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用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
被引量:
7
1
作者
毛爱军
王台
宋艳茹
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期736-739,共4页
通过调整差异显示反转录PCR (DDRT PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量 ,优化了适用于银染检测的DDRT PCR方法 .PCR扩增产物经 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后 ,银染能检测到多而清晰的条带 .泳道中的...
通过调整差异显示反转录PCR (DDRT PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量 ,优化了适用于银染检测的DDRT PCR方法 .PCR扩增产物经 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后 ,银染能检测到多而清晰的条带 .泳道中的条带数最少为 40个 ,最多达 80个 ,平均为 6 0个 ,条带大小分布在 10 0~ 90 0bp范围 ,灵敏度为 5pg/mm2 .此方法操作简便快速 ,灵敏度高 ,重复性好 .采用这个改良的方法 ,分析了拟南芥野生型和ast突变型基因表达的差异 .从 16 0 0 0个cDNA扩增产物条带中筛选出 2 8个差异条带 .二次PCR扩增后 ,进一步筛选出 13个差异条带 ,其中 7个是野生型特异表达的 ,6个是突变型特异表达的 。
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关键词
差异显示反转录PCR
银染
拟南芥
ast突变型
植物
基因表达
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职称材料
题名
用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
被引量:
7
1
作者
毛爱军
王台
宋艳茹
机构
中国科学院植物研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期736-739,共4页
基金
中国科学院生物科学与生物技术特别支持费资助课题 (STZ98 2 14 )~~
文摘
通过调整差异显示反转录PCR (DDRT PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量 ,优化了适用于银染检测的DDRT PCR方法 .PCR扩增产物经 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后 ,银染能检测到多而清晰的条带 .泳道中的条带数最少为 40个 ,最多达 80个 ,平均为 6 0个 ,条带大小分布在 10 0~ 90 0bp范围 ,灵敏度为 5pg/mm2 .此方法操作简便快速 ,灵敏度高 ,重复性好 .采用这个改良的方法 ,分析了拟南芥野生型和ast突变型基因表达的差异 .从 16 0 0 0个cDNA扩增产物条带中筛选出 2 8个差异条带 .二次PCR扩增后 ,进一步筛选出 13个差异条带 ,其中 7个是野生型特异表达的 ,6个是突变型特异表达的 。
关键词
差异显示反转录PCR
银染
拟南芥
ast突变型
植物
基因表达
Keywords
differential display reverse transcription polymerase chain reaction
silver staining
Arabidopsis thaliana
ast
mutant
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
毛爱军
王台
宋艳茹
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001
7
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职称材料
已选择
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参考文献
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