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Inhibition of PKB/Akt activity involved in apigenin-induced apoptosis in human gastric carcinoma cells 被引量:1
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作者 YUAN LinHong XIA Wei +3 位作者 ZHAO XiuJuan ZHANG XiaoHua ZHANG Ling WU Kun 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2007年第16期2226-2232,共7页
Apigenin is a flavonoid widely distributed in fruits and vegetables. It possesses growth inhibitory properties against numerous cancer cell lines. However,the molecular mechanism(s) by which api-genin elicits its effe... Apigenin is a flavonoid widely distributed in fruits and vegetables. It possesses growth inhibitory properties against numerous cancer cell lines. However,the molecular mechanism(s) by which api-genin elicits its effects have not been fully elucidated. Here we studied whether apigenin inhibits growth and induces apoptosis in human gastric carcinoma cells. We showed that the flavonoid inhibited growth of the cells and caused apoptosis,as evidenced by DNA Ladder,cleavage of pro-caspase-3 in a time-dependent manner. Induction of apoptosis was dependent on inhibition of the PKB/Akt activity. We found that while apigenin had no effect on the expression of Akt and Bad,it inhibited specific phosphorylation of the two proteins that are associated with pro-survival mechanisms. We propose that this important flavonoid induces apoptosis in gastric cancer cells by inhibiting Akt activity. Since Akt is often activated in cancers,our findings may have clinical implications. 展开更多
关键词 胃癌 细胞凋亡 pkb/akt 类黄酮 分子机制
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Inhibitory effects of apigenin on the growth of gastric carcinoma SGC-7901 cells 被引量:10
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作者 Kun Wu Lin-Hong Yuan Wei Xia 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第29期4461-4464,共4页
AIM: To explore the growth inhibition and apoptosisinducing effect of apigenin on human gastric carcinoma SGC-7901 cells. METHODS: The effects of apigenin on the growth, clone formation and proliferation of human ga... AIM: To explore the growth inhibition and apoptosisinducing effect of apigenin on human gastric carcinoma SGC-7901 cells. METHODS: The effects of apigenin on the growth, clone formation and proliferation of human gastric carcinoma SGC-7901 cells were observed by N-rr, done-forming assay, and morphological observation. Fluorescent staining and flow cytometry analysis were used to detect apoptosis of cells. RESULTS: Apigenin obviously inhibited the growth, clone formation and proliferation of SGC-7901 cells in a dosedependent manner. Inhibition of growth was observed on d 1 at the concentration of 80 μmol/L, while after 4 d, the inhibition rate (IR) was 90%. The growth IRs at the concentration of 20, 40, and 80 μmol/L were 38%, 71%, and 99% respedJvely on the 7^th d. After the cells were treated with apigenin for 48 h, the number of clone-forming in control, 20, 40, and 80 μmol/L groups was 217±16.9, 170±11.1 (P〈0.05), 98±11.1 (P〈0.05), and 25±3.5 (P〈0.05) respectively. Typical morphological changes of apoptosis was found by fluorescent staining. The cell nuclei had lost its smooth boundaries, chromatin was condensed, and cell nuclei were broken. Flow cytometry detected typical apoptosis peak. After the cells were treated with apigenin for 48 h, the apoptosis rates were 5.76%, 19.17%, and 29.30% respectively in 20, 40, and 80 μmol/L groups. CONCLUSION: Apigenin shows obvious inhibition on the growth and clone formation of SGC-7901 cells by inducing apoptosis. 展开更多
关键词 apigenin apoptosis Anti-cancer effect gastric carcinoma
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异甘草素通过PI3K/Akt通路诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡
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作者 牛琼 刘方康 +2 位作者 王爱丽 贾兴芳 刘成霞 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第33期5342-5347,共6页
目的:初步研究异甘草素(isoliquiritigenin ISL)对人胃癌SGC7901细胞凋亡诱导作用的影响,并探讨信号通路中蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(PAkt)及下游凋亡蛋白Bax表达水平的变化.方法:取对数生长期人胃癌SGC... 目的:初步研究异甘草素(isoliquiritigenin ISL)对人胃癌SGC7901细胞凋亡诱导作用的影响,并探讨信号通路中蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(PAkt)及下游凋亡蛋白Bax表达水平的变化.方法:取对数生长期人胃癌SGC7901细胞分为对照组、ISL实验组,培养24、48、72 h后采用MTT实验检测ISL对细胞生长的抑制情况,摸索后续实验药物浓度和作用时间;应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;应用Western blot法检测凋亡调节蛋白Bax、Ak和P-Akt的表达.结果:10mmol/L ISL不能抑制胃癌细胞株SGC7901的生长,而25、50、100mm o l/LISL可明显抑制其生长,且呈时间和浓度依赖性.与对照组凋亡率3.23%±0.45%相比,25mmol/L组(6.13%±0.61%)、50mmol/L组(11.70%±0.75%)、100mmol/L组(26.60%±1.51%)凋亡率逐渐增高(P<0.05)随ISL浓度的增加,P-Akt蛋白表达水平逐渐降低,凋亡蛋白Bax表达水平逐渐增加(均P<0.05),各组间A k t蛋白水平差异无统计学意义.结论:ISL能够诱导SGC7901细胞凋亡,其机制可能与下调PI3K/AKT信号转导通路蛋白的表达以及上调其下游的凋亡蛋白Bax有关. 展开更多
关键词 异甘草素 胃癌 凋亡 Bax 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 磷酸化蛋白激酶B
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β咔啉类生物碱对SGC-7901荷瘤裸鼠HGF/c-MET通路中FAK、PI3K、AKT信号通路影响
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作者 陈星桥 樊玉祥 张洪亮 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2020年第5期16-22,共7页
目的通过观察β-咔啉类生物碱对SGC-7901荷瘤裸鼠HGF/c-MET通路中PI3K/AKT、FAK信号分子的变化,探讨β-咔啉类生物碱抗胃癌信号通路的可能靶点。方法建立荷瘤裸鼠80只。采用随机数字表法将模型随机分为4组。分别为β咔啉类生物碱高、中... 目的通过观察β-咔啉类生物碱对SGC-7901荷瘤裸鼠HGF/c-MET通路中PI3K/AKT、FAK信号分子的变化,探讨β-咔啉类生物碱抗胃癌信号通路的可能靶点。方法建立荷瘤裸鼠80只。采用随机数字表法将模型随机分为4组。分别为β咔啉类生物碱高、中、低组,空白对照组(给药方式:每天1次,连续14 d;空白对照组给予等体积的生理盐水,灌胃,每天1次,连用14 d)。5-FU组给予5 mg/L,每周1次,累计2周。记录各组裸鼠瘤体质量变化。使用HE染色,免疫组织化学染色细胞结构,Tunnel染色法观察细胞凋亡情况。RT-PCR方法检测PI3K/AKT、FAK的mRNA表达水平。Western Blot法检测PI3K/AKT、FAK蛋白表达水平。结果β咔啉类生物碱能抑制SGC-7901荷瘤裸鼠肿瘤细胞的增殖,诱导SGC-7901荷瘤裸鼠肿瘤凋亡,不同浓度的β-咔啉类生物碱作用于SGC-7901荷瘤裸鼠各组14 d后。随着浓度增加,瘤块质量均有降低(高剂量组和阳性对照组对比空白对照组差异有统计学意义P<0.05)。5-FU组,β咔啉类生物碱组中,低剂量组均有坏死,高剂量组肿瘤细胞坏死较为明显。FAK、Grb2、PI3Kp85a、p-PI3Kp85a、AKT、p-AKT的免疫组化结果显示随着β-咔啉类生物碱浓度的增加而蛋白表达逐渐降低,5-FU组和β咔啉类生物碱组对比空白对照组差异有统计学意义(P<0.05)。Tunnel染色镜结果显示:空白对照组肿瘤细胞凋亡最少,阳性组、中、低剂量组均有细胞凋亡,高剂量组肿瘤细胞凋亡率最高。5-FU组、β-咔啉类生物碱组Grb2、PI3Kp85a、FAKmRNA表达水平较空白对照组显著降低。β-咔啉类生物碱高剂量组和5-FU组Grb2、PI3Kp85a对比空白对照组mRNA水平降低(P<0.05)。β-咔啉类生物碱高剂量组p-PI3Kp85a、p-AKT表达对比空白对照组降低(P<0.05)。结论5-FU与β-咔啉类生物碱相比具有更有效的抑制SGC-7901荷瘤裸鼠肿瘤细胞增殖能力,可能与β-咔啉类生物碱抑制PI3Kp85a、AKT相关蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 PI3K/akt、FAK信号通路 β咔啉类生物碱 胃癌 SGC-7901 凋亡
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米非司酮诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡过程中PKB/Akt激酶的调控作用 被引量:3
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作者 张辉 牛志宏 +2 位作者 张捷 马春燕 吕家驹 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期877-879,共3页
目的观察米非司酮在体外诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用机制以及Akt激酶在前列腺癌生长过程中的作用。方法采用Westernblot方法检测不同前列腺癌细胞株癌细胞以及米非司酮作用后PC-3细胞中Akt蛋白磷酸化后蛋白含量,以及相关蛋白的表... 目的观察米非司酮在体外诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用机制以及Akt激酶在前列腺癌生长过程中的作用。方法采用Westernblot方法检测不同前列腺癌细胞株癌细胞以及米非司酮作用后PC-3细胞中Akt蛋白磷酸化后蛋白含量,以及相关蛋白的表达量。结果前列腺癌PC-3细胞中Akt磷酸化后蛋白即[p-Akt(Thr^308)和p-Akt(Ser^473)]的含量明显高于激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞中的蛋白表达量,其表达量分别为0.27±0.05和0.22±0.07;O.46±0.09和0.37±0.10(P〈0.05)。10μmol/L米非司酮作用于PC-3细胞后p-Akt(Thr^308)和p-Akt(Ser^473)磷酸化蛋白的含量均明显下降,但其中p-Akt(nr3。)蛋白表达量变化尤为显著,4~24h4个时间组蛋白含量分别为0.24±0.08、0.11±0.03、0.05±0.01和0.01±0.00;其蛋白表达量下降速度较p-Akt(Ser^473)快且显著,p-Akt(Serg7。)磷酸化蛋白4~24h4个时间组蛋白含量分别为0.56±0.17、0.42+0.11、0.28±0.09和0.12±0.05。米非司酮作用于PC-3细胞后使Caspase-9、Caspase-3被激活裂解出有活性的激活片段。结论Akt激酶在前列腺癌生长、发展以及激素依赖性向激素非依赖性的转变过程中起着重要作用。p-Akt(Thr^308)蛋白磷酸化水平在Akt磷酸化激活过程中占主导地位,是Akt激活的必要过程。米非司酮抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其可能是通过抑制Akt信号转导通路,从而激活Caspase。 展开更多
关键词 前列腺癌 米非司酮 脱噬作用 akt/pkb信号通路
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Bmi-1基因对胃癌细胞增殖的影响及机制 被引量:10
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作者 张晓伟 秦薇 +3 位作者 郭伟剑 李建芳 刘炳亚 张凤春 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第14期1390-1393,共4页
目的:探索干扰Bmi-1基因后对其可能的下游基因Akt/PKB活性和P16INK4a基因表达的影响及对肿瘤细胞增殖和细胞衰老的作用.方法:用siRNA技术干扰Bmi-1表达后,运用Western blot检测Bmi-1蛋白及相关蛋白pAkt、Akt和P16INK4a的表达,同时进行SA... 目的:探索干扰Bmi-1基因后对其可能的下游基因Akt/PKB活性和P16INK4a基因表达的影响及对肿瘤细胞增殖和细胞衰老的作用.方法:用siRNA技术干扰Bmi-1表达后,运用Western blot检测Bmi-1蛋白及相关蛋白pAkt、Akt和P16INK4a的表达,同时进行SA-β-Gal染色检测细胞衰老,软琼脂克隆形成实验检测细胞的增殖能力.结果:转染Bmi-1 i质粒组平均细胞衰老率28%±3.5%,而对照Ctrli组为16%±2.7%,有明显统计学差异(P<0.01).转染Bmi-1 i质粒组细胞平均克隆形成数为3.4±1.4个,而对照Ctrli组为11±2.3个,两组比较有明显的统计学差异(P<0.01).Bmi-1 i组较Ctrli组Bmi-1和pAkt蛋白表达明显下降,而P16INK4a蛋白表达升高.结论:干扰Bmi-1可以通过降低Akt/PKB活性和上调P16INK4a蛋白表达,促进肿瘤细胞衰老并减弱肿瘤细胞的增殖能力. 展开更多
关键词 BMI-1 小干扰RNA akt/KKB P16INK4A
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蛋白激酶B和15-脂氧合酶-1在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 李勇 李建英 +1 位作者 陈丰霖 陈治新 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2009年第10期938-941,共4页
目的检测蛋白激酶B(Akt)和15-脂氧合酶-1(15-lipoxygenase-1,15-LOX-1)在胃癌及癌旁正常组织中的表达,以探讨二者在胃癌形成中的临床意义。方法采用RT-PCR法检测新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt-1、Akt-2、Akt-3和15-LOX-1 mRNA的表达;... 目的检测蛋白激酶B(Akt)和15-脂氧合酶-1(15-lipoxygenase-1,15-LOX-1)在胃癌及癌旁正常组织中的表达,以探讨二者在胃癌形成中的临床意义。方法采用RT-PCR法检测新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt-1、Akt-2、Akt-3和15-LOX-1 mRNA的表达;Western blot印迹法检测磷酸化Akt(p-Akt)和15-LOX-1蛋白的表达。结果Akt-1、Akt-2、Akt-3 mRNA在胃癌及癌旁正常组织中的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。p-Akt蛋白在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。15-LOX-1蛋白及mRNA在胃癌组织的表达均低于癌旁正常组织(P<0.05)。p-Akt蛋白表达与胃癌的肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期呈正相关(P<0.05)。相关性分析表明:胃癌组织中15-LOX-1蛋白表达和p-Akt水平间无明显相关性(r=-0.252,P>0.05)。结论Akt在胃癌的发生发展中具有促进作用。15-LOX-1蛋白可能对胃癌的发生发展有一定抑制作用,但与Akt无直接关系。 展开更多
关键词 胃肿瘤 蛋白激酶B 15-脂氧合酶-1 临床病理因素
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SHIP2通过上调Bim表达增强胃癌细胞BGC-823对紫杉醇的敏感性 被引量:2
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作者 葛燕梅 叶艳 张林杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期701-706,共6页
目的探讨SHIP2(SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定... 目的探讨SHIP2(SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将GV112-Puromycin空载体和GV112-Puromycin-Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与SGC-7901细胞相比,BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0.3μmol·L-1紫杉醇诱导BGC-823 48 h后细胞凋亡率仅为(25.6±1.6)%,在紫杉醇作用不同时间点Bim蛋白和mRNA表达均无明显变化;与对照组相比,转染SHIP2基因能明显增加Bim的表达,紫杉醇作用48 h后,细胞凋亡率上升到(50.8±0.9)%;GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的BGC-823细胞,Bim的表达明显被抑制,在GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的稳定BGC-823细胞中转入pCMV6-SHIP2,紫杉醇作用48 h后,凋亡率为(27.6±1.6)%。结论转染外源性SHIP2基因能有效提高BGC-823细胞内Bim的表达,诱导BGC-823细胞凋亡,明显增加BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 SHIP2 胃癌 BIM 紫杉醇 细胞凋亡 akt
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重楼活性单体pp-10通过抑制PI3K/Akt通路诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡和自噬 被引量:5
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作者 王娟娟 张鹏 +5 位作者 黄志宏 陈家劲 李强 王国才 李药兰 蒋建伟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期31-37,共7页
目的:探讨重楼/七叶一枝花(Paris polyphylla)的醇提物单体pp-10诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡和自噬及其分子机制。方法:采用MTT法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体pp-10对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;Hoechst33342染色法检... 目的:探讨重楼/七叶一枝花(Paris polyphylla)的醇提物单体pp-10诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡和自噬及其分子机制。方法:采用MTT法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体pp-10对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;Hoechst33342染色法检测pp-10作用于人胃癌BGC-823细胞后细胞核形态的改变;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blotting检测重楼单体pp-10对细胞凋亡和自噬相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、Bax、Bcl-2、LC3、P62以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白(Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、P70s6k、p-P70s6k)表达的影响。结果:重楼单体pp-10能显著抑制BGC-823细胞的生长,作用呈时间-效应关系及剂量-效应关系;克隆形成抑制实验表明随着pp-10浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与对照组相比有显著差异;在荧光显微镜下观察可见其细胞核固缩、边聚、裂解等细胞凋亡形态学变化;流式细胞术检测显示,随着作用药物浓度的增高,其凋亡率逐渐升高;Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加,线粒体相关凋亡信号通路蛋白Caspase9、Caspase3及PARP均出现酶切活化条带,细胞促凋亡蛋白Bax的表达水平增加,抗凋亡蛋白Bcl-2减少,自噬相关蛋白Ⅱ型LC3增加,P62蛋白减少,p-Akt蛋白的表达水平下降,Akt下游蛋白p-m Tor、p-p70S6K表达减少。结论:重楼单体pp-10通过抑制BGC-823细胞增殖,诱导细胞凋亡和自噬,与下调P13K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 重楼 胃癌 BGC-823细胞 akt 凋亡和自噬
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白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响 被引量:11
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作者 郑作文 伦玉宁 赵丽丽 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第13期214-216,共3页
目的:研究白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌SGC-7901细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,连续11 d ig给予芹菜素600,300,150 mg·kg-1或ip五氟尿嘧啶(5-FU)20 mg·kg-1治疗,观察移植瘤瘤重及药物对肿瘤... 目的:研究白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌SGC-7901细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,连续11 d ig给予芹菜素600,300,150 mg·kg-1或ip五氟尿嘧啶(5-FU)20 mg·kg-1治疗,观察移植瘤瘤重及药物对肿瘤生长的抑制率;透射电镜观察肿瘤组织细胞凋亡情况。结果:芹菜素600,300 mg·kg-1和5-FU均能明显抑制裸鼠移植瘤生长,抑瘤率分别为31.78%(P<0.01),25.66%(P<0.05)和49.03%(P<0.01),且芹菜素可致裸鼠移植瘤大量细胞发生凋亡,可见典型的细胞凋亡形态学变化。结论:白背叶提取物芹菜素可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 白背叶提取物芹菜素 SGC-7901人胃癌细胞株 细胞凋亡
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