养心通脉有效部位方对梗死心肌细胞因子分泌、血管新生及动员MSCs归巢的影响

探讨养心通脉有效部位方(apr-YTF)对梗死心肌细胞因子分泌、血管新生及动员骨髓间充质干细胞(MSCs)归巢的影响。方法:取急性心肌梗死造模成功的SD雄性大鼠32只,随机分为apr-YTF组、香丹注射液组、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)组和模型对照组4组,每组8只;均于造模3h后给予相应药物,连续5d。经masson’s三色染色检测心肌瘢痕组织微小血管密度,免疫组化的方法检测心肌组织中CD34+细胞、Ⅷ因子、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子受体(Flk-1)的含量表达。结果:单个高倍视野下apr-YTF组和rhG-CSF组的心肌毛细血管数较模型组显著增加(P<0.01);与模型组比较,2组的CD34+细胞、Flk-1、bFGF表达显著增加(P<0.01),2组的Ⅷ因子表达亦增加(P<0.05),apr-YTF组的VEGF表达比模型组显著增加(P<0.01),rhG-CSF组的VEGF表达较模型组亦增加(P<0.05)。结论:apr-YTF能促进Ⅷ因子、Flk-1、VEGF、bFGF的分泌,促进血管新生,促进大鼠外周血MSCs归巢于急性梗死的心肌,有利于急性梗死心肌的修复。

养心通脉有效部位方动员心肌梗塞大鼠MSCs归巢及对心功能和病理的影响

目的探讨养心通脉有效部位方(active principle region of Yangxing Tongmai Formula,apr-YTF)促进急性心肌梗塞大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)定向归巢及其对心功能和病理的影响。方法将造模成功的大鼠32只,随机分为apr-YTF组、香丹注射液组、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)组、模型对照组,每组8只,均于造模3h后给予相应药物,连续5d;均于造模后第2天开始腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),连续4d。用PcLab生物医学信号采集处理系统检测记录心功能,masson's三色染色检测梗塞心肌病理,Image-Pro Plus6.0病理图象分析系统测量梗塞区瘢痕面积百分比,免疫组化的方法检测梗塞心肌边缘区的CD34+染色阳性细胞数、Brdu与肌钙蛋白I(cTn I)双染阳性细胞数。结果 rhG-CSF组和apr-YTF组的心功能4个指标较模型组均有显著改善(P<0.05或P<0.01);两组的心肌梗塞边缘区瘢痕组织内可见新生的心肌细胞和血管,恢复的趋势较为明显;两组的心室肌瘢痕面积百分比较模型组和香丹组显著减小(P<0.01);两组大鼠梗塞心肌边缘区CD34+染色阳性的细胞数、Brdu与cTn I双染阳性的细胞数较模型组显著增加(P<0.01),apr-YTF组较rhG-CSF组显著增加(P<0.01)。结论 pr-YTF能促进MSCs归巢并因此而促进心肌细胞和心功能恢复。

养心通脉有效部位方对BMSCs移植心血瘀阻证心肌的实验研究

目的:观察养心通脉部位方(Active Principle Region of Yangxing Tongmai Formula,apr-YTF)对大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Mesemchymal Stem Cells,BMSCs)移植心血瘀阻证心肌后分化为心肌样细胞的作用。方法:采用"冠脉结扎法"结合血流变学改变建立大鼠心血瘀阻证模型。然后将大鼠分为(apr-YTF)+BMSCs组、集落刺激因子(rh G-CSF)+BMSCs组、NS+BMSCs组、NS+DMEM组。原代培养大鼠BMSCs,体外溴氮胞苷(5-bromouracil Deoxyriboside Brdu)标记后注射至大鼠心肌,采用双染法观察心肌组织中心肌结蛋白Desmin-Brdu和肌球蛋白重链(Myosin Heavy Chain MHC)-Brdu的表达。结果:apr-YTF干预BMSCs移植心血瘀阻证心肌28 d后经心肌结蛋白Desmin-Brdu抗体染色后,NS+DMEM组梗死边缘未见双染表达,在NS+BMSCs组、(rh G-CSF)+BMSCs和(apr-YTF)+BMSCs组均可有猩红色Brdu抗体和棕色Desmin蛋白的同时表达,其中(rh G-CSF)+BMSCs和(apr-YTF)+BMSCs组阳性细胞计数高于NS+BMSCs组(P<0.05);(rh G-CSF)+BMSCs组和(apr-YTF)+BMSCs组两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:apr-YTF能促使移植于心血瘀阻证心肌环境后BMSCs向心肌细胞的方向分化。