子宫内膜癌患者术前血清apo AI和Apelin水平检测对预测淋巴脉管间隙浸润风险的价值研究

目的分析子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)患者术前血清载脂蛋白AI(apolipoprotein A1,apo AI)和Apelin水平检测对预测子宫内膜癌淋巴结脉管间隙浸润(lymph vascular space invasion,LVSI)风险的价值。方法选取2020年2月~2022年6月石家庄市妇幼保健院97例EC患者为研究对象,统计EC患者LVSI发生情况并比较不同结果患者的一般资料,采用Logistic回归分析EC患者LVSI风险的影响因素,采用ROC分析术前血清apo AI和Apelin水平评估EC患者LVSI风险的价值,绘制决策曲线分析术前血清apo AI和Apelin水平评估EC患者LVSI风险的净受益率,比较血清apo AI和Apelin术前不同表达水平的患者LVSI发生情况。结果97例EC患者中LVSI阴性和阳性分别为69例和28例;Logistic回归分析显示,肿瘤≥2 cm、非子宫内膜样腺癌、低分化、肌层浸润≥1/2和血清Apelin水平升高是EC患者LVSI阳性的独立危险因素,血清apo AI升高是LVSI阳性的保护因素(t/χ2=6.592,8.686,4.697,9.098,4.001,2.738均P<0.05);ROC曲线分析显示术前血清apo AI,Apelin联合检测评估EC患者LVSI风险的AUC值为0.801,高于二者单独评估的AUC值(P<0.001);决策曲线分析显示当风险阈值为0~0.55时,术前血清apo AI,Apelin联合检测的净受益率大于单独检测。结论术前血清apo AI,Apelin水平变化对评估EC患者LVSI风险具有一定预测价值。低水平apo AI与高水平Apelin表明患者LVSI风险较高。

载脂蛋白AI对HDL生成影响的研究新进展

载脂蛋白AI(apolipoprotein A-I,apoA-I)是高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)的主要蛋白成分,其中两性α-螺旋是apoA-I相应功能的结构基础。ApoA-I分子N-端是动态的四螺旋束结构,C-端形成无规则的螺旋结构,是介导蛋白质与磷脂结合的功能域。两分子apoA-I呈反向平行的双带结构环绕磷脂双分子层形成圆盘状HDL,而球状HDL表面的apoA-I分子则形成三叶草结构。ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)介导apoA-I与磷脂及胆固醇相互作用形成新生HDL,参与胆固醇的逆向转运过程。ApoA-I、HDL作为抗动脉粥样硬化的主要作用靶标,深入了解其分子结构与功能、构象变化和相互作用及其影响脂质代谢平衡的机制对抗动脉粥样硬化药物的研发及其应用具有重要意义。

蝇蛆壳聚糖降血脂作用机制探讨

目的研究蝇蛆壳聚糖降血脂作用机制。方法利用以高脂饲料喂养大鼠诱导建立的饮食性高脂血症模型,采用灌胃不同剂量蝇蛆壳聚糖给药,通过生化法检测各组大鼠载脂蛋白、相关酶及活性物质,初步探讨蝇蛆壳聚糖调节血脂机制。结果蝇蛆壳聚糖能升高载脂蛋白AI(ApoAI),升高ApoAI/ApoB比值,使卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)活性显著升高,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)含量,提高NO水平(P<0.01)。结论蝇蛆壳聚糖调节血脂的作用机制是多方面的。蝇蛆壳聚糖通过升高高密度脂蛋白胆固醇,升高ApoAI,激活LCAT,促进胆固醇的逆向转运,抑制低密度脂蛋白胆固醇氧化修饰,调节血脂水平。通过提高SOD活性,增强机体抗脂质过氧化作用的能力,调节血脂水平。通过促进NO的生成和释放,改善血管内皮的功能,调节血脂水平。

有氧运动对高脂饲料喂养大鼠血脂及骨骼肌PPARα、ABCA1及ApoAI mRNA表达的影响

目的:探讨有氧运动对高脂饮食大鼠血脂及骨骼肌过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPARα)、三磷酸腺苷结合盒转运体A(lABCA1)、载脂蛋白AI(ApoAI)基因表达的影响。方法:将40只SD雄性大鼠分为4组:正常饮食组(N)、正常运动组(NE)、高脂饮食组(H)和高脂运动组(HE)。H组和HE组大鼠采用高脂饲料喂养。NE组和HE组大鼠进行跑台运动,速度为15m/min,每天60min,每周5d,持续8周。实验结束后,采用酶法、酶修饰法和清除法测试各组大鼠血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)与高密度脂蛋白(HDL-C);采用实时定量PCR测定骨骼肌PPARα、ABCA1、ApoAI mRNA表达。结果:(1)与N组比较,H组TG、TC、LDL-C水平显著上升,而HDL-C水平显著下降;HE组TG含量显著低于H组,HDL-C水平显著高于H组。HE组与H组相比,血清TC、LDL-C水平无显著性差异。(2)NE组大鼠PPARα、ABCA1、ApoAI mRNA的表达较N组显著增加;H组PPARα、ABCA1、ApoAI mRNA表达与N组相比显著降低;HE组ABCA1、ApoAI mRNA的表达较H组显著提高,而PPARα mRNA的表达与H组比较无显著差异。结论:(1)高脂饮食可以导致血脂水平异常,并使骨骼肌PPARα、ABCA1、ApoAI mRNA表达显著下降;(2)运动可以一定程度改善高脂饮食导致的血脂异常;运动可上调高脂饮食大鼠骨骼肌ABCA1和ApoAI mRNA表达。PPARα在该通路中可能不是唯一的调节机制。

用酵母双杂交系统研究载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体BI(SR-BI)间的相互作用

目的:利用酵母双杂交系统验证在胆固醇逆转运过程中起关键作用的大鼠载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体BI- (SR -BI)间存在着相互作用,为初步筛选具有降脂活性组分提供1对新的靶点。方法:首先分别克隆了Wistar大鼠的apoAI和SR -BI基因的cDNA ,并构建了酵母表达载体,利用共转化技术观察到apoAI和SR -BI间存在着相互作用,并在酵母交配实验中证实了这个结果。结果:经共转化后的实验组与阳性对照组可在SD/ -Leu/- Trp/- His/- Ade/X -α- Gal平板上生长且菌斑呈蓝色,经测定α、β半乳糖苷酶活力可知酶活分别为8～1 2U和1 0～40U。酵母交配后的二倍体实验组、阳性对照组可在SD/- Leu/- Trp/ -His/- Ade/X -α- Gal平板上生长且菌斑呈蓝色。结论:apoAI和SR BI间的确存在相互作用。

动脉粥样硬化性脑梗塞患者载脂蛋白AI-CⅢ基因簇DNA多态性及不同基因型与血脂脂蛋白的关系

本文研究了24例动脉粥样硬化性脑梗塞患者和39例正常对照载脂蛋白AI—CⅢ基因簇EcoRI限制性片段长度多态性及不同基因型与总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇之间的关系。患者与正常对照组R_2等位基因频率分别为0.40和0.12,二组间具极显著性差异(P<0.0001)。R_1R_2基因型个体总胆固醇和甘油三酯高于R_1R_1基因型个体,而高密度脂蛋白胆固醇低于R_1R_1基因型个体。结果显示载脂蛋白AI—CⅢ基因簇遗传变异与动脉粥样硬化性脑梗塞有关,其机制可能是通过调控高密度脂蛋白所致。

载脂蛋白免疫复合物微粒的共振散射光谱研究及分析应用

在pH6．8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中和聚乙二醇存在下，载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B（APOB）与相应的抗体发生特异性结合，分别形成粒径约为180，140nm的抗体抗原免疫复合物微粒，导致体系在340，470nm处的共振散射峰增强。分别研究了pH、抗血清、聚乙二醇浓度、温育时间和共存物质的影响。在最佳条件下，APOA1浓度在8．4-430．0ng·mL^-1，APOB浓度在14．8-590．0ng·mL^-1范围内与其共振散射强度成良好线性关系，方法的检出限分别为6．2和7．0ng·mL^-1，用于定量分析血清中的APOA1与APOB，获得满意结果。

肾病综合征患者中血清铁与载脂蛋白AI和载脂蛋白B的相关性分析

目的探讨肾病综合征患者血清铁与载脂蛋白AI和载脂蛋白B之间的关系。方法分别用比色法检测正常对照组和肾病综合征组血清铁以及血脂（总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇）水平，用免疫比浊法检测载脂蛋白AI、载脂蛋白B和脂蛋白（a）。结果对照组与肾病综合征组间，除血清铁差异无统计学意义外（P〉0．05），其余血脂各项指标差别均有统计学意义（P〈0．01）。对照组中，血清铁与脂蛋白（a）具有相关关系（r=0．277，P〈0．05），差异有统计学意义；肾病综合征组中血清铁与载脂蛋白AI（r=0．628，P〈0．01）和载脂蛋白B（r=0．48，P〈0．05）具有相关性，差异有统计学意义外，与其余诸项血脂指标无相关性，差异无统计学意义。结论肾病综合征患者中血清铁的水平可能与载脂蛋白AI和载脂蛋白B的紊乱有关系，其生物学意义尚待进一步研究。

冠心病冠脉病变程度与Apo AI/Apo B、同型半胱氨酸、血脂指标的相关性

目的探究与分析冠心病冠脉病变程度与载脂蛋白AI/载脂蛋白B(Apo AI/Apo B)、同型半胱氨酸、血脂指标的相关性。方法选取2016年12月~2018年12月辽宁中医药大学附属第二医院(以下简称“我院”)收治的67例经过冠脉造影(CAG)确诊的冠心病患者作为观察组,另选择我院同时期收治的63名健康体检者作为对照组。根据Gensini评分将冠心病患者分为低危组(n = 23)、中危组(n = 22)及高危组(n = 22)。比较各组Apo AI/Apo B、同型半胱氨酸、低密度脂蛋白、胆固醇、三酰甘油水平,探讨冠心病冠脉病变程度与Apo AI/Apo B、同型半胱氨酸、血脂指标的相关性。结果低危组、中危组、高危组的胆固醇、三酰甘油水平比较,差异无统计学意义(P > 0.05)。低危组、中危组、高危组的胆固醇、三酰甘油水平均高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。中危组、高危组Apo AI/Apo B低于低危组,但同型半胱氨酸及低密度脂蛋白水平高于低危组,差异有统计学意义(P < 0.05);高危组Apo AI/Apo B低于中危组,但同型半胱氨酸及低密度脂蛋白水平高于中危组,差异有统计学意义(P < 0.05)。低危组、中危组、高危组的同型半胱氨酸及低密度脂蛋白水平均高于对照组,Apo AI/Apo B低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。Apo AI/Apo B与冠心病冠脉病变程度呈负相关(r =-0.189,P < 0.05),同型半胱氨酸、低密度脂蛋白冠心病冠脉病变程度呈正相关(r = 0.072~0.095,P < 0.05)。结论 Apo AI/Apo B、同型半胱氨酸与低密度脂蛋白水平与冠心病冠脉病变程度具有一定的相关性,能够用于对疾病的预测及判断。

人血清载脂蛋白AI的大量分离、纯化及鉴定

采用正常人血清为原料，利用硫酸右旋糖酐浓缩血清、密度梯度区带离、脱脂和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０柱层析技术，获得人血清载脂蛋白ＡＩ的纯品，经十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、分子量测定等证明，所提取的载脂蛋白ＡＩ为纯品，分子量为２８１８０。本方法的优点是，通过浓缩血清，减少了离心次数，缩短了制备时间，且分离效果好，为大量制备纯净的载脂蛋白ＡＩ提供了一种新的方法。

雌二醇对雌性大鼠血清载脂蛋白AI和B含量的影响

为观察雌二醇对大鼠血清载脂蛋白AI和B含量的影响，用免疫比浊法和放射免疫分析法检测了性周期雌性大鼠、去卵巢大鼠和去卵巢注射雌二醇大鼠的血清雌二醇、载脂蛋白AI和B的水平。结果发现，在大鼠性周期中，血清雌二醇与载脂蛋白AI水平均呈周期性波动，两者的变化趋势一致。大鼠卵巢摘除后15天，血清雌二醇与载脂蛋白AI含量较未摘除卵巢大鼠显著降低（分别为0．82±0．32ng／L和0．51±0.11g／L），而注射雌二醇大鼠两者的含量又明显增加（分别为116．94±38．91ng／L和1．80±0．21g／L，P＜0.01）。但是，在性周期中、摘除卵巢和注射雌二醇大鼠血清中载脂蛋白B的含量无明显变化。提示，雌二醇可能调节雌性大鼠血中载脂蛋白AI的含量。

2型糖尿病患者中载脂蛋白M与脂蛋白a、载脂蛋白AI的关系研究

目的研究2型糖尿病患者中载脂蛋白M(apolipoprote in M,apoM)与脂蛋白及其他载脂蛋白的相关关系。方法用dot-b lotting法检测73例2型糖尿病患者(36男37女)血浆中apoM的水平,酶法及比浊法检测糖尿病患者血浆中载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)、脂蛋白a[Lp(a)]、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及空腹血糖(G lu),ELISA法测定血浆中瘦素的含量,对apoM与其它脂蛋白、载脂蛋白、瘦素的关系作相关性分析。结果男性病例中,apoM负相关于甘油三酯(r=-0.364 8,P=0.028 7),但与年龄成正相关(r=0.375 2,P=0.026 4)。女性病例中apoM负相关于血浆Lp(a)水平(r=-0.442 0,P=0.007 0),正相关于apoAI/apoB(r=0.458 3,P=0.004 3)。男女病例混合分析发现,apoM负相关于Lp(a)(r=-0.338 5,P=0.003 0),正相关于apoAI(r=0.232 1,P=0.046 6)、瘦素(r=0.247 1,P=0.032 6)和年龄(r=0.242 0,P=0.035 2)。结论apoM负相关于Lp(a),正相关于apoAI、apoAI/apoB,提示了apoM可能是抑制动脉粥样硬化的保护因子。如果体内apoM与apoAI同时升高,可能会降低体内Lp(a)水平。

鸡血清载脂蛋白AI浓度单向免疫扩散测定法的研究

介绍一种特异、灵敏、简便的蛋鸡血清载脂蛋白AI(apoAI)浓度单向免疫扩散测定法。用磷钨酸镁反复沉淀制备得高密度脂蛋白,经纯化、B radford法蛋白定量后(3.208 mg/mL),作为新西兰白兔的免疫原及载脂蛋白AI测定的标准。本室免疫所得兔抗鸡apoAI抗血清制成免疫琼脂板,加样培养进行单向免疫扩散测定。本法的标准曲线相关性良好,可信性、重复性满意。

慢性肾功能衰竭患者血脂质变化

为研究慢性肾功能衰竭患者血脂质变化，检测40例慢性肾功能衰竭患者血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白AI和B水平。结果显示，慢性肾功能衰竭患者血清甘油三酯及载脂蛋白B较对照组明显升高（1．27±0．60mmol／L比0．79±0．23mmol／L，P＜0．01；0．89±0．18g／L比0．80±0．17g／L，P＜0．05）；高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白AI和载脂蛋白AI／B比值均明显降低（分别为1．07±0．47mmol／L比1．41±0．29mmol／L；1．26±0．28g／L比1．46±0．10g／L；1．41比1．82，P均＜0．01）。以上提示，慢性肾功能衰竭患者脂质代谢紊乱主要表现为甘油三酯和载脂蛋白B浓度升高，高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AI浓度降低。

蚯蚓冻干粉对高血脂症小鼠载脂蛋白AI和载脂蛋白B基因表达的影响

目的研究蚯蚓冻干粉(earthworm lyophilized powder,ELP)的降血脂作用是否与调节载脂蛋白AI(apolipoproteinAI,ApoAI)和载脂蛋白B(apolipoprotein B,ApoB)基因表达有关。方法健康昆明种小鼠60只,随机分为5组,基础饲料组(normal diet control group,NCG)、高脂饲料组(high fatdiet control group,HCG)、高脂饲料+高剂量ELP组(high-dose gavage group,HDG)、高脂饲料+中剂量ELP组(middle-dose gavage group,MDG)、高脂饲料+低剂量ELP组(low-dose gavage group,LDG)。ELP干预10周后,测定各组小鼠血脂水平,RT-PCR测定各组小鼠肝脏ApoAI、ApoB mRNA表达量。结果 ELP明显降低高血脂小鼠血浆TG(totalcholesterol)、TG(triglycerol)和LDL-C(low-density lipoprotein-cholesterol)水平,同时升高HDL-C(high-density lipoprotein-cholesterol)水平。HDG组和MDG组小鼠ApoAI mRNA表达量明显上升,ApoB mRNA表达量明显降低。结论 ELP具有明显的降血脂作用,其降血脂作用可能与其调节载脂蛋白基因表达有关。

高糖膳食对载脂蛋白AI基因-75 G/A多态性不同基因型健康青年血脂及载脂蛋白比值的影响

目的探讨高糖膳食对载脂蛋白AI基因(APOA1)启动子区-75 G/A多态性不同基因型健康青年血脂及载脂蛋白比值的影响。方法给予56名平均年龄为(22.89±1.80)岁的健康青年7 d平衡膳食和6 d高糖膳食。平衡膳食的热量组成为15%蛋白质、31%脂肪和54%碳水化合物;高糖膳食的热量组成为15%蛋白质、15%脂肪和70%碳水化合物。于膳食干预的第1天、第8天和第14天清晨抽取12 h空腹静脉血,测定血脂及载脂蛋白浓度,计算甘油三酯(TG)/高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)/HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/HDL-C及载脂蛋白B100(APOB100)/载脂蛋白AI(APOAI)的比值。提取全基因组DNA,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法分析APOA1-75 G/A多态性。结果基础值时,血脂及载脂蛋白比值在男性基因型之间的差异无统计学意义(P>0.05);在女性中,A等位基因携带者LDL-C/HDL-C显著高于GG基因型受试者(P<0.05)。高糖膳食后,TC/HDL-C在各性别和基因型分组中均显著降低(P<0.01)。LDL-C/HDL-C在男性各基因型中显著降低(P<0.05);在女性中,LDL-C/HDL-C仅在A等位基因携带者中显著降低(P<0.01),在GG基因型受试者中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 APOA1-75 G/A多态性A等位基因可能对其女性携带者的LDL-C/HDL-C比值有一定的影响。

脑梗死、冠心病患者载脂蛋白AI基因第三内含子MspI位点多态性研究

为了观察载脂蛋白AI基因第三内含子MspI位点多态性在北京地区汉族人群冠心病患者和脑梗死患者中的分布特点 ,探讨其与脂质代谢的关系 ,采用聚合酶链反应扩增技术对 783例个体载脂蛋白AI基因型进行分析 ,其中脑梗死组 2 36例 ,冠心病组 2 2 6例 ,对照组 32 1例 ,同时测定血脂及载脂蛋白。结果显示载脂蛋白AI基因第三内含子M2 等位基因频率与冠心病密切相关。M2 等位基因频率为 0 .387,与对照组相比增加 (P <0 .0 5 ) ;M2 等位基因频率脑梗死组与对照组相比有所增加 ,但统计学上未见差异 (P >0 .0 5 )。M2 M2 纯合等位基因型组的血脂变量与M1M1及M1M2 等位基因型组比较无论是在对照组还是在冠心病、脑梗死组中均存在显著差异。提示载脂蛋白AI基因第三内含子M2 等位基因的检出为进一步揭示该基因在冠心病发病及冠心病、脑梗死脂质代谢中的作用提供了良好的遗传标记 ,对预测血脂相关性疾病的危险性具有重要意义。

利用大肠杆菌高效表达人载脂蛋白AI及其性质分析

载脂蛋白AI(apolipoproteinAI,apoAI)是高密度脂蛋白HDL的主要组成成分 ,流行病学研究表明apoAI的含量决定血浆中HDL的高低 ,而HDL具有胆固醇逆向转运的功能 ,起到降低冠心病发生概率的作用。通过大肠杆菌表达系统来生产apoAI的蛋白原proapoAI,蛋白的表达形式为包涵体 ,通过疏水柱进行柱上复性。同时在proapoAI和apoAI之间设计一个酸水解位点 ,通过将蛋白原proapoAI进行酸水解来得到成熟蛋白apoAI。最终得到的成熟蛋白apoAI在结构分析和脂结合特性上都与天然的apoAI相似 ,从而为该蛋白的工业生产上提供了一个良好的基础。

不易感动脉粥样硬化动物北京鸭肝cDNA文库的快速构建

为了研究不易感动脉粥样硬化动物北京鸭多种载脂蛋白的基因分子结构，在国内外首次快速构建了鸭肝细胞CDNA文库。采用一步法提取鸭肝细胞总RNA；寡核胸苷酸为吸附介质，柱层析法进一步提取mRNA。以此为模板，利用改良的中CDNA合成方法，反转录合成鸭肝细胞CDNA的第一、二链。经CDNA双链末端修饰，连接含双酶切位点的连接子后重组于噬菌体载体，包装后获得高滴度的鸭肝细胞。CDNA文库，放射自显影显示合成的。CDNA产物大小在400～5000个核苷酸之间，该文库的克隆重组率98．5％以上，随机提取白色噬菌斑DNA，酶切鉴定均有CDNA插入片段。以制备的兔抗鸭aPoAI多抗为探针，从构建的cDNA文库中克隆出鸭aPoAIcDNA核苷酸序列，与常规方法比较，本法简便、快速，易于操作和掌握。本研究还对应用此方法构建CDNA文库的某些环节进行了讨论。

激活巨噬细胞抑制载脂蛋白AI促细胞胆固醇流出能力

为探讨巨噬细胞活化对载脂蛋白ＡＩ促胆固醇外流能力的影响，用炎症诱发剂活化鼠腹腔巨噬细胞，３Ｈ标记乙酰低密度脂蛋白作泡沫细胞诱导物，巨噬细胞衍化的泡沫细胞与载脂蛋白ＡＩ孵育一段时间后，测定由细胞释放入培养基中的３Ｈ标记胆固醇量。结果发现，载脂蛋白ＡＩ浓度为２０ｍｇ／Ｌ时，从被活化的细胞释放至基质中的３Ｈ标记胆固醇量［（４．１５±０．４１）×１０－１ｄｐｍ／ｇ细胞蛋白］显著低于未被活化的细胞［（５．６９±０．１２）×１０－１ｄｐｍ／ｇ细胞蛋白］（Ｐ＜０．０１），但高密度脂蛋白清除细胞胆固醇能力两组细胞无显著差异。提示巨噬细胞活化可显著抑制载脂蛋白ＡＩ促细胞胆固醇外流能力。