四氢嘧啶对HaCaT细胞活力及AQP3、Claudin-1、ZO-1表达的影响

目的研究四氢嘧啶(Ectoine)对人角质形成细胞(HaCaT)的细胞活力、细胞凋亡率和细胞活性氧(ROS)的影响,并分析水通道蛋白3(AQP3)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白(ZO-1)的表达水平。方法设置Ectoine浓度实验组和空白对照组,培养HaCaT细胞(24 h),采用CCK8法检测HaCaT细胞的细胞活力,甄选最佳的Ectoine作用浓度。用Western Blot法检测HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平;用流式细胞仪检测HaCaT细胞的凋亡率及胞内ROS水平。结果CCK8法检测结果显示,0.10%Ectoine组、0.20%Ectoine组、0.30%Ectoine组的HaCaT细胞活力均高于120%,其中0.20%Ectoine组最高(146.92%±7.67%)。Ectoine浓度实验组相对于空白对照组,HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平明显升高(P<0.05),且细胞凋亡率和胞内ROS水平均明显降低(P<0.05)。结论Ectoine可提高HaCaT细胞的细胞活力,降低凋亡率和胞内ROS水平,上调AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平。Ectoine可能与相关保湿蛋白的表达相关,对HaCaT细胞具有一定的保护作用。

血清Omentin-1、AQP4、VILIP-1预测急性前循环大血管闭塞性脑梗死的价值分析

目的:探讨急性前循环大血管闭塞性脑梗死(ALVS)患者在急诊血管内治疗术后血管再通后血清视椎蛋白样蛋白1(VILIP-1)、水通道蛋白-4(AQP4)、网膜素-1(Omentin-1)的表达和临床意义。方法:选取154例我院2019年9月-2022年9月就诊的ALVS患者,入院后均行血管内治疗术,根据术后90d改良Rankin(mRS)评分分为预后良好组116(75.32%)、预后不良组38例(24.68%),比较两组临床资料及术前、术后1个月Omentin-1、AQP4、VILIP-1的表达水平,Pearson分析术后1个月上述指标与mRS评分相关性,Logistic回归方程分析预后影响因素,并分析其预测价值。结果:与预后良好组比较,预后不良组术前血清VILIP-1、AQP4水平较低(P<0.05),Omentin-1水平较高(P<0.05),术后1个月血清VILIP-1、AQP4水平较低(P<0.05),Omentin-1水平较高(P<0.05),且术后1个月更为显著(P<0.05);术后1个月血清VILIP-1、AQP4水平与mRS评分呈正相关,Omentin-1水平与mRS评分呈负相关(P<0.05);VILIP-1、AQP4为术后90d预后不良危险因素,Omentin-1为预后不良保护因素(P<0.05);与低危组比较,高危组术后90d不良预后发生率高于低危组(P<0.05)。结论:血清VILIP-1、AQP4、Omentin-1水平为ALVS患者血管内治疗术后血管再通预后的重要影响因素,为临床早期评估和预测预后提供可靠依据。

老年急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1变化及其与预后的关系

目的检测老年急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、钙调蛋白(CaM)、水通道蛋白1(AQP1)水平,并探讨其与预后的关系。方法回顾性分析2021年2月至2022年2月于北京中医药大学孙思邈医院就诊的104例老年急性脑梗死患者的临床资料,依据入院后美国国立卫生研究院卒中(NHISS)量表评分进行分组,其中重度组23例,中度组43例,轻度组38例;采用改良Rankin(mRS)量表评估所有患者3个月后预后情况,并依据评分分组,其中预后不佳组37例,预后良好组67例,比较不同神经功能缺损程度患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平,应用Spearman相关性分析老年急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平与神经功能缺损程度的相关性,采用多因素Logistic回归分析探究老年急性脑梗死患者预后不佳的影响因素。结果重度组患者的Lp-PLA2、CaM、AQP1水平分别为(328.24±84.26)U/L、(227.59±61.34)ng/mL、(44.51±8.26)μg/L,明显高于中度组的(264.56±61.44)U/L、(150.17±44.38)ng/mL、(35.19±5.98)μg/L和轻度组的(201.83±55.12)U/L、(83.24±20.14)ng/mL、(24.32±3.48)μg/L,且中度组患者的Lp-PLA2、CaM、AQP1水平明显高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析显示,老年急性脑梗死患者Lp-PLA2、CaM、AQP1水平与神经功能缺损程度均呈正相关性(P<0.05);预后不佳组与预后良好组患者的性别、年龄、身体质量指数(BMI)、基础疾病等资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),但预后不佳组患者的NIHSS评分为(16.58±3.51)分,明显高于预后良好组的(14.24±2.35)分,血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平分别为(273.84±53.26)U/L、(174.69±48.65)ng/mL、(41.32±6.88)μg/L,明显高于预后良好组的(211.56±51.89)U/L、(130.43±38.55)ng/mL、(32.64±3.72)μg/L,差异均具有统计学意义(P<0.05);经多因素Logistic回归分析显示,血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平为老年急性脑梗死患者预后不佳的危险因素(P<0.05)。结论伴随老年急性脑梗死神经功能缺损程度加重,患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平均会出现升高现象;且血清Lp-PLA2、CaM、AQP1为老年急性脑梗死患者预后不佳的危险因素,值得临床重视。

急性大血管闭塞性卒中患者中omentin-1、AQP4、VILIP-1与急诊血管内治疗后血管再通的关系

目的探讨急性大血管闭塞性卒中(ALVOS)患者中网膜素-1(omentin-1)、水通道蛋白4(AQP4)、视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)与急诊血管内治疗后血管再通的关系及联合预测效能。方法选取110例行急诊血管内治疗的ALVOS患者,根据术后血管是否再通分为未再通组(23例)和再通组(87例),比较2组的临床资料和omentin-1、AQP4、VILIP-1水平。采用LASSO回归初筛术后血管再通的特征变量,寻找可使模型性能优良且影响因素最少的变量。采用logistic回归分析术后血管再通的影响因素。应用R语言绘制列线图预测术后血管再通,应用受试者操作特征(ROC)曲线和校准曲线评价、验证列线图的预测效能和校准度。结果未再通组高血压患者占比、术前美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、急诊血糖、AQP4和VILIP-1水平高于再通组,发病至血管内治疗时间长于再通组,术前Alberta卒中项目早期CT评分(ASPECTS)、静脉溶栓患者占比、血小板、omentin-1水平低于再通组(P<0.05)。术前ASPECTS、omentin-1水平是术后血管再通的相关独立保护因素,发病至血管内治疗时间、术前NIHSS评分、AQP4和VILIP-1水平是术后血管再通的相关独立危险因素(P<0.05)。运用R语言对logistic回归进行列线图可视化分析,该列线图预测术后血管再通的一致性指数为0.994,呈现出良好的区分度;列线图的ROC曲线显示,列线图预测术后血管再通的AUC为0.994,预测灵敏度为98.90%,特异度为95.70%,校准度为0.975,与实际观测结果曲线贴合度良好。结论omentin-1、AQP4、VILIP-1水平为ALVOS患者急诊血管内治疗后血管再通的重要影响因素,临床可通过监测其水平进行早期预测,采取针对性治疗,改善血管再通情况。

高频重复经颅磁刺激联合高压氧对颅脑损伤后昏迷患者预后、意识障碍程度及血清AQP-1水平的影响

目的探究高频重复经颅磁刺激联合高压氧对颅脑损伤后昏迷患者预后、意识障碍程度及血清水通道蛋白1(AQP-1)水平的影响。方法前瞻性将2021年3月至2023年5月在沧州市人民医院就诊的88例颅脑损伤后昏迷患者纳入研究。按照随机数字表法将其分为对照组(n=44)和研究组(n=44)。对照组采用高压氧治疗,研究组在对照组的基础上联合高频重复经颅磁刺激治疗。检测并比较两组患者治疗前、治疗4周后血清AQP-1、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、C反应蛋白(CRP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平;用格拉斯哥昏迷评分量表(GCS)、昏迷恢复修订量表(CRS-R)评估患者治疗前后的意识状态,并统计两组患者清醒率及清醒时间、昏迷期间并发症情况以及不良反应。结果研究组治疗4周后血清AQP-1、LDH、CRP水平分别为(21.24±6.61)μg/L、(246.61±32.88)U/L、(24.70±4.37)mg/L,均显著低于对照组[(26.33±7.86)μg/L、(295.73±50.09)U/L、(30.88±5.92)mg/L],SOD水平为(27.56±7.62)U/mL,显著高于对照组[(20.19±4.68)U/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者治疗4周后GFAP、NSE水平分别为(2.07±0.68)、(3.81±1.16)ng/mL,均显著低于对照组[(4.49±1.13)、(7.20±1.44)ng/mL],BDNF水平为(2.64±0.89)ng/mL,高于对照组[(1.87±0.51)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者治疗4周后GCS评分与CRS-R评分分别为(12.39±3.05)、(19.66±4.89)分,均显著高于对照组[(9.17±2.46)、(14.94±3.55)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组意识清醒时间为(22.36±5.74)d,显著短于对照组[(28.18±8.25)d],清醒率为93.18%,显著高于对照组(77.27%),并发症发生率为13.64%,显著少于对照组(38.63%),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合高频重复经颅磁刺激与高压氧治疗可以有效改善颅脑损伤后昏迷患者意识状态,降低血清AQP-1水平,缩短患者意识清醒时间。

血清标志物sTREM⁃1、AQP5对白内障术后感染性眼内炎的预测价值研究

目的研究血清标志物可溶性人髓系细胞触发受体⁃1(sTREM⁃1)和水通道蛋白5(AQP5)是对白内障术后感染性眼内炎的预测价值。方法选择2021年10月⁃2023年10月期间在成都爱尔眼科医院行手术治疗的白内障患者146例作为观察组,另取同期进行体检的健康者120名作为对照组,比较两组间血清sTREM⁃1、AQP5水平的差异;根据观察组术后是否发生白内障术后感染性眼内炎并分为感染亚组(n=31)和非感染亚组(n=115),比较两亚组间血清sTREM⁃1、AQP5水平及临床资料的差异,采用二元logistic回归分析白内障术后感染性眼内炎的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sTREM⁃1、AQP5对白内障术后感染性眼内炎的预测价值。结果观察组患者的血清sTREM⁃1、AQP5水平高于对照组,差异有统计学意义(t=13.235、12.484,P<0.05);感染亚组患者的血清sTREM⁃1、AQP5水平以及糖尿病比例、手术时间、术中出血量、玻璃体溢出比例均高于非感染亚组,差异有统计学意义(t=6.536、4.026、4.392、6.934、10.544、14.508,P<0.05);有糖尿病史、手术时间延长及血清sTREM⁃1、AQP5水平增加是白内障术后感染性眼内炎的危险因素(P<0.05);血清sTREM⁃1、AQP5对白内障术后感染性眼内炎具有预测价值,预测的曲线下面积分别为0.807、0.905。结论血清sTREM⁃1、AQP5水平增加与白内障术后感染性眼内炎相关,两项指标均对白内障术后感染性眼内炎具有预测价值。

血清水通道蛋白1水平联合血管外肺水指数对脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的价值

目的 探讨血清水通道蛋白1(AQP1)水平联合血管外肺水指数(EVLWI)对脓毒症致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的病情程度及预后的评估价值。方法 选取2020年1月至2023年12月收治的脓毒症致ARDS患者268例(ARDS组)和单纯脓毒症患者55例(单纯脓毒症组),脓毒症致ARDS患者根据氧合指数(OI)分为轻度组89例、中度组109例、重度组70例,根据28 d预后分为死亡组104例和存活组164例。检测血清AQP1水平和计算EVLWI。利用Spearman法,脓毒症致ARDS患者血清AQP1水平、EVLWI与OI的相关性;建立logistic回归模型,确定脓毒症致ARDS患者死亡的因素;并绘制ROC曲线,评价血清AQP1水平联合EVLWI对其的评估价值。结果 与单纯脓毒症组比较,ARDS组血清AQP1水平降低,EVLWI升高(P <0.05)。AQP1水平在轻度、中度、重度组中依次降低,EVLWI依次升高(P <0.05)。血清AQP1水平与脓毒症致ARDS患者OI呈正相关,EVLWI与脓毒症致ARDS患者OI呈负相关(P <0.05)。268例脓毒症致ARDS患者28 d死亡率38.81%(104/268)。脓毒症致ARDS患者死亡的独立保护因素为OI升高(OR=0.984,95%CI:0.976~0.992)和AQP1升高(OR=0.761,95%CI:0.677~0.854),独立危险因素为SOFA评分增加(OR=1.367,95%CI:1.142~1.636)和血乳酸升高(OR=2.515,95%CI:1.689~3.745)、EVLWI升高(OR=1.559,95%CI:1.290~1.885),差异有统计学意义(P <0.05)。血清AQP1水平联合EVLWI预测的AUC为0.887(95%CI:0.843~0.923),比血清AQP1水平、EVLWI单独预测的0.792(95%CI:0.738~0.839)、0.807(95%CI:0.754~0.852)大(P <0.05)。结论 血清AQP1水平降低和EVLWI升高与脓毒症致ARDS患者病情程度加重、预后不良有关,血清AQP1水平联合EVLWI对脓毒症致ARDS患者预后的评估价值较高。

血清AQP-1联合脑电双频指数对颅脑损伤患者病情严重程度和预后的评估

目的探讨血清水通道蛋白-1(AQP-1)联合脑电双频指数(BIS)对颅脑损伤(TBI)患者病情严重程度和预后的评估价值。方法选取2018-01—2021-12赤峰市医院收治的125例TBI患者为TBI组,根据格拉斯哥昏迷量表(GCS)分为轻度组51例,中度组42例,重度组32例,根据90 d格拉斯哥预后量表分为预后不良组和预后良好组,选取同期60名健康体检者为对照组。收集TBI患者临床资料,检测血清AQP-1水平和监测BIS。分析TBI患者血清AQP-1水平和BIS与GCS评分的相关性及AQP-1水平和BIS与TBI患者预后的不良关系和评估价值。结果TBI组血清AQP-1水平高于对照组(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清AQP-1水平依次升高,BIS依次降低(P均<0.05)。Spearman相关性分析显示,TBI患者GCS评分与血清AQP-1水平呈负相关,与BIS呈正相关(rs=-0.829、0.855,P均<0.001)。随访90 d,125例TBI患者预后不良发生率为26.40%(33/125)。多因素Logistic回归分析显示,GCS评分(OR=0.697,95%CI:0.569~0.854)、BIS(OR=0.705,95%CI:0.590~0.843)增加为TBI患者预后不良的独立保护因素,中线移位≥5 mm(OR=4.568,95%CI:1.200~17.387)、基底池异常(OR=3.620,95%CI:1.092~12.002)和AQP-1(OR=1.115,95%CI:1.023~1.215)升高为其独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清AQP-1联合BIS(AUC=0.837,95%CI:0.760~0.897)评估TBI患者预后不良的曲线下面积(AUC)大于AQP-1(AUC=0.759,95%CI:0.674~0.831)、BIS(AUC=0.769,95%CI:0.685~0.840)单独评估(P均<0.05)。结论血清AQP-1水平升高和BIS降低与TBI患者病情加重和预后不良有关,血清AQP-1联合BIS评估TBI患者预后不良的价值较高。

异功散通过调控脑水液代谢改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响,并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组(8只/组):对照组、模型组、多奈哌齐(1.67 mg/kg)组、异功散(7.5 g/kg)组。灌胃给予各组对应药物1次/d,1月后采用Morris水迷宫实验考察小鼠的学习记忆能力;HE染色观察海马皮层组织病理形态学变化;免疫组化染色、硫磺素S染色观察脑内淀粉样蛋白斑块数量变化;ELISA法检测脑组织和血清Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)含量;伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)通透性变化;免疫荧光共定位考察AQP4在星型胶质细胞上极化情况;Western blotting观察血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、闭锁连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、β-淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BACE1)、胰岛素降解酶(IDE)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、水通道蛋白4(AQP4)蛋白表达情况。结果与对照组比较,APP/PS1小鼠第5天的逃避潜伏期显著延长(P<0.001),平台象限停留时间降低(P<0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量增加且病理评分升高(P<0.001);Aβ阳性斑块明显升高以及硫磺素S荧光强度明显增强(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量升高(P<0.05);BBB通透性增加(P<0.01),RAGE蛋白表达上调(P<0.01)而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达下调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量减少(P<0.05)。与模型组比较,异功散组小鼠第5天的逃避潜伏期缩短(P<0.001),平台象限停留时间增加(P<0.05)且平均游泳速度加快(P>0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量减少且病理评分降低(P<0.01);Aβ阳性斑块减少以及硫磺素S荧光强度减弱(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量降低(P<0.05);维持了BBB通透性(P<0.01),RAGE蛋白表达下调(P<0.05),而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达上调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量明显增加(P<0.01)。结论异功散能够通过改善APP/PS1小鼠脑内神经细胞损伤、Aβ病变,调控脑水液代谢系统相关蛋白表达而改善学习记忆变化。

水通道蛋白1作为急性呼吸窘迫综合征肺部炎症水平的新生物标志物探索研究

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺组织水通道蛋白1(AQP1)表达水平的时效规律以及与肺损伤程度、经典炎症指标的相关性,旨在为ARDS寻找新的生物标志物及干预靶点。方法脂多糖(LPS)滴鼻制备ARDS小鼠模型,每日称量小鼠体质量,取6 h、1 d、3 d和7 d四个时间点肺组织和肺泡灌洗液,HE分析肺组织病理变化,ELISA和qPCR检测炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平,流式细胞术分析中性粒细胞、肺泡巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞等天然免疫细胞数量及比例,qPCR和Western blotting检测AQP1 mRNA和蛋白表达水平,Pearson法分析AQP1与炎性细胞相关性。结果LPS刺激6 h后小鼠肺组织有炎性细胞浸润,至第3日出现严重肺损伤,第7日有所恢复;炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA和蛋白水平持续升高至第3日,第7日降低(P<0.05);中性粒细胞比例显著升高,第7日降低,肺泡巨噬细胞和嗜酸性粒细胞、单核细胞比例持续降低至第3日,第7日升高(P<0.05);AQP1 mRNA和蛋白表达水平持续降低(P<0.05);AQP1表达水平与四种炎性细胞显著相关(P<0.01)。结论ARDS肺组织AQP1表达水平与肺损伤程度及炎症指标呈显著负相关,可作为肺损伤的新生物标志物,进一步揭示AQP1可能扮演的保护性角色具有潜在临床价值。

西北燥证对糖尿病大鼠AQP1、AQP3和CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达的影响

目的探讨西北燥证对糖尿病大鼠水通道蛋白-1(Aquaporin-1,AQP1)、水通道蛋白-3(Aquaporin-3,AQP3)和CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达的影响。方法选取16只正常大鼠,建立2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为正常环境T2DM组、西北燥证T2DM组,每组8只。另选正常大鼠8只设为正常对照组。观察各组大鼠的一般情况,检测大鼠空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、空腹血清胰岛素(Fasting serum insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)的变化,比较各组大鼠AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞的表达水平,分析血清CD4^(+)、CD8^(+)与AQP1、AQP3表达水平的相关性。结果与正常对照组比较,正常环境T2DM组大鼠和西北燥证T2DM组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T表达差异均有统计学意义(P<0.05);与正常环境T2DM组比较,西北燥证T2DM组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论西北燥证外环境可影响T2DM大鼠的血糖水平,其作用机制可能与调控AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达有关。

槐角苷通过调控AQP1、AQP3表达对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用

目的观察槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用。方法将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、赋型剂组、槐角苷组,切除卵巢进行造模,假手术组和模型组不给药,其余组连续阴道给药14 d后,观察用药前后大鼠一般体征变化(体质量、阴道pH、阴道健康状况、乳酸杆菌、内糖原),血清E2和FSH水平,阴道上皮黏膜中AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,槐角苷组大鼠体质量、血清E2和FSH水平无明显变化(P>0.05),阴道健康评分、乳酸杆菌数量、上皮细胞数量、内糖原表达、AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),炎细胞数量、阴道pH降低(P<0.05)。结论槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠具有保护作用,其机制与提高大鼠阴道上皮黏膜AQP1和AQP3表达有关。

藏绵羊肺脏结构特点及HIF-1α和AQP1的表达特性

【背景】低氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)是细胞对缺氧应激做出适应性反应的关键因子之一,主要通过调节基因转录来维持细胞中氧的供需平衡。水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是疏水性的跨膜转运蛋白,为机体水稳态平衡提供重要的系统调节。肺中,AQP1主要通过调节肺泡、肺间质和毛细血管间水转运从而保持肺内液体平衡。高原环境由于低氧、高寒、大风和强辐射等特点,能够适应并生存的物种相对较少,藏羊作为适应高海拔、高寒气候的特有物种,形成了独特的形态结构和生理功能适应。肺脏作为呼吸主要的执行器官,对低氧或缺氧等极为敏感。【目的】通过研究藏绵羊肺脏结构特点以及HIF-1α与AQP1在不同海拔藏绵羊肺脏中的表达特性,揭示其在藏绵羊高原环境适应性中所起的作用。【方法】选择不同生存海拔藏绵羊和小尾寒羊,断颈致死后快速采集肺组织,H.E染色、PAS染色、Masson染色等观察肺脏显微结构及弹性纤维分布,免疫组织化学SP法及实时荧光定量PCR法检测肺组织中HIF-1α与AQP1蛋白及基因的表达特点。【结果】藏绵羊肺脏被膜厚度为40.28μm,与小尾寒羊肺脏被膜厚度无显著差异,但其弹性纤维含量显著多于小尾寒羊(P<0.05);藏绵羊细支气管黏膜上皮单位面积内杯状细胞数量显著多于小尾寒羊(P<0.05),但小支气管及以上分支中两者无显著差异;藏绵羊终末细支气管黏膜上皮仍有少量散在分布的杯状细胞且其终末细支气管平滑肌厚度显著高于小尾寒羊(P<0.05);藏绵羊肺内微动脉(直径小于100μm)平滑肌占血管外径比例显著小于小尾寒羊;藏绵羊呼吸性细支气管平滑肌厚度及单位面积内毛细血管数量显著高于小尾寒羊。肺脏中HIF-1α蛋白主要表达于细支气管黏膜上皮、肺微血管内皮和肺泡隔中,主要表达于细胞质;高海拔藏绵羊和小尾寒羊肺组织中HIF-1α表达均显著高于低海拔绵羊,低海拔藏绵羊肺脏中HIF-1α的表达显著高于低海拔小尾寒羊。AQP1蛋白主要表达于肺泡上皮、肺泡隔及肺微血管内皮、细支气管平滑肌中,主要定位于细胞膜;高海拔藏绵羊肺组织中AQP1表达显著高于低海拔藏绵羊和小尾寒羊(P<0.05),但高海拔和低海拔小尾寒羊肺脏中AQP1的表达无显著差异(P>0.05)。【结论】藏绵羊肺被膜含有更多的弹性纤维,微血管平滑肌含量较少,但呼吸性细支气管上皮杯状细胞数量及平滑肌含量较多;藏绵羊肺脏中HIF-1α和AQP1的表达均显著高于小尾寒羊,且其表达均随海拔升高而增强。

AQP1在黄芩苷调控肺腺癌细胞增殖、迁移、凋亡中的作用及其分子机制

目的通过观察AQP1在黄芩苷调控肺腺癌细胞增殖、迁移、凋亡中的作用探讨其分子机制。方法将人肺腺癌细胞株LTEP-A2分为对照组及黄芩苷组,对照组正常培养细胞,黄芩苷组采用黄芩苷处理48h。采用qRT-PCR法检测细胞中AQP1表达,以CCK-8法、划痕实验、流式细胞术分别观察细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。将LTEP-A2细胞分为对照组、AQP1降表达组、AQP1过表达组,对照组不做处理,AQP1降表达组、AQP1过表达组分别转染AQP1小干扰siRNA及AQP1过表达载体,按照上法观察细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。将转染AQP1过表达载体的AQP1过表达LTEP-A2细胞分为AQP1过表达组、AQP1过表达+黄芩苷组、AQP1过表达+LY294002组、AQP1过表达+wortmannin组,AQP1过表达组不做处理,余下各组分别采用黄芩苷、PI3Kα抑制剂LY294002、磷酸化PI3Kα(p-PI3Kα)抑制剂wortmannin处理;采用Western blotting法观察各组PI3K/Akt信号通路相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、苏氨酸激酶(p-Akt)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达。结果黄芩苷组AQP1表达、细胞增殖抑制率低于对照组,细胞迁移距离、细胞凋亡率高于对照组(P均<0.05)。细胞增殖抑制率AQP1过表达组>对照组>AQP1降表达组,细胞迁移距离、细胞凋亡率AQP1降表达组>对照组>AQP1过表达组(P均<0.05)。LTEP-A2细胞VEGF、IGF、mTOR、p-Akt、HIF-1α蛋白表达AQP1过表达组>AQP1过表达+黄芩苷组、AQP1过表达+LY294002组、AQP1过表达+wortmannin组(P均<0.05),过表达+黄芩苷组、AQP1过表达+LY294002组、AQP1过表达+wortmannin组各项蛋白表达差异均无统计学意义。结论黄芩苷通过下调AQP1表达抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路激活有关。

维生素B6联合卡马西平对癫痫患儿AQP4、GFAP、GABABR1水平的影响

目的 探究维生素B6联合卡马西平对癫痫患儿水通道蛋白-4(AQP4)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、核氨基丁酸B受体亚单位1(GABABR1)水平的影响。方法 选取144例癫痫患儿,随机均分为卡马西平组和联合组。观察患儿癫痫发作频率及发作持续时间,评价患儿言语、操作智力,检测GABABR1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、HMGB1、AQP4及GFAP水平,评价患儿不良反应情况及疗效。结果 与卡马西平组治疗后比较,联合组治疗总有效率较高,总不良发生率较低,发作频率、发作持续时间、TNF-α、IL-2、IFN-γ、HMGB1、AQP4、GFAP水平降低,GABABR1、言语、操作智力升高(P<0.05)。结论 维生素B6联合卡马西平治疗癫痫患儿,能显著改善患儿症状与行为意识,降低炎症反应与神经系统损伤,效果显著。

鸦胆子油乳联合调强放疗对喉癌治疗效果、放疗副作用及血Treg/Th17细胞因子水平的影响

目的:研究鸦胆子油乳联合调强放疗对喉癌治疗效果、放疗副作用、血调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)细胞因子水平的影响,为临床提供参考。方法:选择2021年1月—2022年7月商丘市第一人民医院收治的126例喉癌患者作为研究对象,采用随机数表法分为对照组和观察组,每组各63例。对照组采用调强放疗治疗,观察组采用鸦胆子油乳联合调强放疗治疗。比较两组患者临床疗效、治疗前及治疗21 d后血清Treg/Th17相关细胞因子[白细胞介素(IL-6)、IL-17、IL-23、转化生长因子-β (TGF-β)]水平、血清细胞角蛋白19片段抗原21-1 (CYFRA21-1)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、水通道蛋白-1 (AQP-1)、斯钙素-1 (STC-1)水平,卡氏评分(KPS)及放疗副作用。结果:观察组临床总有效率高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=5.420,P<0.05);治疗21 d后,观察组血清IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β水平低于对照组,差异有统计学意义(t=5.211、17.611、7.748、9.482,P<0.05);治疗21 d后,观察组血清CYFRA21-1、SCC、AQP-1、STC-1水平低于对照组,差异有统计学意义(t=10.299、5.663、9.091、7.389,P<0.05);治疗21 d后观察组KPS评分高于对照组(t=13.674,P<0.05);观察组放疗副作用低于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.203、4.881、4.308、5.143,P<0.05)。结论:采用鸦胆子油乳与调强放疗联合治疗喉癌患者可获得更好的临床疗效,能进一步下调血清Treg/Th17细胞因子水平,提高患者体能状态,有效缓解毒副反应。

右美托咪定对心肌缺血再灌注后eNOS、HIF-1α、AQP1水平的影响

目的:观察右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)对心肌缺血再灌注后丙二醛(malondialdehyde,MDA)、内皮源性一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)水平的影响,探讨抑制体外循环心肺转流(cardiopulmonary bypass,CPB)术后低心排血量状态的细胞分子机制。方法:选取2021年5月—2022年6月在南通大学附属医院行CPB心内直视择期手术患者45例,按随机数字表法分为常规麻醉组(对照组)、常规麻醉+低剂量DEX组(DEX1组)和常规麻醉+高剂量DEX组(DEX2组),每组15例。常规麻醉:面罩吸氧去氮后,依次静脉注射依托咪酯、咪达唑仑、丙泊酚、维库溴铵、舒芬太尼行麻醉诱导,肌松后气管插管、机械控制呼吸;使用丙泊酚、瑞芬太尼、维库溴铵行麻醉维持,维持术中血流动力学稳定。DEX1组:常规麻醉基础上,麻醉前10 min单次予0.3μg/kg DEX静脉慢注,再予0.8μg/(kg·h)DEX静脉维持;DEX2组:在常规麻醉基础上,麻醉前10 min单次予0.6μg/kg DEX静脉慢注,再予1.2μg/(kg·h)DEX静脉维持。比较3组患者一般情况和MDA、HIF-1α、eNOS、AQP1水平。结果:各组患者基本情况差异无统计学意义(P>0.05)。患者心脏复跳(T1)、复跳后15 min(T2)时MDA水平与麻醉诱导前(T0)比较,对照组和DEX1组显著增高(P<0.05),DEX2组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,T1、T2时DEX2组显著降低(P<0.05),DEX1组差异无统计学意义(P>0.05)。T2时DEX1组HIF-1α、eNOS、AQP1水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),DEX2组较对照组显著增高(P<0.05);与DEX1组比较,DEX2组HIF-1α、eNOS、AQP1水平均显著增加(P<0.05)。结论:DEX术前预处理可能是干预CPB心内直视手术后心肌缺血再灌注损伤的对策,内皮细胞eNOS/HIF-1α-AQP1可能是临床改善术后低心排血量状态的重要信号通路。

水通道AQP1敲除小鼠肿瘤血管生成障碍及肿瘤生长减缓

血管生成是肿瘤生长、浸润和转移的必要步骤. 肿瘤血管生成涉及瘤旁组织血管内皮细胞增殖、向肿瘤细胞团内迁移以及管腔形成,目前机理尚不完全清楚. 水通道AQP1在多种肿瘤血管内皮高表达,提示其可能参与肿瘤血管的生成过程. 应用AQP1敲除小鼠荷瘤实验证实了AQP1在黑色素瘤生长和血管新生中的作用. 结果表明,皮下接种的黑色素瘤在AQP1敲除小鼠的生长较之在野生型小鼠延迟近30%(P< 0.01). 免疫组化与肿瘤病理形态学分析显示,AQP1在野生型小鼠黑色素瘤血管内皮细胞上高表达,而在AQP1敲除小鼠黑色素瘤血管内皮细胞呈阴性表达. 在病理结构上,黑色素瘤细胞围绕血管分支呈岛状分布. 野生型小鼠黑色素瘤内血管管腔较细小,而AQP1(-/-)小鼠黑色素瘤内血管床显著膨大. AQP1(-/-)小鼠肿瘤内平均微血管密度(47/mm2) 较之AQP1(+/+)肿瘤(142/mm2) 减少67%(P< 0.01). 围绕AQP1(-/-)肿瘤血管的肿瘤细胞岛周边坏死区域明显大于AQP1(+/+)肿瘤. 上述结果提出确切证据表明,AQP1缺失使肿瘤血管生成发生障碍,从而影响了肿瘤血液供应和肿瘤生长. AQP1参与肿瘤血管生成的机理值得深入研究.

急性肺损伤大鼠呼吸膜AQP1和AQP5的表达

目的确定水通道蛋白AQP1及AQP5是否在大鼠肺泡毛细血管膜(呼吸膜)表达,进而研究急性肺损伤(ALI)大鼠AQP1和AQP5的表达调节及激素干预的作用。方法采用亲和的抗人AQP1和AQP5抗体,应用免疫组化及免疫电镜的方法研究AQP1及AQP5在呼吸膜的分布。选用肺泡内灌注脂多糖(LPS)制作大鼠ALI动物模型,研究ALI时呼吸膜AQP1及AQP5的变化。结果免疫染色显示AQP1主要表达于正常肺组织的微血管内皮,而AQP5主要表达于肺泡I型上皮细胞。免疫组化分析进一步表明LPS灌注后4h^48h AQP1及AQP5在呼吸膜的表达均下降;AQP1蛋白于LPS灌注后24h及激素干预后有部分恢复(P<0.05),而AQP5无这种恢复现象。结论 ALI时AQP1及AQP5在呼吸膜的表达减少,提示ALI时AQP1和AQP5的下降表达可能与其液体转运的异常有关。

DKK-1抑制剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿影响的研究

目的探讨DKK-l对大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)和水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)表达的影响。方法选取2022年1-12月期间由广西医科大学动物实验中心提供的雄性大鼠72只,按随机数表法分为假手术组、SAH模型组和DKK-1抑制剂组,每组24只。分别比较各组在不同时间点(术后1、2、4周)的脑组织含水量和AQP-4、AQP-1的表达水平。结果假手术组大鼠的脑组织含水量未改变,另两组脑组织含水量自第1周均慢慢提高,且在1周时增至最高。DKK-1抑制剂组术后1、2、4周时间点脑组织含水量均低于SAH模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。DKK-1抑制剂组术后1、2、4周AQP-4表达水平(0.78±0.14)%、(0.87±0.16)%、(0.98±0.18)%与术后1、2、4周AQP-1表达水平(0.79±0.15)%、(0.89±0.17)%、(0.97±0.19)%不断上调,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组未出现AQP-1上调,其余各组AQP-1从术后1周时均逐渐增高上调;SAA模型组和DKK-1抑制剂组于术后4周时AQP-1表达值达到顶峰。DKK-1抑制剂组术后1、2、4周时间点AQP-1表达低于SAH模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DKK-1抑制剂可以减少SAH后大鼠脑组织含水量,可抑制AQP-4及AQP-1表达,从而减轻SAH后大鼠神经功能损害。