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Hippocampal expression of apoptotic protease activating factor-1 following diffuse axonal injury under mild hypothermia
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作者 Peng Yang Yun Li +10 位作者 Jun Zhu Jianmin Li Aijun Fu Qingjun Liu Tong Chen Zelin Sun Zhiyong Zhang Limin Zhang Yunhe Zhang Xifeng Zou Qunxi Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第11期845-849,共5页
The influence of mild hypothermia on neural cell apoptosis remains poorly understood. Therefore, the present study established rat models of diffuse axonal injury (DAI) at 33℃. Morris water maze results demonstrate... The influence of mild hypothermia on neural cell apoptosis remains poorly understood. Therefore, the present study established rat models of diffuse axonal injury (DAI) at 33℃. Morris water maze results demonstrated significantly better learning and memory functions in DAI rats with hypothermia compared with DAI rats with normothermia. Expression of apoptotic protease activating factor-1 in the hippocampal CA1 region was significantly lower in the DAI hypothermia group compared with the DAI normothermia group. Expression of apoptotic protease activating factor-1 positively correlated with latency, but negatively correlated with platform location times and time of swimming in the quadrant area. Results suggested that post-traumatic mild hypothermia in a rat model of DAI could provide cerebral protection by attenuating expression of apoptotic protease activating factor-1. 展开更多
关键词 diffuse axonal injury hippocampus apoptotic protease activating factor-1 mild hypothermia Morris water maze neural regeneration
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胃癌组织中IL-32与Apaf-1蛋白的表达及意义
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作者 朱兴华 陈亚丽 郭燕 《系统医学》 2024年第4期35-37,41,共4页
目的 分析胃癌组织中白细胞介素-32(Interleukin-32,IL-32)与凋亡蛋白酶激活因子-1(Apoptotic Protease Activating Factor-1,Apaf-1)的表达及意义。方法 回顾性选取2019年1月—2022年12月南通市肿瘤医院收治的100例胃癌患者的临床资料... 目的 分析胃癌组织中白细胞介素-32(Interleukin-32,IL-32)与凋亡蛋白酶激活因子-1(Apoptotic Protease Activating Factor-1,Apaf-1)的表达及意义。方法 回顾性选取2019年1月—2022年12月南通市肿瘤医院收治的100例胃癌患者的临床资料,分别取其胃癌组织标本(胃癌组)和正常胃黏膜标本(癌旁组),通过免疫组化法(Streptavidin-perosidase,SP)检测胃癌标本与正常标本中IL-32、Apaf-1蛋白的阳性表达情况。结果胃癌组IL-32阳性表达率高于癌旁组,Apaf-1蛋白阳性表达率低于癌旁组,差异有统计学意义(P均<0.05);胃癌患者高中分化程度与低分化程度之间,浸润深度<肌层与≥肌层之间,TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期与分期为Ⅲ、Ⅳ期之间以及有无淋巴结转移之间的IL-32、Apaf-1蛋白阳性表达率对比,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 IL-32与Apaf-1蛋白的阳性表达可为胃癌患者的临床诊断和治疗提供重要的参考价值。 展开更多
关键词 胃癌组织 白细胞介素-32 凋亡蛋白酶激活因子-1 阳性表达 意义
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miR-23a和APAF-1在子宫内膜癌中的表达及意义
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作者 张琼 何素丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第15期2116-2120,共5页
目的观察子宫内膜癌组织中微小RNA-23a(miR-23a)与凋亡蛋白酶活化因子-1(APAF-1)的表达变化并分析其临床意义。方法选取2018年5月至2020年5月于我院进行子宫内膜癌切除手术的123例标本为子宫内膜癌组,另选取其癌旁组织为正常组。检测子... 目的观察子宫内膜癌组织中微小RNA-23a(miR-23a)与凋亡蛋白酶活化因子-1(APAF-1)的表达变化并分析其临床意义。方法选取2018年5月至2020年5月于我院进行子宫内膜癌切除手术的123例标本为子宫内膜癌组,另选取其癌旁组织为正常组。检测子宫内膜组织中miR-23a与APAF-1的表达情况;分析miR-23a和APAF-1与患者临床病理的关系及二者的相关性,Kaplan-Meier法分析两指标对患者的生存情况的影响。结果与正常组相比,子宫内膜癌组miR-23a的表达升高,APAF-1 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);miR-23a、APAF-1均与临床分期、组织分化程度及肌层浸润显著相关(P<0.05);miR-23a与APAF-1呈显著负相关(P<0.05);Kaplan-Meier曲线显示miR-23a低表达组与APAF-1阳性表达组中的PFS、OS显著高于miR-23a高表达组和APAF-1阴性表达组(P<0.05)。结论子宫内膜癌中miR-23a表达升高,APAF-1降低,二者与子宫内膜癌的发展及患者预后相关,有望成为临床上评估早期患者疾病进展及预后的生物标记物。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 微小RNA-23a 凋亡蛋白酶活化因子-1 临床意义
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miR-125a-5p通过靶向APAF1增强非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药性 被引量:4
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作者 李彦明 郝雁冰 +4 位作者 杨继雷 李传贵 陈万生 孙忠哲 容宇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期622-628,共7页
目的:探讨miR-125a-5p在诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞吉非替尼(gefitinib,Gef)耐药中的作用及其机制。方法:选用人NSCLC耐药细胞株A549/GR和NSCLC细胞株A549,将miR-125a-5p mimic、miR-125a-5p inhibitor、p... 目的:探讨miR-125a-5p在诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞吉非替尼(gefitinib,Gef)耐药中的作用及其机制。方法:选用人NSCLC耐药细胞株A549/GR和NSCLC细胞株A549,将miR-125a-5p mimic、miR-125a-5p inhibitor、pcDNA3.1-APAF1、空载体pcDNA3.1转染至A549/GR细胞。用qPCR检测细胞中miR-125a-5p的表达水平,用MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测Gef对细胞增殖、迁移和凋亡的影响。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-125a-5p与细胞凋亡蛋白酶活化因子1(apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1)的靶向关系,用Western blotting检测A549/GR细胞中APAF1蛋白水平,用比色法测定细胞中caspase-3及caspase-9表达水平。结果:A549/GR细胞中miR-125a-5p表达水平显著高于A549细胞(P<0.01)。敲降miR-125a-5p显著增强Gef对A549/GR细胞增殖、迁移的抑制作用(均P<0.05),并促进细胞凋亡(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-125a-5p靶向APAF1,并负调控其表达。进一步实验显示,miR-125a-5p通过靶向下调APAF1缓解Gef对A549/G细胞增殖、迁移的抑制作用及凋亡的促进作用(均P<0.05),减弱Gef引起的凋亡相关蛋白caspase-3及caspase-9表达的上调(均P<0.05)。结论:miR-125a-5p促进NSCLC细胞Gef耐药,其机制是通过靶向APAF1而促进细胞的增殖、迁移并抑制凋亡。 展开更多
关键词 吉非替尼 非小细胞肺癌 A549/GR细胞 获得性耐药 miR-125a-5p 蛋白酶活化因子1 增殖 迁移 凋亡
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Procaine Inhibiting Human Bladder Cancer Cell Proliferation by Inducing Apoptosis and Demethylating APAF1 CpG Island Hypermethylated 被引量:3
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作者 SUN Ran CHANG Li-ping +2 位作者 WANG Kai-chen SUN Hong-yan CONG Xian-ling 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期1017-1021,共5页
Studies have shown that aberrant DNA methylation of apoptotic protease activating factor-1(APAF1) is an important epigenetic mechanism of gene regulation in the progression of bladder cancer.In this article,we have ... Studies have shown that aberrant DNA methylation of apoptotic protease activating factor-1(APAF1) is an important epigenetic mechanism of gene regulation in the progression of bladder cancer.In this article,we have proved that procaine,an inhibitor of DNA methyltransferases,could inhibit the proliferation of T24 and 5637 human bladder cancer cells by inducing their apoptosis.The mechanism studies reveal that procaine could induce demethylation of APAF1 gene in T24 or 5637 cells,subsequently activating caspase-3/9.It was also shown that the serum soluble fas ligand(sFasL) was activated,and the expression of matrix metallopeptidase 9(MMP-9) was down-regulated.Procaine seems to induce cell death by different pathways,and it might be used as a potential agent for bladder cancer treatment. 展开更多
关键词 Bladder cancer cell EPIGENETICS DNA methylation apoptotic protease activating factor-1(apaf1 PROCAINE
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凋亡蛋白酶活化因子-1和星形细胞上调基因-1在胃癌中的表达及临床意义
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作者 胡金花 阮玖根 李晓军 《当代医学》 2023年第20期9-12,共4页
目的探讨凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)和星形细胞上调基因-1(AEG-1)在胃癌中的表达及临床意义。方法选取2015年9月至2017年12月于新余市人民医院行胃癌切除术及病理证实的50例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组化法测定胃... 目的探讨凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)和星形细胞上调基因-1(AEG-1)在胃癌中的表达及临床意义。方法选取2015年9月至2017年12月于新余市人民医院行胃癌切除术及病理证实的50例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组化法测定胃癌及癌旁组织中Apaf-1、AEG-1表达水平,分析Apaf-1、AEG-1表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系及Apaf-1与AEG-1表达水平的相关性。结果癌旁组织中Apaf-1阳性表达率(78.00%)高于胃癌组织(20.00%),胃癌组织中AEG-1阳性表达率(82.00%)明显高于癌旁组织(26.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中Apaf-1、AEG-1表达水平均与肿瘤分化程度、浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位无关;经Spearman相关性分析结果显示,胃癌组织中Apaf-1表达水平与AEG-1表达水平呈显著负相关(r<0,P<0.05)。结论胃癌组织中AEG-1呈高表达,Apaf-1呈低表达,二者与胃癌的疾病进展密切相关,Apaf-1和AEG-1的肿瘤基因检测可能成为治疗胃癌的新靶点,具有较高的研究价值。 展开更多
关键词 星形细胞上调基因-1 凋亡蛋白酶活化因子-1 胃癌 细胞凋亡
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电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C及凋亡蛋白酶激活因子-1表达的影响 被引量:23
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作者 许明 张泓 +4 位作者 刘继生 尹秀婷 张健 黄桂兰 艾坤 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第6期628-633,共6页
目的观察电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能及脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)及凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley大鼠60只,随机抽取36只,采用改良T_(10)脊髓横断法制作完全性脊... 目的观察电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能及脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)及凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley大鼠60只,随机抽取36只,采用改良T_(10)脊髓横断法制作完全性脊髓损伤后神经源性膀胱模型,取24只成功模型分为模型组和电针组各12只,其余未造模大鼠24只随机分为假手术组和空白组各12只。于造模后第19天取次髎、中极、三阴交、大椎行电针,连续7 d后行尿流动力学检测,TUNEL法测定细胞凋亡率,Western blotting测定脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1蛋白的表达情况。结果与空白组和假手术组比较,模型组和电针组膀胱最大容量及膀胱顺应性均明显降低(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力增加(P<0.05);脊髓组织TUNEL阳性率显著升高(P<0.001);脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,电针组的膀胱最大容量及膀胱顺应性明显增加(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力降低(P<0.05);脊髓组织TUNEL阳性率明显降低(P<0.01);脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C及Apaf-1蛋白表达量降低(P<0.05)。结论电针次髎、中极、三阴交、大椎可改善完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能,其作用机制可能与脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1的表达下调,凋亡减少有关。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经源性膀胱 电针 CASPASE-9 细胞色素C 凋亡蛋白酶激活因子-1 凋亡 大鼠
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黄芪注射液抑制脑缺血再灌注大鼠海马组织Apaf-1表达 被引量:21
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作者 刘瑞 高维娟 +1 位作者 钱涛 王利 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期872-877,共6页
目的:观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)蛋白及其mRNA表达的影响。方法:将健康雄性SD大鼠120只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、黄芪注射液干预组和溶剂对照组。采用四血管阻断法制备大鼠脑缺血... 目的:观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)蛋白及其mRNA表达的影响。方法:将健康雄性SD大鼠120只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、黄芪注射液干预组和溶剂对照组。采用四血管阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,除假手术组外其余3组根据再灌注不同时点再分为0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、72 h和120 h 7个亚组,于再灌注相应时点提取脑组织。采用免疫组织化学和Western blot-ting检测大鼠海马组织Apaf-1蛋白的表达,RT-PCR法检测Apaf-1 mRNA的表达。结果:除0 h和120 h外,脑缺血再灌注组各个时点Apaf-1蛋白及mRNA表达均较假手术组增加(P<0.05);与脑缺血再灌注组相比,黄芪注射液干预组各个时点Apaf-1蛋白及mRNA表达均显著减少(P<0.05),而溶剂对照组各时点与脑缺血再灌注组相比则均无显著变化(P>0.05)。结论:黄芪注射液能抑制大鼠海马组织Apaf-1蛋白及mRNA表达,从而抑制脑缺血再灌注大鼠海马神经元的凋亡。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 黄芪注射液 凋亡蛋白酶激活因子1 海马 细胞凋亡
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Apaf-1和Ki-67在乳腺癌组织中的表达及临床意义 被引量:10
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作者 刘卓 李晓凤 张美云 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第2期133-136,共4页
目的探讨凋亡酶激活因子(Apaf-1)和Ki-67在乳腺癌组织中的表达并分析两者表达的临床意义。方法收集2014年1月至2015年12月60例乳腺癌组织和30例癌旁组织存档蜡块,采用免疫组织化学En Vision法检测Apaf-1和Ki-67的表达情况,同时分析两者... 目的探讨凋亡酶激活因子(Apaf-1)和Ki-67在乳腺癌组织中的表达并分析两者表达的临床意义。方法收集2014年1月至2015年12月60例乳腺癌组织和30例癌旁组织存档蜡块,采用免疫组织化学En Vision法检测Apaf-1和Ki-67的表达情况,同时分析两者表达的相关性及与临床病理特征(年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期和身体质量指数)的关系。结果 Apaf-1在乳腺癌组织中的阳性表达率为21.7%(13/60),低于癌旁组织的70.0%(21/30),差异有统计学意义(P<0.05)。Ki-67在乳腺癌组织中的阳性表达率为73.3%(44/60),高于癌旁组织的36.7%(11/30),差异有统计学意义(P<0.05)。两者表达与年龄、身体质量指数均无关(P>0.05),与肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05)。两者在乳腺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.413,P=0.018)。结论 Apaf-1在乳腺癌中表达降低,而Ki-67水平升高,两者在乳腺癌的发展和侵袭中发挥促癌作用,有可能作为临床诊断乳腺癌的标志物。 展开更多
关键词 乳腺癌 凋亡酶激活因子(Apaf-1) KI-67
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Nodosin通过Apaf-1和caspase-3诱导HepG2细胞凋亡 被引量:3
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作者 海广范 张慧 +2 位作者 马敬 郭兰青 王海燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2193-2197,共5页
目的:研究传统中药提取物nodosin对人肝细胞癌Hep G2细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:将nodosin设置为1. 25μmol/L、2. 5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L不同浓度组,作用于Hep G2细胞24 h后,用Hoechst 33258染色和电... 目的:研究传统中药提取物nodosin对人肝细胞癌Hep G2细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:将nodosin设置为1. 25μmol/L、2. 5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L不同浓度组,作用于Hep G2细胞24 h后,用Hoechst 33258染色和电镜观察不同浓度的药物对细胞形态学的影响,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用RT-qPCR检测凋亡蛋白酶激活因子1 (Apaf-1) mRNA的表达,用Western blot检测caspase-3及其前体和活化体的蛋白水平。结果:形态学结果显示,随着用药剂量的增加,细胞皱缩和细胞核偏移越明显,凋亡小体在5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L剂量组明显增多。Apaf-1 mRNA的表达增加,caspase-3及其前体的表达和cleaved caspase-3的蛋白水平随着用药剂量的增加逐渐增加(P <0. 01)。结论:Nodosin能够诱导Hep G2细胞凋亡。该作用可能是通过增加Apaf-1 mRNA的表达继之激活caspase-3实现的。 展开更多
关键词 肝细胞癌 NODOSIN 细胞凋亡 CASPASE-3 凋亡蛋白酶激活因子1
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食管鳞状细胞癌中Apaf-1基因启动子区甲基化状态及其与EZH2蛋白表达的关系 被引量:3
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作者 马洪亮 郭炜 +2 位作者 郭艳丽 董稚明 单保恩 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第3期193-196,J0001,共5页
目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)中凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)启动子区的甲基化状态及其与EZH2蛋白表达之间的相关性。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测128例食管鳞癌患者癌灶组织及相应癌旁组织的Apaf-1基因甲基化情况,应用免疫... 目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)中凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)启动子区的甲基化状态及其与EZH2蛋白表达之间的相关性。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测128例食管鳞癌患者癌灶组织及相应癌旁组织的Apaf-1基因甲基化情况,应用免疫组织化学方法检测Apaf-1和EZH2的蛋白表达情况。结果 Apaf-1基因在食管鳞癌组织中的甲基化率为52.3%,显著高于癌旁正常组织的4.7%(P<0.01),不同肿瘤TNM分期患者的Apaf-1基因甲基化率差异有统计学意义(P<0.01)。食管鳞癌组织Apaf-1蛋白表达阳性率为41.4%,显著低于相应癌旁正常组织的94.5%(P<0.01)。食管鳞癌组织EZH2蛋白表达阳性率为72.7%,显著高于相应癌旁正常组织的12.5%(P<0.01),不同肿瘤TNM分期和组织分化程度患者的Apaf-1和EZH2蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01)。食管鳞癌中Apaf-1基因甲基化与其蛋白阳性表达率呈负相关(r=-0.722),Apaf-1与EZH2的蛋白表达呈明显的负相关(r=-0.232)。结论 Apaf-1和EZH2可能共同参与了食管鳞癌的发生发展,Apaf-1基因启动子区的异常高甲基化可能是食管鳞癌中此基因失活的重要原因之一。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞 凋亡蛋白酶活化因子1 DNA甲基化 免疫组织化学 EZH2
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塞来昔布对大鼠重型颅脑创伤后运动功能及Apaf-1蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 张涛 国建飞 +2 位作者 邢琳琳 张金玲 张宇新 《天津医药》 CAS 2016年第6期716-719,806,共4页
目的探讨在大鼠重型颅脑创伤模型中,塞来昔布对环氧合酶(COX)-2和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)蛋白表达及运动功能的影响。方法 48只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机等量分为4组。正常对照组不做任何处理,假手术组给予头皮切开... 目的探讨在大鼠重型颅脑创伤模型中,塞来昔布对环氧合酶(COX)-2和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)蛋白表达及运动功能的影响。方法 48只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机等量分为4组。正常对照组不做任何处理,假手术组给予头皮切开并缝合,损伤组采用Foda法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型,治疗组在损伤组基础上立即腹腔注入塞来昔布(250 mg/kg,给药间隔6 h/次),其余3组在同等条件下给予等量生理盐水,72 h后统一取材。应用免疫组化法和Western blot法分别检测COX-2及Apaf-1蛋白表达变化。同上述分组方法每组另取6只,经10 d恢复后应用神经功能损害评分(NSS)对大鼠运动功能进行检测。结果损伤组COX-2和Apaf-1蛋白表达水平明显高于其他组,治疗组与损伤组比较能有效降低蛋白表达,但仍高于假手术组和正常组(P<0.05);NSS评分显示治疗组与损伤组比较能有效改善大鼠的运动功能障碍(P<0.05),但与假手术组和正常对照组比较仍有差距(P<0.05)。结论塞来昔布可通过对COX-2蛋白的特异性抑制,减少由其引发的炎症反应,进一步降低Apaf-1蛋白的表达,从而减少神经细胞的凋亡,并改善大鼠脑创伤后的运动功能障碍。 展开更多
关键词 颅脑损伤 环氧化酶2 凋亡蛋白酶活化因子1 神经功能损害评分
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表达谱基因芯片技术研究膦甲酸钠上调细胞凋亡蛋白酶激活因子-1基因的表达 被引量:4
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作者 王建军 刘妍 +4 位作者 成军 杨倩 纪冬 党晓燕 王春花 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2003年第6期346-348,362,共4页
目的:了解膦甲酸钠(PFA)与细胞凋亡蛋白酶激活因子-1(APAF-1)基因启动子的关系,为PFA的作用机制提供理论依据。方法:应用基因表达谱芯片技术对于膦甲酸钠刺激Jurkat细胞之后的基因表达谱进行研究。聚合酶链反应(PCR)扩增APAF-1基因启动... 目的:了解膦甲酸钠(PFA)与细胞凋亡蛋白酶激活因子-1(APAF-1)基因启动子的关系,为PFA的作用机制提供理论依据。方法:应用基因表达谱芯片技术对于膦甲酸钠刺激Jurkat细胞之后的基因表达谱进行研究。聚合酶链反应(PCR)扩增APAF-1基因启动子,命名为APAF-P。以T-A克隆法,将APAF-P基因片段连入栽体pGEM-T。将获得的质粒pT-APAF-P,与报告质粒pCAT3-basic分别用KpnⅠ和NheⅠ双酶切后构建APAF-1启动子报告基因表达载体pCAT3-APAF-P,以重组表达质粒pCAT3-APAF-P瞬时转染Jurkat细胞,以转染pCAT3 basic的Jurkat细胞为阴性对照,PFA刺激后24小时收获细胞。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果:表达谱基因芯片研究结果表明,PFA可上调APAF-1基因表达水平达2.815倍。构建的报告载体pCAT3-APAF-P经过序列分析和酶切鉴定正确。pCAT3-APAF-P和PFA瞬时转染的Jurkat细胞的CAT表达活性是CAT3空载体的4.9倍,pCAT3-Weep的2.9倍。结论:PFA可以上调APAF-1启动子的活性,进而上调APAE-1基因的表达。为深入了解PFA的免疫调节作用及其在病毒的清除过程中的作用机制提供新的理论依据。 展开更多
关键词 分子生物学 膦甲酸钠 药效学 细胞凋亡蛋白酶激活因子-1 基因芯片 基因启动子 抗病毒药物
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凋亡蛋白酶活化因子-1基因在贲门腺癌中的甲基化状态及其临床意义 被引量:2
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作者 马洪亮 郭炜 +3 位作者 郭艳丽 邝钢 杨植彬 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期526-530,共5页
目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptosis protease activatingfactor-1,Apaf-1)基因启动子区甲基化状态及其与果蝇zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)蛋... 目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptosis protease activatingfactor-1,Apaf-1)基因启动子区甲基化状态及其与果蝇zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)蛋白表达之间的相关性。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)检测GCA组织及癌旁组织中Apaf-1基因甲基化状态,应用免疫组织化学法检测GCA组织及癌旁组织中Apaf-1和EZH2蛋白的表达情况。结果:GCA组织中Apaf-1基因甲基化率显著高于癌旁组织[49.6%(62/125)vs 4.0%(5/125),P<0.01],Ⅲ期和Ⅳ期GCA组织中Apaf-1基因甲基化率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期(58.8%vs 38.6%,P<0.05),但GCA组织中Apaf-1基因甲基化率与GCA的组织学分化程度无关(P>0.05)。GCA组织中Apaf-1蛋白表达阳性率显著低于相应癌旁组织(39.2%vs 96.0%,P<0.01),且与Apaf-1基因甲基化状态相关。GCA组织中EZH2蛋白表达阳性率显著高于相应癌旁组织(74.4%vs 11.2%,P<0.01),且与Apaf-1蛋白的表达呈负相关。结论:GCA组织中Apaf-1基因启动子区呈高甲基化,Apaf-1和EZH2蛋白可能共同参与了GCA的发展。 展开更多
关键词 贲门腺癌 凋亡蛋白酶活化因子-1基因(Apaf-1) DNA甲基化 EZH2蛋白
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NF-κB Apaf-1蛋白在胃癌组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 杨波 杨涛 +3 位作者 杨东霞 张歆萍 孙海宁 李佳欣 《河北医学》 CAS 2022年第5期766-770,共5页
目的:探讨核转录因子-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)和凋亡蛋白酶活化因1(Apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)在胃癌组织中的表达及意义,为胃癌的临床治疗开辟新思路。方法:收集50例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正常... 目的:探讨核转录因子-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)和凋亡蛋白酶活化因1(Apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)在胃癌组织中的表达及意义,为胃癌的临床治疗开辟新思路。方法:收集50例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测NF-κB和Apaf-1蛋白的表达情况,分析二者与临床病理特征的关系和二者间相关性。结果:NF-κB蛋白在胃癌组织中的表达高于癌旁正常组织,而Apaf-1蛋白的表达低于癌旁组织,二者蛋白表达变化与分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴转移均有关(P<0.05)。相关性分析显示胃癌组织中NF-κB蛋白和Apaf-1蛋白表达为负相关(rs=-0.36,P<0.05)。结论:胃癌组织中NF-κB蛋白和Apaf-1蛋白表达异常,参与了胃癌的发生、发展,有望为胃癌的诊断及治疗提供参考。 展开更多
关键词 胃癌 核转录因子-ΚB 凋亡蛋白酶活化因子1 免疫组化SP法
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人脑胶质瘤中Apaf-1基因启动子区甲基化的研究
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作者 吕涛 关俊宏 +2 位作者 陈铎 魏翔泰 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期133-135,共3页
目的探讨凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)基因启动子区甲基化在脑胶质瘤中的表达及发生中的作用。方法应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR分析方法分析37例脑胶质瘤及9例瘤旁非肿瘤脑组织中Apaf-1基因表达及启动子区甲基化情况。结果37例... 目的探讨凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)基因启动子区甲基化在脑胶质瘤中的表达及发生中的作用。方法应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR分析方法分析37例脑胶质瘤及9例瘤旁非肿瘤脑组织中Apaf-1基因表达及启动子区甲基化情况。结果37例胶质瘤中23例Apaf-1mRNA表达下调,而瘤旁脑组织未发现Apaf-1mRNA表达明显下调或者上调;在Apaf-1基因表达明显下调的23例胶质瘤中15例出现甲基化,表达水平无明显下调的14例胶质瘤中仅4例出现甲基化,而瘤旁非肿瘤的9例脑组织中未检测到Apaf-1基因启动子甲基化。结论Apaf-1基因与脑胶质瘤的发生、发展相关,启动子区甲基化是该基因失活的重要机制。 展开更多
关键词 胶质瘤 凋亡蛋白酶活化因子1基因 逆转录酶-聚合酶链反应 甲基化
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脑出血PAR-1、HIF-1α与细胞凋亡关系实验研究 被引量:1
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作者 张德绸 刘大勇 +2 位作者 白雪 李小林 江燕 《泸州医学院学报》 2013年第3期223-227,共5页
目的:研究大鼠脑出血后血肿周围蛋白酶激活受体-1(proteinase activated receptor-1,PAR-1)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、神经细胞凋亡之间的关系及缺氧诱导因子-1α对神经细胞的保护作用。方法 :将90只S... 目的:研究大鼠脑出血后血肿周围蛋白酶激活受体-1(proteinase activated receptor-1,PAR-1)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、神经细胞凋亡之间的关系及缺氧诱导因子-1α对神经细胞的保护作用。方法 :将90只SD大鼠随机分为三组:空白对照组、假手术组、脑出血组(脑立体定位仪定位注射自体不凝血制造大鼠脑出血模型),分别于术后6h、1d、2d、3d、5d、7d处死,免疫组织化学法检测血肿周围区PAR-1、HIF-1α、TUNEL阳性细胞(凋亡细胞)数的表达,双抗体夹心ELISA法测定VEGF含量,假手术组注射等量生理盐水。结果:空白对照组、假手术组PAR-1、HIF-1α少量表达,偶见凋亡细胞;脑出血组自6h起PAR-1、HIF-1α表达上调,凋亡细胞大量增加,3d达高峰,PAR-1在7d基本降至假手术组,但凋亡细胞仍处于较高水平;6h起HIF-1α表达不明显,1d明显增多,3d达到高峰,7d仍处于较高水平,与空白对照组、假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),脑出血组自6h起VEGF含量明显增加,3d达高峰,7d仍处于较高水平,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑出血后血肿周围存在大量PAR-1表达上调,神经细胞凋亡明显增多,HIF-1α阳性细胞数、VEGF含量明显增加。 展开更多
关键词 脑出血 PAR-1 HIF-1Α VEGF 细胞凋亡
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基底细胞样乳腺癌组织中Apaf-1、Caspase-9的表达变化及意义
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作者 张丙信 赵霞 +5 位作者 陈雪 周炳娟 赵文明 李金梅 孙吉瑞 张金库 《山东医药》 CAS 2014年第39期12-14,共3页
目的观察基底细胞样乳腺癌(BLBC)组织中凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)、细胞凋亡蛋白酶9(Caspase-9)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测43例BLBC(A组)、57例non-BLBC(B组)和60例癌旁正常乳腺组织(C组)Apaf-1、Caspase-9的... 目的观察基底细胞样乳腺癌(BLBC)组织中凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)、细胞凋亡蛋白酶9(Caspase-9)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测43例BLBC(A组)、57例non-BLBC(B组)和60例癌旁正常乳腺组织(C组)Apaf-1、Caspase-9的表达,分析两指标间及与BLBC临床病理参数的关系。结果A、B、C组Apaf-1阳性率分别为23.3%(10/43)、49.1%(28/57)、75%(45/60),两两比较,P均<0.01;Caspase-9阳性率分别为27.9%(12/43)、54.4%(31/57)、85%(51/60),两两比较,P均<0.01。Apaf-1表达与BLBC肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05),Caspase-9表达与BLBC淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05)。BLBC组织Apaf-1与Caspase-9阳性表达呈正相关(r=0.639,P<0.01)。结论 BLBC组织Apaf-1、Caspase-9表达降低,两者异常表达可能与BLBC的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基底细胞样乳腺癌 凋亡蛋白酶活化因子1 细胞凋亡蛋白酶9
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活血清下中药对大鼠缺血-再灌注小肠凋亡蛋白酶活化因子-1表达的影响
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作者 李琳 解基良 +1 位作者 张楠 周振理 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2008年第2期138-140,共3页
目的:利用小肠缺血-再灌注动物模型,观察中药对小肠黏膜细胞凋亡的干预作用及对肠屏障的影响。方法:选用健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型组、承气合剂治疗组、复方丹参合剂治疗组、活血承气合剂(承气合剂+复方丹参合剂)治疗组... 目的:利用小肠缺血-再灌注动物模型,观察中药对小肠黏膜细胞凋亡的干预作用及对肠屏障的影响。方法:选用健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型组、承气合剂治疗组、复方丹参合剂治疗组、活血承气合剂(承气合剂+复方丹参合剂)治疗组。对动物模型再灌注6h、24h、72h时血浆内毒素、小肠黏膜上皮细胞凋亡情况、凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)的表达分别进行检测和观察。结果:与模型组比较,各治疗组对于肠黏膜上皮细胞凋亡均有不同程度的抑制作用,其中活血承气治疗组各观察指标降低明显(P<0.01),效果最佳。结论:小肠缺血-再灌注早期肠黏膜上皮细胞凋亡是造成血中内毒素明显升高、肠屏障功能损伤的主要原因之一。活血清下法可以通过抑制Apaf-1表达来减弱肠黏膜上皮细胞的凋亡,从而达到降低内毒素水平,保护肠屏障功能的作用。 展开更多
关键词 活血清下法 细胞凋亡 凋亡蛋白酶活化因子-1 肠屏障
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Apaf-1基因甲基化及表达在结直肠癌发生中的作用
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作者 刘震 张成武 王成 《青海医学院学报》 CAS 2010年第1期18-23,共6页
目的探讨Apaf-1基因甲基化及表达在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发生中的作用。方法应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR方法,分析40例CRC及癌旁正常组织中Apaf-1(apoptotic protease activating factor-1)基因的表达及启动子区甲基... 目的探讨Apaf-1基因甲基化及表达在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发生中的作用。方法应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR方法,分析40例CRC及癌旁正常组织中Apaf-1(apoptotic protease activating factor-1)基因的表达及启动子区甲基化情况。结果65%(26/40)的CRC组织Apaf-1表达明显下调,与癌旁正常组织相比差异有统计学意义(P<0.05)。Apaf-1基因与患者的性别及浸润深度差异无统计学意义(P>0.05),与患者的病理组织分化程度、淋巴结转移与否、临床TNM分期差异有统计学意义(P<0.05)。在Apaf-1基因表达明显下调的26例CRC中20例出现甲基化,表达水平无明显变化的14例CRC中5例出现甲基化,二者对比差异有统计学意义(P<0.05)。40例癌旁正常对照组织未检测到Apaf-1基因甲基化,提示甲基化是Apaf-1基因表达下调的主要原因。结论Apaf-1基因与CRC的发生发展相关,启动子区甲基化是该基因失活的重要发生机制。 展开更多
关键词 APAF-1基因 甲基化结直肠癌
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