IGHG1对人急性髓系白血病THP-1细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨免疫球蛋白G1重链恒定区(IGHG1)对急性髓系白血病(AML)细胞系THP-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人AML THP-1细胞,分为对照(正常培养的THP-1细胞)、pcDNA3.1[转染IGHG1过表达(pcDNA3.1-IGHG1)阴性对照质粒的THP-1细胞]、pcDNA3.1-IGHG1(转染pcDNA3.1-IGHG1的THP-1细胞)、LY364947[转化生长因子-β(TGF-β)/信号转导蛋白(Smad)抑制剂LY36494720μmol/L处理THP-1细胞)]、si-NC[转染IGHG1小干扰RNA(IGHG1-siRNA)阴性对照的THP-1细胞]、si-IGHG1(转染IGHG1-siRNA的THP-1细胞)和si-IGHG1+LY364947(IGHG1-siRNA和LY364947共同处理THP-1细胞)共7组。荧光定量PCR法检测各组THP-1细胞中IGHG1和免疫球蛋白G(IgG)mRNA的表达;CCK-8法检测各组THP-1细胞增殖活力;流式细胞术检测各组THP-1细胞凋亡率和细胞周期变化;蛋白印迹法检测各组THP-1细胞增殖、凋亡及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,过表达IGHG1后THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、IgG、TGF-β1、磷酸化Smad3(p-Smad3)/Smad3蛋白表达均显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达均显著降低(P<0.05)。抑制TGF-β/Smad信号通路或沉默IGHG1后THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、Cyclin D1、Bcl-2、IgG、TGF-β1、p-Smad3/Smad3蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bax、Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05);且与沉默IGHG1相比,IGHG1基因沉默和TGF-β/Smad通路抑制共同处理的THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、Cyclin D1、Bcl-2、IgG、TGF-β1、p-Smad3/Smad3蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bax、Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论:沉默IGHG1基因可下调IgG的表达,抑制人AML THP-1细胞增殖,阻滞细胞周期进程,并诱导细胞凋亡;其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路的激活有关。

PAIgG及血小板活化标志物PAC-1、CD62P检测在原发性血小板减少性紫癜患者临床意义

目的检测原发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板相关抗体(PAIgG)及血小板活化标志物PAC-1、CD62P表达,以探讨其在ITP中应用价值。方法采用流式细胞仪分别对ITP患者、非免疫性血小板减少、其他自身免疫性疾病及正常对照组的PAIgG、PAC-1及CD62P的表达情况进行分析测定。结果 ITP患者PAC-1血小板阳性表达率45.7±17.6%明显高于其他三组患者11.4±4.2%,10.2±4.2%,11.7±5.6%(P【0.01),但CD62P血小板阳性表达率四组无明显差别,分别为3.4± 0.55%,3.1±0.52%,3.2±0.51%;3.4±0.53%(P】0.05);在32例ITP患者,21例表现为PAIgG阳性血小板百分率增高 (65.6%),23例表现为平均荧光强度(MFI)增高(71.9%),将PAIgG与MFI综合统计,对ITP患者阳性诊断率为84.4%(27/32); 无临床症状ITP患者的PAC-1活性表达为55.4±27.9%明显高于有临床症状ITP患者29.8±12.3%(P【0.01),PAIgG测定结果在两组间无明显差异(P】0.05)。结论 PAIgG对ITP诊断具有较高的阳性率,同时结合PAC-1,可提高ITP的诊断正确率; PAC-1可作为ITP患者疗效监测及判断预后的指标;CD62P并非监测ITP患者血小板活化的理想标志物。

尿α-1微球蛋白和尿免疫球蛋白G与移植肾功能的关系

目的研究肾移植术后受者尿α-1微球蛋白、尿免疫球蛋白G(IgG)的变化规律及其与移植肾功能短期转归之间的关系。方法29例肾移植受者,于肾移植术后第1、7、14、21、28天分别检测晨尿α-1微球蛋白和尿IgG含量;根据临床、实验室、影像学等检查综合评价移植肾功能状况;分析尿α-1微球蛋白和尿IgG与血清肌酐(SCr)的关系。结果在肾移植术后1月内,尿α-1微球蛋白、尿IgG与SC r水平相关。29例中移植肾功能恢复正常15例(A组),移植肾功能未恢复正常14例(B组);A组尿α-1微球蛋白显著降低(P<0.05),A组中符合尿α-1微球蛋白和尿IgG临界值(<10 mg/dL,<2 mg/dL)的受者检测例次明显多于B组(P<0.01)。两组间尿α-1微球蛋白/SC r比值存在显著差异。结论尿α-1微球蛋白和尿IgG与肾移植受者短期肾功能相关。

人可溶性sTNFR1及胞膜外区Ig融合基因重组腺病毒的真核表达及功能活性鉴定

目的构建携带人sTNFR1与IgGFc片段融合基因的重组腺病毒,稳定表达并初步鉴定其功能活性在妊娠哮喘炎症机制中的作用。方法将PCR扩增的sTNFR1及IgGFc基因片段先后连接到穿梭质粒pAdTrack-CMV多克隆位点上,酶切线性化后在BJ5183细菌内与骨架质粒pAdEasy-1同源重组,产生获得的AdE-EGFP-sTNFR1-Ig以脂质体法转染AD293细胞进行病毒包装,以绿色荧光蛋白(GFP)监测病毒滴度及感染效率。RT-PCR、Western blot实验鉴定细胞内重组腺病毒转录及融合基因与蛋白表达;流式细胞术、ELISA实验分析混合培养上清中转染肥大细胞(MC)激活、调节同基因来源T细胞表达Th2/Treg水平及细胞因子分泌效果;MTT评估转染细胞上清中sTNFR1-Ig对TNF-α介导细胞毒效应的拮抗作用。结果成功构建编码sTNFR1-Ig基因的重组腺病毒载体经酶切和测序鉴定正确,制备的腺病毒在转染细胞中的GFP表达以及CPE效应明显,扩增后的滴度为3.7×1010～4.8×1010pfu/ml,体外感染效率可达90%以上;sTNFR1-Ig基因在mRNA及蛋白水平获得的清晰条带均证实腺病毒包装与扩增成功。表达sTNFR1-Ig的MC诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+T细胞水平以及IL-12含量均明显升高,CD4+IL-4+Th2细胞水平下调(P<0.05),Th2/Treg所占CD4+T细胞比值下降(P<0.05)。sTNFR1-Ig封闭TNF-α对MC免疫毒性作用的浓度效应明显,而EGFP-MCs与对照细胞上清对TNF-α毒性效应的中和阻断能力不足(P<0.05)。结论携sTNFR1-Ig基因重组腺病毒参与的免疫调控与妊娠期哮喘发生发展密切相关。sTNFR1及IgG-Fc亚基胞膜外区结合的表达和引起免疫耐受的作用研究,为妊娠哮喘发病机制在理论上的新突破,为以sTNFRI-Ig为靶点的妊娠哮喘干预治疗奠定基础。

CD38、CD138、IgG_4在胆道闭锁发病中作用的研究进展

胆道闭锁(biliary atresia,BA)是婴儿期最严重的肝胆系统疾病之一,以肝内外胆管进行性炎症和纤维性梗阻为特征。目前BA的病因并不明确,可能与遗传易感、病毒感染、免疫损伤有关,现多认为是多因素共同作用的结果。而在众多因素中,炎症免疫学说得到大多数学者支持。CD38、CD138、IgG_4在自身免疫性肝病中的作用机制已有相关文献报道,而BA和其他的自身免疫性肝病有相似之处,在疾病进展过程中均有炎症免疫反应,对疾病的发生发展起着不可代替的作用,因此,本文就CD38、CD138、IgG_4在BA炎症免疫中的作用进行综述。

血清PLA2R1和IgG联合检测对特发性膜性肾病的诊断价值

目的探讨血清M型磷脂酶A2受体1(PLA2R1)、免疫球蛋白G(IgG)联合检测在特发性膜性肾病(IMN)中的诊断价值。方法抽取四川大学华西广安医院肾内科收治的96例肾病综合征患者行前瞻性研究,包括52例IMN患者、24例继发性膜性肾病(SMN)患者与20例不典型膜性肾病(AMN)患者,分别纳入IMN组、SMN组、AMN组,比较3组一般临床资料、实验室指标[白蛋白(ALB)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清肌酐(Scr)、肾小球滤过率(eGFR)、24h尿蛋白定量、血清PLA2R1、IgG],并分析血清PLA2R1、IgG对IMN的诊断敏感度与特异度。结果3组血清PLA2R1比较,IMN组>AMN组>SMN组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);IMN组血清IgG水平明显高于SMN组(P<0.05);血清PLA2R1对IMN的诊断敏感度、特异度为77.36%、89.85%,ROC曲线下面积(AUC)为0.801;血清IgG分别为60.37%、71.25%,AUC为0.713;血清PLA2R1、IgG联合诊断敏感度、特异度为80.14%、93.78%,AUC为0.912。结论IMN患者血清PLA2R1、IgG水平异常升高,二者联合检测有助于IMN的临床诊断。

社区获得性肺炎患儿血清内皮素-1水平变化及临床意义

目的:探究社区获得性肺炎(CAP)患儿血清内皮素-1(ET-1)水平的变化及临床意义。方法:选取134例CAP患儿(CAP组),依据疾病严重程度分为轻症组(69例)和重症组(65例)。另选取同期健康体检儿童70例作为健康组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测所有受试者血清ET-1、C反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白G(IgG)水平。比较不同程度CAP患儿血清ET-1、CRP、IgG水平。分析CAP患儿血清ET-1水平与CRP、IgG的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清ET-1、CRP、IgG水平对重症CAP的诊断价值。结果:CAP组患儿血清ET-1、CRP水平明显高于健康组,IgG水平明显低于健康组(均P<0.05)。重症组患儿血清ET-1、CRP水平明显高于轻症组,IgG水平明显低于轻症组(均P<0.05)。CAP患儿血清ET-1水平与CRP水平呈正相关,与IgG水平呈负相关(r=0.476、-0.469,均P<0.05)。血清ET-1诊断重症CAP的曲线下面积(AUC)为0.887,截断值为108.86 pg/ml时灵敏度、特异度分别为78.5%和88.4%。血清ET-1与CRP联合预测重症CAP的AUC为0.902,灵敏度、特异度分别为84.6%和88.4%。结论:CAP患儿血清ET-1水平明显升高,其可能与CRP、IgG相互影响,进而在CAP发展中发挥重要作用。ET-1与CRP联合可更好地筛查重症CAP患儿。

瑞芬太尼静脉自控分娩镇痛联合“2+1”导乐陪伴分娩模式对无痛分娩孕妇产后的影响

目的探讨瑞芬太尼静脉自控分娩镇痛联合“2+1”导乐陪伴分娩模式对无痛分娩孕妇产后出血、新生儿免疫球蛋白G(IgG)水平的影响。方法108例产妇的临床资料,根据麻醉方法的不同分为观察组和对照组,每组54例。2组均接受“2+1”导乐陪伴分娩模式干预,对照组应用舒芬太尼联合罗哌卡因硬膜外自控分娩镇痛,观察组应用瑞芬太尼静脉自控分娩镇痛。比较2组孕妇生产时母婴结局、产痛、产程时间,产后出血情况及新生儿娩出时脐带血指标。结果观察组孕妇产后出血率低于对照组(P<0.05);观察组孕妇产后2 h出血量低于对照组(P<0.05);观察组孕妇的产痛Ⅲ、Ⅱ级比例低于对照组,Ⅰ、0级比例高于对照组照组(P<0.05);观察组孕妇的阴道分娩率高于对照组(P<0.05);观察组新生儿并发症发生率低于对照组(P<0.05);观察组孕妇的第一产程、第二产程、第三产程时间均短于对照组(P<0.05)。观察组新生儿脐带血二氧化碳分压(PaCO2)水平低于对照组,IgG、血氧分压(PaO2)水平高于对照组(P<0.05)。结论瑞芬太尼静脉自控分娩镇痛联合“2+1”导乐陪伴分娩模式可降低无痛分娩孕妇产后出血及产痛,缩短产程,优化母婴结局,提高母体给予新生儿免疫防御能力,改善新生儿血气指标。

Hp-IgG抗体联合血清DKK1、sB7-H3对早期胃癌的诊断价值

目的探讨幽门螺杆菌免疫球蛋白G(Hp-IgG)抗体联合血清分泌型蛋白Dikkopf相关蛋白1(DKK1)、可溶性B7同源物3(sB7-H3)对早期胃癌(EGC)的诊断价值。方法选择2020年6月至2023年8月江苏省南通市海门区人民医院收治的48例EGC患者作为研究对象(EGC组), 选取同时期确诊的50例慢性萎缩性胃炎(CAG)患者作为CAG组, 58例健康体检者作为对照组。采用胶体金法检测Hp-IgG抗体情况, 酶联免疫吸附试验测定血清DKK1、sB7-H3水平;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析Hp-IgG抗体、DKK1、sB7-H3对CAG与EGC的鉴别诊断价值, 采用Kappa一致性检验评估其鉴别诊断的一致性。结果对照组、CAG组、EGC组Hp-IgG抗体阳性率分别为36.21%(21/58)、72.00%(36/50)、89.58%(43/48), DKK1水平分别为(13.78±3.35)、(21.36±4.52)、(38.86±7.24)μg/L, sB7-H3水平分别为(7.63±1.59)、(12.34±3.64)、(25.35±5.27)μg/L, 差异均有统计学意义(χ^(2)=34.51, P<0.001;F=316.95, P<0.001;F=314.22, P<0.001);与对照组相比, CAG组、EGC组Hp-IgG抗体阳性率、DKK1及sB7-H3水平均升高(均P<0.05);与CAG组相比, EGC组Hp-IgG抗体阳性率、DKK1及sB7-H3水平均升高(均P<0.05)。CAG患者Hp-IgG抗体阳性36例、阴性14例, DKK1水平分别为(22.18±4.84)、(16.33±3.57)μg/L, sB7-H3水平分别为(12.83±3.84)、(9.33±2.32)μg/L, 差异均有统计学意义(t=4.10, P<0.001;t=3.18, P=0.003)。EGC患者Hp-IgG抗体阳性43例、阴性5例, DKK1水平分别为(39.66±7.61)、(30.05±5.23)μg/L, sB7-H3水平分别为(26.18±5.62)、(16.24±4.25)μg/L, 差异均有统计学意义(t=2.74, P=0.009;t=3.82, P<0.001)。ROC曲线显示, Hp-IgG抗体鉴别诊断CAG与EGC的曲线下面积(AUC)为0.81(95%CI为0.72~0.88), 敏感性为72.00%, 特异性为89.58%;DKK1鉴别诊断CAG与EGC的AUC为0.90(95%CI为0.82~0.95), 最佳截断值为28.32 μg/L, 敏感性为70.00%, 特异性为95.83%;sB7-H3鉴别诊断CAG与EGC的AUC为0.86(95%CI为0.78~0.92), 最佳截断值为16.44 μg/L, 敏感性为70.00%, 特异性为95.83%;三者联合鉴别诊断CAG与EGC的AUC为0.95(95%CI为0.89~0.98), 敏感性为90.00%, 特异性为87.50%;三者联合优于Hp-IgG抗体、DKK1及sB7-H3各自单独鉴别诊断CAG与EGC(Z=3.62, P<0.001;Z=2.13, P=0.035;Z=2.69, P=0.016)。Kappa一致性检验显示, Hp-IgG抗体联合DKK1、sB7-H3鉴别诊断CAG与EGC, 与病理组织学检查一致性更佳(Kappa=0.78)。结论 EGC患者Hp-IgG抗体阳性率、DKK1及sB7-H3水平均升高, 三者联合检测鉴别诊断CAG与EGC效能更优。

多项尿蛋白联合筛查对糖尿病肾病早期诊断的临床价值

目的:探讨多项尿蛋白联合检测对糖尿病肾病(DN)早期诊断的临床价值。方法:选取76例DN患者作为观察组,并根据干化学法检测的尿蛋白定性结果将其进一步分为弱阳性(±)DN组(9例),阳性(+)DN组(9例),强阳性(++)DN组(30例),超强阳性(+++)DN组(28例);同时选择60名健康体检者作为对照组。采用免疫散射比浊法分别检测观察组与对照组的尿液微量白蛋白(m Alb)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、转铁蛋白(TRF)以及免疫球蛋白G(Ig G)项目;采用化学比色法检测24 h尿蛋白(UTP)项目;采用干化学试纸条法检测尿蛋白定性项目,并比较两组各项尿蛋白检测结果。结果:观察组m Alb、Ig G及TRF与对照组相比,其差异有明显统计学意义(Z=-3.43,Z=-2.61,Z=-3.51;P<0.01)。UTP项目尿蛋白弱阳性DN组与对照组相比,差异有统计学意义(Z=-2.11,P<0.05);尿蛋白阳性、强阳性及超强阳性DN组与对照组相比,其差异有明显统计学意义(Z=-2.66,Z=-2.89,Z=-4.03;P<0.01)。α1-MG和β2-MG两项:尿蛋白弱阳性DN组和尿蛋白阳性DN组与对照组相比无差异;尿蛋白强阳性DN组和尿蛋白超强阳性DN组与对照组相比,其差异有明显统计学意义(Z=-3.89,Z=-5.37,Z=-2.64,Z=-3.71;P<0.01)。结论:多项尿蛋白联合检测对诊断早期DN有较高的临床价值,尤其是m Alb、Ig G及TRF三项对DN早期诊断更具有临床意义。

消白合剂治疗白癜风的临床观察

目的 :观察消白合剂治疗白癜风的疗效。方法 :将白癜风患者 74例随机分成消白合剂治疗组及8 甲氧补骨脂素 (8 MOP)片对照组 ,进行临床疗效及甲皱微循环、血浆内皮素 1、血清免疫球蛋白的观察和比较。结果 :消白合剂疗效优于 8 MOP片 (P <0 0 5 ) ,并能明显改善患者的甲皱微循环、提高血浆内皮素 1的水平、降低血清免疫球蛋白IgG(P <0 0 1)。 结论 :消白合剂治疗白癜风具有疗效优势。

阿奇霉素对动脉粥样硬化家兔炎症反应的影响

目的观察动脉粥样硬化与炎症的关系及阿奇霉素对动脉粥样硬化的影响。方法用高胆固醇喂养加血管内膜剥脱的方法复制家兔动脉粥样硬化模型,并予阿奇霉素干预治疗4周。于实验0、4、8、12周检测血中炎性标志物高敏C反应蛋白、肺炎衣原体抗体的水平;测定病变组织中血管细胞粘附分子1 mRNA水平;观察病变组织动脉粥样硬化情况。结果高脂组家兔动脉粥样硬化明显,内膜增生幅度最大,管腔面积最小。随着动脉粥样硬化的进展,高脂组和阿奇霉素组血中高敏C反应蛋白、肺炎衣原体抗体的水平和组织中血管细胞粘附分子1 mR-NA的表达均明显升高,阿奇霉素组血中高敏C反应蛋白(123.9±2.1 g/L)、肺炎衣原体抗体(1.40±0.09 g/L)的水平和组织中血管细胞粘附分子1 mRNA(0.978±0.135)较高脂组血中高敏C反应蛋白(212.8±5.3 g/L)、肺炎衣原体抗体(2.03±0.08 g/L)的水平和组织中血管细胞粘附分子1 mRNA(1.102±0.108)明显降低(P<0.05)。两组之间血脂水平差异无显著性(P>0.05)。结论动脉粥样硬化与炎症密切相关,阿奇霉素有抗动脉粥样硬化的作用。

老年糖尿病患者尿特种蛋白检测的临床意义

目的探讨不同尿特种蛋白指标在老年糖尿病患者肾损害程度中的变化及临床意义。方法选取老年糖尿病患者284例,根据尿蛋白清除率(UAER)进行糖尿病肾病分级,按照患病时间进行分组,选取60例健康老年人作为对照组,分别测定其尿β2-MG,mAlb,IgG,α1-MG含量,分析肾功能损害的临床指标。结果老年糖尿病患者尿β2-MG,mAlb,IgG,α1-MG显著高于健康对照组(P<0.01),随肾病病变进展及病程延长,上述四项指标每级均较前一级和每组均较前一组有显著增高(P<0.05)。结论β2-MG、mAlb、IgG、α1-MG是反映老年糖尿病患者肾功能损害的较早期指标,对肾功能损害程度及部位判断有一定价值。

视神经脊髓炎谱系疾病发病相关抗体的研究进展

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种亚裔人群高发的获得性、异质性神经眼科交叉性疾病,与视神经脊髓炎(NMO)相关的视神经炎在临床上具有较高致盲率,给患者的生活、学习、工作带来沉重的负担。特异性诊断生物标志物水通道蛋白-4抗体(AQP4-IgG)的发现与确认,使得NMOSD在发病机制、诊断及治疗上取得显著的进步,但AQP4-IgG并非NMOSD完全通用的生物标志物,还需要在NMOSD早期开发诊断标记物。随着临床和基础研究的不断进展,髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG-IgG)、水通道蛋白-1抗体(AQP1-IgG)、胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP-IgG)等在NMOSD发病中的地位逐渐受到重视。本文回顾近些年来与NMOSD发病相关的抗体研究成果,试图分析、综述各抗体在NMOSD发病机制中的作用现状及未来发展前景。

单纯疱疹病毒和载脂蛋白E基因多态性对阿尔茨海默病的影响

目的:探讨单纯疱疹病毒感染和载脂蛋白(ApoE)基因多态性对阿尔茨海默病发病的影响。方法:用间接ELISA法测定18例阿尔茨海默病(AD)病人和20例正常对照者血浆中抗单纯疱疹病毒1型(HSV1)特异性IgG,IgM类抗体及抗单纯疱疹病毒2型(HSV2)特异性IgG,IgM类抗体;通过直接测序法检测ApoE基因的基因型并分析其单核苷酸多态性。结果:AD病人血浆中抗HSV1特异性IgG类抗体阳性率较正常对照明显升高(P<0.05);两组血浆中均未检测到抗HSV1,HSV2特异性IgM类抗体。含ε4等位基因的基因型频率在AD和对照组之间有明显差异(P<0.05);AD的发病与HSV1感染和携带ApoEε4有明显相关性(P<0.01,比值比(OR)1.809,4.976。结论:HSV1感染和携带ApoEε4对AD发病起到一定作用,两种因素同时存在可能是AD发病的危险因子。

儿童特发性肾病综合征低IgG血症机制:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白过表达对滤泡辅助性T细胞数量的可能影响

目的探讨儿童特发性肾病综合征(INS)的低免疫球蛋白(Ig)G血症可能机制。方法选择2015年9月至2016年10月,于深圳市儿童医院接受治疗的40例激素敏感型INS患儿为研究对象。按照患儿病情,将其分为INS初发组(n=20)和INS缓解组(n=20),选择同期在该院接受健康体检的同年龄健康儿童纳入对照组(n=20)。采用流式细胞术(FCM)检测受试儿外周血单个核细胞(PBMC)中滤泡辅助性T细胞(Tfh,CD4+CXCR5+ICOShighT)、初始B细胞(CD19+CD27-IgD+B细胞)、转化前记忆B细胞(CD19+CD27+IgD+B细胞)、转化后记忆B细胞(CD19+CD27+IgD-B细胞)及浆细胞(CD19+CD27+IgD-CD38highB细胞)百分比;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测受试儿外周血CD4+T细胞相关基因mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附试验、免疫荧光吸附试验,分别检测受试儿血浆白细胞介素(IL)-2水平、丙二醛浓度。采用单因素方差分析及最小显著性差异(LSD)-t法,对上述指标分别进行3组间及组间两两比较;对其中部分指标的相关性,采用Pearson相关分析法。本研究通过深圳市儿童医院伦理委员会批准(批准日期:2016-04-11),所有受试对象监护人知情并同意。结果①INS初发组患儿血清总蛋白及白蛋白水平,以及血浆总IgG、IgG1、IgG2、IgG4水平等6项指标,均显著低于对照组健康儿童,血清总胆固醇浓度,则显著高于对照组,并且差异均有统计学意义(P<0.05)。②INS初发组患儿PBMC中Tfh百分比为(3.9±1.2)%,显著低于对照组的(5.2±1.1)%及INS缓解组的(4.9±1.2)%,并且差异均有统计学意义(P=0.001,P=0.021)。③INS初发组患儿PBMC中,转化后记忆B细胞、浆细胞百分比为(8.4±3.6)%、(7.5±2.0)%,均低于INS缓解组患儿的(11.6±2.7)%、(11.4±3.9)%及对照组健康儿童的(12.2±3.7)%、(12.5±3.4)%,并且差异均有统计学意义(均为P<0.001)。④INS初发组患儿的8项指标,如CD4+T细胞相关基因B淋巴细胞诱导成熟蛋白(Blimp)-1、IL-2Rα、IL-2Rβ、IL-2Rγ、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及雷帕霉素结合蛋白复合物(mTORC)1mRNA表达水平为(3.2±1.1)、(14.4±5.7)、(18.5±4.6)、(7.2±1.7)、(10.3±3.6)、(2.2±0.3)、(1.84±0.68)、(7.2±1.4),均高于INS缓解组患儿的(2.4±1.1)、(10.5±2.5)、(15.5±3.5)、(5.5±1.1)、(8.5±2.2)、(1.8±0.5)、(1.44±0.29)、(6.1±1.2)及对照组健康儿童的(2.4±1.1)、(10.3±5.5)、(14.6±4.8)、(5.6±2.5)、(1.56±0.42)、(2.4±1.1)、(10.3±5.5)、(14.6±4.8);而B细胞淋巴瘤因子(BCL)-6 mRNA表达水平为(1.22±0.29),则低于INS缓解组患儿的(1.49±0.35)及对照组健康儿童的(1.56±0.42),并且上述差异均有统计学意义(均为P<0.05)。⑤INS初发组患儿血浆IL-2水平及丙二醛浓度为(28.9±6.1)ng/L、(15.0±9.2)μmol/L,均高于INS缓解组患儿的(18.0±5.9)ng/L、(7.3±5.4)μmol/L及对照组健康儿童的(16.2±7.6)ng/L、(8.8±5.1)μmol/L,并且差异均有统计学意义(P<0.001、P=0.022,P<0.001、P=0.004)。⑥INS缓解组患儿与对照组健康儿童上述21项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。⑦60例受试儿PBMC中Tfh百分比与血浆IgG水平、浆细胞百分比,均呈正相关关系(r=0.692、0.809,P<0.001)。INS初发组20例患儿血浆丙二醛浓度与mTOR、mTORC1mRNA表达水平,亦均呈正相关关系(r=0.627、P=0.003,r=0.794、P<0.001)。结论INS患儿PBMC中Tfh百分比下降影响B细胞分化成熟,可能是导致患儿低IgG血症的原因之一。血浆IL-2水平升高和高脂血症导致的mTOR和mTORC1过表达,可能是抑制INS患儿Tfh分化的重要原因。

阻断高迁移率组蛋白B1对利福平致小鼠肝损伤内质网应激的影响

目的探讨高迁移率组蛋白B1(HMGB1)对利福平致小鼠肝损伤及其内质网应激(ERS)的影响。方法按照体重将小鼠随机分为4组:正常组、模型组、HMGB1抗体组和免疫球蛋白(IgG)抗体组,每组8只。除正常组外均给予利福平200 mg·kg^-1·d^-1灌胃,制备利福平肝损伤模型。在造模开始的第1、3和5天,HMGB1抗体组和IgG抗体组分别给予腹腔注射HMGB1多克隆抗体溶液(0.5 mg·kg^-1)和IgG抗体溶液(0.5 mg·kg^-1),其余2组腹腔注射等量0.9%NaCl。用生化分析仪检测小鼠血清总胆红素(TBIL)和谷丙转氨酶(GPT),用蛋白质印迹法检测小鼠肝组织核因子κB(NF-κB)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶/内切核糖核酸酶肌醇需要酶1α(IRE1α)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达变化。结果正常组、模型组、HMGB1抗体组和IgG抗体组的TBIL分别为(3.65±0.45),(42.06±9.17),(23.41±1.96)和(49.40±12.58)μmo1·L^-1;这4组的GPT分别为(27.97±9.99),(99.45±21.59),(57.91±4.97)和(89.60±12.12)μmo1·L^-1;这4组的NF-κB相对表达量为0.51±0.03,1.03±0.01,0.76±0.02和0.98±0.06;这4组的GRP78相对表达量为0.41±0.03,1.28±0.24,0.87±0.07和1.15±0.16;这4组的CHOP相对表达量为0.32±0.01,1.34±0.15,0.81±0.05和1.23±0.07;这4组的IRE1α相对表达量为0.56±0.05,1.35±0.12,1.06±0.04和1.37±0.15;上述指标:模型组和IgG抗体组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);HMGB1组与模型组和IgG抗体组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论阻断HMGB1可以减轻利福平导致的小鼠肝损伤,其机制与抑制HMGB1-内质网应激途径有关。

Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein-IgG Contributes to Oligodendrocytopathy in the Presence of Complement, Distinct from Astrocytopathy Induced by AQP4-IgG

Immunoglobulin G against myelin oligodendrocyte glycoprotein(MOG-Ig G) is detectable in neuromyelitis optica spectrum disorder(NMOSD) without aquaporin-4 Ig G(AQP4-Ig G), but its pathogenicity remains unclear.In this study, we explored the pathogenic mechanisms of MOG-Ig G in vitro and in vivo and compared them with those of AQP4-Ig G. MOG-Ig G-positive serum induced complement activation and cell death in human embryonic kidney(HEK)-293 T cells transfected with human MOG. In C57 BL/6 mice and Sprague-Dawley rats, MOG-Ig G only caused lesions in the presence of complement. Interestingly, AQP4-Ig G induced astroglial damage, while MOGIg G mainly caused myelin loss. MOG-Ig G also induced astrocyte damage in mouse brains in the presence ofcomplement. Importantly, we also observed ultrastructural changes induced by MOG-Ig G and AQP4-Ig G. These findings suggest that MOG-Ig G directly mediates cell death by activating complement in vitro and producing NMOSDlike lesions in vivo. AQP4-Ig G directly targets astrocytes,while MOG-Ig G mainly damages oligodendrocytes.

不典型膜性肾病病理特点的诊断价值评估

目的对不典型膜性肾病(AMN)的病理特点进行分析,并评估其诊断价值。方法选取2011年至2017年首都医科大学附属北京安贞医院肾内科经肾穿刺病理检查诊断为AMN的患者91例。依据肾组织M型磷脂酶A2受体(PLA2R)和1型血小板反应蛋白7a域(THSD7A)免疫组化染色结果,将其分为AMN组(PLA2R和THSD7A均阴性,25例)和特发性膜性肾病(IMN)组(PLA2R或THSD7A阳性,66例)。比较两组患者的免疫荧光、光镜和电镜检查结果,筛选出差异有统计学意义的指标,采用四格表评估其诊断AMN的价值。结果免疫荧光结果中AMN组IgG同时沉积于毛细血管壁和系膜区、IgG4阴性而其他IgG亚类和补体C1q阳性的比例均高于IMN组(分别56.0%比12.1%,44.0%比0,均P<0.05),其诊断AMN的特异度分别为87.9%、100.0%。而IgG伴IgA和(或)IgM阳性、以IgG4为主伴其他IgG亚类和补体C1q阳性的比例两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。光镜检查中AMN组基底膜“假双轨征”、上皮下伴其他部位的嗜复红蛋白沉积的比例均高于IMN组(分别36.0%比0,44.0%比1.5%,均P<0.05),其诊断AMN的特异度分别为100.0%、98.5%。而两组肾小球系膜细胞增生积分差异无统计学意义(P>0.05)。电镜结果中AMN组内皮下电子致密物沉积的比例高于IMN组(36.0%比1.5%,P<0.05),其诊断AMN的特异度为98.5%。结论在未进行PLA2R和THSD7A相关检查时,IgG同时沉积于毛细血管壁和系膜区、IgG4阴性而其他IgG亚类和补体C1q阳性、基底膜“假双轨征”、上皮下伴其他部位的嗜复红蛋白沉积、上皮下伴内皮下电子致密物沉积均有助于诊断AMN。

维生素A缺乏与小儿反复呼吸道感染的相关性

目的分析维生素A缺乏、免疫及炎症因子与小儿反复呼吸道感染的相关性。方法选择2017年1月-2018年1月遵义市妇幼保健院收治的反复呼吸道感染患儿74例为病例组,选择同期健康体检儿童74名为对照组。检测两组儿童维生素A缺乏情况,比较两组儿童血清白细胞介素-1(IL-1)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与免疫球蛋白G(IgG)水平,对维生素A、炎症因子与小儿反复呼吸道感染进行Pearson相关性分析。结果病例组患儿维生素A缺乏发生率35.14%,维生素A可疑性缺乏发生率32.43%,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组患儿IL-1、IgG及淋巴细胞计数指标水平均低于对照组;血清hs-CRP、TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。维生素A、IL-1、IgG、淋巴细胞计数与小儿反复呼吸道感染呈显著负相关;hs-CRP、TNF-α与小儿反复呼吸道感染呈显著正相关(P<0.05)。结论反复呼吸道感染患儿存在维生素A缺乏症状,其血清免疫指标低于正常儿童,炎症因子高于正常儿童。