响应面法优化槟榔核多酚提取工艺

在单因素试验的基础上,采用响应面试验研究丙酮体积分数、提取温度、提取时间和料液比对槟榔核多酚提取情况的影响。本试验以提取液中的多酚含量为响应值,通过建立多元回归模型,优化提取工艺参数。结果表明,料液比和提取温度对响应值的影响大,丙酮体积分数和提取时间对响应值的影响相对较小。在丙酮体积分数50%、浸提温度68℃、提取时间48 min、料液比1∶38(g/mL),在此条件下,多酚得率达到最大值40.43%,与理论预测值基本一致,说明该模型回归性良好,试验的拟合程度高,可对槟榔核多酚的提取进行预测。

槟榔果仁多酚氧化酶分离纯化及其酶特性研究

以槟榔果仁为试材,经pH6.8磷酸缓冲溶液(PBS)提取多酚氧化酶(PPO)粗酶液,采用(NH4)2SO4分级沉淀后,进一步通过DEAE-Sepharose Fast Flow和Phenyl Sepharose 6 Fast Flow柱层析,获得PPO纯化酶液。经鉴定其纯度达到电泳纯,相对分子质量为29.2 ku。在此基础上,对提取的PPO进行酶学特性研究,结果表明,槟榔果仁中PPO最适温度为20℃,最适pH为7.0;以邻苯二酚为底物,该酶的最大反应速度(Vmax)为140.84 U/mL·min,Km为3.22 mmol/L。