mitoK_(ATP)在黄芪甲苷抑制心肌细胞肥大中的作用

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP)在黄芪甲苷抑制乳大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法:利用体外培养模型,以苯肾上腺素(PE)10μmol/L诱导心肌细胞肥大,观察不同剂量黄芪甲苷对PE诱导的心肌肥大的抑制作用,并探讨在选择性mitoKATP通道阻断剂5-HD存在的情况下,不同剂量黄芪甲苷(12.5、25、50 mg/ml)对PE诱导肥大心肌细胞的作用。用考马斯亮蓝法测心肌细胞蛋白质含量;消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积;RT-PCR法检测心肌细胞ANP的mRNA的表达;采用Till阳离子测定系统,以Fura-2/AM为荧光探针,观察胞内[Ca2+]i瞬间变化;werstern印迹法测定KATP通道Kir6.2亚基的表达。结果:与正常对照组相比,苯肾上腺素模型组使心肌细胞总蛋白质含量增加,细胞体积增大,ANP的mRNA的表达增多,心肌细胞内[Ca2+]i静息水平明显升高,而Kir6.2的表达没有明显变化。与模型组相比,黄芪甲苷(25、50 mg/ml)可有效改善苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,抑制[Ca2+]i静息水平升高,使Kir6.2表达增加,并呈一定的剂量依赖性。而在加入5-HD后,黄芪甲苷对苯肾上腺素诱导心肌肥大的抑制作用消失,Kir6.2表达降低。结论:黄芪甲苷可通过开放mitoKATP通道抑制PE诱导心肌细胞肥大。

黄芪甲苷对苯肾上腺素诱导心肌肥大的抑制作用

目的:探讨黄芪甲苷对苯肾上腺素(PE)诱导心肌肥大的抑制作用及其机制。方法:利用体外培养模型,以苯肾上腺素10μmol/L诱导心肌细胞肥大,观察不同剂量黄芪甲苷(12.5,25,50 mg/ml)及钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂环孢菌素A(CsA)1μmol/L对苯肾上腺素诱导的心肌肥大的抑制作用。用考马斯亮蓝法测心肌细胞蛋白质含量;消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积;倒置相差显微镜观察细胞形态;采用Till阳离子测定系统以Fura-2/AM为荧光探针,观察胞内[Ca2+]i瞬间变化;Werstern印迹法测定CaN表达。结果:与正常对照组相比,苯肾上腺素使心肌细胞总蛋白质含量增加56.2%,细胞体积增大79.6%,心肌细胞内[Ca2+]i静息水平明显升高,CaN表达增加,黄芪甲苷(25,50 mg/ml)可有效改善苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,抑制[Ca2+]i静息水平升高,抑制CaN表达增加,并呈一定的剂量依赖性。结论:黄芪甲苷对苯肾上腺素诱导心肌细胞肥大具有一定的保护作用,其机制可能与抑制细胞内Ca2+进而抑制CaN通路有关。