期刊文献+

二次检索

题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到24篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
烟草甲攻击素基因LsAttacin2的表达及其在抗细菌胁迫中的作用
1
作者 夏鹏亮 严毅 +2 位作者 宋兴宜 黄勇 杨文佳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期501-509,共9页
【目的】本研究旨在阐明烟草甲Lasioderma serricorne幼虫体内攻击素(attacin)基因LsAttacin2在响应细菌侵染过程中的功能。【方法】利用RT-PCR扩增烟草甲LsAttacin2的cDNA全长序列;利用RT-qPCR检测LsAttacin2在烟草甲不同发育阶段(卵... 【目的】本研究旨在阐明烟草甲Lasioderma serricorne幼虫体内攻击素(attacin)基因LsAttacin2在响应细菌侵染过程中的功能。【方法】利用RT-PCR扩增烟草甲LsAttacin2的cDNA全长序列;利用RT-qPCR检测LsAttacin2在烟草甲不同发育阶段(卵、低龄幼虫、高龄幼虫、蛹、低龄成虫和高龄成虫)、4龄幼虫不同组织(头、表皮、前肠、中肠、后肠、脂肪体和马氏管)、大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus侵染及其肽聚糖处理4龄幼虫后的相对表达量;通过注射法利用RNAi沉默烟草甲4龄幼虫LsAttacin2的表达后,检测大肠杆菌和金黄色葡萄球菌侵染烟草甲4龄幼虫后的死亡率。【结果】克隆获得烟草甲LsAttacin2(GenBank登录号:MT635176)的cDNA全长序列,其开放阅读框长504 bp,编码167个氨基酸残基,LsAttacin2 N端存在信号肽,C端具有Attacin_C超家族的保守结构域。RT-qPCR结果表明,LsAttacin2在烟草甲测试的各发育阶段均有表达,且在高龄幼虫和蛹中高表达;LsAttacin2主要在4龄幼虫中肠、表皮和脂肪体等免疫组织中表达;大肠杆菌和金黄色葡萄球菌及其肽聚糖均诱导了烟草甲4龄幼虫体内LsAttacin2的上调表达。RNAi结合细菌生物测定结果表明,ds LsAttacin2注射组4龄幼虫中LsAttacin2的表达量在注射24和48 h时较对照组(注射ds GFP)分别显著下降了72.8%和80.4%;RNAi后48 h,与注射ds GFP的对照组相比,ds LsAttacin2注射组大肠杆菌和金黄色葡萄球菌侵染24 h时4龄幼虫的死亡率分别提高了21.1%和24.4%。【结论】本研究结果表明LsAttacin2可能在烟草甲抗细菌的免疫应答过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 烟草甲 攻击素 基因表达 细菌侵染 免疫 RNA干扰
下载PDF
Attacin-Thanatin杂合抗菌肽的融合表达及其菌内抑菌活性 被引量:5
2
作者 王利娜 余冰 +1 位作者 韩国全 陈代文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期531-537,共7页
构建杂合抗菌肽Attacin-Thanatin(简称mAT)融合表达重组菌株,对其在大肠杆菌系统中的表达特性及其融合表达产物的菌内抑菌活性进行了研究。将mAT重组表达质粒pET-mAT(pe)依次转化宿主菌E.coliDH5α、BL21(DE3)、Rosetta-gamiTM(DE3)pLy... 构建杂合抗菌肽Attacin-Thanatin(简称mAT)融合表达重组菌株,对其在大肠杆菌系统中的表达特性及其融合表达产物的菌内抑菌活性进行了研究。将mAT重组表达质粒pET-mAT(pe)依次转化宿主菌E.coliDH5α、BL21(DE3)、Rosetta-gamiTM(DE3)pLysS,采用IPTG诱导表达;优化筛选该抗菌肽的敏感菌株、IPTG浓度、宿主菌诱导起始浓度等,初步建立了抗菌肽菌内抑菌活性检测方法,用于研究该杂合抗菌肽的体内抑菌活性。SDS-PAGE分析结果显示,宿主菌Rosetta-gamiTM(DE3)pLysS可获得表达的融合产物,而E.coliDH5α、BL21(DE3)经IPTG诱导后未检测到目的条带;优化结果显示,以E.coliDH5α宿主菌、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、起始诱导菌浓度D600 nm值0.3为检测抗菌肽菌内抑菌活性的最佳条件;mAT融合表达产物抑菌活性的检测结果显示,宿主菌被本身所表达的杂合抗菌肽融合蛋白所抑制,增殖速度放缓。利用Rosetta-gamiTM(DE3)pLysS有效融合表达mAT并初步建立的抗菌肽菌内抑菌活性快速检测方法为进一步研究mAT奠定了基础。 展开更多
关键词 attacin—Thanatin 杂合抗菌肽 融合表达 菌内抑菌活性
下载PDF
Attacin抗菌肽基因体内抗菌活性研究 被引量:2
3
作者 徐建华 朱家勇 +4 位作者 金小宝 许琴英 张秀明 庄俊华 陈曲波 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1051-1053,共3页
目的建立Attacin基因体内抗菌活性检测系统,并初步研究其抗菌活性。方法PCR扩增Attacin编码区目的序列,并构建原核表达重组质粒,转化大肠埃希菌,在体内检测Attacin的抗菌活性,同时SDS-PAGE分析融合蛋白表达情况。结果与未诱导对照相比,... 目的建立Attacin基因体内抗菌活性检测系统,并初步研究其抗菌活性。方法PCR扩增Attacin编码区目的序列,并构建原核表达重组质粒,转化大肠埃希菌,在体内检测Attacin的抗菌活性,同时SDS-PAGE分析融合蛋白表达情况。结果与未诱导对照相比,包含重组质粒的宿主菌生长受到抑制,含pET30a(+)/Attacin宿主菌诱导表达后,提纯不到His-Attacin融合蛋白,而含pGEX-4T-1/Attacin宿主菌可获得GST-Attacin融合蛋白。结论建立灵敏、简便的Attacin体内抗菌活性检测方法,为下一步研究Attacin的生物学功能及其应用开发奠定基础。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 原核表达 体内活性检测 attacin
下载PDF
家蝇Attacin基因在家蝇三龄幼虫中的时间表达模式研究 被引量:6
4
作者 王艳 金小宝 朱家勇 《中国热带医学》 CAS 2007年第6期862-864,共3页
目的探讨家蝇Attacin mRNA在幼虫各个时期的表达,为进一步研究家蝇的免疫防御打下基础。方法对家蝇三龄幼虫进行诱导,分别取诱导前0h和诱导后2h、4h、8h、12h、16h、24h、36h、48h的家蝇mRNA,进行RT-PCR,分析attacin基因在家蝇体内的时... 目的探讨家蝇Attacin mRNA在幼虫各个时期的表达,为进一步研究家蝇的免疫防御打下基础。方法对家蝇三龄幼虫进行诱导,分别取诱导前0h和诱导后2h、4h、8h、12h、16h、24h、36h、48h的家蝇mRNA,进行RT-PCR,分析attacin基因在家蝇体内的时间表达模式。结果家蝇三龄幼虫体内的attacin基因在诱导前后均有表达,诱导后表达增强16h达到相对高水平,维持约24h,而后开始下降。结论Attacin基因在家蝇三龄幼虫中是组成性表达,对进一步了解其在家蝇免疫系统,丰富对昆虫天然免疫的认识具有积极作用。 展开更多
关键词 家蝇幼虫 attacin基因 半定量RT-PCR 表达模式
下载PDF
多聚组氨酸标签的Attacin抗菌肽基因克隆及其在CHO细胞中稳定表达 被引量:3
5
作者 徐建华 朱家勇 +5 位作者 金小宝 许琴英 张秀明 庄俊华 马艳 王艳 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1910-1913,共4页
目的克隆家蝇幼虫抗菌肽Attacin-His_6融合基因,构建真核表达载体并转染CHO细胞表达,为深入研究其生物学活性创造条件。方法以pUCm-T/Attacin载体为模板,用含6×His标签序列的下游引物克隆Attacin-His_6融合基因,并将其构建于pcDNA3... 目的克隆家蝇幼虫抗菌肽Attacin-His_6融合基因,构建真核表达载体并转染CHO细胞表达,为深入研究其生物学活性创造条件。方法以pUCm-T/Attacin载体为模板,用含6×His标签序列的下游引物克隆Attacin-His_6融合基因,并将其构建于pcDNA3.1(+)中,pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒转染CHO细胞,ZeocinG418筛选阳性细胞株,RT-PCR检测重组质粒在CHO细胞的转录情况。结果成功扩增出Attacin-His_6融合基因,构建了pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒并转染入CHO细胞中,RT-PCR从阳性克隆的CHO细胞中扩增出预期大小的目的片段,从转录水平证实CHO-Attacin-His_6重组细胞株表达了Attacin-His_6基因。结论抗菌肽Attacin基因哺乳动物型工程细胞表达系统的建立,为进一步制备其肽类抗生素奠定了基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 真核表达 中国仓鼠卵巢细胞 attacin
下载PDF
顺式串联家蝇抗菌肽Attacin基因真核表达载体的构建 被引量:5
6
作者 王婷婷 金小宝 +1 位作者 朱家勇 刘雷山 《中国热带医学》 CAS 2006年第3期390-391,401,共3页
目的构建家蝇抗菌肽Attacin基因多拷贝串联体,并克隆到甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K上。方法PCR法扩增家蝇抗菌肽Attacin基因成熟肽片断,目的片断的上游5′端带有EcoR Ⅰ和Nhe Ⅰ位点,下游5′端带有NotⅠ和xbaⅠ位点,目的片断首先克隆入p... 目的构建家蝇抗菌肽Attacin基因多拷贝串联体,并克隆到甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K上。方法PCR法扩增家蝇抗菌肽Attacin基因成熟肽片断,目的片断的上游5′端带有EcoR Ⅰ和Nhe Ⅰ位点,下游5′端带有NotⅠ和xbaⅠ位点,目的片断首先克隆入pMD18-T栽体,利用pMD18-T载体的Nde Ⅰ位点和目的片断上的一对同尾酶(Nhe Ⅰ和Xba Ⅰ),多次酶切连接,串联成多拷贝的Attacin成熟肽基因,再用EcoRⅠ和Not Ⅰ双酶切,最后克隆入甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K。结果 PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序证明串联体基因重组质粒构建成功。结论该方法能方便高效地获得所需的多拷贝基因,为进一步进行高效表达打下基础。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 attacin基因 多拷贝
下载PDF
Abnormal Expression of Silkworm Attacin Gene Induced by 3 Kinds of Microorganisms 被引量:5
7
作者 孔卫青 杨金宏 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第6期142-145,共4页
[Objective] The aim of this research was to study the expression of silkworm attacin gene induced by some different microorganisms.[Method] Three kinds of microorganism,BmNPV,JM109 and Agrobacterium LBA4404,were inges... [Objective] The aim of this research was to study the expression of silkworm attacin gene induced by some different microorganisms.[Method] Three kinds of microorganism,BmNPV,JM109 and Agrobacterium LBA4404,were ingested to silkworm and the expression profile of attacin gene in hemocyte and fat body was detected by semi-quantitative PCR.And subsequently,the PCR products were cloned and sequenced for further analysis.[Result] A specific band,about 800 bp,appeared in fat body of all induced silkworms.As indicated by the results of cloning and sequencing(GenBank accession number:FJ373019),the band was produced because the 2 introns existing in normal expression form were not spliced.Furthermore,when the extended expression sequence was translated into amino acids,the translation stopped earlier by the stop codon TGA at the 5' end of the first intron of the original sequence,leading the loss of attacin C terminus.[Conclusion] There were two splicesomes of attacin gene,which had reference value to study the role of the attacin gene in silkworm immunity. 展开更多
关键词 SILKWORM attacin INDUCED EXPRESSION SPLICING Immunity
下载PDF
3种微生物诱导的家蚕attacin基因异常表达形式的研究
8
作者 孔卫青 杨金宏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第6期2407-2408,2427,共3页
[目的]研究家蚕抗菌肽attacin基因在不同诱导源诱导时的表达情况。[方法]应用3种外源微生物BmNPV、JM109以及农杆菌LBA4404对家蚕进行诱导,半定量PCR检测attacin基因在诱导后的家蚕血液和脂肪体的表达情况,对诱导表达产物进行克隆测序... [目的]研究家蚕抗菌肽attacin基因在不同诱导源诱导时的表达情况。[方法]应用3种外源微生物BmNPV、JM109以及农杆菌LBA4404对家蚕进行诱导,半定量PCR检测attacin基因在诱导后的家蚕血液和脂肪体的表达情况,对诱导表达产物进行克隆测序及进一步的分析。[结果]attacin基因在所有诱导后的脂肪体中均出现1条800 bp左右的特异表达条带,克隆测序(GenBank登录号:FJ373020)后发现其产生由正常表达形式的2个内含子未被剪接引起,且原序列第1内含子5′端的1个TGA终止密码子使得加长的特异表达序列翻译氨基酸时在此处终止,最终导致了attacin C末端结构的缺失。[结论]attacin基因有2种剪接形式,该研究对探明atta-cin基因在家蚕免疫中的作用具有参考价值。 展开更多
关键词 家蚕 attacin 诱导表达 剪接 免疫
下载PDF
家蚕抗菌肽Attacin1对球孢白僵菌的抗菌活性 被引量:2
9
作者 胡丛武 李瑞林 +4 位作者 吴万明 侯成香 高坤 耿涛 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期651-659,共9页
抗菌肽是宿主在免疫过程中产生的一类重要抗菌物质。通过实时荧光定量PCR检测发现家蚕幼虫在被球孢白僵菌(Beauveria bassiana)感染后抗菌肽Attacin1的编码基因BmAttacin1表达显著上调。克隆获得了BmAttacin1成熟蛋白的编码序列,利用原... 抗菌肽是宿主在免疫过程中产生的一类重要抗菌物质。通过实时荧光定量PCR检测发现家蚕幼虫在被球孢白僵菌(Beauveria bassiana)感染后抗菌肽Attacin1的编码基因BmAttacin1表达显著上调。克隆获得了BmAttacin1成熟蛋白的编码序列,利用原核表达系统成功表达并获得BmAttacin1蛋白。抑菌圈实验结果表明,BmAttacin1对革兰阴性菌大肠埃希菌(Escherichia coli)和球孢白僵菌有明显的抑菌效果,而对革兰阳性菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)没有抑菌效果;进一步将BmAttacin1与球孢白僵菌分生孢子孵育,间接免疫荧光检测发现BmAttacin1能与球孢白僵菌分生孢子结合。在BmN培养细胞中过表达BmAttacin1基因后,家蚕其他7种抗菌肽基因也都上调表达,其中天蚕素类抗菌肽基因BmCecropinA的表达上调了10倍,BmCecropinB上调了9倍,表明BmAttacin1的表达可能对其他抗菌肽基因的表达具有协同增强作用。试验结果为深入研究BmAttacin1与球孢白僵菌的相互作用以及BmAttacin1在家蚕抵御白僵菌感染过程中发挥的作用奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽 attacin1 球孢白僵菌
下载PDF
家蝇攻击素(Attacin)基因的克隆与表达 被引量:17
10
作者 耿华 安春菊 +2 位作者 郝友进 李德森 杜荣骞 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1344-1350,共7页
通过同源克隆策略并结合cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆到了编码家蝇攻击素 (Attacin)基因的全长cDNA序列 (GenBank登陆号 :AY4 6 0 10 6 ) ,并对相应的氨基酸序列进行了序列比对 ,对系统关系等进行了生物信息学分析。家蝇Attacin的... 通过同源克隆策略并结合cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆到了编码家蝇攻击素 (Attacin)基因的全长cDNA序列 (GenBank登陆号 :AY4 6 0 10 6 ) ,并对相应的氨基酸序列进行了序列比对 ,对系统关系等进行了生物信息学分析。家蝇Attacin的cDNA全长 778bp ,其中包括 6 2 7bp的开放式读码框 (ORF) ,4 4bp的 5′末端非编码区 (5′UTR)和 10 7bp的 3′末端非编码区 (3′UTR) ,相应的蛋白产物含 2 0 8个氨基酸 ,与其他双翅目昆虫的Attacin具有很高的相似性 ,约 5 0 %~ 70 %。以邻接法 (Neighbor Joining ,NJ)所构建的系统关系表明 ,家蝇的Attacin与其他双翅目昆虫的Attacin起源于共同的祖先。应用半定量RT PCR的方法 ,研究家蝇幼虫在受到外源刺激后Attacin基因的表达 ,结果表明 ,在家蝇幼虫体内Attacin基因呈诱导型表达 。 展开更多
关键词 家蝇 攻击素 同源克隆 RT—PCR
下载PDF
家蝇抗菌肽Attacin-2基因的克隆、序列分析和诱导表达 被引量:12
11
作者 柳峰松 孙玲玲 +1 位作者 唐婷 王丽娜 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期27-33,共7页
攻击素(attacin)作为昆虫抗菌肽之一,在昆虫的先天免疫中起着重要作用。本研究通过家蝇Musca domesticaEST序列筛选并结合RACE技术克隆了家蝇的Attacin-2基因(Mdatta2)cDNA序列。其全长819 bp,包含一个726 bp的完整开放阅读框(open read... 攻击素(attacin)作为昆虫抗菌肽之一,在昆虫的先天免疫中起着重要作用。本研究通过家蝇Musca domesticaEST序列筛选并结合RACE技术克隆了家蝇的Attacin-2基因(Mdatta2)cDNA序列。其全长819 bp,包含一个726 bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),以及42 bp的5'末端非翻译区(5'UTR)和51 bp的3'末端非翻译区(3'UTR),编码241个氨基酸残基,推导的多肽N端22个氨基酸残基为信号肽序列。同源性分析表明,其氨基酸序列与嗜凤梨果蝇Drosophila ananassae的Attacin一致性最高(46%)。以邻接法(Neighbor-Joining,NJ)构建的系统关系表明,家蝇的Attacin-2与其他双翅目昆虫的Attacin起源于共同的祖先,属于Attain_C超家族。应用实时荧光定量PCR的方法研究家蝇幼虫在受到外源细菌刺激时Mdatta2基因的表达,结果显示,在大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus分别刺激后3 h和6 h,家蝇幼虫Mdatta2表达量出现显著上调。Mdatta2基因在家蝇幼虫体内呈诱导型表达,表达水平随诱导时间的不同而变化,提示Mdatta2基因可能在家蝇免疫防御过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 攻击素 基因克隆 基因表达
下载PDF
家蝇抗菌肽Attacin在毕赤酵母中的异源表达 被引量:6
12
作者 李小波 王婷婷 +3 位作者 马艳 朱家勇 刘漫宇 金小宝 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期332-336,共5页
目的构建家蝇抗菌肽(攻击素,attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达。方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K-attacin用Sac... 目的构建家蝇抗菌肽(攻击素,attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达。方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K-attacin用SacⅠ酶切线性化后,采用电转化法将其转入毕赤酵母GS115中,通过抗性、表型和PCR筛选多拷贝整合株。甲醇诱导毕赤酵母GS115/pPIC9K-attacin的表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定表达产物,采用琼脂糖孔穴扩散法检测其对大肠埃希菌K12D31的抑制作用。结果重组表达质粒pPIC9K-attacin构建成功,电转化获得多拷贝整合转化子毕赤酵母GS115/pPIC9 K-attacin,表达产物经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,在约Mr22000处有蛋白条带,表达产物可抑制E.coli K12D31的生长。结论家蝇抗菌肽attacin在巴斯德毕赤酵母中成功进行了表达。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 攻击素 巴斯德毕赤酵母 异源表达
下载PDF
家蚕抗菌肽Attacin基因植物表达载体的构建 被引量:1
13
作者 党颖慧 杨金宏 孔卫青 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第10期52-54,共3页
抗菌肽是昆虫抵御外界微生物侵染的主要物质。利用双酶切将pBI121载体上的植物启动子CaMV35S克隆到植物表达载体pCAMBIA2300上,构建重组表达载体pCAMBIA2300-CaMV35S。通过PCR扩增家蚕抗菌肽attacin基因编码区全长序列,并将其成功克隆至... 抗菌肽是昆虫抵御外界微生物侵染的主要物质。利用双酶切将pBI121载体上的植物启动子CaMV35S克隆到植物表达载体pCAMBIA2300上,构建重组表达载体pCAMBIA2300-CaMV35S。通过PCR扩增家蚕抗菌肽attacin基因编码区全长序列,并将其成功克隆至T载体上(Gen Bank登录号:GU244351),然后利用双酶切将attacin基因亚克隆到pCAMBIA2300-CaMV35S上,通过PCR鉴定,成功构建了attacin基因的植物表达载体pCAMBIA2300-Ca MV35S-attacin。为研究attacin基因在植物抗病性方面的应用奠定基础。 展开更多
关键词 家蚕 attacin基因 克隆 植物表达载体
下载PDF
用cDNA末端扩增法克隆柞蚕攻击素(attacin)基因及序列分析 被引量:5
14
作者 张波 王林美 +3 位作者 叶博 李树英 赵振军 范琦 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期333-339,共7页
利用cDNA末端扩增(RLM-RACE)方法,克隆了柞蚕攻击素(attac in)基因cDNA序列(GenBank登陆号:AY960680)。柞蚕攻击素基因cDNA序列全长912 bp,其中699 bp的蛋白质编码区可编码233个氨基酸。预测蛋白质分子量为25 kD,等电点(pI)为7.54。柞... 利用cDNA末端扩增(RLM-RACE)方法,克隆了柞蚕攻击素(attac in)基因cDNA序列(GenBank登陆号:AY960680)。柞蚕攻击素基因cDNA序列全长912 bp,其中699 bp的蛋白质编码区可编码233个氨基酸。预测蛋白质分子量为25 kD,等电点(pI)为7.54。柞蚕攻击素基因中包含2个内含子。S ignal P 3.0 Server程序分析结果显示,柞蚕攻击素第1-17位氨基酸为信号肽序列。蛋白质功能区分析预测,柞蚕攻击素在第47-112氨基酸之间为攻击素-N(attac in-N)功能区,第113-233位氨基酸之间为攻击素-C(attac in-C)功能区。以邻接法(ne igh-bor-join ing,NJ)建立了与其它昆虫攻击素的系统关系图。 展开更多
关键词 柞蚕 攻击素 末端扩增
下载PDF
小胸鳖甲Attacin基因结构与功能生物信息学分析 被引量:1
15
作者 李洁琼 李小万 《湖北农业科学》 2022年第24期170-176,共7页
为了解小胸鳖甲抗菌肽基因MpAtt1和MpAtt2的结构与功能,借助生物信息学相关软件,对2个基因所编码的氨基酸理化性质、信号肽、跨膜结构、蛋白质的二级结构,蛋白质翻译后修饰、功能结构域、蛋白质的三级结构及亚细胞定位、Attacin同源性... 为了解小胸鳖甲抗菌肽基因MpAtt1和MpAtt2的结构与功能,借助生物信息学相关软件,对2个基因所编码的氨基酸理化性质、信号肽、跨膜结构、蛋白质的二级结构,蛋白质翻译后修饰、功能结构域、蛋白质的三级结构及亚细胞定位、Attacin同源性进行生物信息学分析。MpAtt1和MpAtt2二级结构以无规则卷曲和β-折叠为主,存在大量的潜在磷酸化位点,三级结构具有高度保守性,具有Attacin_C结构域和Gloverin结构域,属于Attacin_C超家族。MpAtt1和MpAtt2蛋白为可溶性分泌蛋白,含有N-端信号肽。与鞘翅目光滑鳖甲抗菌肽Attacin1序列在氨基酸水平上具有84.77%的一致性。这表明MpAtt1和MpAtt2具有较好的抗菌活性,为该基因的功能鉴定提供理论基础,以期为研究昆虫小胸鳖甲的耐寒机制提供基因来源。 展开更多
关键词 小胸鳖甲 抗菌肽 attacin 结构 生物信息学分析
下载PDF
荒漠昆虫小胸鳖甲抗菌肽Attacin基因的克隆及低温表达模式分析 被引量:3
16
作者 李洁琼 陆雪莹 +1 位作者 刘小宁 马纪 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1381-1390,共10页
昆虫在低温冷驯化过程中会发生很多基因表达的改变, 从转录组层面上开展广泛的研究有助于全面认识昆虫对冷响应的分子机制。为了对荒漠昆虫小胸鳖甲Microdera punctipennis的 4℃低温转录组数据中一个上调表达的Attacin基因(MpAttacin... 昆虫在低温冷驯化过程中会发生很多基因表达的改变, 从转录组层面上开展广泛的研究有助于全面认识昆虫对冷响应的分子机制。为了对荒漠昆虫小胸鳖甲Microdera punctipennis的 4℃低温转录组数据中一个上调表达的Attacin基因(MpAttacin1)进行深入了解并分析其对低温诱导的响应情况, 本研究通过生物信息学分析对该基因进行了鉴定, 并利用实时荧光定量PCR对其在低温下的mRNA水平进行了检测。结果表明: 获得的MpAttacin1 cDNA长度为523 bp, 包含一个456 bp的开放阅读框和67 bp的5′端非翻译区。MpAttacin1编码含有151个氨基酸残基的多肽, N端含有17个氨基酸的信号肽序列。同源性分析表明, 其氨基酸序列与其他鳞翅目、 双翅目和鞘翅目昆虫的抗菌肽Attacin具有30%~40%的一致性。以邻接法(neighbor-joining, NJ)构建的系统进化树表明, 小胸鳖甲Attacin1与其他鞘翅目昆虫的Attacin起源于共同的祖先, 属于Attacin_C超家族。实时荧光定量PCR分析结果显示, 在4℃与-4℃低温胁迫时, MpAttacin1基因的转录都呈现先升高后降低的应激反应趋势, 但在对低温的响应时间和强度上有所不同。在4℃处理5 h和9 h后, MpAttacin1的表达量分别为对照组的2.3和3.8倍, 而在-4℃处理7 h和9 h后, 分别为对照组的2.4和1.5倍。这些研究表明, 除已知的抗菌功能外, Attacin在昆虫的低温适应过程中可能也发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 荒漠昆虫 小胸鳖甲 冷响应基因 攻击素 低温 抗菌肽 表达谱
下载PDF
T4溶菌酶基因和Attacin基因可增强转基因苹果对Erwinia amylovora的抗性
17
作者 KisungKo JohnL.Norelli 谢国禄 《国外作物育种》 2003年第4期41-42,共2页
关键词 T4溶菌酶基因 attacin基因 转基因苹果 ERWINIA-AMYLOVORA 抗性
下载PDF
抗菌肽attacin重组杆状病毒表达载体构建 被引量:6
18
作者 刘晖 王鑫 +2 位作者 蔡辉霞 曹建平 沈玉娟 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1871-1872,共2页
抗菌肽广泛存在于动、植物中,在生物体内发现的抗菌肽已超过2000种,昆虫抗菌肽已多达200多种,其中一些抗菌肽的基因、结构、生物学效应及作用机制已经阐明。抗菌肽抗菌谱广,对肿瘤细胞、病毒、真菌等均有杀伤作用,甚至对弓形虫等... 抗菌肽广泛存在于动、植物中,在生物体内发现的抗菌肽已超过2000种,昆虫抗菌肽已多达200多种,其中一些抗菌肽的基因、结构、生物学效应及作用机制已经阐明。抗菌肽抗菌谱广,对肿瘤细胞、病毒、真菌等均有杀伤作用,甚至对弓形虫等原虫也有抑制作用, 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 attacin 杆状病毒表达载体
原文传递
橘小实蝇抗菌肽全基因组鉴定和表达模式分析
19
作者 张小枫 苏禹 +3 位作者 董欣怡 刘月茹 周洪旭 范银君 《热带生物学报》 2024年第6期672-682,共11页
基于橘小实蝇染色体水平的基因组数据,运用生物信息学方法,深入分析橘小实蝇抗菌肽基因的组成、结构特征及它们在昆虫间的系统进化关系;使用荧光定量PCR技术,分析橘小实蝇抗菌肽基因在橘小实蝇4个不同发育阶段及成虫的6个部位的表达谱... 基于橘小实蝇染色体水平的基因组数据,运用生物信息学方法,深入分析橘小实蝇抗菌肽基因的组成、结构特征及它们在昆虫间的系统进化关系;使用荧光定量PCR技术,分析橘小实蝇抗菌肽基因在橘小实蝇4个不同发育阶段及成虫的6个部位的表达谱。研究结果表明,橘小实蝇基因组存在3大类共29个抗菌肽基因,包括12个cecropins,11个defensins,4个attacins和2个diptericins。基因组和蛋白结构表明橘小实蝇抗菌肽分子和结构具有显著的多样性,包括基因复制过程;表达谱分析表明,大多数抗菌肽在蛹期和成虫期表达水平较高,且在不同部位中,不同类型抗菌肽的表达特征差异较大;此外,除了在血淋巴中的广泛表达外,某些抗菌肽基因在头和体壁中也有特定表达。上述结果为进一步研究橘小实蝇抗菌肽的功能提供了数据库和信息。 展开更多
关键词 橘小实蝇 抗菌肽 cercropin DEFENSIN attacin diptericin 表达谱
下载PDF
家蝇幼虫抗菌肽Attacin基因的克隆表达及抑菌生物学活性(英文) 被引量:9
20
作者 徐建华 朱家勇 +1 位作者 金小宝 许琴英 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期20-26,共7页
目的克隆家蝇幼虫Attacin抗菌肽基因,构建原核融合表达载体,建立Attacin体内抗菌活性检测系统,优化表达和纯化Attacin目的蛋白,并初步研究其抗菌生物学功能。方法以pUCm-T/Attacin重组质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Attacin编码区序... 目的克隆家蝇幼虫Attacin抗菌肽基因,构建原核融合表达载体,建立Attacin体内抗菌活性检测系统,优化表达和纯化Attacin目的蛋白,并初步研究其抗菌生物学功能。方法以pUCm-T/Attacin重组质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Attacin编码区序列,分别克隆至原核表达载体pET30a(+)和pGEX-4T-1,构建原核重组质粒,转化大肠埃希菌,表达重组Attacin蛋白,并在大肠埃希菌中体内检测Attacin的抗菌活性。利用亲和层析柱纯化重组融合蛋白Attacin,SDS-PAGE进行纯度分析,琼脂糖平板抑菌试验鉴定其生物活性。结果pET30a(a+)/Attacin和pGEX-4T-1/Attacin重组质粒分别转化大肠埃希菌后,以IPTG诱导表达,与未诱导对照相比,含有重组质粒的宿主菌生长受到抑制,从pET30a(+)/Attacin重组质粒的表达宿主菌中未能获得His-Attacin融合蛋白,而从pGEX-4T-1/Attacin重组质粒转化菌种获得GST-Attacin融合蛋白。SDS-PAGE分析表明Attacin重组蛋白分子量与预期结果一致,琼脂糖平板抑菌试验显示重组Attacin具有抗菌活性。结论Attacin基因在原核系统中成功表达,并且纯化后具有抑菌活性,为下一步研究Attacin的生物学功能及其应用开发奠定了基础。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽attacin 基因克隆 生物信息学分析 原核表达
原文传递
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部