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具有抗农作物病原真菌活性的链霉菌IIR21菌株中attB位点的分析 被引量:2
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作者 李晓华 吴金龙 +6 位作者 郭佳 陶新园 梅枫 马婷婷 皮婷 刘涛 沈冬 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期19-22,共4页
以7种农作物病原真菌为指示菌,采用菌块法和杯碟法测定了链霉菌IIR21菌株次级代谢产物的抗农作物病原真菌活性,用PCR方法扩增了链霉菌IIR21菌株的att B的序列,并进行了生物信息学分析.结果表明:链霉菌IIR21菌株对稻瘟病菌、立枯丝核病... 以7种农作物病原真菌为指示菌,采用菌块法和杯碟法测定了链霉菌IIR21菌株次级代谢产物的抗农作物病原真菌活性,用PCR方法扩增了链霉菌IIR21菌株的att B的序列,并进行了生物信息学分析.结果表明:链霉菌IIR21菌株对稻瘟病菌、立枯丝核病菌具有较强的抑菌活性;链霉菌IIR21菌株的att B位点序列长269 bp,它与Streptomyces natalensis的att B位点核心区域的序列的相似度最高,达到92%,具有发生交换的核心区域5'-TT.含有ΦC31att P位点的整合型质粒p SET152可通过att P位点与链霉菌IIR21菌株的染色体上的att B位点发生位点特异性重组. 展开更多
关键词 链霉菌IIR21菌株 抗真菌活性 att B位点
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抗生素Bagremycin生产菌Streptomyces sp. Tü4128接合转移系统的建立 被引量:2
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作者 朱云霞 廖思懿 +1 位作者 叶江 张惠展 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期160-164,共5页
基于噬菌体φC31 att/int系统,采用属间接合将来自大肠杆菌的DNA有效地导入菌株Tü4128的孢子中。通过条件优化,当融合温度为37℃时,在含80mmol/L MgCl2的ISP4培养基上使每个受体细胞的接合频率显著提高到7.3×10-3。Southern b... 基于噬菌体φC31 att/int系统,采用属间接合将来自大肠杆菌的DNA有效地导入菌株Tü4128的孢子中。通过条件优化,当融合温度为37℃时,在含80mmol/L MgCl2的ISP4培养基上使每个受体细胞的接合频率显著提高到7.3×10-3。Southern blot分析显示在受体菌染色体上存在单一的染色体附着位点(attB位点)。整合位点的DNA序列测序显示为保守。采用优化的方法建立了大肠杆菌和菌株Tü4128间高效的属间接合系统。 展开更多
关键词 attb位点 噬菌体φC31 bagremycin 属间接合 STREPTOMYCES sp. Tü4128
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具有抗稻瘟病菌活性的ⅡW1菌株的分离鉴定及其接合转移方法的建立 被引量:2
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作者 李晓华 冯喆 +3 位作者 黄粤 马婷婷 姚家成 夏珍珍 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第3期240-244,共5页
从湖北省神农架地区土壤中筛选出一株具有抗稻瘟病菌活性的ⅡW1菌株,采用菌块法测定了ⅡW1菌株对稻瘟病菌的抑菌活性,通过形态结构、生理生化和16S rDNA基因序列同源性比对对ⅡW1菌株进行鉴定,同时对链霉菌ⅡW1菌株attB序列进行克隆,并... 从湖北省神农架地区土壤中筛选出一株具有抗稻瘟病菌活性的ⅡW1菌株,采用菌块法测定了ⅡW1菌株对稻瘟病菌的抑菌活性,通过形态结构、生理生化和16S rDNA基因序列同源性比对对ⅡW1菌株进行鉴定,同时对链霉菌ⅡW1菌株attB序列进行克隆,并建立接合转移的方法.结果表明:ⅡW1菌株属假灰色链霉菌,链霉菌ⅡW1菌株对稻瘟病NO-1菌株和168菌株的抑菌圈直径分别为29.7 mm和27.4 mm;链霉菌ⅡW1菌株attB序列具有位点特异性重组所必须的核心位点5′-TT-3′.含ΦC31attP位点的整合型质粒pSET152通过两亲接合转移导入链霉菌ⅡW1菌株. 展开更多
关键词 假灰色链霉菌ⅡW1菌株 稻瘟病菌 attb位点 接合转移
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Acquisition and dissemination mechanisms of CTXΦ in Vibrio cholerae : New paradigm for dif residents
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作者 Bhabatosh Das G Balakrish Nair Rupak K Bhadra 《World Journal of Medical Genetics》 2014年第2期27-33,共7页
Vibrio cholerae(V. cholerae) genome is equipped with a number of integrative mobile genetic element(IMGE) like prophages, plasmids, transposons or genomic islands, which provides fitness factors that help the pathogen... Vibrio cholerae(V. cholerae) genome is equipped with a number of integrative mobile genetic element(IMGE) like prophages, plasmids, transposons or genomic islands, which provides fitness factors that help the pathogen to survive in changing environmental conditions. Metagenomic analyses of clinical and environmental V. cholerae isolates revealed that dimer resolution sites(dif) harbor several structurally and functionally distinct IMGEs. All IMGEs present in the dif region exploit chromosomally encoded tyrosine recombinases, Xer C and Xer D, for integration. Integration takes place due to site-specific recombination between two specific DNA sequences; chromosomal sequence is called att B and IMGEs sequence is called att P. Different IMGEs present in the att P region have different attP structure but all of them are recognized by Xer C and Xer D enzymes and mediate either reversible or irreversible integration. Cholera toxin phage(CTXΦ), a lysogenic filamentous phage carrying the cholera toxin genes ctx AB, deserves special attention because it provides V. cholerae the crucial toxin and is always present in the dif region of all epidemic cholera isolates. Therefore, understanding the mechanisms of integration and dissemination of CTXΦ, genetic and ecological factors which support CTXΦ integration as well as production of virion from chromosomally integrated phage genome and interactions of CTXΦ with other genetic elements present in the genomes of V. cholerae is important for learning more about the biology of cholera pathogen. 展开更多
关键词 Vibrio cholerae Cholera toxin phage VGJΦ Plasmids Integrative mobile genetic element Xer C Xer D Dimer resolution sites att P attb
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attB位点核心区定点突变对φC31整合酶效率的影响
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作者 李振海 谢飞 马晴雯 《医学分子生物学杂志》 CAS 2013年第2期63-68,共6页
目的考察attB位点核心区碱基突变对φC31整合酶存真核细胞中催化目的基网整合效率的影响。方法选取attB位点核心区中可能对中c31整合酶效率产生影响的碱基,设计含有相应位点突变的引物,采用大引物法两轮PCR扩增得到含突变碱基的attB... 目的考察attB位点核心区碱基突变对φC31整合酶存真核细胞中催化目的基网整合效率的影响。方法选取attB位点核心区中可能对中c31整合酶效率产生影响的碱基,设计含有相应位点突变的引物,采用大引物法两轮PCR扩增得到含突变碱基的attB片段,将其连人含报告基因的载体pEGFP。NI中得到pEGFP—NI—attB。以含野生型attB位点的报告基因载体pEGFP-N1-attB作为对照.将上述载体分别与中φC31整合酶表达质粒共转染HeLa细胞,经过药物筛选、染色、细胞克隆计数后,计算并比较整合效率。结果成功完成9个含有突变碱基attB位点及报告基因载体的构建。酶切及测序鉴定结果显示每个质粒含1或2个突变碱基。其中6个质粒为目标碱基突变,3个为PCR过程中随机产生的非预期突变。细胞实验结果表明,3个含有突变attB报告质粒的整合率与野生型attB相比无显著性差异,其余6个突变attB报告质粒的整合率与野生型attB相比显著降低(P〈0.05),尤其是其中两个attB位点中含有2个碱基突变的报告质粒,整合率降低极为显著(P〈0.001)。结论attB位点核心区碱基保守性较强,其中一些关键位点的突变使得整合酶效率降低。 展开更多
关键词 attb位点 点突变 大引物 整合率
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