老年急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1变化及其与预后的关系

目的检测老年急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、钙调蛋白(CaM)、水通道蛋白1(AQP1)水平,并探讨其与预后的关系。方法回顾性分析2021年2月至2022年2月于北京中医药大学孙思邈医院就诊的104例老年急性脑梗死患者的临床资料,依据入院后美国国立卫生研究院卒中(NHISS)量表评分进行分组,其中重度组23例,中度组43例,轻度组38例;采用改良Rankin(mRS)量表评估所有患者3个月后预后情况,并依据评分分组,其中预后不佳组37例,预后良好组67例,比较不同神经功能缺损程度患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平,应用Spearman相关性分析老年急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平与神经功能缺损程度的相关性,采用多因素Logistic回归分析探究老年急性脑梗死患者预后不佳的影响因素。结果重度组患者的Lp-PLA2、CaM、AQP1水平分别为(328.24±84.26)U/L、(227.59±61.34)ng/mL、(44.51±8.26)μg/L,明显高于中度组的(264.56±61.44)U/L、(150.17±44.38)ng/mL、(35.19±5.98)μg/L和轻度组的(201.83±55.12)U/L、(83.24±20.14)ng/mL、(24.32±3.48)μg/L,且中度组患者的Lp-PLA2、CaM、AQP1水平明显高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析显示,老年急性脑梗死患者Lp-PLA2、CaM、AQP1水平与神经功能缺损程度均呈正相关性(P<0.05);预后不佳组与预后良好组患者的性别、年龄、身体质量指数(BMI)、基础疾病等资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),但预后不佳组患者的NIHSS评分为(16.58±3.51)分,明显高于预后良好组的(14.24±2.35)分,血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平分别为(273.84±53.26)U/L、(174.69±48.65)ng/mL、(41.32±6.88)μg/L,明显高于预后良好组的(211.56±51.89)U/L、(130.43±38.55)ng/mL、(32.64±3.72)μg/L,差异均具有统计学意义(P<0.05);经多因素Logistic回归分析显示,血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平为老年急性脑梗死患者预后不佳的危险因素(P<0.05)。结论伴随老年急性脑梗死神经功能缺损程度加重,患者血清Lp-PLA2、CaM、AQP1水平均会出现升高现象;且血清Lp-PLA2、CaM、AQP1为老年急性脑梗死患者预后不佳的危险因素,值得临床重视。

熏烟对肺组织AQP1表达与定位的影响

目的探讨水通道蛋白1(Aquaporin1,AQP1)在慢性阻塞性肺病(Chronic obstruc-tive pulmonary disease,COPD)和熏烟诱导的COPD小鼠模型中的表达变化。方法选取SPF级昆明小鼠30只,4周龄,采用随机数字表法分为空白对照组、熏烟3个月组和熏烟6个月组,各10只。熏烟组小鼠构建熏烟诱导的COPD小鼠模型,空白对照组小鼠不进行任何处理。免疫组织化学法和蛋白印迹法分别测定各组小鼠肺组织中的AQP1蛋白表达量。体外使用尼古丁刺激人非小细胞肺癌细胞系A549,分为对照组(PBS)、3μmol/L尼古丁组(3μmol/L)和5μmol/L尼古丁组(5μmol/L),测定各组A549细胞中的AQP1蛋白表达量。用“limma”函数对COPD数据进行差异表达基因分析;对AQP1表达量与差异表达基因进行Pearson相关性分析;用GeneMANIA平台对相关性强的基因进行富集分析。结果免疫组织化学结果显示,对照组小鼠肺组织中AQP1主要分布于肺组织毛细血管内皮细胞和红细胞内,在Ⅱ型肺泡上皮细胞的顶膜也有少量分布。HE染色结果显示,对照组小鼠肺泡及肺间质无炎症细胞浸润,呼吸道通畅;熏烟3个月组小鼠肺组织可见肺大泡形成,小气道及血管周围可见炎性细胞浸润,并伴有黏性分泌物堆积;熏烟6个月组小鼠肺组织可见大量肺大泡,血管周围有大量炎性细胞聚集。蛋白印迹法检测结果显示,熏烟3个月组和6个月组小鼠肺组织中AQP1蛋白表达量较对照组分别减少约40%和60%(P<0.01)。体外使用尼古丁刺激结果显示,与对照组比较,3μmol/L尼古丁组AQP1蛋白表达量升高(P<0.05);5μmol/L尼古丁组AQP1蛋白表达量更高(P<0.01)。生物信息学分析结果显示,数据集GSE103174中,与正常肺组织比较,COPD患者肺组织中AQP1显著降低(P=0.00013);差异表达基因分析发现,与正常组比较,COPD患者有62个基因表达上调和56个基因表达下调;Pearson相关性分析发现,表皮调节素(EREG)、前列腺素G/H合酶2(PTGS2)、双调蛋白(AR-EG)等基因与AQP1相关性系数(R2)>0.5;富集分析结果显示,EREG、白介素-6(IL-6)、AREG参与上皮细胞增殖过程,细胞色素P450家族1亚家族B成员1(CYP1B1)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、PTGS2参与血管内皮生长因子的产生。结论COPD患者与熏烟诱导COPD小鼠模型的肺组织AQP1蛋白表达降低,这可能与尼古丁刺激肺泡上皮细胞导致AQP1增高无关。

西北燥证对糖尿病大鼠AQP1、AQP3和CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达的影响

目的探讨西北燥证对糖尿病大鼠水通道蛋白-1(Aquaporin-1,AQP1)、水通道蛋白-3(Aquaporin-3,AQP3)和CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达的影响。方法选取16只正常大鼠,建立2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为正常环境T2DM组、西北燥证T2DM组,每组8只。另选正常大鼠8只设为正常对照组。观察各组大鼠的一般情况,检测大鼠空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、空腹血清胰岛素(Fasting serum insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)的变化,比较各组大鼠AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞的表达水平,分析血清CD4^(+)、CD8^(+)与AQP1、AQP3表达水平的相关性。结果与正常对照组比较,正常环境T2DM组大鼠和西北燥证T2DM组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T表达差异均有统计学意义(P<0.05);与正常环境T2DM组比较,西北燥证T2DM组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论西北燥证外环境可影响T2DM大鼠的血糖水平,其作用机制可能与调控AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达有关。

槐角苷通过调控AQP1、AQP3表达对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用

目的观察槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用。方法将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、赋型剂组、槐角苷组,切除卵巢进行造模,假手术组和模型组不给药,其余组连续阴道给药14 d后,观察用药前后大鼠一般体征变化(体质量、阴道pH、阴道健康状况、乳酸杆菌、内糖原),血清E2和FSH水平,阴道上皮黏膜中AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,槐角苷组大鼠体质量、血清E2和FSH水平无明显变化(P>0.05),阴道健康评分、乳酸杆菌数量、上皮细胞数量、内糖原表达、AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),炎细胞数量、阴道pH降低(P<0.05)。结论槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠具有保护作用,其机制与提高大鼠阴道上皮黏膜AQP1和AQP3表达有关。

藏绵羊肺脏结构特点及HIF-1α和AQP1的表达特性

【背景】低氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)是细胞对缺氧应激做出适应性反应的关键因子之一,主要通过调节基因转录来维持细胞中氧的供需平衡。水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是疏水性的跨膜转运蛋白,为机体水稳态平衡提供重要的系统调节。肺中,AQP1主要通过调节肺泡、肺间质和毛细血管间水转运从而保持肺内液体平衡。高原环境由于低氧、高寒、大风和强辐射等特点,能够适应并生存的物种相对较少,藏羊作为适应高海拔、高寒气候的特有物种,形成了独特的形态结构和生理功能适应。肺脏作为呼吸主要的执行器官,对低氧或缺氧等极为敏感。【目的】通过研究藏绵羊肺脏结构特点以及HIF-1α与AQP1在不同海拔藏绵羊肺脏中的表达特性,揭示其在藏绵羊高原环境适应性中所起的作用。【方法】选择不同生存海拔藏绵羊和小尾寒羊,断颈致死后快速采集肺组织,H.E染色、PAS染色、Masson染色等观察肺脏显微结构及弹性纤维分布,免疫组织化学SP法及实时荧光定量PCR法检测肺组织中HIF-1α与AQP1蛋白及基因的表达特点。【结果】藏绵羊肺脏被膜厚度为40.28μm,与小尾寒羊肺脏被膜厚度无显著差异,但其弹性纤维含量显著多于小尾寒羊(P<0.05);藏绵羊细支气管黏膜上皮单位面积内杯状细胞数量显著多于小尾寒羊(P<0.05),但小支气管及以上分支中两者无显著差异;藏绵羊终末细支气管黏膜上皮仍有少量散在分布的杯状细胞且其终末细支气管平滑肌厚度显著高于小尾寒羊(P<0.05);藏绵羊肺内微动脉(直径小于100μm)平滑肌占血管外径比例显著小于小尾寒羊;藏绵羊呼吸性细支气管平滑肌厚度及单位面积内毛细血管数量显著高于小尾寒羊。肺脏中HIF-1α蛋白主要表达于细支气管黏膜上皮、肺微血管内皮和肺泡隔中,主要表达于细胞质;高海拔藏绵羊和小尾寒羊肺组织中HIF-1α表达均显著高于低海拔绵羊,低海拔藏绵羊肺脏中HIF-1α的表达显著高于低海拔小尾寒羊。AQP1蛋白主要表达于肺泡上皮、肺泡隔及肺微血管内皮、细支气管平滑肌中,主要定位于细胞膜;高海拔藏绵羊肺组织中AQP1表达显著高于低海拔藏绵羊和小尾寒羊(P<0.05),但高海拔和低海拔小尾寒羊肺脏中AQP1的表达无显著差异(P>0.05)。【结论】藏绵羊肺被膜含有更多的弹性纤维,微血管平滑肌含量较少,但呼吸性细支气管上皮杯状细胞数量及平滑肌含量较多;藏绵羊肺脏中HIF-1α和AQP1的表达均显著高于小尾寒羊,且其表达均随海拔升高而增强。

AQP1在黄芩苷调控肺腺癌细胞增殖、迁移、凋亡中的作用及其分子机制

目的通过观察AQP1在黄芩苷调控肺腺癌细胞增殖、迁移、凋亡中的作用探讨其分子机制。方法将人肺腺癌细胞株LTEP-A2分为对照组及黄芩苷组,对照组正常培养细胞,黄芩苷组采用黄芩苷处理48h。采用qRT-PCR法检测细胞中AQP1表达,以CCK-8法、划痕实验、流式细胞术分别观察细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。将LTEP-A2细胞分为对照组、AQP1降表达组、AQP1过表达组,对照组不做处理,AQP1降表达组、AQP1过表达组分别转染AQP1小干扰siRNA及AQP1过表达载体,按照上法观察细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。将转染AQP1过表达载体的AQP1过表达LTEP-A2细胞分为AQP1过表达组、AQP1过表达+黄芩苷组、AQP1过表达+LY294002组、AQP1过表达+wortmannin组,AQP1过表达组不做处理,余下各组分别采用黄芩苷、PI3Kα抑制剂LY294002、磷酸化PI3Kα(p-PI3Kα)抑制剂wortmannin处理;采用Western blotting法观察各组PI3K/Akt信号通路相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、苏氨酸激酶(p-Akt)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达。结果黄芩苷组AQP1表达、细胞增殖抑制率低于对照组,细胞迁移距离、细胞凋亡率高于对照组(P均<0.05)。细胞增殖抑制率AQP1过表达组>对照组>AQP1降表达组,细胞迁移距离、细胞凋亡率AQP1降表达组>对照组>AQP1过表达组(P均<0.05)。LTEP-A2细胞VEGF、IGF、mTOR、p-Akt、HIF-1α蛋白表达AQP1过表达组>AQP1过表达+黄芩苷组、AQP1过表达+LY294002组、AQP1过表达+wortmannin组(P均<0.05),过表达+黄芩苷组、AQP1过表达+LY294002组、AQP1过表达+wortmannin组各项蛋白表达差异均无统计学意义。结论黄芩苷通过下调AQP1表达抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路激活有关。

右美托咪定对心肌缺血再灌注后eNOS、HIF-1α、AQP1水平的影响

目的:观察右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)对心肌缺血再灌注后丙二醛(malondialdehyde,MDA)、内皮源性一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)水平的影响,探讨抑制体外循环心肺转流(cardiopulmonary bypass,CPB)术后低心排血量状态的细胞分子机制。方法:选取2021年5月—2022年6月在南通大学附属医院行CPB心内直视择期手术患者45例,按随机数字表法分为常规麻醉组(对照组)、常规麻醉+低剂量DEX组(DEX1组)和常规麻醉+高剂量DEX组(DEX2组),每组15例。常规麻醉:面罩吸氧去氮后,依次静脉注射依托咪酯、咪达唑仑、丙泊酚、维库溴铵、舒芬太尼行麻醉诱导,肌松后气管插管、机械控制呼吸;使用丙泊酚、瑞芬太尼、维库溴铵行麻醉维持,维持术中血流动力学稳定。DEX1组:常规麻醉基础上,麻醉前10 min单次予0.3μg/kg DEX静脉慢注,再予0.8μg/(kg·h)DEX静脉维持;DEX2组:在常规麻醉基础上,麻醉前10 min单次予0.6μg/kg DEX静脉慢注,再予1.2μg/(kg·h)DEX静脉维持。比较3组患者一般情况和MDA、HIF-1α、eNOS、AQP1水平。结果:各组患者基本情况差异无统计学意义(P>0.05)。患者心脏复跳(T1)、复跳后15 min(T2)时MDA水平与麻醉诱导前(T0)比较,对照组和DEX1组显著增高(P<0.05),DEX2组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,T1、T2时DEX2组显著降低(P<0.05),DEX1组差异无统计学意义(P>0.05)。T2时DEX1组HIF-1α、eNOS、AQP1水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),DEX2组较对照组显著增高(P<0.05);与DEX1组比较,DEX2组HIF-1α、eNOS、AQP1水平均显著增加(P<0.05)。结论:DEX术前预处理可能是干预CPB心内直视手术后心肌缺血再灌注损伤的对策,内皮细胞eNOS/HIF-1α-AQP1可能是临床改善术后低心排血量状态的重要信号通路。

血清水通道蛋白1水平联合血管外肺水指数对脓毒症致急性呼吸窘迫综合征的价值

目的 探讨血清水通道蛋白1(AQP1)水平联合血管外肺水指数(EVLWI)对脓毒症致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的病情程度及预后的评估价值。方法 选取2020年1月至2023年12月收治的脓毒症致ARDS患者268例(ARDS组)和单纯脓毒症患者55例(单纯脓毒症组),脓毒症致ARDS患者根据氧合指数(OI)分为轻度组89例、中度组109例、重度组70例,根据28 d预后分为死亡组104例和存活组164例。检测血清AQP1水平和计算EVLWI。利用Spearman法,脓毒症致ARDS患者血清AQP1水平、EVLWI与OI的相关性;建立logistic回归模型,确定脓毒症致ARDS患者死亡的因素;并绘制ROC曲线,评价血清AQP1水平联合EVLWI对其的评估价值。结果 与单纯脓毒症组比较,ARDS组血清AQP1水平降低,EVLWI升高(P <0.05)。AQP1水平在轻度、中度、重度组中依次降低,EVLWI依次升高(P <0.05)。血清AQP1水平与脓毒症致ARDS患者OI呈正相关,EVLWI与脓毒症致ARDS患者OI呈负相关(P <0.05)。268例脓毒症致ARDS患者28 d死亡率38.81%(104/268)。脓毒症致ARDS患者死亡的独立保护因素为OI升高(OR=0.984,95%CI:0.976~0.992)和AQP1升高(OR=0.761,95%CI:0.677~0.854),独立危险因素为SOFA评分增加(OR=1.367,95%CI:1.142~1.636)和血乳酸升高(OR=2.515,95%CI:1.689~3.745)、EVLWI升高(OR=1.559,95%CI:1.290~1.885),差异有统计学意义(P <0.05)。血清AQP1水平联合EVLWI预测的AUC为0.887(95%CI:0.843~0.923),比血清AQP1水平、EVLWI单独预测的0.792(95%CI:0.738~0.839)、0.807(95%CI:0.754~0.852)大(P <0.05)。结论 血清AQP1水平降低和EVLWI升高与脓毒症致ARDS患者病情程度加重、预后不良有关,血清AQP1水平联合EVLWI对脓毒症致ARDS患者预后的评估价值较高。

四氢嘧啶对HaCaT细胞活力及AQP3、Claudin-1、ZO-1表达的影响

目的研究四氢嘧啶(Ectoine)对人角质形成细胞(HaCaT)的细胞活力、细胞凋亡率和细胞活性氧(ROS)的影响,并分析水通道蛋白3(AQP3)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白(ZO-1)的表达水平。方法设置Ectoine浓度实验组和空白对照组,培养HaCaT细胞(24 h),采用CCK8法检测HaCaT细胞的细胞活力,甄选最佳的Ectoine作用浓度。用Western Blot法检测HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平;用流式细胞仪检测HaCaT细胞的凋亡率及胞内ROS水平。结果CCK8法检测结果显示,0.10%Ectoine组、0.20%Ectoine组、0.30%Ectoine组的HaCaT细胞活力均高于120%,其中0.20%Ectoine组最高(146.92%±7.67%)。Ectoine浓度实验组相对于空白对照组,HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平明显升高(P<0.05),且细胞凋亡率和胞内ROS水平均明显降低(P<0.05)。结论Ectoine可提高HaCaT细胞的细胞活力,降低凋亡率和胞内ROS水平,上调AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平。Ectoine可能与相关保湿蛋白的表达相关,对HaCaT细胞具有一定的保护作用。

血清Omentin-1、AQP4、VILIP-1预测急性前循环大血管闭塞性脑梗死的价值分析

目的:探讨急性前循环大血管闭塞性脑梗死(ALVS)患者在急诊血管内治疗术后血管再通后血清视椎蛋白样蛋白1(VILIP-1)、水通道蛋白-4(AQP4)、网膜素-1(Omentin-1)的表达和临床意义。方法:选取154例我院2019年9月-2022年9月就诊的ALVS患者,入院后均行血管内治疗术,根据术后90d改良Rankin(mRS)评分分为预后良好组116(75.32%)、预后不良组38例(24.68%),比较两组临床资料及术前、术后1个月Omentin-1、AQP4、VILIP-1的表达水平,Pearson分析术后1个月上述指标与mRS评分相关性,Logistic回归方程分析预后影响因素,并分析其预测价值。结果:与预后良好组比较,预后不良组术前血清VILIP-1、AQP4水平较低(P<0.05),Omentin-1水平较高(P<0.05),术后1个月血清VILIP-1、AQP4水平较低(P<0.05),Omentin-1水平较高(P<0.05),且术后1个月更为显著(P<0.05);术后1个月血清VILIP-1、AQP4水平与mRS评分呈正相关,Omentin-1水平与mRS评分呈负相关(P<0.05);VILIP-1、AQP4为术后90d预后不良危险因素,Omentin-1为预后不良保护因素(P<0.05);与低危组比较,高危组术后90d不良预后发生率高于低危组(P<0.05)。结论:血清VILIP-1、AQP4、Omentin-1水平为ALVS患者血管内治疗术后血管再通预后的重要影响因素,为临床早期评估和预测预后提供可靠依据。

水通道AQP1敲除小鼠肿瘤血管生成障碍及肿瘤生长减缓

血管生成是肿瘤生长、浸润和转移的必要步骤. 肿瘤血管生成涉及瘤旁组织血管内皮细胞增殖、向肿瘤细胞团内迁移以及管腔形成,目前机理尚不完全清楚. 水通道AQP1在多种肿瘤血管内皮高表达,提示其可能参与肿瘤血管的生成过程. 应用AQP1敲除小鼠荷瘤实验证实了AQP1在黑色素瘤生长和血管新生中的作用. 结果表明,皮下接种的黑色素瘤在AQP1敲除小鼠的生长较之在野生型小鼠延迟近30%(P< 0.01). 免疫组化与肿瘤病理形态学分析显示,AQP1在野生型小鼠黑色素瘤血管内皮细胞上高表达,而在AQP1敲除小鼠黑色素瘤血管内皮细胞呈阴性表达. 在病理结构上,黑色素瘤细胞围绕血管分支呈岛状分布. 野生型小鼠黑色素瘤内血管管腔较细小,而AQP1(-/-)小鼠黑色素瘤内血管床显著膨大. AQP1(-/-)小鼠肿瘤内平均微血管密度(47/mm2) 较之AQP1(+/+)肿瘤(142/mm2) 减少67%(P< 0.01). 围绕AQP1(-/-)肿瘤血管的肿瘤细胞岛周边坏死区域明显大于AQP1(+/+)肿瘤. 上述结果提出确切证据表明,AQP1缺失使肿瘤血管生成发生障碍,从而影响了肿瘤血液供应和肿瘤生长. AQP1参与肿瘤血管生成的机理值得深入研究.

异功散通过调控脑水液代谢改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响,并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组(8只/组):对照组、模型组、多奈哌齐(1.67 mg/kg)组、异功散(7.5 g/kg)组。灌胃给予各组对应药物1次/d,1月后采用Morris水迷宫实验考察小鼠的学习记忆能力;HE染色观察海马皮层组织病理形态学变化;免疫组化染色、硫磺素S染色观察脑内淀粉样蛋白斑块数量变化;ELISA法检测脑组织和血清Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)含量;伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)通透性变化;免疫荧光共定位考察AQP4在星型胶质细胞上极化情况;Western blotting观察血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、闭锁连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、β-淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BACE1)、胰岛素降解酶(IDE)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、水通道蛋白4(AQP4)蛋白表达情况。结果与对照组比较,APP/PS1小鼠第5天的逃避潜伏期显著延长(P<0.001),平台象限停留时间降低(P<0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量增加且病理评分升高(P<0.001);Aβ阳性斑块明显升高以及硫磺素S荧光强度明显增强(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量升高(P<0.05);BBB通透性增加(P<0.01),RAGE蛋白表达上调(P<0.01)而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达下调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量减少(P<0.05)。与模型组比较,异功散组小鼠第5天的逃避潜伏期缩短(P<0.001),平台象限停留时间增加(P<0.05)且平均游泳速度加快(P>0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量减少且病理评分降低(P<0.01);Aβ阳性斑块减少以及硫磺素S荧光强度减弱(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量降低(P<0.05);维持了BBB通透性(P<0.01),RAGE蛋白表达下调(P<0.05),而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达上调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量明显增加(P<0.01)。结论异功散能够通过改善APP/PS1小鼠脑内神经细胞损伤、Aβ病变,调控脑水液代谢系统相关蛋白表达而改善学习记忆变化。

6-姜烯酚对急性肺损伤小鼠肺水肿的治疗作用及机制研究

目的:观察6-姜烯酚(6-SH)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺水肿的治疗作用,探究可能的作用机制。方法:采用随机数字表法将40只无特定病原体(SPF)级Balb/c小鼠分为对照组、模型组、6-姜烯酚组、地塞米松组,每组10只。鼻腔滴注LPS构建ALI模型,对照组滴注等量生理盐水。30 min后,给予6-姜烯酚组灌胃(100 mg/kg);地塞米松组给予腹腔注射(5 mg/kg);对照组和模型组给予灌胃等量生理盐水,24 h后结束实验,收集样本。测定肺组织湿/干重比(W/D)和肺系数;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定白细胞计数和总蛋白浓度;观察肺组织病理学改变、计算病理评分;测定BALF上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及白细胞介素-6(IL-6)水平;检测肺组织中Toll样受体4/核因子κB/水通道蛋白(TLR4/NF-κB/AQPs)信号通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组肺组织损伤明显,病理评分、肺系数、W/D增加(P<0.01),白细胞计数、总蛋白浓度及TNF-α、IL-1β、IL-6的水平升高(P<0.01);与模型组比较,6-姜烯酚组的肺系数和W/D降低(P<0.01或P<0.05),白细胞计数、总蛋白浓度以及TNF-α、IL-1β、IL-6的水平降低(P<0.01或P<0.05),AQP1和AQP5的蛋白表达水平升高(P<0.01),TLR4、MyD88、NF-κB p65以及p-NF-κB p65的表达水平降低(P<0.01或P<0.05)。结论:6-姜烯酚可能通过调控TLR4/NF-κB/AQPs信号通路发挥其抗炎作用和改善肺组织水液代谢与转运,有效缓解ALI小鼠的肺组织水肿。

中医引经药葛根对食管癌细胞系TE-1及ECA109 AQP1 mRNA表达的影响

目的探讨中医引经药葛根对食管癌细胞系TE-1及ECA109 AQP1 mRNA表达的影响。方法以5 g/L及10 g/L的葛根素注射液干预食管癌细胞系TE-1及ECA109,干预24 h后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测AQP1 mRNA表达,观察表达结果。结果 AQP1在食管癌细胞系ECA109及TE-1中均有少量表达;葛根素可上调ECA109及TE-1细胞系AQP1表达。结论葛根素通过上调AQP1 mRNA的表达,从而影响食管癌细胞水转运。

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织AQP1和AQP5表达的影响

目的通过研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP1）和水通道蛋白5（AQP5）表达的影响,旨在从水液代谢及气道黏液分泌的角度探讨阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘的作用机制。方法 SD大鼠90只随机分为正常组（N）、模型组（M）、阳和平喘颗粒低、中、高剂量治疗组（YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H）和地塞米松治疗组（DXM）,每组15只。其中,M、YHPC-L、YHPC-M、YHPC-H和DXM组采用卵蛋白（OVA）腹腔注射致敏及雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,同时应用氢化可的松腹腔注射复制肾阳虚模型,N组则均使用生理盐水作为对照。采取HE染色检测各组大鼠肺组织形态学改变,应用Real-time PCR和Western blot检测各组大鼠肺组织AQP1和AQP5mRNA及蛋白表达水平的变化,采用免疫组化法检测AQP1和AQP5在肺组织的分布及表达水平变化。结果与N组相比,M组AQP1和AQP5在mRNA及蛋白表达水平均发生显著下降（P〈0.01）;与M组相比,YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H组AQP1和AQP5的表达水平均显著上升（P〈0.05～0.01）,且具有一定的剂量依赖效应;与DXM相比,YHPC-L对AQP1和AQP5的作用效果低于DXM（P〈0.05）,而YHPC-M和YHPC-H则与之具有相当的作用效果（P〉0.05）。结论阳和平喘颗粒可通过上调AQP1和AQP5的表达而调控水液代谢平衡及气道黏液分泌,进而发挥其治疗支气管哮喘的作用。

六味地黄丸对甲亢型肾阴虚大鼠肾组织AQP1、AQP2含量的影响

[目的]观察六味地黄丸对甲亢型肾阴虚大鼠肾组织水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白2(AQP2)含量变化的影响。[方法]30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、六味地黄丸组,采用甲状腺片制备肾阴虚模型,六味地黄丸给药观察,连续21天。给药前后记录各组大鼠体重、体温、饮水量、尿量等体征;动物处理后,检测大鼠皮肤含水量,ELISA法检测大鼠肾组织AQP1和AQP2含量。[结果]六味地黄丸组大鼠较模型组大鼠体温显著降低(P<0.01)、饮水量明显减少(P<0.05)、尿量和皮肤含水量均显著增多(P<0.01),肾组织AQP1、AQP2含量均显著降低(P<0.01),而与正常组相比无统计差异。六味地黄丸未能有效纠正模型大鼠体重的降低。[结论]六味地黄丸能有效改善甲亢型肾阴虚模型大鼠体温升高以及饮水量、尿量和皮肤含水量等水液代谢相关指标的紊乱,纠正其肾组织AQP1和AQP2含量的异常升高。

基于水通道蛋白AQP1/AQP3的表达探讨石膏对急性软组织损伤大鼠模型的影响

目的研究生石膏和煅石膏对急性软组织损伤大鼠模型水通道蛋白AQP1、AQP3表达的影响,对石膏消肿的作用机制进行初步研究。方法采用砝码自由落体运动制备急性软组织损伤大鼠模型,造模成功后将动物随机分为模型组,阳性药组(双氯芬酸0.75 g/kg),煅石膏高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg)、生石膏高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg),另设空白对照组,每组10只。除模型组与空白对照组外,其余各组均给予相应药物,每天换药1次,连续7 d。采用Western blotting和免疫组化法检测各组大鼠损伤组织中AQP1/AQP3表达变化。结果与空白对照组比较,模型组大鼠损伤骨骼肌中AQP1/AQP3表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,煅石膏高、中、低剂量组和阳性药组大鼠损伤骨骼肌中AQP1/AQP3表达明显增加(P<0.01),生石膏组无明显差异。结论石膏煅制后可能通过调节急性软组织损伤模型骨骼肌中AQP1/AQP3的表达从而发挥消肿的作用。

增液汤干预干燥综合征模型鼠AQP1/AQP8的表达规律研究

目的:观察增液汤干预下干燥综合征(Sjogren's Syndrome,SS)模型小鼠肺及结肠组织中水通道蛋白AQP1(aquaporin1)、AQP8(aquaporin8)的表达规律。方法:选用BALB/c小鼠,各组10只,免疫诱导法建立干燥综合征小鼠模型,产生SS特异性临床表现和病理改变,采用免疫组化和Western blot蛋白质印迹法观察增液汤对SS模型小鼠肺及结肠组织中AQP1/AQP8表达的影响。结果:增液汤可以增强肺及结肠组织中AQP1的蛋白表达(P<0.01),对AQP8无影响。结论:AQP1在干燥综合征模型鼠多组织中的表达下调,可能是干燥综合征水液代谢障碍,多脏器损伤的机制之一;增液汤恢复机体阴液,起到"增水"功效可能与上调AQP1蛋白表达有关。

恶性胸水与水通道蛋白AQP1之间相关性探讨

目的:拟阐明水通道蛋白AQP1与恶性胸水产生机制的相关性,给予临床治疗提供科学依据。方法:利用免疫组织化学法和荧光定量PCR方法检测AQP1、CD34和TNF-αmRNA表达水平,并探讨其与胸水之间的相关性。结果:免疫组织化学方法检测结果提示AQP1在正常肺近胸膜下的毛细血管内皮细胞中强阳性表达,间皮细胞中弱表达。荧光定量PCR结果有胸水的肺癌组织中CD34和TNF-αmRNA的表达量比对照组、无胸水肺癌组织和炎性胸水相比增多,差异有统计学意义(P<0.05)。CD34的表达与VEGF有着密切的正相关,但AQP1的表达与CD34不相关,伴有胸水的肺癌组织中AQP1表达相对减少。结论:NSCLC伴有胸水时其癌组织中TNF-α和VEGF高表达导致新生毛细血管增多,即CD34表达增多;肿瘤来源TNF-α导致血管通透性增高,导致胸腔内渗出液不断增多;新生血管大量出现但相应的AQP1并未同步增多,导致机体水的严重失衡最后形成恶性胸水,推测癌性胸水与AOP1具有潜在联系。

AQP1在慢传输型便秘发病过程中的作用机制探讨

目的:通过建立大鼠慢传输型便秘模型,探讨AQP1在慢传输型便秘发病过程的作用机制。方法:SD大鼠48只,随机分为4组:空白组,模型组,莫沙必利治疗组,麻仁丸治疗组。空白组大鼠用生理盐水灌胃,便秘模型组和治疗组大鼠分别用复方地芬诺酯灌胃,建立大鼠慢传输型便秘模型。模型建立后,治疗组大鼠分别用莫沙必利、麻仁丸灌胃,观察各组大鼠大便粒数及大便湿重。治疗结束后将大鼠集体处死,取大鼠近端结肠标本,用免疫组织化学的方法检测各组大鼠近端结肠AQP1的表达情况。采用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值进行半定量分析。结果:便秘组结肠AQP1的平均光密度(MD)值大于空白对照组、莫沙必利治疗组、麻仁丸治疗组的MD值(P<0.05),差异有统计学意义;莫沙必利治疗组和麻仁丸治疗组的MD值均大于空白对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论:大鼠近端结肠AQP1的表达增高使结肠对水分的吸收增加,从而引起大便干结,排便困难,导致慢传输便秘的发生。