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血清lncRNA ATP1A1-AS1对胰腺癌的诊断价值及其对细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响
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作者 崔巍 周威 +1 位作者 刘智化 刘成栋 《空军军医大学学报》 CAS 2024年第5期567-571,共5页
目的探讨血清长链非编码RNA Na+/K+ATP酶A1亚基的反义RNA1(ATP1A1-AS1)对胰腺癌的诊断价值及其对胰腺癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响。方法选取2020年4月至2023年10月在安徽省宣城市人民医院就诊的65例胰腺癌患者为研究对象,并选... 目的探讨血清长链非编码RNA Na+/K+ATP酶A1亚基的反义RNA1(ATP1A1-AS1)对胰腺癌的诊断价值及其对胰腺癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响。方法选取2020年4月至2023年10月在安徽省宣城市人民医院就诊的65例胰腺癌患者为研究对象,并选取同时期60例健康体检者作为对照,qRT-PCR检测两组患者血清中ATP1A1-AS1表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ATP1A1-AS1对胰腺癌的诊断价值。体外培养胰腺癌细胞PANC-1,通过转染ATP1A1-AS1过表达载体上调PANC-1细胞中ATP1A1-AS1表达,MTT检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞增殖的影响,流式细胞术检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞凋亡的影响,Western blotting检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞增殖抗原Ki-67、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤2相关蛋白(Bax)蛋白表达的影响,端粒酶重复序列扩增法检测上调ATP1A1-AS1表达对PANC-1细胞端粒酶活性的影响。结果与对照组比较,胰腺癌患者血清中ATP1A1-AS1的表达水平显著降低(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清ATP1A1-AS1诊断胰腺癌的灵敏度为83.08%,特异度为86.67%,ROC曲线下面积为0.900。ATP1A1-AS1表达上调,PANC-1细胞增殖能力、端粒酶活性及细胞CyclinD1、Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论ATP1A1-AS1在胰腺癌患者血清中呈低表达,可能是胰腺癌诊断的潜在生物学标志物。上调ATP1A1-AS1表达可抑制胰腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,这可能与调控CyclinD1、Ki-67、Bcl-2和Bax蛋白表达及抑制细胞端粒酶活性有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 atp1A1-AS1 细胞增殖 细胞凋亡 端粒酶活性
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基于ATP-EMTP的海上风电送出海缆工频过电压仿真分析
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作者 何发武 邓婧 卢赓 《电工电气》 2024年第6期35-39,共5页
海底长电缆线路的充电电容较高,在不同的运行工况下会产生较严重的过电压,而在高抗退出运行情况下,陆上架空送出线路故障产生的过电压会传送至海底电缆。结合工程实际,基于ATPEMTP软件对某海上风电场220 kV送出海缆及架空线路进行建模,... 海底长电缆线路的充电电容较高,在不同的运行工况下会产生较严重的过电压,而在高抗退出运行情况下,陆上架空送出线路故障产生的过电压会传送至海底电缆。结合工程实际,基于ATPEMTP软件对某海上风电场220 kV送出海缆及架空线路进行建模,对不同运行工况下送出海缆工频过电压、送出架空线路短路故障及断线故障时的海缆工频过电压进行仿真计算,结果表明,合理的高抗配置方案可有效降低海上风电送出海缆的工频过电压水平。 展开更多
关键词 海底电缆 工频过电压 海上风电 atp-EMTP软件
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ATP1B3在神经胶质瘤中表达及其对细胞增殖和迁移的影响
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作者 严其康 扈清云 +2 位作者 孙权 王彩霞 朱金玲 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第6期435-441,共7页
目的:探讨ATP1B3在神经胶质瘤细胞(U87MG)中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响。方法:利用在线数据库CGGA及TCGA分析ATP1B3在不同级别神经胶质瘤细胞中差异表达,及其与患者生存、预后的关系;利用siRNA干扰技术瞬时敲减神经胶质瘤细胞系U... 目的:探讨ATP1B3在神经胶质瘤细胞(U87MG)中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响。方法:利用在线数据库CGGA及TCGA分析ATP1B3在不同级别神经胶质瘤细胞中差异表达,及其与患者生存、预后的关系;利用siRNA干扰技术瞬时敲减神经胶质瘤细胞系U87MG中ATP1B3的表达水平,通过RT-qPCR和western blot方法检测敲减效率;用CCK-8、transwell实验检测敲减ATP1B3后神经胶质瘤细胞增殖及迁移能力变化;western blot实验检测敲减ATP1B3后P-MTOR、MTOR蛋白的表达变化。结果:数据库分析表明ATP1B3的表达量与恶神经胶质瘤恶性程度成正相关,且与患者的预后生存成负相关。敲减ATP1B3后其mRNA和蛋白表达水平后明显降低,敲减组细胞增殖及迁移能力显著低于对照组(P<0.01);敲减ATP1B3影响P-MTOR的表达水平,P-MTOR/MTOR比值降低。结论:ATP1B3高表达与胶质瘤恶性程度相关且不利于患者的生存预后。在神经胶质瘤细胞内ATP1B3可调控MTOR细胞增殖生长信号通路,敲减ATP1B3基因能有效抑制神经胶质瘤细胞的增殖和迁移,因此ATP1B3基因可能是一个潜在神经肿瘤标志物和治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 atp1B3 细胞增殖 细胞迁移
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ATP5J通过TOMM20调节线粒体功能并促进人肝细胞癌细胞转移
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作者 冷君志 王根旺 +3 位作者 刘迪 柳科军 王琦 惠永峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期431-437,共7页
目的:探讨ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6(ATP5J)通过调节肝癌细胞线粒体功能介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移的作用及其机制。方法:培养人肝细胞癌Li-7细胞株,基因修饰ATP5J表达(过表达和敲减)。使用JC-1染色检测每组细胞线粒... 目的:探讨ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F6(ATP5J)通过调节肝癌细胞线粒体功能介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移的作用及其机制。方法:培养人肝细胞癌Li-7细胞株,基因修饰ATP5J表达(过表达和敲减)。使用JC-1染色检测每组细胞线粒体膜电位情况;利用DCFH-DA荧光探针检测Li-7细胞的活性氧(ROS)含量;线粒体ATP荧光探针检测线粒体功能;微丝绿色荧光探针(Actin-Tracker Green-488)检测细胞骨架重塑情况;Transwell检测细胞侵袭能力;Western blot检测ATP5J和线粒体外膜转位酶20(TOMM20)的表达水平。结果:过表达ATP5J可上调线粒体膜电位水平和线粒体ATP荧光强度、诱导细胞骨架重塑、促进细胞侵袭和TOMM20蛋白表达,抑制ROS生成(P<0.01)。相反,敲减ATP5J显著降低线粒体膜电位和线粒体ATP荧光强度,显著降低细胞侵袭能力和TOMM20表达,促进ROS产生,阻断细胞骨架重塑(P<0.01)。结论:ATP5J可调节肝癌细胞线粒体能量转化,其通过TOMM20调节线粒体膜电位水平和线粒体ATP产生介导细胞骨架重塑影响肝癌细胞转移。 展开更多
关键词 肝细胞癌 线粒体功能 atp5J蛋白 细胞骨架
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质膜ATP酶作为新型杀真菌剂靶标的发现与应用
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作者 武洛宇 侯毅平 周明国 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期278-289,共12页
质膜H+-三磷酸腺苷酶(plasma membrane H+-ATPase,PMA),简称质膜ATP酶,属于质子泵家族蛋白,广泛存在于植物和真菌的质膜上;它们的主要作用是维持细胞营养摄取所需的跨膜电化学质子梯度和调控pH值。质膜ATP酶是真菌生命活动所必须的,该... 质膜H+-三磷酸腺苷酶(plasma membrane H+-ATPase,PMA),简称质膜ATP酶,属于质子泵家族蛋白,广泛存在于植物和真菌的质膜上;它们的主要作用是维持细胞营养摄取所需的跨膜电化学质子梯度和调控pH值。质膜ATP酶是真菌生命活动所必须的,该酶缺失后,突变体的生长出现明显缺陷甚至无法生长,这使其具有作为杀真菌剂靶标的潜力;另外,由于真菌和植物的质膜ATP酶同源性较低,故以质膜ATP酶为靶标开发的杀真菌剂具有生物安全性。最近明确的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae和粗糙脉孢霉Neurospora crassa质膜ATP酶的冷冻电镜结构揭示了其六聚体的状态,阐明了质膜ATP酶的作用机制,为基于结构的药物设计提供了理论基础。本文主要对真菌中质膜ATP酶的结构和功能进行系统阐述,并对质膜ATP酶作为新型杀真菌剂靶标的研究现状进行综述,旨在为新型杀真菌剂的发现和应用提供理论依据。 展开更多
关键词 质膜atp 杀菌剂靶标 抑制剂
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稳定表达ATP5a细胞系的建立
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作者 闫浩鑫 李明蔚 +2 位作者 吴洋 郭龙军 冯力 《畜牧兽医科技信息》 2024年第1期71-74,共4页
目的:通过慢病毒表达系统构建稳定表达ATP5a蛋白的猪回肠上皮细胞IPI-2I细胞系,筛选获得过表达ATP5a的稳定细胞株,为研究ATP5a介导的生物学功能在病毒复制中的作用提供细胞模型。方法:提取HEK 293细胞的cDNA为模版,通过PCR扩增将ATP5a... 目的:通过慢病毒表达系统构建稳定表达ATP5a蛋白的猪回肠上皮细胞IPI-2I细胞系,筛选获得过表达ATP5a的稳定细胞株,为研究ATP5a介导的生物学功能在病毒复制中的作用提供细胞模型。方法:提取HEK 293细胞的cDNA为模版,通过PCR扩增将ATP5a基因克隆入慢病毒载体中,获得重组质粒p LVX-ATP5a-IRES-Zs GReen1,利用慢病毒包装系统将重组质粒与辅助质粒PSPAI2、PMG 2.0按照3:2:1共转染293T细胞,48 h后收集细胞上清获得稳定表达ATP5a蛋白的慢病毒颗粒,将重组慢病毒颗粒感染IPI-2I细胞,利用流式筛选技术获得阳性细胞,通过Western Blotting验证ATP5a的表达。结果:成功构建ATP5a过表达慢病毒载体,并通过倒置荧光显微镜观察显示获得纯度高于90%的稳定表达细胞株,Western Blotting结果显示ATP5a蛋白可在细胞系中稳定表达。结论:本研究成功建立了稳定表达ATP5a蛋白IPI-2I稳定表达细胞系,为ATP5a蛋白生物学特性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 atp5a 细胞系 稳定表达 IPI-2I
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发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数ATP检测方法的开发与应用
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作者 王慧 魏丽铭 +2 位作者 刘超 喻东威 逯刚 《食品安全导刊》 2024年第1期62-66,共5页
乳酸菌活菌数作为发酵乳和乳酸菌饮料的产品质量属性,同时作为国家风险抽检项目,目前的检测方法存在操作烦琐、检测周期长、结果滞后等缺点,无法满足企业产品卖点宣称及质量控制,故针对发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数的快速检测方法进行... 乳酸菌活菌数作为发酵乳和乳酸菌饮料的产品质量属性,同时作为国家风险抽检项目,目前的检测方法存在操作烦琐、检测周期长、结果滞后等缺点,无法满足企业产品卖点宣称及质量控制,故针对发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数的快速检测方法进行开发、研究,旨在提高检测结果准确性、稳定性及缩短检测周期。每种微生物中的腺嘌呤核苷三磷酸(Adenosine Triphosphate,ATP)含量都是基本恒定的,而ATP的相对发光单位(Relative Luminescence Unit,RLU)与ATP含量呈线性关系,通过建立产品中乳酸菌数量与ATP的RLU(相对发光单位)的相关关系开发乳酸菌快速检测方法。通过试验证实该方法与国家标准检测方法具有一致性,能够快速、准确地检测产品中乳酸菌数活菌数,为生产销售流通中的质量监测提供一种快捷方便的方法。 展开更多
关键词 乳酸菌总数 腺嘌呤核苷三磷酸(atp) 发酵乳 发酵乳饮料 快速检测
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蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线虫活性研究
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作者 孙玉凤 谈家金 +2 位作者 袁裕超 赵晓佳 叶建仁 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期84-90,共7页
【目的】阐明蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线分子机制,构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。【方法】克隆杀线蛋白酶编码基因atpA与clpX,利用基因工程手段对杀线蛋白酶编码基因进行PCR扩增,并与载体pET-21b... 【目的】阐明蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线分子机制,构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。【方法】克隆杀线蛋白酶编码基因atpA与clpX,利用基因工程手段对杀线蛋白酶编码基因进行PCR扩增,并与载体pET-21b连接构建重组载体,提取重组质粒转入蛋白表达载体大肠杆菌BL21(DE3)。利用菌落PCR和测序验证转化效果。加入IPTG诱导蛋白表达,使用Ni-NTA柱进行重组蛋白的纯化,利用SDS-PAGE与Western blot验证ATP-α与ClpX纯化效果并进行杀线活性测定。【结果】菌落PCR验证和测序表明,重组载体中含有蛋白酶编码基因atpA与clpX,且基因序列与参考序列一致,证明目的基因已经成功插入BL21(DE3)表达载体中。SDSPAGE与Western blot验证表明,重组蛋白得到正确诱导与纯化,成功构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。杀线活性测定结果表明ATP-α与ClpX均具有较强的杀线效果。ATP-α在72 h达到66.75%的杀线率,ClpX在72 h达到75.46%的杀线率。同时,两个蛋白酶共同作用杀线能力显著增强,24 h便达到66.32%的杀线率,72 h杀线率达到91.01%。【结论】ATP-α与ClpX经原核表达及纯化后具有较高的杀线活性,且两者共同处理松材线虫,杀线效果更强,证明蛋白酶ATP-α与ClpX是重要的杀线因子,为设计和筛选杀线药物提供了新的线索和依据。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌NJSZ-13 松材线虫 atp ClpX 原核表达
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ATP法在生物处理工艺优化中的应用分析
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作者 范亚静 张丹凤 +3 位作者 张颖 安长伟 张俊 赵一玲 《辽宁科技学院学报》 2024年第2期1-4,共4页
活性污泥ATP(三磷酸腺苷)法具有操作快速、简单、灵敏的特点,可以及时反馈生物处理过程中微生物的活性状态。文章采用ATP检测法对细胞活性进行分析,确定活性污泥数量,并通过微生物镜检方式对生化系统状态进行观察,判断污水处理厂生物处... 活性污泥ATP(三磷酸腺苷)法具有操作快速、简单、灵敏的特点,可以及时反馈生物处理过程中微生物的活性状态。文章采用ATP检测法对细胞活性进行分析,确定活性污泥数量,并通过微生物镜检方式对生化系统状态进行观察,判断污水处理厂生物处理能力,同时考察活性污泥中溶解氧含量及系统搅拌程度对反硝化功能的影响情况。根据分析结果,将ATP指标列入污水处理厂日常检测,能有效定量分析污水处理厂活性污泥状态,也是判断运行工艺是否异常的有效手段。 展开更多
关键词 污水处理厂 生物处理 atp 工艺优化
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ATP诱导细胞死亡与骨质疏松调控
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作者 潘静 赵瑞 +6 位作者 杨钰婷 齐雅茜 刘志 王薇 张忠文 张浩令 宋志靖 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期703-707,731,共6页
骨质疏松症作为一种广泛存在的骨骼系统疾病,其发病机制至今尚未完全阐明。研究表明,ATP诱导的细胞死亡与成骨细胞、破骨细胞和骨髓间充质干细胞之间存在着密切的关系,其通过多个途径影响骨吸收、骨形成和骨代谢涉及骨组织的动态平衡和... 骨质疏松症作为一种广泛存在的骨骼系统疾病,其发病机制至今尚未完全阐明。研究表明,ATP诱导的细胞死亡与成骨细胞、破骨细胞和骨髓间充质干细胞之间存在着密切的关系,其通过多个途径影响骨吸收、骨形成和骨代谢涉及骨组织的动态平衡和骨质疏松症的发病机制,进而参与骨质疏松症的病理过程。本文综述了ATP诱导细胞死亡的分子机制,深入探讨了ATP在骨质疏松症中的作用机制,旨在为骨质疏松症提供新的研究靶点和诊疗思路。 展开更多
关键词 atp诱导细胞死亡 骨质疏松症 发病机制 治疗策略
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Electrochemical Study of the Corrosion Inhibitory Capacity of Calcined Attapulgite in Reinforced Concrete Medium
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作者 Malang Bodian Kinda Hannawi +3 位作者 Dame Keinde Modou Fall Aveline Darquennes Prince William Agbodjan 《Advances in Materials Physics and Chemistry》 CAS 2024年第5期76-94,共19页
The durability of reinforced concrete structures is greatly influenced by the corrosion of the reinforcement. In addition to air pollution related to the repair of corroded structures, chloride ions are the main facto... The durability of reinforced concrete structures is greatly influenced by the corrosion of the reinforcement. In addition to air pollution related to the repair of corroded structures, chloride ions are the main factors of corrosion of reinforced concrete structures. This study aims to valorize a clay inhibitor against reinforcement corrosion in reinforced concrete. This clay (Attapulgite) was incorporated into reinforced concretes at different percentages of substitution of calcined attapulgite (0%, 5% and 10%) to cement in the formulation. The corrosion inhibitory power of attapulgite is evaluated in reinforced concretes subjected to the action of chloride ions at different intervals in the NaCl solution (1 day, 21 days and 45 days) by electrochemical methods (zero current chronopotentiometry, polarization curves and electrochemical impedance spectroscopy). This study showed that in the presence of chloride ions, the composition based on 10% attapulgite has an appreciable inhibitory effect with an average inhibitory efficiency of 82%. 展开更多
关键词 attapulgite Electrochemical Methods INHIBITOR Reinforced Concrete
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ATP合成酶F1β亚基在肿瘤中的研究进展及作用机制
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作者 郭子杰 王小林 《癌症进展》 2024年第5期477-480,共4页
ATP合成酶F1β亚基(ATP5B)基因编码合成线粒体ATP合成酶F1单位上的β亚基,通过电子传递产生的质子梯度催化ADP合成ATP。ATP5B在乳腺癌、胃癌、肺癌和肝癌等多种恶性肿瘤中异常表达,与患者的预后密切相关。既往研究认为,ATP5B仅在线粒体... ATP合成酶F1β亚基(ATP5B)基因编码合成线粒体ATP合成酶F1单位上的β亚基,通过电子传递产生的质子梯度催化ADP合成ATP。ATP5B在乳腺癌、胃癌、肺癌和肝癌等多种恶性肿瘤中异常表达,与患者的预后密切相关。既往研究认为,ATP5B仅在线粒体内膜上表达,但有研究表明,ATP5B也可以在细胞膜上异位表达,并在肿瘤发生、发展中发挥关键作用,可能作为预后的生物标志物和治疗靶点,因此,探讨ATP5B在肿瘤中的作用机制有重要意义。本文就ATP5B在肿瘤发生发展中的研究进展及作用机制进行综述。 展开更多
关键词 atp合成酶F1β亚基 肿瘤 异位表达 增殖 迁移 侵袭
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脑缺血后N-乙基马来酰亚胺敏感因子ATP酶失活致神经元自噬流障碍的病理机制
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作者 雷倩 邓仪昊 何红云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1034-1042,共9页
缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程... 缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程呈连续状态则称为自噬流。研究发现,脑缺血可导致自噬体与溶酶体间发生融合障碍,从而引发自噬流损伤。细胞内膜融合由3种核心组分介导,即N-乙基马来酰亚胺敏感因子(N-ethylmaleimide sensitive factor,NSF)ATP酶、可溶性NSF黏附蛋白(soluble NSF attachment protein,SNAP)及可溶性NSF黏附蛋白受体(soluble NSF attachment protein receptors,SNAREs)。当SNAREs介导自噬体与溶酶体融合后以非活性的复合体形式存留于自噬溶酶体膜,须被NSF再激活为单体后方可发挥新一轮的膜融合介导作用,而NSF是唯一可再激活SNAREs的ATP酶。新近研究表明,脑缺血可显著抑制NSF ATP酶活性,导致其对SNAREs再激活减少,这可能是自噬体与溶酶体间发生融合障碍并导致神经元自噬流损伤的病理机制。本文就NSF ATP酶失活导致SNAREs互作失调、自噬体与溶酶体融合障碍,以及蛋白水解酶向溶酶体的转运不足引发神经元自噬流障碍的病理机制进行阐述,并针对NSF ATP酶失活改善神经元自噬流的方法进行探讨,为提高脑卒中治疗提供参考并指明深入研究方向。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 N-乙基马来酰亚胺敏感因子atp 自噬 神经元 自噬流障碍
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肝豆状核变性患者的临床表型和ATP7B基因变异分析
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作者 李晓娜 赵雪杰 +3 位作者 张璐 种丽莉 石大鹏 董海波 《黑龙江医药科学》 2024年第1期129-132,共4页
目的:分析我国北方部分地区肝豆状核变性(wilson disease,WD)患者的临床特征及ATP7B基因变异情况。方法:以2018年11月至2022年4月期间在河南大学附属郑州颐和医院确诊的50例WD患者为研究对象,提取患者外周血基因组DNA,采用PCR扩增后用Sa... 目的:分析我国北方部分地区肝豆状核变性(wilson disease,WD)患者的临床特征及ATP7B基因变异情况。方法:以2018年11月至2022年4月期间在河南大学附属郑州颐和医院确诊的50例WD患者为研究对象,提取患者外周血基因组DNA,采用PCR扩增后用Sanger法对患者ATP7B基因外显子/内含子连接区进行序列分析。结果:50例WD患者根据临床症状分为肝型14例、脑型28例和其他型8例。50例WD患者中ATP7B基因变异结果:纯合子3例,复合杂合子32例和单一杂合突变13例,三处杂合突变1例,四处杂合子突变1例。共检测到30种不同的ATP7B基因突变,突变频率比较高的为p.Arg778Leu,p.Pro992Leu,p.Ala874Val,p.Arg919Trp,p.Val1106Ile。结论:本研究发现肝型WD患者发病早期主要表现为转氨酶升高,血清铜蓝蛋白降低,且以幼儿为主。p.Arg778Leu和p.Pro992Leu为ATP7B基因常见的突变,共发现30种ATP7B基因突变,为WD的早期确诊、家系筛查及产前诊断提供科学依据。 展开更多
关键词 肝豆状核变性 atp7B基因 铜蓝蛋白 转氨酶 复合杂合子 基因突变
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ATP5B兔多克隆抗体制备与功能验证
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作者 王梦汝 黄帆 周芬 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第2期0089-0092,共4页
ATP5B是F1F0 ATP合酶F1部分的β亚基,在许多生物体中负责大部分的ATP合成。本研究利用从公司购买的pET-24a(K+)-ATP5B质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,在25℃最佳诱导温度条件下以 0.1 mmol/L 异丙基硫代半乳糖苷诱导表达重组蛋白。经S... ATP5B是F1F0 ATP合酶F1部分的β亚基,在许多生物体中负责大部分的ATP合成。本研究利用从公司购买的pET-24a(K+)-ATP5B质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,在25℃最佳诱导温度条件下以 0.1 mmol/L 异丙基硫代半乳糖苷诱导表达重组蛋白。经SDS-PAGE分析重组表达的融合蛋白,显示分子量约为27 kDa,与预期大小相符。将该重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得血清,采用间接ELISA测定其效价达1:243000。经 SDS-PAGE验证,此抗体纯度大于90%;利用人脐静脉内皮细胞膜蛋白为抗原,采用WB、ICC和FCM证实了此抗体的高度特异性。研究结果为深入分析ATP5B的结构和功能及进一步探讨ATP5B与肿瘤的相互作用提供了基础。 展开更多
关键词 atp5B 兔多克隆抗体 膜蛋白 特异性
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Drosophila models used to simulate human ATP1A1 gene mutations that cause Charcot-Marie-Tooth type 2 disease and refractory seizures
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作者 Yao Yuan Lingqi Yu +8 位作者 Xudong Zhuang Dongjing Wen Jin He Jingmei Hong Jiayu Xie Shengan Ling Xiaoyue Du Wenfeng Chen Xinrui Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第1期265-276,共12页
Certain amino acids changes in the human Na^(+)/K^(+)-ATPase pump,ATPase Na^(+)/K^(+)transporting subunit alpha 1(ATP1A1),cause Charcot-Marie-Tooth disease type 2(CMT2)disease and refractory seizures.To develop in viv... Certain amino acids changes in the human Na^(+)/K^(+)-ATPase pump,ATPase Na^(+)/K^(+)transporting subunit alpha 1(ATP1A1),cause Charcot-Marie-Tooth disease type 2(CMT2)disease and refractory seizures.To develop in vivo models to study the role of Na^(+)/K^(+)-ATPase in these diseases,we modified the Drosophila gene homolog,Atpα,to mimic the human ATP1A1 gene mutations that cause CMT2.Mutations located within the helical linker region of human ATP1A1(I592T,A597T,P600T,and D601F)were simultaneously introduced into endogenous Drosophila Atpαby CRISPR/Cas9-mediated genome editing,generating the Atpα^(TTTF)model.In addition,the same strategy was used to generate the corresponding single point mutations in flies(Atpα^(I571T),Atpα^(A576T),Atpα^(P579T),and Atpα^(D580F)).Moreover,a deletion mutation(Atpα^(mut))that causes premature termination of translation was generated as a positive control.Of these alleles,we found two that could be maintained as homozygotes(Atpα^(I571T)and Atpα^(P579T)).Three alleles(Atpα^(A576T),Atpα^(P579)and Atpα^(D580F))can form heterozygotes with the Atpαmut allele.We found that the Atpαallele carrying these CMT2-associated mutations showed differential phenotypes in Drosophila.Flies heterozygous for Atpα^(TTTF)mutations have motor performance defects,a reduced lifespan,seizures,and an abnormal neuronal morphology.These Drosophila models will provide a new platform for studying the function and regulation of the sodium-potassium pump. 展开更多
关键词 atp1A1 atpα bang-sensitive paralysis Charcot-Marie-Tooth disease type 2 CRISPR/Cas9 homology-directed repair Na^(+)/K^(+)-atpase point mutation seizures sodium pump
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胃癌组织中高表达ATP5A1与患者术后的不良预后和肿瘤细胞的糖代谢有关
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作者 杨晶晶 殷丽霞 +7 位作者 段婷 牛民主 何震东 陈心蕊 张小凤 李静 耿志军 左芦根 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期974-980,共7页
目的分析ATP5A1在胃癌中的表达及对患者预后的影响,并探讨其调控肿瘤细胞糖代谢的作用机制。方法回顾性分析2013年2月~2016年11月在我院行胃癌根治术的115例患者,检测ATP5A1在胃癌组织中的表达情况并以IOD值中位数为界,将样本分为ATP5A... 目的分析ATP5A1在胃癌中的表达及对患者预后的影响,并探讨其调控肿瘤细胞糖代谢的作用机制。方法回顾性分析2013年2月~2016年11月在我院行胃癌根治术的115例患者,检测ATP5A1在胃癌组织中的表达情况并以IOD值中位数为界,将样本分为ATP5A1高表达组(n=58)和ATP5A1低表达组(n=57),分析其对患者术后远期预后的影响;慢病毒转染技术调控胃癌细胞系(MGC803)中ATP5A1基因的表达,并探究其对胃癌细胞糖代谢的影响及可能的分子机制;将裸鼠随机分成对照组、ATP5A1过表达组和低表达组(3只/组)。收集对照组、敲低和过表达ATP5A1基因的胃癌细胞悬液,分别接种到对应组裸鼠背部皮下,构建裸鼠移植瘤模型分析ATP5A1对肿瘤生长和糖代谢的影响。结果ATP5A1在胃癌组织中高表达(P<0.05),并与外周血CEA、CA19-9,病理分级、T分期及N分期密切相关(P<0.05);而高表达组患者术后5年生存率低(P<0.001),且ATP5A1高表达是影响胃癌患者术后生存期的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线表明,ATP5A1高表达对患者预后具有预判价值(P<0.001)。过表达ATP5A1上调胃癌细胞对葡萄糖摄取和乳酸生成量以及糖代谢关键酶HK2、PFK1、LDHA的蛋白水平(P<0.05),而干扰ATP5A1则结果相反(P<0.05);在体实验表明,ATP5A1过表达增加胃癌细胞糖代谢(P<0.05),且促进肿瘤的生长(P<0.05)。高表达ATP5A1促进胃癌细胞中p-JNK和p-JUN的表达(P<0.05),且JNK抑制剂SP600125阻遏了过表达ATP5A1胃癌细胞糖代谢的促进作用(P<0.05)。结论胃癌组织中ATP5A1高表达并影响患者远期预后不良,且至少部分是通过JNK/JUN通路促进胃癌细胞的糖代谢。 展开更多
关键词 atp5A1 胃癌 糖代谢 预后 JNK/JUN通路
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腺苷负荷与ATP负荷评估冠状动脉微血管疾病中的不良反应分析
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作者 赵慧 李文豪 +5 位作者 程功 陈亮 梁宸源 王依阳 蒋红英 姜瑞嘉 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2024年第17期2109-2112,共4页
背景 冠状动脉微血管疾病(CMVD)的诊疗一直是非冠状动脉阻塞性缺血性心脏病的重点。腺苷注射液和ATP注射液是目前测定冠状动脉血流储备(CFR)评估CMVD的临床常用负荷药物,两者有所关联,但具有显著区别。ATP是腺苷的前体,其价格低廉且血... 背景 冠状动脉微血管疾病(CMVD)的诊疗一直是非冠状动脉阻塞性缺血性心脏病的重点。腺苷注射液和ATP注射液是目前测定冠状动脉血流储备(CFR)评估CMVD的临床常用负荷药物,两者有所关联,但具有显著区别。ATP是腺苷的前体,其价格低廉且血管扩张机制与腺苷类似,临床上常代替腺苷,但忽视了其潜在的不良反应。目的 比较腺苷负荷与ATP负荷在评估CMVD过程中的不良反应发生率。方法 选取2019年6月—2020年7月因典型心绞痛就诊于陕西省人民医院心内科行冠状动脉造影术/冠状动脉CT血管造影术(CTA)明确各支冠状动脉残余狭窄直径<50%的患者170例,依据随机数字表法分为腺苷组和ATP组,腺苷组88例,ATP组82例。腺苷组给予腺苷注射液负荷测定CFR,ATP组采用ATP负荷测定CFR,检测过程中记录患者的血压、心率、扫描时间及不良反应发生情况。结果 与腺苷组相比,ATP组患者胸闷[61.0%(50/82)和20.4%(18/88)]、头晕[72.0%(59/82)和31.8%(28/88)]、头痛[68.3%(56/82)和11.4%(10/88)]、胃肠道不适[13.4%(11/82)和4.5%(4/88)]、心悸[69.5%(57/82)和5.7%(5/88)]、气促[40.2%(33/82)和2.3%(2/88)]、大汗[28.0%(23/82)和3.4%(3/88)]、潮热[19.5%(16/82)和2.3%(2/88)]、颜面潮红[13.4%(11/82)和4.5%(4/88)]的发生率均较高(P<0.05);两组患者神经过敏、耳鸣、咽干、颈部不适的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 与ATP负荷相比,腺苷负荷测定CFR的不良反应发生率更低。 展开更多
关键词 冠状动脉疾病 腺苷负荷 三磷酸腺苷二钠负荷 冠状动脉血流储备分数 药物相关性副作用和不良反应
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肝细胞癌中HIF-1α依赖性的ATP2C1过表达指示不良预后
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作者 任德续 马少杰 +9 位作者 丁圆圆 王雅嵩 钱其兰 邱腾 陈泽锋 施雯 王伟玲 马金鸣 王秀军 吉敬 《江苏海洋大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第1期44-57,共14页
缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor, HIF)与肝细胞癌的发生发展相关。HIF-1α在包括肝细胞癌在内的多种癌症类型的发生发展中发挥着重要作用,但其在肝细胞癌中的靶基因尚未完全确定。为找到HIF-1α在肝癌中新的致癌靶点,通过整合HI... 缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor, HIF)与肝细胞癌的发生发展相关。HIF-1α在包括肝细胞癌在内的多种癌症类型的发生发展中发挥着重要作用,但其在肝细胞癌中的靶基因尚未完全确定。为找到HIF-1α在肝癌中新的致癌靶点,通过整合HIF-1α敲除的RNA-seq数据,HIF-1α的ChIP-Seq数据,HIF-1α在肝癌中的共表达基因,以及肝癌相关的GEO(Gene Expression Omnibus)数据集,寻找HIF-1α的潜在靶基因。通过分析TCGA(The Cancer Genome Atlas)肝癌数据库、GEO和HPA(Human Protein Atlas)数据集,研究HIF-1α与ATP2C1的相关性,ATP2C1在肝癌中的表达及预后。通过建立物理和化学(氯化钴)缺氧模型验证ATP2C1与低氧及HIF-1α的关系。通过GO(Gene Ontology),KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)和GSEA(Gene Set Enrichment Analysis)分析探索ATP2C1的生物学功能。通过设计体外实验证实ATP2C1对HCC的作用。利用STRING和BioGRID两个蛋白互作在线数据库获得ATP2C1的互作蛋白,并研究其在肝癌中的表达及相关性。通过整合及筛选数据,ATP2C1被鉴定为一个HIF-1α的潜在靶基因。ATP2C1与HIF-1α高度相关,在肝细胞癌中高表达,且伴随有不良预后。富集分析与体外实验的结果表明ATP2C1参与调控HCC细胞的增殖迁移。蛋白互作数据表明ATP2C1与TMEM165存在互作关系,生存分析表明TMEM1651高表达的肝癌患者预后较差。相关性分析的结果显示ATP2C1与肝癌中TMEM165和MMP2的表达高度相关,表明ATP2C1可能与TMEM165和MMP2存在互作关系,并参与了肝癌的进展过程。结果表明,ATP2C1是HIF-1α的靶基因和肝细胞癌的生物标志物,其敲低抑制了HCC的增殖和迁移。 展开更多
关键词 缺氧 HIF-1Α atp2C1 肝细胞癌 预后
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基于ATP-EMTP的高海拔地区某110 kV线路雷击故障分析
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作者 赵文华 李秋阳 +4 位作者 杨韬辉 蒋玲 马志青 马旭东 董生成 《青海电力》 2024年第1期57-62,共6页
某高海拔山区110 kV线路在经受大幅值雷电流侵入时发生三相短路故障,经现场勘查确认故障杆塔及环境状况,结合雷电监测系统中记录的雷电流幅值等故障监测数据以及历史运行数据,对雷击故障原因及线路防雷水平进行综合分析和评估。运用ATP... 某高海拔山区110 kV线路在经受大幅值雷电流侵入时发生三相短路故障,经现场勘查确认故障杆塔及环境状况,结合雷电监测系统中记录的雷电流幅值等故障监测数据以及历史运行数据,对雷击故障原因及线路防雷水平进行综合分析和评估。运用ATP—EMTP仿真软件构建故障杆塔模型,逐步调整雷电流幅值计算反击耐雷水平,结果表明此次故障为大幅值雷电流反击导致。最后分别对改善接地电阻、提高绝缘水平、增设避雷器等防雷措施效果进行仿真分析。并结合线路运行实况,选择合理的防治措施,从而提高线路的防雷水平。 展开更多
关键词 高海拔山区 输电线路 雷电反击 atp—EMTP
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