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Agrobacterium-mediated Transformation of Rice (Oryza sativa L.) with Atrazine Chlorohydrolase Gene (atzA) 被引量:2
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作者 WANGSong-wen SHILi-li +6 位作者 SUNZong-xiu CAIBao-li FUYa-ping WANGYang SIHua-min LIUXia ZHANGXin 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2005年第4期241-246,共6页
Atrazine chlorohydrolase gene (atzA) was cloned from Arthrobacter sp. AD1. A plant expression plasmid was constructed under the control of CaMV35s promoter and was used in rice transformation. The target gene was succ... Atrazine chlorohydrolase gene (atzA) was cloned from Arthrobacter sp. AD1. A plant expression plasmid was constructed under the control of CaMV35s promoter and was used in rice transformation. The target gene was successfully introduced into mature embryos of a japonica rice cultivar Jindao 107 by Agrobacterium- mediated transformation and hundreds of transgenic plants were obtained. The exogenous atzA gene in the transgenic plants that expressed atrazine resistance was confirmed by Southern blot hybridization. The resistance experiments by spraying transgenic rice plants with 0.133% atrazine shown that most of the transgenic rice plants exhibited the resistance to herbicide atrazine. The segregation of exogenous atzA gene in T1 progeny corresponded to the Mendelian ratio. 展开更多
关键词 Transgenic rice Arthrobacter sp. AD1 atrazine chlorohydrolase gene
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农杆菌介导的细菌阿特拉津氯水解酶基因对水稻的遗传转化 被引量:9
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作者 王松文 施利利 +6 位作者 孙宗修 蔡宝立 傅亚萍 王扬 斯华敏 刘霞 张欣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1093-1098,共6页
研究构建了植物表达载体p1301-atzA,使来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因atzA受控于CaMV35s启动子下表达。用农杆菌介导法将植物表达载体p1301-atzA导入粳型保持系津稻107中,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再... 研究构建了植物表达载体p1301-atzA,使来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因atzA受控于CaMV35s启动子下表达。用农杆菌介导法将植物表达载体p1301-atzA导入粳型保持系津稻107中,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再生植株。转基因植株总DNA经PCR和Southern检测表明atzA基因已整合到水稻的基因组中。对转基因植株进行除草剂阿特拉津抗性检测,在喷施浓度为0.133%的阿特拉津溶液后,对照植株和敏感植株死亡,而转基因植株表现出对阿特拉津的抗性,保持正常生长,但不同转化株系的抗性表达水平不同。对转基因植株T,代进行的遗传分析表明,外源基因atzA能稳定遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。 展开更多
关键词 农杆菌介导 细菌 阿特拉津氯 水解酶基因 水稻 遗传转化
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降解-示踪质粒的构建及性能评价研究 被引量:2
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作者 刘春 李曼 +2 位作者 杨景亮 王悦 李敏源 《环境科学与管理》 CAS 2013年第6期53-58,共6页
在生物强化中采用报告基因技术对降解质粒进行标记,可实现对基因工程菌和降解基因的原位监测。通过基因克隆技术,将绿色荧光蛋白基因(gfp)和阿特拉津脱氯水解酶基因(atzA)重组,构建降解-示踪功能质粒,实现对阿特拉津降解质粒的示踪标记... 在生物强化中采用报告基因技术对降解质粒进行标记,可实现对基因工程菌和降解基因的原位监测。通过基因克隆技术,将绿色荧光蛋白基因(gfp)和阿特拉津脱氯水解酶基因(atzA)重组,构建降解-示踪功能质粒,实现对阿特拉津降解质粒的示踪标记,并对转化获得的基因工程菌绿色荧光蛋白表达及阿特拉津降解能力进行评价。结果表明将gfp和atzA基因克隆至质粒载体pUC18所获得的重组质粒,经检测含有atzA基因,具有氨苄青霉素抗性,并可表达绿色荧光蛋白。携带重组质粒的基因工程菌具有阿特拉津降解活性;且在活性污泥中产生绿色荧光现象,可通过原位观察进行监测。 展开更多
关键词 atza基因 绿色荧光蛋白基因 重组质粒 阿特拉津
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检测转基因水稻中阿特拉津抗性表达的方法 被引量:2
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作者 施利利 王松文 +4 位作者 孙宗修 蔡宝立 张欣 刘霞 丁得亮 《天津农学院学报》 CAS 2004年第4期5-8,共4页
用10种不同浓度的阿特拉津溶液对津稻107进行叶片涂抹处理,从而确定可以用产生药害的0.076%~0.190%浓度(W V)的阿特拉津溶液检测转化植株对除草剂的抗性。用以上浓度范围的阿特拉津溶液涂抹处理津稻107转化植株,并对在此浓度下检测出... 用10种不同浓度的阿特拉津溶液对津稻107进行叶片涂抹处理,从而确定可以用产生药害的0.076%~0.190%浓度(W V)的阿特拉津溶液检测转化植株对除草剂的抗性。用以上浓度范围的阿特拉津溶液涂抹处理津稻107转化植株,并对在此浓度下检测出的除草剂抗性和敏感的转化植株进行了PCR分析,结果表明,除草剂抗性鉴定结果与分子检测结果一致。因此可以利用浓度为0.076%~0.190%的阿特拉津溶液对早期转化株进行叶片涂抹法鉴定。 展开更多
关键词 阿特拉津 阿特拉津氯水解酶基因(atza) 转基因水稻
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细菌阿特拉津氯水解酶基因的功能及其应用 被引量:1
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作者 徐胜文 王松文 郭玉华 《天津农学院学报》 CAS 2006年第1期42-46,共5页
简要介绍了能降解除草剂阿特拉津的细菌的种类和它们的生物降解途径、阿特拉津氯水解酶的功能和定向进化的研究进展,以及阿特拉津氯水解酶基因atzA在污染土壤生物修复和转基因植物研究中的应用。
关键词 除草剂 阿特拉津 阿特拉津氯水解酶基因 污染土壤修复 转基因植物
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不同生物反应器中基因工程菌生物强化处理阿特拉津研究 被引量:5
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作者 郭渊明 刘春 +3 位作者 郭亚楠 杨景亮 李亮 马俊科 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期554-559,共6页
在膜-生物反应器(MBR)和复合生物反应器中,考察基因工程菌生物强化处理阿特拉津去除效果,并对基因工程菌浓度和降解基因atzA基因丰度变化进行检测.结果表明,阿特拉津对COD和氨氮的生物去除活性具有一定的抑制作用;基因工程菌生物强化后,... 在膜-生物反应器(MBR)和复合生物反应器中,考察基因工程菌生物强化处理阿特拉津去除效果,并对基因工程菌浓度和降解基因atzA基因丰度变化进行检测.结果表明,阿特拉津对COD和氨氮的生物去除活性具有一定的抑制作用;基因工程菌生物强化后,COD及氨氮的去除效率得到恢复.MBR对COD和氨氮的去除效果优于复合生物反应器.基因工程菌生物强化显著提高阿特拉津的生物去除效率,MBR和复合生物反应器阿特拉津去除率均逐渐提高,运行后期平均去除率分别达到38.94%和29.36%.接种基因工程菌后,反应器中基因工程菌细胞浓度快速下降,而后趋于稳定.MBR、复合生物反应器悬浮污泥和附着生物膜稳定细胞浓度分别为5×103、1.1×103和0.4×103 CFU/mL.采用FISH技术对MBR和复合生物反应器中降解基因atzA基因进行检测,结果表明,atzA基因平均相对丰度先减小而后增加.MBR污泥atzA基因平均相对丰度最大;附着生物膜atzA基因平均相对丰度高于悬浮污泥.atzA基因水平迁移可能是维持较高基因丰度的重要原因. 展开更多
关键词 基因工程菌 atza基因 生物强化 荧光原位杂交 阿特拉津
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