Analysis of gene expression profile of aspermia using cDNA microarray

Objective: To identify the differential gene expression profiles between the normal and aspermia human testes utilizing cDNA microarray. Methods: cDNA probes were prepared by labeling mRNA of aspermia testes tissues with Cy5-dUTP and mRNA of normal testes tissues with Cy3-dUTP respectively through reverse transcription. The mixed cDNA probes were then hybridized with 4096 cDNA arrays (4096 unique human cDNA sequences), and the fluorescent signals were scanned by ScanArray 3000 scanner (General Scanning, Inc.). The values of Cy5-dUTP and Cy3-dUTP on each spot were analyzed and calculated by ImaGene 3.0 software (BioDiscovery, Inc.). Differentially expressed genes were screened according to the criterion that the absolute value of natural logarithm of the ratio of Cy5-dUTP to Cy3-dUTP was greater-than 2.0 or less-than 0.5. A randomly chosen gene RAP1A was studied by in situ hybridization to evaluate the accuracy of the results. Results: 623 differential expressed genes related to aspermia were found. There were 303 up-expressed genes and 320 down-expressed genes. A distinct up-expressed gene RAP1A was confirmed by in situ hybridization. Conclusions: Screening the differential gene expression profiles between the normal and aspermia human testis by cDNA microarray can be used in the study of aspermia-related genes and the further research due to its properties, RAP1A may play some roles in the development and progression of aspermia.

基因芯片技术在COX10等无精症患者相关基因的分析

目的 运用基因芯片技术获取正常生育者睾丸组织与无精症患者睾丸组织中差异表达的基因 ,并对结果进行生物信息学分析。方法 分别抽提正常生育者与无精症患者睾丸组织中mRNA制备探针 ,应用基因芯片技术观察二者表达谱差异情况 ,并对其中明显下调的COX10基因进行生物信息学分析。结果 通过人基因芯片筛选 ,获得 12 0条与无精症相关的基因 ,其中明显下调的基因COX10与人类精子调控关系密切。结论 基因芯片筛选正常生育者与无精症患者睾丸组织差异表达基因具有样品用量少 ,高敏感性 ,快速高效等特性 。

501例无精、少精子症细胞遗传学研究

本文对501例无精、少精子症患者进行染色体分析,发现异常核型145例,其中X染色体数目异常81例,易位、倒位11例,Y染色体结构异常49例,XX男性2例,额外小染色体1例,总的染色体异常率为28.94%。本文还分析了核型与表型的关系,并从细胞遗传学的角度对无精。

利用基因芯片研究无精子症相关基因及RAP1 A基因初步探讨

目的 :应用基因芯片技术获取正常生育人睾丸组织与无精子症病人睾丸组织中差异表达的基因 ,并对结果进行初步分析研究。 方法 :抽提正常生育人睾丸组织与无精子症病人睾丸组织中的mRNA来制备探针 ,经过点样、杂交及洗涤后 ,通过计算机观察两者表达谱的差异情况 ,随后通过文献检索系统对其中明显上调的基因之一RAP1A进行了初步分析。 结果 :通过基因芯片筛选 ,获得 6 2 3条差异表达的基因 ,其中明显上调的基因RAP1A与人类精子调控关系密切。 结论 :基因芯片筛选正常生育人睾丸组织与无精子症病人睾丸组织差异表达的基因具有样品用量少、速度快的特性 ,可用于高通量筛选无精子症基因以及进一步的研究。

无精子症患者精浆pH值、性激素与生精细胞检测及其意义

目的：探讨对无精子症患者进行精浆pH值、性激素和生精细胞检测及其意义。方法：对60例无精子症患者根据精液pH值分为高pH值组38例（pH值7.2～8．0），低pH值组22例（pH值≤7．0）；另以20例正常男性作为正常对照组。采用电化学发光免疫法（ECLI）测定精浆性激素水平，用瑞一姬染色法进行精液细胞学检查。结果：高pH值组33例检出生精细胞，精浆中睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）与正常组相比，差异均有统计学意义（P〈0.05）；低pH值组22例均未检出生精细胞，精浆中T、FSH与正常组相比差异均无统计学意义。结论：临床只有对无精症患者精液的pH值、性激素水平与生精细胞学进行综合分析，才能正确诊断发生无精子症的原因，以指导临床治疗。

无精子症病人性激素测定和精液细胞学检查

目的 :对无精子症病人进行血清性激素和精液细胞学分析。 方法 :4 5例无精子症病人采用放射免疫法(RIA)检测性激素 ,瑞 吉染色法进行精液细胞学检查。 结果 :4 5例无精子症病人中 ,未检出生精细胞者 2 9例 ,血清T值降低 14例 (31 1% ) ,FSH、LH升高 13例 (2 8 9% ) ,PRL升高 4例 (8 9% )。 结论 :睾丸体积减小、T值降低、FSH和LH升高 ,提示睾丸功能损害 ,并且T/LH值更能反映睾丸间质细胞的功能 ;血清PRL只有在诊断高泌乳素血症引起的无精子症中才有意义 ;血清性激素测定和精液细胞学检查在鉴别非梗阻性与梗阻性无精子症是一项重要指标 ,对判定睾丸功能的损害程度和指导临床治疗有重要意义。

48例原发性不育患者染色体核型与AZF基因分析

目的探讨严重少弱精症和无精症的遗传病因。方法采用外周血染色体G显带,PCR技术以及PAGE电泳,对48例严重少弱精症和无精症患者进行外周血染色体核型分析及无精子症因子(AZF)基因的6个位点分析。结果48例中7例染色体异常,5例AZF基因有微缺失。结论严重少弱精症和无精症的发生与遗传密切相关,对男性不育患者进行治疗前有必要进行染色体核型分析及Y染色体AZF微缺失的检测。

无精症患者生精细胞检测和精浆生化测定

目的 :对无精症患者生精细胞和精浆生化结果进行分析。方法 :对 92例无精症患者 ,采用瑞吉氏染色法进行生精细胞检测 ,吲哚法和Cooper法分别进行果糖和中性α 葡糖苷酶测定。结果 :92例无精症患者中 ,6 1例未检出生精细胞 ,其中 37例果糖阴性 ,中性α 葡糖苷酶降低 :6例果糖正常 ,仅中性α 葡糖苷酶降低 :18例果糖和中性α 葡糖苷酶均正常。 31例发现生精细胞 ,其中处于精子细胞水平 18例、次级精母细胞水平 10例、初级精母细胞水平 2例、精原细胞水平 1例 ,其中 2 8例果糖和中性α 葡糖苷酶均正常 ,3例仅果糖降低。结论