Simultaneous determination of geniposidic acid. chlorogenic acid and geniposide in eucommia by HPLC

A high performance liquid chromatography (HPLC) method was established for simultaneous determina-tion of geniposidic acid, chlorogenic acid and geniposide in eucommia. Detection at 240 nm with a reversed-phasecolumn, CH3OH volume fraction, acidic additive and pH value of mobile phase were studied for their effects on theseparability of the compounds. The most suitable separation was obtained with isocratic gradient elution systemusing CH3OH-H2O-H3 PO4 (12.00: 87.96: 0.04, volume ratio) at a flow-rate of 1.0 mL/min. Under the experi-mental conditions, the capacity factors of three compounds are in 3-13. The sample is separated rightly. Theanalysis time is 30 min and the retention time of genfposidic acid, chlorogenic acid and geniposide are 6. 7 min,10.5 min and 21 min, respectively.

HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^(-1)乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4~3.213、0.784 5~8.982、0.998~3.194、0.622 5~19.92、25.05~300.6、2.513~30.15和7.775~93.30μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸的含量范围分别为0.12~0.18、0.19~0.24、0.06~0.09、0.34~0.37、4.54~4.85、0.49~0.67和1.82~2.19 mg·m L^(-1)。15批样品测定结果较为接近。结论 该方法具有良好的灵敏度、准确性和重复性,可为清开灵口服液的质量控制和后续研究提供参考及数据支持。

热毒宁吸入粉雾剂的制备与质量标准研究

目的:建立热毒宁吸入粉雾剂的质量标准。方法:通过实验对热毒宁吸入粉雾剂进行制备工艺优化,采用高效液相色谱法(HPLC)测定热毒宁吸入粉雾剂中绿原酸、栀子苷和青蒿素的含量。运用激光粒度仪测定热毒宁吸入粉雾剂的粉末粒径分布,结合药典和相关法规的要求,制定热毒宁吸入粉雾剂的质量标准。结果:15 g金银花和12 g青蒿在3倍体积的水中提取6 h,可以获得最佳的挥发油提取量,在6倍水体积,pH=2.5的条件下,提取240 min可以获得最优的绿原酸和浸膏得率。在乙醇浓度为70%,提取时间180 min, 6倍加液条件下,获得最佳的栀子醇提物得率。在温度80℃、风速600 L/h,进药量3 mL/min的条件下进行喷雾干燥,发现乙醇含量为60%时为最优条件,其粒径分布在1~5μm的体积百分数为67.6%,且得粉率为71.2%。喷雾微粉在25℃条件下储存1个月和3个月,药物分别降解0.25%和2.13%,水分分别增加0.02%和0.05%,且在避光和正常光照条件下无明显变化。热毒宁喷吸入雾剂中绿原酸含量不低于5.0%、青蒿素含量不低于3.2%、栀子苷含量不低于6.8%。热毒宁喷吸入雾剂中总菌落数低于1 000 cfu/g,真菌和酵母低于100 cfu/g,未检出大肠杆菌。结论:该优化后工艺可靠,含量测定的精密度、准确性、重复性均符合方法学要求,可用于热毒宁吸入粉雾剂的生产和质量控制。

RP-HPLC法同时测定茵栀解毒颗粒中绿原酸和栀子苷的含量

建立RP-HPLC法同时测定茵栀解毒颗粒中绿原酸和栀子苷的含量。采用反相高效液相色谱法,色谱柱为C_(18)柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈‒甲醇‒0.1%磷酸(11∶8∶81),等度洗脱,检测波长为(235±1)nm,流速为1 mL/min。结果显示,绿原酸的线性范围为0.0943~0.7544μg,r=0.999999(n=5),平均回收率为99.25%(n=6);栀子苷线性范围为0.1971~1.5766μg,r=0.999999(n=5),平均回收率为99.56%(n=6)。该方法检测效率高、专属性强、重复性好,为茵栀解毒颗粒的质量评价提供了简便、准确、可靠的定量方法。

不同炒制温度对栀子中环烯醚萜苷类和西红花苷类成分的影响

目的建立HPLC法,比较栀子炒制过程中6种成分随炒制温度的含量变化规律。方法先用DCCZ3-4型电磁炒货机对江西新余、宜春、萍乡、丰城和湖南湘潭、长沙、衡阳七个不同产地栀子分别在上料温度160℃、200℃、250℃条件下,以10℃为一间隔作为炮制终点进行炮制,再采用HPLC法对炮制品中京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、京尼平苷酸、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ和藏红花酸6种成分进行含量测定。结果京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ含量分别平均下降了5.52 mg/g、45.63 mg/g、3.48 mg/g和0.42 mg/g。其中西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ在上料温度200℃、出料温度225℃时含量降至最低;京尼平苷酸和藏红花酸分别在上料温度250℃、出料温度280℃和上料温度200℃、出料温度225℃出现拐点,其含量先升后降。结论炒制温度对栀子中环烯醚萜苷类和西红花苷类成分含量均有较大影响,不同产区栀子炮制品中京尼平苷酸、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ、藏红花酸的含量差异较大,为建立栀子饮片炮制品质量标准提供可靠依据。

基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术的清利湿热颗粒入血成分分析

目的:阐明灌胃给予清利湿热颗粒后大鼠体内吸收入血的化学成分。方法:借助超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相体系,梯度洗脱,进样量为2μL,在正、负离子模式下对处理后的空白血清和给药后0.5、1、2、4 h不同时间点的血清进行质谱检测。结果:通过与Natural Products HR-MS/MS Spectral Library 1.0数据库对比、文献分析以及质谱裂解规律从血清样品中鉴定出15个原型成分。结论:本研究为清利湿热颗粒标志性成分的选择提供了依据,初步确定了该产品发挥药效的物质基础,也为进一步揭示清利湿热颗粒的作用机制奠定基础。

金匮肾气丸中马钱苷、京尼平苷酸、23-乙酰泽泻醇B和β-蜕皮甾酮含量测定方法的建立

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定金匮肾气丸中马钱苷、京尼平苷酸、23-乙酰泽泻醇B和β-蜕皮甾酮的含量。方法将金匮肾气丸样品研细、甲醇超声提取后,用Capcell Pak UG C_(18)色谱柱分离,柱温为28℃,京尼平苷酸、β-蜕皮甾酮、马钱苷和23-乙酰泽泻醇B检测波长分别设定为254、250、240、254 nm,进样体积为10μL,流速为1.0 mL·min^(-1),以乙腈为流动相A、3 mL·L^(-1)磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,外标法定量检测。结果京尼平苷酸、β-蜕皮甾酮、马钱苷和23-乙酰泽泻醇B质量浓度分别在0.0495~4.95、0.0981~9.81、0.0197~1.97、0.0983~9.83μg·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系;重复性RSD值(n=6)分别为1.62%、1.31%、1.76%、1.24%;平均加样回收率分别为100.05%、98.33%、99.97%、99.42%。结论该方法具有前处理简单、分析时间短、检测结果准确等优点,适用于金匮肾气丸的质量控制。

基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术分析清利湿热颗粒化学成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术初步鉴定经水提、浓缩、干燥、制粒后的清利湿热颗粒中的化学成分并确定其药味归属。方法:采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相体系,梯度洗脱,进样量为5μL,在正、负离子模式下对处理后的清利湿热颗粒进行质谱检测。结果:通过与Natural Products HR-MS/MS Spectral Library 1.0数据库对比、文献分析以及质谱裂解规律从清利湿热颗粒样品中鉴定出54个化合物。结论:本研究为清利湿热颗粒质量控制及确定该产品可能的药效物质基础提供了依据。

基于胆汁酸信号通路研究栀子苷治疗小鼠非酒精性脂肪性肝炎的效应机制

目的观察栀子苷对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠胆汁酸代谢及其信号通路的干预作用,探讨栀子苷治疗NASH的作用机制。方法高脂饮食喂养14周诱导NASH小鼠模型,实验设正常组、模型组、栀子苷组和奥贝胆酸组,从第11周开始,栀子苷组和奥贝胆酸组小鼠分别按90 mg·kg^(-1)·d^(-1)和10 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量灌胃给予栀子苷和奥贝胆酸,正常组和模型组小鼠灌胃给予等体积的饮用水。HE染色观察肝组织病理变化,生化试剂盒检测肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)含量和血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平,靶向代谢组学方法检测肠内胆汁酸谱,RT-PCR方法检测肝组织法尼醇X受体(Farnesoid X receptor,FXR)、小异二聚体伴侣(Small Heterodimer Partner,SHP)、固醇调节元件结合蛋白1(sterol-regulatory element binding protein 1,SREBP1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)、肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(carnitine Palmitoyltransferase 1A,CPT1A)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)、胆固醇7-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)、钠离子-牛磺胆酸共转运多肽(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)、成纤维细胞生长因子受体4(fibroblast growth factor receptor 4,FGFR4)和小肠FXR、成纤维细胞生长因子15(fibroblast growth factor 15,FGF15)的基因表达水平。结果栀子苷和奥贝胆酸均能显著改善NASH小鼠的肝组织病理变化,降低NASH小鼠肝组织TG含量及血清ALT、LDL-C、FINS、FBG水平(P<0.01)。栀子苷还能显著降低肠内容物TaMCA、TβMCA含量和肝组织SREBP1、FASN、SCD1、CYP7A1基因表达水平(P<0.01),显著升高肠内容物βCDCA的含量及小肠FXR、FGF15和肝组织FXR、SHP、BSEP、CPT1A、LPL的基因表达水平(P<0.05)。结论栀子苷能调节TaMCA、TβMCA、βCDCA等影响FXR活性的胆汁酸的表达,进而激活FXR信号通路,这可能是栀子苷治疗NASH的重要机制。

桃叶珊瑚苷-硼酸共聚印迹整体柱的制备及其分子识别性能

以桃叶珊瑚苷为模板,4-乙烯基苯基硼酸为功能单体,制备了桃叶珊瑚苷-硼酸共聚印迹整体柱。考察了分子印迹整体柱的通透性、选择保留性能、吸附及固相萃取性能。结果表明,整体柱通透性好,当使用体积比为49∶1的甲醇-1%HCl混合溶液为流动相时,其对模板具有最强的保留能力和较高的选择性,容量因子高达166.4,选择因子最高达3.200。前沿分析表明整体柱的饱和吸附量达95.16 mg·g^(-1)。Scatchard分析显示印迹材料主要有两类吸附位点。当分子印迹柱用于从杜仲籽粨粗提物中分离纯化桃叶珊瑚苷时,可获得含量高于85%的产品。当整体柱用于分离分析时,方法的检出限和定量限分别为0.167 mg·kg^(-1)和0.547 mg·kg^(-1),且整体柱可重复使用。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的舒肝宁注射液指纹图谱化学成分研究

目的对舒肝宁注射液两个指纹图谱化学成分进行化学成分研究,为其质量控制提供比较全面快速的评价方法。方法运用UPLC-Q-TOF-MS技术采集舒肝宁注射液指纹图谱,根据色谱峰保留时间、一级准分子离子数据和二级碎片离子数据,获得精确的相对分子量,结合文献信息进行分析,分析鉴定舒肝宁注射液中的化学成分。结果通过对舒肝宁注射液两个指纹图谱的分析,共鉴定出14个化学成分,包括有酚酸类4个(新绿原酸、去乙酰车叶草酸甲酯、绿原酸、隐绿原酸)、环烯醚萜类2个(京尼平龙胆双糖苷、栀子苷)、黄酮苷类3个(白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷千层纸素、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、黄芩苷)、核苷类4个(尿苷、腺苷、鸟苷、次黄嘌呤)、氨基酸类1个(亮氨酸)。结论UPLC-Q-TOF-MS技术可以快速、简便地对舒肝宁注射液中的化学成分定性分析,为下一步的舒肝宁注射液质量控制提供参考。

高效液相色谱法测定杜仲叶中4种成分含量

目的建立高效液相色谱法同时测定杜仲叶中绿原酸等4种活性成分含量的分析方法。方法样品经过70%甲醇水溶液50℃超声波提取30 min,采用高效液相色谱法,C_(18)色谱柱梯度洗脱分离,外标法定量。结果绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、异槲皮苷4种物质在各自的质量浓度范围内有良好的线性关系,回收率为95.03%~99.96%。结论通过重复性试验、待测液稳定性试验、加标回收试验和杜仲叶样品测定表明,该方法具有操作简单、重复性好、回收率高等优点。

HPLC法同时测定龙船花提取物中京尼平苷酸、绿原酸、山奈酚和异鼠李素的含量

建立了同时测定龙船花提取物中京尼平苷酸、绿原酸、山奈酚和异鼠李素的HPLC法。采用HPLC法,0.15%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱;检测波长:260 nm,流速:1 mL·min^(-1);柱温35℃。京尼平苷酸、绿原酸、山奈酚和异鼠李素分别在2.24~89.6 mg·L^(-1)、5.9225~236.9 mg·L^(-1)、3.485~139.4 mg·L^(-1)和4.445~177.8 mg·L^(-1)范围内线性关系良好。龙船花提取物中京尼平苷酸、绿原酸、山奈酚和异鼠李素的含量分别为1.987 mg·g^(-1)、6.048 mg·g^(-1)、3.647 mg·g^(-1)和4.442 mg·g^(-1)。该方法简便、准确,重现性好,可用于龙船花提取物的质量控制与评价。

HPLC-MS/MS检测杜仲中绿原酸等4种活性成分的分析方法

杜仲作为一种传统的中药材,其活性成分主要包括绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸等。本研究建立了一种HPLC-MS/MS（高效液相色谱质谱联用仪）检测的方法,可同时检测杜仲中桃叶珊瑚苷、京尼平苷、京尼平苷酸和绿原酸的含量。建立的色谱条件：色谱柱XD-C18,流动相为0.1%甲酸水溶液和甲醇,流速0.15 mL/min,柱温30℃。质谱条件：ESI离子源作为裂解源,裂解温度280℃,源内电压4 kV,鞘气辅助气为氮气,流速30 psi,雾化气为氦气,流速10 psi。结果表明：4种目标化合物的色谱峰分离情况良好,质谱鉴定为目标物;绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸标准曲线的相关性系数分别为0.993 5、0.994 2、0.996 9、0.994 8;最低检测限的范围是7.603-8.853 pmol;加样回收率范围是91.838%-108.326%。测定得到杜仲叶中桃叶珊瑚苷的含量为（20.552±4.032）ng/mg干质量,京尼平苷酸含量为（6.913±0.654）ng/mg干质量,绿原酸含量为（25.986±3.412）ng/mg干质量,京尼平苷含量为（0.205±0.015）ng/mg干质量。利用该方法在7种植物组织中进行方法验证,测定得到4种目标化合物的含量,表明本方法有效且适用性广。

UPLC同时测定杜仲中6种有效成分的含量

建立UPLC同时测定杜仲药材中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷的分析方法。以Waters BET C18（2.1×150 mm,1.7μm）为色谱柱,0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为205 nm,流速0.25 m L/min,柱温45℃。在该色谱条件下,杜仲中的六种有效成分能得到较好的分离,方法的加样回收率为96.92%~101.01%,RSD〈3%。39批杜仲药材中六个被测成分的总含量0.4406%~4.2282%,差异较大。该方法简便、准确,重复性好,可用于杜仲中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷的含量测定,为杜仲的质量控制研究提供依据。

杜仲雄花中次生代谢物合成积累的动态变化

对杜仲(Eucomm ia ulm oidesO liv.)雄株不同花期雄花中次生代谢产物含量进行分析测定,并对杜仲雄花次生代谢的生理基础及不同花期次生代谢产物含量差异进行了探讨。研究结果表明,雄花在不同花期次生代谢产物含量均有差异。总黄酮含量在花蕾期最高(4.010%),始花期最低(2.422%),从盛花期到末花期逐渐上升;桃叶珊瑚苷和绿原酸含量均在花蕾期最高(分别为2.351%和1.075%),盛花期最低(分别为1.463%和0.503%),至末花期含量上升;京尼平苷酸含量在始花期最低(0.217%),从盛花期开始逐渐升高,至末花期高达1.403%;次生代谢产物总量也以花蕾期为最高(7.420%)。杜仲雄花的花蕾期和盛花期是兼顾质量和产量的最佳采摘期。

HPLC法同时测定杜仲叶中8种成分的含量

目的:建立同时测定杜仲叶中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、车叶草苷、芦丁、异槲皮苷和紫云英苷等8种成分的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm(桃叶珊瑚苷、儿茶素)、239 nm(京尼平苷酸、车叶草苷)、220 nm(绿原酸)、354 nm(芦丁、异槲皮苷)、266 nm(紫云英苷),进样量为5μL。结果:桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、车叶草苷、芦丁、异槲皮苷和紫云英苷的线性范围分别为0.812~6.090μg(r=0.9993)、0.438~3.285μg(r=0.9992)、0.045~0.336μg(r=0.9992)、0.882~6.615μg(r=0.9993)、0.097~0.726μg(r=0.9991)、0.064~0.483μg(r=0.9993)、0.048~0.360μg(r=0.9991)、0.014~0.108μg(r=0.9997);精密度、重复性和稳定性试验的RSD均小于3.5%(n=6);平均加样回收率分别为101.60%、103.06%、99.77%、96.93%、98.17%、96.75%、98.97%、99.60%,RSD分别为1.42%、2.65%、2.78%、2.05%、2.26%、0.93%、2.79%、3.08%(n=6)。不同采集时间、不同种植品种的12批杜仲叶样品中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、车叶草苷、芦丁、异槲皮苷和紫云英苷的含量范围分别为10.903~17.245、5.578~7.892、0.198~0.440、13.890~19.782、1.008~1.547、1.102~2.396、0.267~0.701、0.150~0.412 mg/g,含量波动较大;杜仲皮样品中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、芦丁、松脂醇二葡萄糖苷的含量分别为0.299、0.123、0.580、0.112、0.026、1.961 mg/g。结论:本方法操作简便、重复性好、准确度高,可用于评价杜仲叶的质量;不同采集时间、不同种植品种的杜仲的不同药用部位(皮、叶)中的成分组成及含量存在明显的差异。

大孔吸附树脂一次性分离杜仲叶中杜仲总苷和杜仲黄酮的研究

本文就9种大孔树脂吸附分离杜仲总苷和杜仲黄酮的工艺进行了研究,结果表明:一次性分离杜仲总苷(富含绿原酸、桃叶珊瑚苷等活性物质)和杜仲黄酮的适宜的大孔树脂为XDA-1和X-5。适宜的吸附解吸条件分别为:上柱液pH 6,吸附时间应大于10 h;XDA-1树脂用40%乙醇洗脱杜仲总苷,用80%的乙醇洗脱黄酮;X-5树脂用30%的乙醇洗脱杜仲总苷,用70%的乙醇洗脱黄酮。两种树脂的分离效果分别为:XDA-1分离杜仲总苷(其中绿原酸含量为14.23%,桃叶珊瑚苷含量为7.69%)粗品得率为8.01%,杜仲总黄酮粗品得率为4.76%,含量为15.82%;X-5分离杜仲总苷(其中绿原酸含量为15.39%,桃叶珊瑚苷含量为9.07%)粗品得率为7.35%,杜仲总黄酮粗品得率为5.11%,含量为16.15%。

多波长高效液相色谱法测定清开灵注射液中3种有效成分

目的:测定清开灵注射液中的3种有效成分,黄芩苷、栀子苷和绿原酸的含量。方法:紫外-三波长同时检测的高效液相色谱法:色谱柱为Kromasil C18分析柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为(A)0.3%甲酸水溶液、(B)甲醇;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min-1。检测波长为240 nm(栀子苷)、280 nm(黄芩苷)、330nm(绿原酸);线性梯度洗脱:(B:30%→60%)/(0→25 min)保持10min(B:60%→100%)/(35→40 min) 保持5 min。结果:建立了对清开灵注射液中3个成分进行定量的测定方法,并将此方法用于10批清开灵注射液的各成分测定。结论:为中药注射液提供了更简便、合理、可靠的质控方法。

杜仲叶次生代谢物季节和地域差异性研究

研究了杜仲叶中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷等次生代谢物季节、地域差异性。采用反相高效液相色谱法分析杜仲叶中这3种主要次生代谢物。结果表明,京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷6月份含量最高,分别达到0.562%、2.258%和0.571%。另外,杜仲叶中次生代谢物含量地域差异性显著,即对于同一年龄、同一杜仲品种而言,气候条件较差地区(年平均气温6.8~8.8℃、绝对最低湿度-29.6%^-22.6%、年降雨量576.7~1048 mm)杜仲叶次生代谢物含量高。由此得出,气候条件影响杜仲叶中次生代谢物的合成积累,而6月份为杜仲叶的最佳采收期。