。③结果表明:Apelin-13能够通过抑制巨噬细胞M1极化,抑制破骨细胞的异常激活和骨吸收能力,缓解全身炎症诱导的骨丢失。

(Pyr1)Apelin-13对布比卡因诱导停搏乳鼠心肌细胞PI3K/Akt通路的干预

目的:探讨Apelin/APJ系统在逆转布比卡因心肌毒性中的作用及机制。方法:提取乳鼠心肌细胞进行原代培养,随机分为4组:空白培养基组(DMSO组)、布比卡因1 mmol/L(Bup组)、(Pyr1)Apelin-132μmol/L组(Apl组)和布比卡因1 mmol/L+(Pyr1)Apelin-132μmol/L组(BAp组)。记录各组细胞基础自主搏动次数后,按照相应分组给药处理6 h。处理完毕后时间记为T0,记录T0至T12不同时间的细胞搏动次数;电镜下观察T12时心肌细胞线粒体形态;比色法检测T12时细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)含量;ELISA检测T12时心肌细胞中Apelin-13浓度;Western blot检测T12时心肌细胞中APJ、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达。结果:T0时Bup组全部心肌细胞停止搏动。与DMSO组比较,Bup组细胞搏动次数显著减少(P<0.05),线粒体肿胀空泡化,培养液LDH含量明显上升(P<0.05),心肌细胞中Apelin-13、APJ、p-PI3K和p-Akt蛋白表达均下调(P<0.05)。与Bup组比较,BAp组细胞搏动次数显著增加(P<0.05),线粒体结构明显改善,培养液LDH含量明显下降(P<0.05),心肌细胞中Apelin-13,APJ、p-PI3K和p-Akt蛋白表达均上调(P<0.05)。结论:(Pyr1)Apelin-13可逆转布比卡因诱导的心肌细胞停搏,机制也许与激活PI3K/Akt蛋白磷酸化有关。

心房颤动患者血清脂蛋白a、Apelin-13、转化生长因子β1水平与左心房内径的关系

目的 探讨心房颤动(AF)患者血清脂蛋白a[Lp(a)]、Apelin-13、转化生长因子β1(TGF-β1)及左心房内径(LAD)间的关系。方法 2022年12月至2024年1月,选择在滁州市第一人民医院心内科住院患者100例,按照是否发生AF分为2组,AF组50例,非AF(NAF)组50例。检测2组患者血清Lp(a)、Apelin-13、TGF-β1水平,采用经胸超声心动图检查左心房内径并进行相关性分析。结果 AF组Lp(a)、TGF-β1水平及LAD升高,Apelin-13水平降低,与NAF组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,Lp(a)、TGF-β1、舒张压及LAD为AF的危险因素,Apelin-13为AF的保护因素(P<0.05),且Lp(a)、TGF-β1、LAD及Apelin-13对AF具有预测价值(P<0.05)。线性回归结果显示,Lp(a)、TGF-β1、Apelin-13对LAD的回归系数分别为0.01(P>0.05)、-0.04(P>0.05)、-1.22(P<0.05)。结论 Lp(a)、TGF-β1及LAD为AF的独立危险因素;但Lp(a)、TGF-β1与LAD无明确相关性;Apelin-13作为AF独立保护因素,与LAD呈负相关。

CT肺动脉血管造影联合血清Apelin-13、IL-38在急性肺栓塞诊断中的临床价值

目的探究CT肺动脉血管造影(CTPA)联合血清Apelin-13、白细胞介素-38(IL-38)在急性肺栓塞(APE)诊断中的临床价值。方法选取2021年5月-2023年5月本院收治的116例疑似APE患者,患者均行CTPA,根据其检测结果分为APE组和非APE组;酶联免疫吸附法检测Apelin-13、IL-38水平;APE的影响因素采用多因素Logistic回归分析;绘制ROC曲线分析血清Apelin-13、IL-38对APE的诊断价值。结果116例患者经过CTPA诊断出APE 49例(42.24%),主要包括23例中心型,82例偏心型,15例附壁血栓型,19例完全堵塞型。APE组血清Apelin-13、IL-38水平显著高于非APE组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析得知Apelin-13、IL-38为影响APE的危险因素(P<0.05)。根据ROC曲线得知,血清Apelin-13诊断APE的AUC为0.859,血清IL-38诊断APE的AUC为0.864,二者联合诊断APE的AUC为0.952,二者联合优于各自单独诊断(Z_(联合vs Apelin-13)=2.681、Z_(联合vs IL-38)=2.739,P均<0.05)。结论Apelin-13、IL-38在APE患者血清中明显升高,CTPA可显示APE的部位和类型,CTPA联合血清Apelin-13、IL-38可提高APE的诊断价值。

FGF23、ANGPTL4、Apelin-13与急性缺血性脑卒中患者病情及溶栓治疗短期预后的相关性

目的 探究成纤维生长因子23(FGF23)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、Apelin-13与急性缺血性脑卒中(AIS)患者病情及溶栓治疗短期预后的关系。方法 选取2020年7月到2023年7月首都医科大学附属北京康复医院收治的120例AIS患者,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者入院时神经功能损伤程度并分为轻度组35例、中度组54例、重度组31例;采用头颅MRI检查评估患者梗死病灶面积并分为腔隙性脑梗死组31例、中等面积梗死组52例,大面积脑梗死组37例;采用改良Rankin量表评估患者溶栓治疗后90 d的预后情况并分为预后良好组82例和预后不良组38例。比较各组患者血清学指标FGF23、ANGPTL4、Apelin-13水平,采用多因素logistic回归分析AIS患者短期预后影响因素。结果 不同神经损伤程度的AIS患者血清FGF23水平为:轻度组<中度组<重度组,血清ANGPTL4、Apelin-13水平为:轻度组>中度组>重度组,差异均有统计学意义(F=9.685、8.418、13.695,P<0.05);不同梗死面积的AIS患者血清FGF23水平为:腔隙性脑梗死组<中等面积梗死组<大面积脑梗死组,血清ANGPTL4、Apelin-13水平为:腔隙性脑梗死组>中等面积梗死组>大面积脑梗死组,差异均有统计学意义(F=8.652、7.579、18.659,P<0.05);预后不良组年龄、病灶最大直径、入院时NIHSS评分、血清FGF23水平均高于预后良好组,血清ANGPTL4、Apelin-13水平均低于预后良好组,差异均有统计学意义(t=3.147、4.725、7.309、3.364、4.869、5.766,P<0.05);病灶最大直径≥5 cm、入院时NIHSS评分≥20分、高水平FGF23均是AIS患者静脉溶栓治疗短期预后不良的独立危险因素,高水平的ANGPTL4及Apelin-13是其保护因素(P<0.05)。结论 FGF23、ANGPTL4、Apelin-13与AIS患者病情程度及短期预后密切相关,检测三指标水平有助于AIS病情及预后评估。

Apelin-13在冠心病诊治作用中的研究进展

Apelin-13作为Apelin最主要的亚型之一,广泛存在于心血管系统中,其结构稳定且活性较强,通过改善内皮功能、舒张血管调节血压等来保护心肌。冠心病作为心血管疾病谱系中的高发疾病,严重影响人类健康。相关研究表明,Apelin-13在冠心病的发生发展中起重要作用。现对Apelin-13在冠心病中的作用机制、诊断价值及治疗意义进行综述。

血清Apelin-13、脂肪酸结合蛋白4水平与绝经后骨质疏松症的相关性研究

目的探讨血清Apelin-13、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)水平与不同骨量绝经后女性代谢参数和骨代谢指标的相关性。方法选取145例绝经后女性作为研究对象,根据骨密度(BMD)检测结果分为骨量正常组49例、骨量减少(ON)组51例和骨质疏松(OP)组45例,测定并比较3组血清Apelin-13、FABP4水平和骨代谢指标、生化指标水平。采用Spearman相关分析法分析Apelin-13、FABP4等指标与BMD的相关性,采用多因素Logistic回归分析法分析OP的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Apelin-13对绝经后骨质疏松症(PMOP)的预测价值。结果OP组血清Apelin-13水平低于ON组、骨量正常组,差异有统计学意义(P<0.05);3组血清FABP4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);OP组血清甲状旁腺激素(PTH)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)、Ⅰ型胶原交联C端肽(CTXⅠ)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平高于ON组、骨量正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。绝经后女性腰椎BMD与血清Apelin-13水平呈正相关(P<0.05),与血清FABP4水平无相关性(P>0.05);腰椎BMD与血清PTH、ALP、PⅠNP、CTXⅠ、BALP和年龄呈负相关(P<0.05),与体质量、体质量指数、T值、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清Apelin-13、PTH、ALP、PⅠNP、CTXⅠ、BALP水平均为绝经后女性发生OP的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清Apelin-13预测PMOP的最佳临界值为18.51 pg/mL,曲线下面积为0.716,敏感度为70.0%,特异度为64.4%。结论Apelin-13在PMOP患者血清中呈低表达,且其表达水平与腰椎BMD密切相关,或可作为PMOP的早期筛查指标和潜在治疗靶点。

Apelin-13通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制脑缺血再灌注损伤小鼠细胞焦亡

目的:探究Apelin-13调节肽对脑缺血再灌注(I/R)损伤模型小鼠神经细胞焦亡的影响。方法:利用大脑中动脉栓塞再灌注法(MCAO/R)制备小鼠I/R损伤模型,氧糖剥夺/复氧(OGD/R)法制备HT22细胞损伤模型,同时给予Apelin-13处理。神经功能缺损评分评估小鼠神经功能;苏木精-伊红染色法(HE)和尼氏染色观察小鼠脑梗死区组织形态变化;2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积;Western Blot检测梗死区脑组织或者HT22细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)等分子的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清及培养上清中IL-1β和IL-18的水平;用CCK-8试剂盒和乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒分别检测HT22细胞活性和细胞损伤;caspase-1活性检测试剂盒检测HT22细胞中caspase-1的活性;免疫荧光染色观察HT22细胞中caspase-1和GSDMD表达。结果:Apelin-13可显著改善I/R小鼠神经功能和脑梗死体积,减轻梗死区病理损伤。同时降低血清中IL-1β和IL-18的水平。此外,Apelin-13可降低小鼠脑梗死区NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的表达。体外实验表明Apelin-13可显著增加OGD/R处理的HT22细胞活力,降低caspase-1活性,并减少LDH含量,同时降低OGD/R处理的HT22细胞中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的表达。结论:Apelin-13可通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制脑缺血再灌注损伤小鼠细胞焦亡,进而发挥神经保护作用。

原发性肾病综合征儿童血清Apelin-13 FOXO1表达水平及其临床意义

目的探究原发性肾病综合征儿童血清Apelin-13、FOXO1表达水平及其临床意义。方法选取2019年1月至2022年12月在本院收治的183例原发性肾病综合征儿童作为研究组。另选取同时期在本院体检的185名体检健康的儿童作为对照组,苏木精-伊红(ELISA)法检测血清Apelin-13、FOX-O1水平;采用Pearson法分析Apelin-13、FOXO1水平与血脂指标的关系;使用受试者工作特征(ROC)曲线分析Apelin-13、FOXO1对原发性肾病综合征的诊断价值;多因素Logistic回归分析影响原发性肾病综合征发生的危险因素。结果与对照组比较,研究组患儿血清Apelin-13水平降低,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(apo)B、FOXO1水平升高(P<0.05);与研究组治疗前比较,治疗后血清Apelin-13水平升高,TG、TC、LDL-C、apoB、FOXO1水平降低(P<0.05);Pearson相关性分析表明,原发性肾病综合征患儿血清Apelin-13与TG、TC、LDL-C、apoB均呈负相关,FOXO1与TG、TC、LDL-C、apoB均呈正相关(P<0.05);ROC曲线分析表明,Apelin-13、FOXO1诊断原发性肾病综合征发生的曲线下面积(AUC)为0.795、0.734,二者联合诊断的AUC为0.920;多因素Logistic回归分析显示,Apelin-13与FOX-O1是影响原发性肾病综合征发生的危险因素。结论原发性肾病综合征儿童血清Apelin-13呈低表达、FOXO1呈高表达,二者与血脂水平有关,并且对原发性肾病综合征具有一定的诊断价值。

帕金森患者血清apelin-13、CXCL12水平与认知功能障碍的相关性及其诊断价值

目的探究帕金森(PD)患者血清apelin-13、趋化因子12(CXCL12)水平与认知功能障碍的相关性及其诊断价值。方法选取2016年1月至2021年1月郑州中心医院神经内科收治的80例PD患者作为PD组,根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将PD患者分为认知障碍组48例(<26分)与非认知障碍组32例(≥26分);根据PD患者的H-Y评级和统一PD评分量表(UDPRSⅢ)评分将其分为H-Y 1~2期35例,H-Y 3期25例,H-Y 4期20例。同期选择于我院体检的80例健康志愿者作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测所有受检者的血清apelin-13、CXCL12水平;采用Pearson法分析PD患者血清中apelin-13与CXCL12表达水平的相关性;采用Spearman法分析血清中apelin-13、CXCL12表达水平与MoCA评分的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清apelin-13、CXCL12水平对PD的诊断价值。结果PD组患者的血清apelin-13水平为(12.36±1.54)ng/mL,明显低于对照组的(14.65±1.63)ng/mL,CXCL12水平为(21.52±2.48)ng/mL,明显高于对照组的(17.08±2.45)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);随着H-Y分期的增加,apelin-13水平显著降低,CXCL12水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);认知障碍组患者的血清apelin-13水平为(11.76±1.55)ng/mL,明显低于非认知障碍组的(13.25±1.53)ng/mL,CXCL12水平为(22.46±2.45)ng/mL,明显高于非认知障碍组的(20.10±2.52)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson法分析结果显示,PD患者血清中apelin-13与CXCL12表达水平呈负相关(r=-0.522,P<0.01);经Spearman法分析结果显示,血清中apelin-13表达水平与MoCA评分呈正相关(r=0.660,P<0.01),CXCL12表达水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.482,P<0.01);经ROC分析结果显示,apelin-13、CXCL12两者联合检测诊断PD发生的AUC为0.943,明显高于apelin-13和CXCL12单独诊断的AUC值(分别为0.870、0.888)(Z=22.930、25.121,P<0.01)。结论PD患者血清中apelin-13呈低表达,CXCL12呈高表达,与患者认知功能障碍具有相关性,对PD具有临床诊断价值。

阶段性减压控制辅助大骨瓣手术治疗重型颅脑损伤对患者血清CNP、Apelin-13、GFAP水平的影响

目的:探讨阶段性减压控制辅助大骨瓣手术治疗重型颅脑损伤的效果及对患者血清C型利钠肽(CNP)、Apelin-13、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平的影响。方法:回顾性分析某院2021年1月—2023年6月诊治的106例重型颅脑损伤患者临床资料,按照手术方案不同将接受传统大骨瓣手术治疗的50例患者纳入对照组,接受阶段性减压控制辅助大骨瓣手术治疗的56例患者纳入观察组。比较2组临床疗效、血清CNP、Apelin-13、GFAP水平、并发症发生情况及预后情况[Glasgow昏迷(GCS)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分]。结果:观察组临床总有效率为96.43%,高于对照组的84.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。术后,观察组血清CNP、Apelin-13水平分别为(16.73±3.99)pg/mL、(29.47±4.39)ng/mL,高于对照组的(12.00±3.28)pg/mL、(24.95±6.72)ng/mL,GFAP水平为(2.00±0.32)pg/mL,低于对照组的(2.47±0.76)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。住院期间,观察组患者并发症总发生率为7.14%,低于对照组的24.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。术后2周,观察组GCS评分为(10.48±2.75)分,高于对照组的(8.42±1.88)分,NIHSS评分为(12.36±3.21)分,低于对照组的(18.36±3.24)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阶段性减压控制辅助大骨瓣手术治疗重型颅脑损伤患者疗效显著,可提高患者血清CNP、Apelin-13水平,降低GFAP水平,减少并发症发生率,改善患者预后。

年龄-肌酐-射血分数评分联合Apelin-13对川崎病患儿冠状动脉病变的预测效果

目的探讨年龄-肌酐-射血分数(ACEF)评分联合Apelin-13对川崎病患儿冠状动脉病变(CAL)的预测效果。方法回顾性分析185例川崎病患儿临床资料,依据是否并发CAL将其分为CAL组(n=35)和非CAL组(n=150)。比较两组患儿的临床资料,应用多因素Logistic回归分析法分析川崎病患儿发生CAL的影响因素,应用受试者操作特征(ROC)曲线分析ACEF评分联合Apelin-13预测川崎病患儿发生CAL的价值。结果CAL组患儿发热持续时间>10 d的占比、ACEF评分,以及C反应蛋白、肌钙蛋白I、D-二聚体、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、氨基末端脑钠肽前体、肿瘤坏死因子-α水平均高于非CAL组,Apelin-13水平、红细胞沉降率、血红蛋白水平均低于非CAL组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,发热持续时间、ACEF评分、Apelin-13水平、IL-10水平均为川崎病患儿发生CAL的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,ACEF评分和Apelin-13水平对川崎病患儿发生CAL均有一定预测价值,且二者联合的预测价值优于单项预测。结论ACEF评分和Apelin-13水平均为川崎病患儿发生CAL的影响因素,二者联合对川崎病患儿发生CAL有较佳的预测价值。

急性脑梗死患者不同时期Apelin-13及应激相关蛋白水平的变化及其与预后的关系研究

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者不同时期Apelin-13和应激相关蛋白热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)水平的变化及其与预后的相关性。方法选取2013年1月—2014年12月在复旦大学附属上海市第五人民医院确诊为ACI的患者50例作为ACI组,另选取同期在本院体检正常者40例作为对照组。采集两组受试者血液,并检测对照组和ACI组发病第1、3、7、14、21、30天Apelin-13、HSP-70、β-EP水平。ACI患者根据改良Rankin分级法评估预后,分为预后好(n=28)、一般(n=15)、差(n=7),并比较不同预后患者发病第1天的Apelin-13、HSP-70、β-EP水平、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、美国国立卫生研究所卒中量表(NHISS)评分、洼田饮水试验分级。结果对照组、ACI组不同时期Apelin-13、HSP-70水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),β-EP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);其中ACI组第1天Apelin-13水平低于对照组,ACI组第14、21、30天Apelin-13水平高于ACI组第1天(P<0.05);ACI组第1、3天HSP-70水平高于对照组,ACI组第3、7、14、21、30天HSP-70水平低于ACI组第1天(P<0.05)。ACI患者Apelin-13与HSP-70呈直线负相关(r=-0.909,P=0.012),Apelin-13与β-EP无直线相关性(r=-0.172,P=0.744),HSP-70与β-EP无直线相关性(r=0.121,P=0.820)。不同预后ACI患者β-EP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同预后ACI患者Apelin-13、HSP-70水平、GCS评分、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中预后差者Apelin-13水平、GCS评分均低于预后好和预后一般者,HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好和预后一般者(P<0.05);预后一般者GCS评分低于预后好者,APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好者(P<0.05)。结论Apelin-13水平在ACI发病第1天降低,随ACI病程逐渐升高;HSP-70水平在ACI发病第1天升高,随ACI病程逐渐下降。预后差的ACI患者发病第1天的Apelin-13水平、GCS评分低于预后一般和预后好者,而HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后一般和预后好者,可以根据这些指标的变化判断ACI患者预后。

急性肺栓塞患者血清Apelin-13、Copeptin及D-D水平与疾病严重程度和预后的相关性研究

目的研究急性肺栓塞患者血清中Apelin-13、合肽素(Copeptin)与D-二聚体(D-dimer,D-D)表达水平并分析其与疾病严重程度和预后的相关性。方法将2013年9月-2018年9月我院收治的183例急性肺栓塞患者定义为观察组,将同期于我院体检的183例健康成年人定为对照组,比较两组患者临床资料、血清Apelin-13、Copeptin与D-D表达水平。将观察组患者按CTPA图像所示阻塞程度进行分级,比较不同分级患者血清Apelin-13、Copeptin与D-D水平,并分析其相关性;统计患者生存及死亡情况,比较不同预后患者血清Apelin-13、Copeptin与D-D水平,并分析其相关性。结果两组性别、年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)、胆固醇、甘油三酯、血红蛋白水平无统计学差异(P>0.05);观察组血清Apelin-13、Copeptin与D-D表达水平均高于对照组(P<0.05);观察组中,1、2、3、4级患者例数分别为38、61、54、30例,随着分级的增加,血清Apelin-13、Copeptin与D-D水平也逐渐增加(P<0.05),血清Apelin-13、Copeptin与D-D水平与肺栓塞分级间呈正相关(r=0.349,P=0.021;r=0.422,P=0.036;r=0.534,P=0.009);观察组中21例患者死亡,死亡患者的血清Apelin-13、Copeptin与D-D表达水平高于存活患者(P<0.05),血清Apelin-13、Copeptin与D-D水平与死亡事件的发生呈正相关(r=0.425,P=0.014;r=0.458,P=0.005;r=0.608,P=0.010)。结论患者血清中Apelin-13、Copeptin与D-D水平可作为反映急性肺栓塞患者疾病严重程度和预后的生物学指标,指导临床治疗。

Apelin-13对5-Aza诱导脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的探讨apelin-13蛋白在体外对5-氮胞苷(5-Aza)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向心肌细胞分化的影响。方法采用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,胰酶消化传代;取P2代细胞置于不同分化条件的培养液中分化培养14d,实验分为A、B、C、D组(apelin-13浓度分别为0、1×10-6、2×10-6和10×10-6mol/L),各组培养基中5-Aza浓度均为10×10-6mol/L。采用流式细胞仪检测hUC-MSCs表面免疫标记,MTT法检测细胞在570nm处的吸光度(A)值,RTPCR检测肌钙蛋白T(cTnT)、GATA-4 mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测心肌细胞表面标志物cTnT的表达。结果流式细胞仪鉴定结果表明,hUC-MSCs表达CD44、CD90、CD105、CD73、经典人类白细胞抗原Ⅰ类抗原(HLAABC),不表达CD34、CD45、经典人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(HLA-DR)。MTT检测显示,0、10×10-6mol/L apelin-13处理的hUC-MSCs在570nm处的A值分别为0.841±0.290、0.875±0.325,差异无统计学意义(P>0.05)。B、C、D组cTnT mRNA表达水平分别是A组的2.09±1.35、5.24±1.30、1.17±0.63倍,B、C、D组GATA-4 mRNA表达水平分别是A组的2.68±1.18、4.82±0.14、2.14±0.27倍;C组与B、D组比较,cTnT、GATA-4 mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色显示,诱导14d后C组细胞cTnT蛋白表达呈阳性。结论 10×10-6mol/L apelin-13对hUC-MSCs无毒性作用,一定浓度的apelin-13蛋白可增强5-Aza诱导hUC-MSCs向心肌细胞分化的效率,浓度为2×10-6mol/L时增强作用最明显。

2型糖尿病血清Apelin-13的变化水平与骨质疏松症的关系

目的探讨血清Apelin-13的水平与骨密度(bone mineral density,BMD)等指标的关系,确定Apelin-13对2型糖尿病患者骨质疏松症的影响。方法纳入2015年1月至2017年9月在我院就诊的152例2型糖尿病患者,将患者分为3组,其中骨质疏松组38例,骨量减少组50例,正常组64例。记录所有患者的临床资料,包括年龄、性别、身高、体重、体质量指数和疾病持续时间。收集血液样品用于测量Apelin-13、I型前胶原氨基端前肽(procollagen type-I N propeptide,PINP)、I型胶原羧基端肽(pyridinoline cross-linked carboxyterminal telopeptide of typeⅠcollagen,ICTP),并用双能X线吸收扫描仪测量患者的BMD。结果 Apelin-13水平在骨质疏松组明显低于骨量减少组和正常组(P<0.05),骨量减少组明显低于正常组(P<0.05)。相关分析显示,Apelin-13水平与BMD和PINP呈正相关(P<0.05),与年龄、ICTP呈负相关(P<0.05)。结论本研究表明Apelin-13和BMD、ICTP与PINP之间存在密切关系。

ERK1/2参与自发性高血压大鼠离体血管环对apelin-13舒张反应性降低作用

研究自发性高血压大鼠(spontanously hypertensive rat,SHR)离体血管环对G蛋白偶联受体APJ的内源性配体apelin-13的血管收缩与舒张反应及其与一氧化氮(NO)和ERK1/2通路关系.采用离体血管环体外灌流方法用Power-Lab生物信息采集仪检测血管环的张力.实验分组如下:新福林(Phenylephrine,PE)组,乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)组,apelin-13组,apelin-13+PE组,apelin-13+Ach组,PD98059(ERK1/2抑制剂)+PE组,PD98059+Ach组,LNNA(L-nitro-arginine,硝基左旋精氨酸,一氧化氮合酶抑制剂)+PE组,LNNA+Ach组,apelin-13(预孵育)+PD98059+PE组,apelin-13(预孵育)+PD98059+Ach组,apelin-13(预孵育)+LNNA+PE组和apelin-13(预孵育)+LNNA+Ach组,以WKY大鼠血管环为对照组.培养大鼠血管平滑肌细胞,Western blot检测ERK1/2蛋白表达.结果显示:a.apelin-13对于有内皮的血管表现出浓度依赖性舒张作用,血管舒张百分比SHR<WKY大鼠,而对于去除内皮血管,apelin-13则表现出收缩血管的作用,且收缩张力SHR>WKY大鼠,apelin-13预孵育,能减少SHR和WKY大鼠血管对新福林的缩血管反应性,增加对乙酰胆碱的舒张反应性;b.NOS抑制剂LNNA阻断NO形成后,血管环对apelin-13的舒张反应明显抑制,且SHR组较WKY组对apelin的舒张反应减少更明显,提示apelin-13的舒血管效应至少部分依赖NO通路,而SHR高血压大鼠NO通路障碍减弱了apelin对血管的舒张作用;c.ERK1/2抑制剂PD98059预孵育后血管环对apelin-13表现出浓度依赖性的收缩,与去除内皮后apelin-13的收缩血管效应趋势一致,血管收缩张力SHR>WKY大鼠,PD98059逆转了apelin-13引起的血管舒张效应;d.Apelin-13促大鼠VSMCsERK1/2磷酸化增加并呈剂量依赖性和时间依赖性,ERK1/2抑制剂PD98059可以减少apelin-13诱导ERK1/2的磷酸化.结果表明,自发性高血压大鼠离体血管环对apelin-13舒张反应性降低,NO通路和ERK1/2通路介导了apelin-13的舒张血管作用.

Apelin-13在自发性高血压大鼠心肌组织的表达及其与心肌肥厚和心功能的关系

目的观察Apelin-13在自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织的表达改变,探讨其与心肌肥厚和心功能的关系。方法选取清洁级4周龄和20周龄雄性自发性高血压大鼠和WKY(Wistar-Kyoto)大鼠,按周龄及种属分为4组,每组8只。分别测定无创尾动脉血压及心脏质量指数;超声心动图和血流动力学系统评估心室重构和心功能;HE染色评价心肌细胞及排列情况。Western blot法检测心肌组织Apelin-13、APJ的蛋白表达。结果 1Apelin-13、APJ在SHR心肌组织中呈低表达(P<0.05),20周龄SHR较4周龄SHR更明显(P<0.05)。2 SHR的收缩压(SBP)、左心室舒张期末压(LVEDP)、心脏质量指数(HW/BW)、心室质量指数(LVW/BW)、舒张期室间隔厚度(IVSD)和左心室舒张期末后壁厚度(LVWPd)明显升高(P<0.05),左心室舒张期末内径(LVEDd)、左心室射血分数(EF)、左心室短轴缩短率(FS)和左心室压力最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P<0.05);心肌细胞明显肥大、排列紊乱。20周龄SHR与4周龄SHR相比,上述指标改变更加明显(P<0.05)。3心肌组织Apelin-13与IVSD、HW/BW、LVW/BW以及LVEDd、LVEDP呈负相关(P<0.05),与EF、FS和-dp/dtmax呈正相关(P<0.05)。结论 Apelin-13在SHR心肌组织中呈低表达,其与心肌肥厚指标呈负相关,与心功能呈正相关,提示其可能影响高血压的左心室心肌肥厚和心功能。

Apelin-13促进血管平滑肌细胞增殖、迁移和血管新生内膜增生

研究apelin-13对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖和迁移的影响及其作用机制.用免疫印迹分析检测apelin-13对VSMC增殖、迁移以及分化相关基因表达的影响,结果表明,apelin-13能以时间和浓度依赖的方式诱导VSMC增殖和迁移相关基因cyclin D1和MMP-2表达,促进细胞增殖和迁移;同时使VSMC分化标志基因SM22α和SMα-actin表达水平降低.而且,用鬼笔环肽对细胞骨架进行染色的结果显示,apelin-13可以促进VSMC从收缩表型向增殖表型转化.体内实验也表明,敲低apelin可抑制球囊损伤诱导的新生内膜形成,提示apelin-13在体内具有促进血管新生内膜形成的作用.总之,本文结果表明,apelin-13通过调节VSMC增殖、迁移以及分化基因表达,进而促进其从分化型向增殖型转化,并向内膜下迁移和增殖.

Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤(CIRI)的保护作用及其可能的机制。方法改良线栓法建立S-D大鼠局灶性CIRI模型,分假手术组、模型组、小剂量Apelin-13干预A组、中剂量B组、大剂量C组共5组,Apelin-13进行侧脑室注射,分别进行神经功能评分,脑水肿、脑梗死体积测定,观察细胞凋亡;检测脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)。结果 (1)B、C组较模型组神经功能评分降低(P<0.05),含水量、脑梗死体积降低(P<0.05);模型组梗死组织可见水肿、坏死,较多深染、固缩核细胞;B组、C组TUNEL阳性细胞数低于模型组(P<0.05);(2)B、C组缺血周边脑组织MDA含量降低,SOD的活性增加(P<0.05);(3)各组ERK1/2蛋白表达无差异性(P>0.05);模型组和干预组pERK1/2蛋白表达高于假手术组(P<0.05);干预组高于模型组(P<0.05)。结论 Apelin-13可能通过抑制氧化应激反应对大鼠局灶性CIRI起保护作用;ERK1/2信号通路可能参与了Apelin-13保护作用机制。