Preparation of Arctiin From Fructus Arctii （Arctium Lappa）

To prepare and purify the main constituent of Arctii Fructus,arctiin.Methods Extracted with systematic solvents,separated with macroporous resin and purified by silica gel H decompressed column.Results With macroporous resin method,the rate of recovery of arctiin was 9% and the purity was 99% after purified by silica gel H decompressed column.Conclusion The preparing method of arctiin with macroporous resin is simple and rapid.

牛蒡子苷经炎性因子和肠道菌群抑制钛颗粒诱导骨溶解的机制

目的基于炎性因子和肠道菌群的变化,探讨牛蒡子苷(ARC)抑制钛颗粒诱导小鼠颅骨周围骨溶解的机制。方法20只7周龄C57BL/6J雌性小鼠被随机均匀分配到以下组:空白组(SHAM)、骨溶解模型组(Vehicle)、ARC低剂量组(L-ARC)以及ARC高剂量组(H-ARC),每组5只。L-ARC、H-ARC组在Vehicle组基础上分别给予5、10 mg/(kg·d)ARC腹腔注射,SHAM组和Vehicle组腹腔注射等剂量生理盐水,每日1次,共14 d。通过Micro-CT测定小鼠颅骨BMD、BV/TV、Tb.N、BS/BV、Tb.Sp和Tb.Th;ELISA法检测小鼠血清中TRACP5b、CTX、OCN、IL-6、TNF-α和IL-10水平;16S rRNA高通量测序技术分析粪便中菌群结构与丰度变化。结果Vehicle组BMD、BV/TV、Tb.N、BS/BV、Tb.Th、OCN和IL-10较SHAM组显著降低(P<0.01,P<0.05),Tb.Sp、TRACP5b、CTX、IL-6和TNF-α显著升高(P<0.05,P<0.01);L-ARC组BMD、BV/TV、Tb.N、BS/BV、Tb.Th和OCN较Vehicle组有升高趋势(P>0.05),Tb.Sp、TRACP5b和CTX有降低趋势(P>0.05),TNF-α和IL-6显著降低(P<0.05),IL-10显著升高(P<0.05);H-ARC组BMD、BV/TV、Tb.N和IL-10较Vehicle组显著升高(P<0.05,P<0.01),TRACP5b、CTX、IL-6和TNF-α显著降低(P<0.05,P<0.01),BS/BV、Tb.Th和OCN有升高趋势(P>0.05),Tb.Sp有降低趋势(P>0.05)。在门水平,Vehicle组Firmicutes/Bacteroidota(F/B)率较SHAM组有升高趋势(P>0.05);L-ARC和H-ARC组F/B率较Vehicle组显著降低(P<0.01)。在属水平,Vehicle组Ileibacterium丰度较SHAM组有升高趋势(P>0.05),Prevotellaceae_UCG-001和Rikenellaceae_RC9_gut_group丰度有降低趋势(P>0.05);较Vehicle组,经ARC干预后,Ileibacterium丰度显著降低(P<0.05),Prevotellaceae_UCG-001和Rikenellaceae_RC9_gut_group丰度显著增加(P<0.05)。结论ARC可通过抑制炎性反应、调节肠道菌群结构抑制钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解,且呈剂量依赖性。

抗感颗粒有效组分质量控制研究

目的 通过对抗感颗粒中牛蒡子、黄芩、连翘、甘草等药材进行薄层色谱(TLC)鉴别、对有效成分黄芪苷和牛蒡苷进行含量测定的研究,建立科学合理的抗感颗粒有效组分质量控制方法。方法 采用薄层色谱法鉴别牛蒡子、连翘和甘草药材;采用高效液相色谱法对方中牛蒡苷和黄芩苷进行含量测定。结果 有效成分黄芩苷和牛蒡苷分别在88.76~887.6、33.68~336.8 mg·L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率分别为100.1%、100.3%,RSD分别为1.3%、1.5%(n=6)。薄层鉴别图谱斑点圆整且分离度好,阴性对照无干扰。结论 该方法准确可靠,重复性好,专属性强,可用于抗感颗粒的质量控制。

牛蒡子苷通过ROS/PI3K/Akt/mTOR通路调控宫颈癌细胞的研究

目的探讨牛蒡子苷(arctiin,ARC)对人宫颈癌细胞恶性增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法将不同浓度ARC作用于人宫颈癌细胞Hela,用CCK-8法检测细胞存活情况,筛选最佳抑制浓度;将对数生长期Hela细胞随机分为对照组、ARC组、ARC联合自噬抑制剂(3-MA)组。用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;用DCFH-DA检测各组细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;用透射电镜观察各组细胞自噬小体;反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉菌靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)mRNA和蛋白表达及哺乳动物ATG6同源蛋白(mammalian ATG6 homologous protein,Beclin-1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)蛋白的表达情况。结果与对照组比较,ARC组细胞ROS水平、PI3K、Akt和mTOR mRNA、PI3K、p-Akt以及p-mTOR蛋白的表达水平降低,且Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达水平升高(P<0.05)。3-MA可逆转ARC组上述指标(P<0.05)。结论ARC对人宫颈癌细胞Hela的恶性增殖有一定的抑制作用,并能提高宫颈癌细胞自噬水平,可能是通过调节细胞ROS水平,影响ROS/PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥作用。

基于高效液相色谱法测定普济消毒饮主要有效成分含量的方法学研究

目的:基于高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)建立普济消毒饮(Pujixiaodu decoction,PJXDD)中橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷等主要有效成分的含量测定方法,为PJXDD的质量评价提供参考。方法:采用Agilent 1260型高效液相色谱仪,色谱柱为AgiLent ZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,求出橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷的回归方程,并考察测定方法的精密度、重复性、稳定性。结果:实验结果显示,橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷的回归方程分别为A=54.99ρ+4.11(r=0.9999)、A=47.25ρ-6.66(r=0.9999)、A=46.95ρ-12.40(r=0.9996)和A=173.37ρ-31.03(r=0.9999);精密度试验结果显示,橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷的A值相对标准偏差(RSD)分别为0.89%、0.22%、0.52%、0.86%;重复性试验结果显示,橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷含量的RSD分别为0.99%、0.23%、0.63%和0.89%;稳定性试验结果显示,橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷含量的RSD分别为0.86%、0.34%、0.83%和0.61%。结论:基于当前条件参数的HPLC可以较为准确的测定PJXDD中橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和牛蒡苷等主要有效成分的含量,方法具有良好的精密度、重复性和稳定性。

牛蒡子苷及牛蒡子苷元的药理作用研究进展

牛蒡子苷及牛蒡子苷元是从牛蒡子中提取的主要活性成分,具有广泛的药理作用。牛蒡子苷及其苷元具有抗肿瘤和神经保护等活性;牛蒡子苷元还具有较强的抗炎及免疫调节活性、抗病毒活性以及对热休克反应的抑制活性。综述近10年来国内外学者对牛蒡子苷及其苷元药理活性的研究概况。

蜗牛酶水解牛蒡子苷制备苷元的研究

[目的]优选牛蒡子苷的酶解3-艺条件。[方法]用蜗牛酶对牛蒡子苷进行酶解,采用正交设计优选酶解工艺条件,高效液相色谱法测定酶解产物牛蒡子苷元的含量。[结果]在37℃条件下用1/5底物量的蜗牛酶,于pH 5的无菌水或生理盐水中酶解36～48 h最为适宜,确定了含醇水溶性有机溶剂作为酶解终止制。[结论]在所确定的条件下牛蒡子苷的酶解得率达72％～78％,酶解终止剂选择得当,工艺便于放大;检测方法简便、准确。

牛蒡不同部位、牛蒡子不同产地中牛蒡苷和牛蒡苷元含量比较及指纹图谱分析

目的:应用HPLC同时测定采集于全国34份牛蒡子和牛蒡不同部位中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量;建立牛蒡子药材HPLC指纹图谱。方法:采用AgilentTC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水(水:0min,55%;10min,46%;20min,30%线性梯度),检测波长为280nm。结果:牛蒡苷的线性方程为Y=540.83X-937.02(r=0.9999),n=6,平均回收率为97.86%,RSD=1.58%;牛蒡苷元的线性方程为Y=38.257X-24.926(r=0.9998),n=6,平均回收率为98.33%,RSD=1.74%。本实验建立的牛蒡子药材HPLC指纹图谱相似度均在0.90～1.00。结论:本方法简便、准确、灵敏,可同时测定牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,可用作牛蒡子药材的质量控制方法。本实验建立的HPLC指纹图谱分析方法可用于评价牛蒡子药材的内在质量。牛蒡不同部位所含牛蒡苷和牛蒡苷元考察结果表明,牛蒡绒毛、果皮、总苞、芽较其他部位含有较多牛蒡苷和牛蒡苷元。

响应面法优化闪式提取牛蒡苷的工艺优化

采用响应面分析法优化牛蒡苷闪式提取的工艺条件。以牛蒡苷得率为指标,在单因素试验基础上,应用Box-Benhnken中心组合设计试验,对提取工艺影响较大的乙醇体积分数、提取时间和液料比3个工艺参数进行优化。最佳工艺条件为:乙醇体积分数83%、提取时间93s、液料比17:1(mL:g)、牛蒡子粒径≤1.0mm,在此工艺条件下,牛蒡苷得率为31.62mg/g,与预测值31.72mg/g基本相符。闪式提取法是一种快速有效的提取牛蒡苷的方法。

牛蒡子苷治疗糖尿病肾病的随机双盲安慰剂多中心Ⅲ期临床试验

目的评价牛蒡子苷治疗糖尿病肾病的临床疗效与安全性。方法用随机双盲双模拟安慰剂对照多中心临床试验设计方法,受试者接受牛蒡子苷颗粒或安慰剂治疗。试验组:牛蒡子苷颗粒1袋/次,每天3次,8周为1个疗程。所有受试者在试验期间,其糖尿病基础治疗不变。以24 h尿微量白蛋白和24 h尿蛋白定量作为疗效评价指标。共纳入431例患者,剔除20例,余411例全部按方案完成观察。结果牛蒡子苷组控显率为64.82%,有效率为77.85%;安慰剂组控显率为19.61%,有效率为35.29%,2组疗效比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后24 h尿微量白蛋白与24 h尿蛋白定量,牛蒡子苷组疗效均优于安慰剂组。结论牛蒡子苷颗粒具有较好的临床疗效和安全性。

高效液相色谱切换波长法同时测定牛蒡子中活性成分的含量

目的建立高效液相色谱（HPLC）切换波长法同时测定牛蒡子中3种活性成分含量。方法应用TC．C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-0．4％冰醋酸，梯度洗脱；流速1．0mL·min-1；检测波长为280与326nm切换；进样量10μL；温度25℃。结果绿原酸、牛蒡子苷和牛蒡子苷元分别在0．0273—5．4600，0．1500～18．0000和0．0303—6．0600肛g范周内呈良好线性，线性方程分别为Y=1]06．476X-11．452，Y=1026．014X＋20．391和y=287．661X＋4.045；平均加样回收率分别为99．55％，99．42％和99．40％。结论该方法快速、准确、重复性好，可用于牛蒡子中多组分含量的同时测定及质量控制。

超高压辅助离子液体提取/HPLC分析牛蒡子中牛蒡苷与牛蒡苷元

通过离子液体类型与浓度、提取压力、时间、料液比等单因素实验确定了超高压辅助离子液体提取牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的最佳工艺。结果表明,超高压离子液体提取最佳工艺为以0.80 mol/L溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑溶液为溶剂,提取压力200 MPa,提取时间2 min,料液比1∶20(g/mL),牛蒡苷和牛蒡苷元的提取率分别为37.15、8.04 mg/g。与传统提取方法相比,超高压提取时间只需2 min,是超声方法的1/15、加热回流方法的1/60,极大地节省了提取时间,提高了工作效率,且不污染环境,是提取牛蒡苷和牛蒡苷元的一种简单有效的方法。

牛蒡子苷对晚期氧化蛋白产物诱导小鼠足细胞转分化的影响

目的探讨牛蒡子苷对晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导小鼠足细胞转分化的影响。方法用200μg/ml AOPP刺激小鼠足细胞24 h,同时加入牛蒡子苷(浓度分别为50、100、200、400μmol/L)进行干预,采用Western blotting检测内质网应激标志性蛋白Grp78、CHOP及平滑肌激动蛋白(α-SMA)表达水平。结果牛蒡子苷干预后可抑制小鼠足细胞Grp78、CHOP、α-SMA蛋白表达水平,且在一定范围内呈剂量依赖性。结论 AOPP可通过引起小鼠足细胞内质网应激(ERS)从而导致上皮-间充质转分化(EMT),而牛蒡子苷则可通过减轻ERS从而逆转EMT,为治疗肾脏纤维化提供新的研究方向。

牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺研究

目的:研究牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺。方法:考察超声功率、药材粒径、液固比、提取时间、提取温度以及占空比等因素对牛蒡苷及牛蒡苷元提取率的影响,并采用正交试验设计优化提取工艺。结果:在本试验条件内,超声提取的最优条件如下:药材粒径为80～100目,提取温度为50℃,液固比为14mL/g,超声功率为400W,提取时间为10min。结论:按照优化正交试验确定的最佳工艺条件合理、可靠。

牛蒡子木脂素类化合物的分离与制备

目的:牛蒡子中木脂素类化合物的分离与制备研究.方法:使用色谱技术,对木脂素类化合物进行分离纯化.根据理化常数和波谱数据对化合物的结构进行鉴定.结果:从牛蒡子中分离得到牛蒡子苷元及牛蒡子苷,纯度均能达到98%.结论:该制备方法简便、快速,可为牛蒡子药材的质量控制提供科学依据.

银翘解毒丸特征图谱初步研究

目的建立银翘解毒丸的特征图谱,从整体评价银翘解毒丸质量。方法采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.6mm×250 mm);DAD检测器;柱温30℃;甲醇和0.2%磷酸为流动相,1 mL/min的体积流量梯度洗脱,对银翘解毒模拟丸进行特征图谱测定。采用中药指纹图谱计算软件进行计算,建立模拟丸的特征图谱,在此基础上探索银翘解毒丸样品的特征。结果银翘解毒模拟丸特征图谱有14个共有峰,其精密度、重复性、稳定性试验中各共有峰的相对保留时间的RSD均小于0.1%,相对峰面积的RSD均小于3.15%。模拟丸的图谱相似度较好,银翘解毒丸样品的图谱存在较大差异。在已建立特征图谱基础上,归属了3个特征色谱峰及1个组峰作为金银花、牛蒡子、连翘、甘草四味药材的样品特征峰。结论方法重复性较好,为进一步控制银翘解毒丸质量提供研究基础。

牛蒡子苷在小鼠体内的分布状态及药代动力学研究

目的研究牛蒡子苷在小鼠体内的分布状态及药代动力学。方法采用高效液相色谱法测定牛蒡子苷在小鼠体内血药浓度及在脏器中的分布。结果牛蒡子木脂素口服后5 m in血液中即可检出牛蒡子苷,在小鼠体内呈二室模型分布,其主要动力学参数为A=37.312 5μg.m l-1;B=7.898 5μg.m l-1;α=0.005 5 m in-1;β=0.000 5 m in-1;Kα=0.478 9m in-1;t1/2α=125.008 3 m in;t1/2β=1 426.755 6 m in;K10=0.001 9 m in-1;K21=0.001 4 m in-1;K12=0.002 7 m in-1;Cmax=42.786 3μg.m l-1;Tmax=9.660 0 m in;AUC=22 892.878 9μg.m in.m-l1。同时牛蒡子木脂素在心、肝、肾、脑等脏器也有分布。结论牛蒡子木脂素在体内吸收很快,消除也快。

牛蒡子中牛蒡子苷的提取分离

以牛蒡子为原料,采用微波辅助提取的方法,对牛蒡子中牛蒡子苷的提取工艺参数进行优化,并采用大孔吸附树脂对牛蒡子苷的粗提液进行初步分离纯化。结果表明,微波辅助提取牛蒡子苷最佳工艺参数为:提取时间80s,微波功率250W,液料比20:1(ml/g)。在此条件下,提取率为9.02%。HPD-700型大孔吸附树脂对牛蒡子苷的吸附量大、解吸率高,比较适合于牛蒡子苷的分离纯化。HPD-700型大孔吸附树脂对牛蒡子苷的最佳分离条件为:上样液质量浓度3.26mg/ml,流速1ml/min,洗脱剂为体积分数70%的乙醇,洗脱流速为1ml/min。

RP-HPLC法同时测定桑杏口服液中芦丁、橙皮苷、牛蒡苷和甘草苷的含量

目的:建立同时测定桑杏口服液中芦丁、橙皮苷、牛蒡苷、甘草苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为276、348 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:芦丁、橙皮苷、牛蒡苷、甘草苷检测质量浓度线性范围分别为1.068~10.68μg/m L(r=0.999 3)、9.320~93.20μg/m L(r=0.999 2)、46.91~469.1μg/m L(r=0.999 4)、0.511 0~5.110μg/m L(r=0.999 2);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;加样回收率分别为95.10%~101.90%(RSD=2.1%,n=9)、96.75%~101.80%(RSD=1.4%,n=9)、95.69%~100.00%(RSD=1.5%,n=9)、98.22%~104.60%(RSD=2.1%,n=9)。结论:该方法准确、灵敏、重复性好,可用于桑杏口服液中芦丁、橙皮苷、牛蒡苷、甘草苷含量的同时测定。

牛蒡子苷通过抑制炎症通路降低雷公藤甲素所致肾毒性

目的探讨具有抗炎活性的牛蒡子苷对雷公藤甲素(TP)所致的大鼠肾毒性的保护作用和潜在机制。方法将40只SD大鼠随机分为4组:对照组(不含药液的PBS),牛蒡子苷组(500 mg·kg^-1·d^-1),雷公藤甲素组(500μg·kg^-1·d^-1),联合用药组(牛蒡子苷500 mg·kg^-1·d^-1+雷公藤甲素500μg·kg^-1·d^-1)。分别予以相应处理后,采血测定肾脏生化指标,取肾脏测定肾脏指数并用HE染色观察其组织病理学变化。进一步体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),MTT法检测细胞的存活率变化,激光共聚焦显微镜记录各组细胞的形态变化,流式细胞术测定细胞凋亡率改变,Western blot法检测炎症相关通路蛋白表达变化。结果在体内实验中,牛蒡子苷显著降低了TP所致的大鼠血清尿素氮(BUN),肌酐(Scr)等肾脏生化指标和肾脏指数(P<0.05)。此外,牛蒡子苷明显改善了TP所致的肾细胞的水肿,空泡化和点状坏死等组织病理学改变。在体外实验中,牛蒡子苷抑制了TP诱导的HK-2细胞毒性,24 h细胞存活率明显升高(P<0.05);改善了凋亡的细胞形态,细胞凋亡率显著下降(P<0.05);逆转了炎性通路中IκBα和Nuclear p65蛋白表达(P<0.05)。结论牛蒡子苷可以减轻雷公藤甲素所致的肾损害,其机制可能与其抗炎活性有关。