芹菜素调控Caveolin-1对慢性心力衰竭大鼠血管紧张素1-7及左室舒张功能的影响

目的:探讨芹菜素通过调控窖蛋白-1(Caveolin-1)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)及左室舒张功能的机制研究。方法:按照随机数字表法将大鼠分为假手术(Sham)组、CHF组、芹菜素组、Caveolin-1组及联合组,每组10只,除Sham组外均建立CHF大鼠模型。建模后24 h,芹菜素组大鼠腹腔注射2 mg/kg的芹菜素,Caveolin-1组腹腔注射1.2 mg/kg的Caveolin-1质粒的脂质体溶液,联合组大鼠腹腔注射2 mg/kg的芹菜素及1.2 mg/kg的Caveolin-1质粒的脂质体溶液,Sham组及CHF组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。比较各组大鼠心脏收缩及舒张功能指标、血清因子水平;苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织病理形态;电镜观察心房超微结构;免疫组化检测心肌组织血管生成情况;蛋白免疫印迹检测心肌组织Caveolin-1、缺氧诱导因子1(HIF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平。结果:CHF组与Sham组比较,大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、Ang1-7及Caveolin-1蛋白、HIF-1蛋白、VEGF蛋白降低,左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、肾素活性(PRA)升高,差异有统计学意义(P<0.05);芹菜素组、Caveolin-1组与CHF组比较,大鼠LVEF、LVFS、Ang1-7、Caveolin-1蛋白、HIF-1蛋白、VEGF蛋白及血管数目升高,LVESD、LVEDD、LVEDV、LVESV、AngⅡ、ALD、PRA降低,差异有统计学意义(P<0.05);芹菜素组与Caveolin-1组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05);联合组与芹菜素组及Caveolin-1组各指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:芹菜素对慢性心力衰竭大鼠心脏舒张及收缩功能具有改善作用,并可通过上调Ang1-7改善心肌重塑从而保护心脏,其机制可能与激活Caveolin-1表达而增加心肌新生血管相关。

Mechanisms of Apigenin-7-glucoside As a Hepatoprotective Agent

Ixeris chinesis (Thunb.) Ankai has been used as a Chinese folk medicine, but only scanty information is available on the physiological and biochemical functions of the compounds extracted from I. chinesis. In the present study the effects of apigenin -7-glucoside (APIG) isolated from I. chinesis against liver injury caused by carbon tetrachloride (CCl4) were investigated. Methods The contents of malondialdehyde (MDA), glutamic pyruvic transaminase (GPT), glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), and reduced glutathione (GSH) were evaluated by spectrophotography. The content of 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) was measured with high-performance liquid chromatography (HPLC) equipped with electrochemical and UV detection methods. The antioxidant activity of APIG was evaluated using chemiluminescence single photon counting technology. Results CCl4 significantly increased the enzyme activities of GPT and GOT in blood serum, as well as the level of MDA and 8-OHdG in liver tissue, and decreased the levels of GSH. Pretreatment with APIG was able not only to suppress the elevation of GPT, GOT, MDA and 8-OHdG, and inhibit the reduction of GSH in a dose-dependent manner in vivo, but also to reduce the damage of hepatocytes in vitro. On the other hand, we also found that APIG had strong antioxidant activity against reactive oxygen species (ROS) in vitro in a concentration-dependent manner. Conclusion The hepatoprotective activity of APIG is possibly due to its antioxidant properties, acting as scavengers of ROS. These results obtained in vivo and in vitro suggest that APIG has protective effects against hepatic oxidative injury induced by chemicals. Further studies on the pharmaceutical functions and immunological responses of APIG may help its clinical application.

芹菜素7-O-葡萄糖苷对抗TRAIL乳腺癌细胞凋亡的作用机制研究

[目的]探讨芹菜素7-O-葡萄糖苷(AGL)对抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)乳腺癌细胞凋亡的影响。[方法]通过CCK-8法、蛋白免疫印迹、流式细胞法检测AGL、TRAIL、AGL+TRAIL对乳腺癌细胞活性、聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)水平和细胞凋亡的影响,通过激光扫描共焦显微镜检测细胞ROS水平,采用ELISA法检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及Western-blot检测PARP-1、p53、p53上调凋亡调制物(PUMA)水平。建立MCF7移植瘤模型,观察AGL+TRAIL处理下移植瘤生长和凋亡情况。[结果]TRAIL(50 ng/mL)+AGL(20、40μmol/L)处理时,MCF7细胞存活率降低(P<0.05),Cleaved PARP-1水平升高(P<0.05);TRAIL(50 ng/mL)+AGL(20μmol/L)处理时,MCF7细胞凋亡率、Cleaved-Cas-3、Cleaved-Cas-9水平均显著升高(P<0.05)。AGL(10、20μmol/L)处理时,MCF7细胞ROS(+)细胞数、MDA水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05);TRAIL(50 ng/mL)+AGL(20μmol/L)MCF7细胞ROS(+)细胞数目、p53、PUMA、Cleaved PARP-1相对蛋白水平显著高于TRAIL(50 ng/mL)处理(P<0.05),TRAIL(50 ng/mL)+AGL(20μmol/L)+NAC(4 mmol/L)MCF7细胞ROS(+)细胞数、p53、PUMA、Cleaved PARP-1相对蛋白水平显著低于TRAIL(50 ng/mL)+AGL(20μmol/L)处理(P<0.05)。AGL+TRAIL组小鼠移植瘤质量、体积和肿瘤组织p53阳性率、PUMA3阳性率均显著低于Control组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于Control组(P<0.05)。[结论]AGL联合TRAIL可促抗TRAIL MCF7细胞凋亡,可能与增强细胞氧化应激损伤和激活Caspase级联反应有关。

硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甙(英文)

本文建立了分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素 -7- O- β- D- 葡萄糖醛酸甙的硅胶柱色谱 /RP- HPLC/LC- ESI- MS方法。拳卷地钱叶经过 80 %乙醇提取后 ,减压蒸馏 ,得粗提物。拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱 ,用不同浓度的甲醇 氯仿溶液洗脱 ,各洗脱液进行RP- HPLC分析 ,较纯的洗脱液进行LC- ESI- MS分析 ,为制备分离黄酮类化合物单体提供指导。氯仿与甲醇配比为 5 :4的洗脱液经过RP- HPLC分析为单一组分 ,tR为 12 1min ,与对照品芹菜素 - 7 -O-β -D 葡萄糖醛酸甙共注射进行RP HPLC实验 ,发现峰高增加 ,tR为 12 . 1min,UV(λmax为 336 /2 96 (sh) /2 6 7nm)和IR光谱与芹菜素 - 7 -O -β- D 葡萄糖醛酸甙基本一致。LC ESI MS测定结果表明 ,与对照品芹菜素 -7 -O- β- D -葡萄糖醛酸甙的分子量相同为 4 4 6。由此可以鉴定该洗脱组分为芹菜素 -7 -O -β- D- 葡萄糖醛酸甙。

洋甘菊中芹苷元-7-葡萄糖苷含量测定

目的测定洋甘菊中芹苷元-7-葡萄糖苷含量。方法在美国药典收载的HPLC方法基础上,适当调整色谱条件,采用UPLC法,测定新疆洋甘菊中芹苷元-7-葡萄糖苷的含量。结果两批洋甘菊样品中芹苷元-7-葡萄糖苷含量分别为5.2、5.8mg/g。结论 UPLC方法,可作为洋甘菊中芹苷元-7-葡萄糖苷含量测定。

蓝刺头及蓝红胶囊中芹菜素-7-O-葡萄糖苷的测定

目的建立蓝刺头及其制剂蓝红胶囊（蓝刺头、三七、杜仲、红花和珍珠）中蓝刺头的质量控制方法。方法采用HPLC法对蓝刺头和蓝红胶囊中芹菜素-7-O-葡萄糖苷进行定量测定。色谱柱为C18柱,以乙腈-醋酸铵缓冲盐水溶液（21∶79）为流动相;柱温25℃;体积流量1 mL/min;检测波长为340 nm。结果芹菜素-7-O-葡萄糖苷在0.228~22.8μg/mL范围内线性关系良好,蓝刺头药材的平均回收率为100.8%,RSD为1.4%;蓝红胶囊的平均回收率为99.0%,RSD为1.0%。芹菜素-7-O-葡萄糖苷从蓝刺头药材至蓝红胶囊的转移率均值为72.4%。结论蓝刺头及蓝红胶囊均以80%甲醇为提取溶剂,回流4 h时得到的提取物分析效果最佳。

5,7,4′-三羟基取代黄酮化合物与牛血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱法与紫外光谱法研究5,7,4′-三羟基取代类黄酮化合物芹菜素、柚皮素和染料木素与牛血清白蛋白(BSA)的结合,探讨了C环氢化及取代位置对其与BSA相互作用的影响。结果表明,3种化合物对BSA内源性荧光均有猝灭作用,且猝灭类型为静态猝灭;3种化合物与BSA的结合位点约为1,在295K条件下,与BSA结合由强到弱顺序为芹菜素、染料木素、柚皮素,结合常数分别为1.269×107、3.011×105和1.342×105 L/mol;芹菜素主要通过氢键与范德华力与BSA结合,柚皮素和染料木素主要通过静电作用与BSA结合;说明具有相同A环与B环结构的黄酮化合物,C环氢化后削弱其与BSA的作用,B环连接在C-2位置上与BSA的结合作用更强。3种化合物的加入均改变了BSA酪氨酸残基与色氨酸残基的微环境;同时也改变了蛋白质的二级结构与氨基酸残基,与BSA均形成了复合物。

构树叶中牡荆素、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷的含量测定

[目的]测定构树叶中牡荆素和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的含量。[方法]采用HPLC色谱法,以无水甲醇-浓度1%乙酸(30∶70,V/V)为流动相3,59 nm为检测波长,测定构树叶中牡荆素的含量;以无水甲醇-浓度0.05%磷酸(40∶60,V/V)为流动相,324 nm为检测波长,测定芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷的含量。[结果]牡荆素在0.056～0.488μg/ml范围内线性关系较好,相关系数R=0.999 2:平均回收率为99.2%,RSD为1.42%;芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷在1.808～4.068μg/ml范围内线性关系良好,相关系数R=0.999 8。平均回收率为100.9%,RSD为1.58%。[结论]该方法简便、分离效果好,可用于构树叶质量标准的制订。

硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的 :建立分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素 -7-O -β -D -葡萄糖醛酸苷的硅胶柱色谱 /RP -HPLC/LC -ESI -MS方法。方法 :拳卷地钱叶经过 80 %乙醇提取后 ,减压蒸馏 ,得粗提物。拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱 ,用甲醇 -氯仿配比为 2 5∶1,2 5∶2 ,2 5∶3…… 2∶2 5 ,1∶2 5混合溶液洗脱 ,各洗脱液进行RP -HPLC分析 ,较纯的洗脱液进行LC -ESI-MS分析 ,为制备分离黄酮类化合物单体提供指导。结果 :氯仿与甲醇配比为 2 5∶15、2 5∶16、2 5∶ 17、2 5∶18的洗脱液经过RP -HPLC分析为单一组分 ,tR 为12 1min ,与对照品芹菜素 -7-O -β -D -葡萄糖醛酸苷共注射进行RP -HPLC实验 ,发现峰高增加 ,tR 为12 1min ,UV[λmax为 3 3 6/ 2 96(sh) / 2 67nm]和IR光谱与芹菜素 -7-O -β -D -葡萄糖醛酸苷基本一致。LC -ESI -MS测定结果表明 ,与对照品芹菜素 -7-O -β -D -葡萄糖醛酸苷的分子量相同为 44 6。结论 :由此可以鉴定该洗脱组分为芹菜素 -7-O -β -D -葡萄糖醛酸苷。

HPLC-DAD同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D葡萄糖苷的含量

目的建立同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定的HPLC方法。方法色谱柱:Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸(34∶66);流速:1.0 ml/min;柱温25℃;进样量10μl;检测波长:350 nm。结果木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷的线性范围分别为5.11~409.00、12.56~1 005.00μg/ml,相关系数r>0.999 3,具有良好的线性。精密度、稳定性符合要求,木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷加样回收率分别为96.44%~103.55%、95.12%~101.52%,RSD均为0.03%。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定。

薄层色谱法同时鉴别构树叶中的牡荆素和芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷

改进构树叶的薄层色谱鉴别方法。在参阅文献的基础上对构树叶的薄层鉴别进行改进,通过改善供试品提取方法和薄层展开方法,对构树叶中牡荆素和芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷同时进行定性鉴别。结果改进后的方法可以准确鉴别构树叶中牡荆素和芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷,有效降低了其他成分的干扰,斑点清晰,分离度好。提示改进后的方法可同时鉴别牡荆素和芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷,专属性强,可作为构树叶的薄层鉴别方法。

半枝莲中黄酮类化学成分研究

目的 :研究中药半枝莲中黄酮类化学成分的种类 ,解析它们的结构。方法 :通过硅胶柱色谱 ,并运用硅胶薄层制备以及凝胶柱色谱的方法分离纯化化合物 ,利用质谱、核磁共振等现代波谱技术解析化合物结构。结果 :分离得到了 5个黄酮类化合物 :芹菜素 (1) ,木犀草素 (2 ) ,芹菜素 7 O 葡萄糖醛酸乙酯 (3) ,芹菜素 7 O β 葡萄糖苷 (4 ) ,芹菜素 7 O 新陈皮糖苷 (5 )。此外还得到苯甲醛 (6 )。结论 :化合物 3,4 ,5为首次从该植物中分离得到。

白背叶中一个新的异戊烯基二氢黄酮

目的对大戟科植物白背叶Mallotusapelta的叶进行化学成分研究。方法原料的乙醇浸出物,用各种柱色谱进行分离和纯化,所得化合物以理化性质和波谱数据进行鉴定。结果分得5个化合物,分别鉴定为蒲公英赛醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、5,7-二羟基-6-异戊烯基-4′-甲氧基二氢黄酮(Ⅲ)、洋芹素(Ⅳ)、洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)。结论化合物为新化合物,命名为白背叶素(mallotusin),化合物Ⅰ、Ⅲ-Ⅴ为首次从白背叶中分得。关键词:白背叶;蒲公英赛醇;5,7-二羟基-6-异戊烯基-4′-甲氧基二氢黄酮;洋芹素;

旱柳叶中抗血栓、抗动脉硬化活性成分的研究

本文从早柳叶中分离并鉴定了3个单体化合物,即芹黄素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甙、木樨草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸甙及化合物Ⅲ。前两者为首次从柳属植物叶片中获得,后者为首次发现的新化合物。测定它们对花生四烯酸代谢的影响,结果发现:它们均可选择性抑制花生四烯酸代谢产物12-HETE的生成量,预示它们可防治动脉硬化及过敏症;芹黄素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甙水解后的甙元芹黄素可抑制TXB_2的生成量,提示其对血栓的形成有防治功效。

木豆黄酮类成分的研究

以抑菌试验指导植物有效成分的提取分离，从木豆叶提取物的乙酸乙酯部分分离和鉴定了６个化合物，牡荆甙（ｖｉｔｅｘｉｎ，１），异牡荆甙（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ，２），芹菜素（ａｐｉｇｅｎｉｎ，３），木犀草素（ｌｕｔｅｏｌｉｎ４），柚皮素４′，７二甲醚（ｎａｒｉｎｇｅｎｉｎｅ４′，７ｄｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ，５）和β谷甾醇（βｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ，６）。化合物２，３和４为首次从木豆中分得。抑菌试验结果显示，乙酸乙酯提取物具较好的生理活性。

杭白菊中主要黄酮苷的测定及影响因素考察

目的:测定杭白菊中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O--βD-葡萄糖苷含量,并考察影响其含量的因素。方法:采用反相高效液相色谱法,以Zorbax SB C18为分离柱,乙腈-10 mmol.L-1磷酸盐缓冲液(pH 2)为流动相进行梯度洗脱,检测波长338 nm。结果:不同种植基地、不同采摘时间、不同炮制工艺及不同等级的杭白菊中木犀草素-7-O--βD-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量有一定的变化;不同年度的杭白菊中2成分含量差别不大;不同产地及不同品种菊花2成分含量差异较大。结论:杭白菊2成分的含量与种植基地、炮制工艺等有一定的关系,产地、品种对其含量的影响更大。

多舌飞蓬化学成分的研究

从菊科植物多舌飞蓬Ｅｒｉｇｅｒｏｎ ｍｕｌｔｉｒａｄｉａｔｕｓ中分得 ７个化合物，通过光谱分析鉴定为芹莱素一７一氧一葡萄糖醛酸丁酯（Ⅰ）、芹菜索（Ⅱ）、山柰酚（Ⅲ）、山柰酚一７一氧一鼠李糖苷（Ⅳ）、山柰酚一３一氧一葡萄糖一７一氧一鼠李糖苷（Ⅴ）、合欢酸（Ⅵ）、豆甾醇葡萄糖苷（Ⅶ）。其中Ⅰ为一新化合物。

洋甘菊中黄酮类成分的分离与结构确定

对洋甘菊中黄酮类活性成分进行分离纯化和结构确定。经过聚酰胺反复柱色谱进行分离、纯化,并经核磁共振确定其结构。从洋甘菊的乙醇(95%)提取物中分离得到2个黄酮类化合物,其结构被确定为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)和木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)。芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷很可能为洋甘菊的主要黄酮活性成分。

洋芹素、槲皮素和槲皮万寿菊素衍生物体外抗氧化作用研究

目的 :研究洋芹素、槲皮素 3 ,3’ 二甲醚和槲皮万寿菊素 3 ,6 二甲醚 7 吡喃葡萄糖苷的体外抗氧化作用。方法 :大鼠脑、肾和肝匀浆自氧化和经Fe2 + VitC诱导产生丙二醛 (MDA) ,TBA比色法检测这三种化合物的抗氧化活性。结果 :洋芹素、槲皮素 3 ,3’ 二甲醚和槲皮万寿菊素 3 ,6 二甲醛 7 吡喃葡萄糖苷浓度在 6.2 5～ 5 0 μmol/L能明显降低大鼠脑、肾和肝匀浆MDA含量。结论 :洋芹素、槲皮素 3 ,3’ 二甲醚和槲皮万寿菊素 3 ,6 二甲醚 7 吡喃葡萄糖苷体外具有抗氧化活性。

芹菜素对肝癌细胞生长及基因表达的影响

目的:探讨芹菜素(apigenin)对Huh-7肝癌细胞生长及基因表达的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测芹菜素对Huh-7细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响;通过动物模型观察芹菜素对裸鼠人肝癌Huh-7移植瘤肿瘤质量及体积的影响;采用基因芯片技术检测芹菜素作用前后Huh-7细胞全基因组序列,分析其基因表达差异;采用qRT-PCR、Western blot技术验证基因芯片结果.结果:与对照组相比,不同浓度的芹菜素(5、10、20mg/L)处理Huh-7细胞后,芹菜素对Huh-7细胞的生长有显著的抑制作用(IC50=10.5mg/L±0.3mg/L).细胞周期阻滞于G2/M期、降低G0-G1期细胞的比例、并促进细胞凋亡和抑制移植瘤的生长.全基因芯片发现芹菜素可改变Huh-7细胞中1764个功能性基因的表达.在这些差异表达的基因中,大多数与核酸结合、转运、接触和酶调节活性、转录调节、细胞骨架结构和黏附、信号转导、代谢、凋亡以及免疫反应等有关.其中最重要的发现是芹菜素显著下调IL-4R和USP18基因表达,qRT-PCR、Western blot检测结果与芯片结果相符.结论:芹菜素可能通过阻滞细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡从而抑制体内体外Huh-7细胞的生长,并影响多种基因的表达.