细胞学检查DNA定量分析与细胞块石蜡切片在胸腹水病理诊断中的价值对比

目的 探讨临床鉴别诊断胸腹水良恶性分别采取细胞学检查、DNA定量分析、细胞块石蜡切片技术的诊断价值。方法 选择2022年1月-2022年6月我院接诊治疗的胸腹水患者171例作为研究对象,分别对其进行细胞学检查、DNA定量分析、细胞块石蜡切片诊断,将病理诊断结果作为金标准,计算三种诊断技术鉴别诊断胸腹水良恶性的灵敏度、特异度与准确率,比较三种技术联合诊断与单一技术诊断的灵敏度、特异度、准确率统计学差异。结果 病理诊断显示,在171例胸腹水患者中,83例患者为良性胸腹水,占比48.54%,88例患者为恶性胸腹水,占比51.46%。计算结果显示,三项技术联合诊断灵敏度、特异度、准确率均高于单一诊断(P<0.05)。结论 临床鉴别诊断胸腹水疾病可选择细胞学检查、DNA定量分析、细胞块石蜡切片三种技术联合方案,可有效提高准确率,为临床提供数据支持,提倡运用推广。

应用自动化工作站提取常见生物样本DNA

目的建立使用自动化工作站提取法医案件生物样本DNA的方法。方法选用Biomek 3000自动化工作站,采用DNA IQTM系统及Chelex法对法医案件中常见生物样本进行DNA提取,荧光定量技术进行定量,PCR扩增16个STR基因座并与手工提取方法比较。结果与手工提取方法进行比较,选用自动化工作站结合使用DNAIQTM系统及Chelex法提取DNA可获得满意的STR检验结果。结论自动化工作站可用于法医案件中常见生物样本的DNA提取。

自动尿液细胞DNA定量分析对泌尿系统炎症与膀胱癌的鉴别诊断价值

目的:评估尿液细胞DNA定量分析在泌尿系统肿瘤诊断中的应用价值。方法:采集92例泌尿系统炎症和39例疑似膀胱癌患者的尿液分别进行DNA定量测定、常规细胞学检验和尿液液基细胞学检查,以病理诊断为金标准,评估3种方法对泌尿系统炎症与膀胱癌的鉴别诊断价值,分析尿液细胞DNA定量与肿瘤分型的关联。结果:尿液DNA倍体分析对膀胱癌诊断的敏感性和特异性分别为88.89%和97.09%,诊断符合率为94.66%。传统尿液细胞学检验的敏感性和特异性分别为51.85%和100%,准确性为90.07%。尿液液基细胞学检查对膀胱癌诊断的敏感性和特异性分别为81.48%和99.04%,诊断符合率为95.41%。尿液DNA倍体分析结果>5C细胞的个数与尿路上皮癌分型存在关联,高级别尿路上皮癌组异倍体(>5C)细胞数量较低级别组显著增高。结论:尿液DNA定量分析能够较好地鉴别泌尿系统炎症与膀胱癌,较传统细胞学检验有更好的提示作用。

维生素K_(3)对人大肠癌细胞核DNA指数(倍体)的计算机图像分析

本文应用光镜,计算机与显微图像形态定量分析软件相结合的方法,观察到人大肠癌培养细胞经Vit K_3不同剂量(2.5、5、10和20μg/ml)作用后,细胞核DNA指数(DI)明显下降。从DI(倍体)分布直方图中,观察到Vit K_3使癌细胞的DNA主峰由DI=3转向1.5,核的倍体由高异倍体向低异倍体转化〔1〕,表明Vit K_3的抗肿瘤作用与抑制DNA合成和减轻肿瘤恶性度有关。本文提供了一种快速、简便、高精度定量测定DNA含量(IOD)的先进方法和手段。可望对肿瘤诊断、预后估计有一定的参考意义,亦可用于对细胞倍体性改变与肿瘤恶性度关系的分析。

基于光谱成像技术的宫颈癌TBS与细胞DNA定量分析联合筛查方法研究

传统的宫颈癌筛查方法主要有TBS分类筛查法和基于细胞DNA的定量分析筛查法,TBS分类筛查法诊断率高但需要经验丰富的医生参与且敏感度低,难以实现宫颈癌早期筛查;基于细胞DNA的定量分析筛查法仅染色细胞核,实现了定量化与自动化分析,敏感度高但特异性差。因此实现宫颈癌TBS与DNA定量分析联合筛查十分必要,但目前TBS与DNA定量分析联合筛查方法均是使用两张不同的细胞涂片分别进行,费时费力费材极为不便,国内外还没有在一张宫颈细胞涂片上联合使用这两种方法的宫颈癌筛查方法。为此提出了一种在一张细胞涂片上同时使用TBS分类法和细胞DNA定量分析法的宫颈癌筛查方法:在同一张细胞涂片上对细胞进行巴氏染色和Feulgen染色,为解决多重染色带来的DNA物质的吸光度干扰问题,建立一套多光谱成像系统,并提出基于线性多元回归的DNA吸光度剥离模型,通过该模型解算出DNA物质的真实吸光度从而实现DNA物质的定量分析;选取接近RGB波长的3个波段细胞图像合成伪彩色图像进行TBS分类筛查。实现了一张细胞涂片上的宫颈癌TBS与DNA定量分析联合筛查,DNA定量分析模型稳定度高、误差小,诊断率高,用于TBS筛查的伪彩色图像颜色明亮、细胞核清晰可见、细胞质边缘明确,该方法在宫颈癌的诊断和筛查中具有很强的实用性。

结直肠癌中EpCAM的表达及与DNA倍体改变的关系

目的探讨结直肠癌细胞中EpCAM(CD326)表达的临床病理学意义及与DNA倍体改变的关系。方法应用流式细胞直接免疫荧光法检测55例结直肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中EpCAM的表达,用阳性率(percentage of positive cells,PPC)、平均荧光强度(mean fluorescence index,MFI)表示;应用细胞周期分析仪对结直肠癌细胞进行细胞周期分析。用细胞定量术分析EpCAM表达和DNA倍体改变的相关性及其在结直肠癌早期诊断、预后中的价值。结果 55例结直肠癌组织中EpCAM蛋白的PPC为(83.48±7.07)%,明显高于癌旁正常黏膜组织(43.56±5.29)%(t=39.22,P<0.001)。55例结直肠癌组织中EpCAM蛋白MFI值为28.90(19.60~45.89),明显高于癌旁正常黏膜组织的4.89(3.79~6.28)(Z=-6.45,P<0.001)。癌组织:浸润型+溃疡型vs肿块型(包括浸润型vs溃疡型),中+低分化vs高分化(包括低分化vs中分化),Dukes分期C+D vs A+B,p TNM分期Ⅲ+ⅣvsⅠ+Ⅱ,浸润深度pT3+T4 vs pT1+T2,淋巴结转移pN1 vs pN0,差异均有统计学意义,即生物学行为越差,EpCAM蛋白表达MFI值与PPC越高,而与患者年龄、性别无关。DNA含量分析结果显示:55例结直肠癌中39例(70.90%)为多倍体,DNA指数(DNA index,DI)和DNA倍体与肿瘤分化程度、Dukes分期相关,与淋巴结转移无关。同时,在EpCAM阳性病例中,DI随着EpCAM表达增强而升高(r=0.668,P=0.000);而增殖指标S期细胞比率(S-phase fraction,SPF)和增殖指数(proliferation index,PI)也随着EpCAM表达增强而升高(r_1=0.664,P_1=0.000;r_2=0.651,P_2=0.000)。结论EpCAM在结直肠癌中的表达明显上调,与肿瘤细胞侵袭转移、增殖密切相关,同时检测EpCAM表达和DNA含量分析能为结直肠癌早期诊断和预后判断提供参考依据。

子宫腔脱落细胞的DNA倍体分析技术应用于子宫内膜病变筛查的研究

目的探讨子宫腔脱落细胞的DNA倍体分析技术应用于子宫内膜病变筛查的可行性及应用价值。方法选取2014年1月~2016年5月就诊于贵阳中医学院第二附属医院疑似子宫内膜病变患者500例为研究对象,采集子宫腔脱落细胞标本,采用Feulgen染色和全自动DNA倍体分析系统分析患者DNA倍体情况,同时行分段诊断性刮宫术检测,以分段诊断性刮宫术检测结果为金标准,观察DNA倍体分析对诊断子宫内膜病变的敏感性和特异性。结果分段诊断性刮宫术检测发现,子宫内膜癌39例(78.0%),癌前病变98例(19.6%),子宫内膜量增生258例(51.6%),正常子宫内膜105例(21.0%)。子宫腔脱落细胞DNA倍体分析子宫内膜癌检出率相似于病理检查,差异无统计学意义(P>0.05);子宫腔脱落细胞DNA倍体分析癌前病变检出率相似于病理检查,差异无统计学意义(P>0.05)。以病理活检结果为金标准,DNA倍体分析筛查子宫内膜病变的敏感性、特异性、准确度分别为92.7%、83.8%、86.2%,DNA倍体分析筛查子宫内膜癌的敏感性、特异性、准确度分别为94.9%、67.7%、69.8%。结论DNA倍体分析对子宫内膜癌的筛选敏感性高,可用于子宫内膜病变的早期筛查,具有一定临床推广价值。

细胞DNA定量分析方法对宫颈病变的诊断价值

目的:评价细胞DNA定量分析系统在宫颈癌及癌前病变的诊断及预测作用。方法:通过对8670名妇女妇科筛查,对其中351例结果异常的患者给予阴道镜检查和病理组织学检查,比较细胞DNA定量分析结果和组织学检查结果,计算细胞DNA定量分析结果对宫颈病变的阳性预测值。结果:TBS分级ASCUS以上、DNA定量分析可见或可见大量DNA倍体异常细胞。对CINⅡ/Ⅲ级以上病变的敏感性、特异性及预测值:ASCUS以上者70例,敏感性26.70%,特异性74.71%,阳性预测值27.38%;可见大量DNA异倍体细胞84例,敏感性81.05%,特异性18.42%,阳性预测值87.56%;细胞学结合DNA定量分析的敏感性、特异性及阳性预测值分别为92.45%、7.47%、93.05%。结论:细胞DNA定量分析方法对CINⅡ、CINⅢ以上的宫颈病变有较高的敏感性,有利于宫颈癌和癌前病变的早期诊断和预测。

DNA定量分析在宫颈早期病变诊断中的应用及其对细胞学ASCUS的临床意义

目的:研究DNA定量分析在宫颈早期病变诊断中对不能明确意义的不典型鳞状细胞(ASCUS)的诊断价值。方法:选择2015-2016年宫颈筛查1 980例妇科宫颈普查病例,均行薄层液基细胞学检查(TCT)和DNA定量分析,241例在阴道镜引导下行宫颈活检,以组织学诊断为金标准,评估DNA定量分析的诊断价值及其对ASCUS的临床意义。结果:241例病人中DNA倍体正常组(128例)、1～2个异倍体细胞组(54例)及≥3个异倍体细胞组(59例),3组活检分别诊断CINⅡ及以上病变7例、7例、30例,细胞DNA倍体分析与组织病理学结果显示,病变级别与DNA倍体异常数呈正相关(rs=0.439,P<0.01),其敏感性为84.1%,特异性为61.4%。活检的57例ASCUS病人中伴1～2个DNA异倍体细胞8例,伴≥3个异倍体细胞28例,伴DNA倍体正常21例,3组分别诊断CINⅡ及以上病变1例、13例、1例,ASCUS病例伴DNA倍体异常的组织病理学级别与DNA倍体异常数呈正相关(rs=0.424,P<0.01)。结论:DNA定量分析可提高宫颈早期病变的检出率,而ASCUS伴有≥3个异倍体细胞时CINⅡ及以上病变的风险最高,二者结合可提高筛查质量、指导临床处置。

宫颈液基细胞学检查联合细胞DNA倍体定量分析及宫颈活检在宫颈病变中的作用

目的评价宫颈液基细胞学、细胞DNA倍体定量分析系统在宫颈癌及癌前病变中所起的作用。方法通过对1054名妇女妇科检查,对阳性者再进行阴道镜下活检,比较液基细胞学、DNA倍体定量分析结果与组织性结果。结果 TCT检查的1054例患者中,阳性180例,阳性率17.1%,并进行病理组织活检,符合率70.6%;对TCT及DNA综合阳性269例,阳性率25.5%的患者进行病理组织活检,符合率87.4%。结论对妇女进行TCT及DAN定量分析,并综合其结果,能使宫颈病变的检出率明显提高,尤其是对早期诊断宫颈癌和癌前病变具有一定的价值,适合临床广泛应用。

细胞定量DNA分析方法联合阴道镜在子宫颈癌及癌前病变筛查中的应用

目的研究宫颈细胞定量DNA分析联合阴道镜检查在诊断宫颈癌及宫颈上皮内瘤样变(cervical intraep ithelialneop lasia C IN)Ⅱ、Ⅲ级/原位癌(carc inom a in situ C IS)的应用价值。方法采用DNA倍体分析及常规细胞学分别对632例宫颈细胞进行检查,作出细胞学诊断。对细胞定量DNA分析阳性,常规细胞学检查不明确意义的非典型鳞状上皮细胞增生(atyp ical squamous cells of undeterm ined sign ificance,ASCUS)及以上级别的病人阴道镜下定位活检或宫颈管搔刮术活检。结果632例宫颈细胞,细胞定量DNA分析方法检出阳性31例(4.91%),常规细胞学异常80例(12.66%),阴道镜异常60例(9.49%)。病理证实宫颈癌及高度病变21例,其中细胞定量DNA分析阳性19例(90.48%),常规细胞学异常11例(52.38%),阴道镜异常17例(80.95%)。三者间有显著差异(P<0.01)。AcCell系统及阴道镜检查筛查子宫颈癌、宫颈上皮内高度病变(≥C INⅡ)的敏感度特异度均高于常规细胞学。结论细胞定量DNA分析联合阴道镜在宫颈癌及宫颈高度病变的诊断方面作用显著,可用于宫颈癌及癌前病变的筛查。

细胞DNA定量分析技术在乳腺癌筛查中的回顾性研究

目的比较和评估两种乳腺癌筛查方法的应用价值。方法选取贵阳中医学院第二附属医院及贵阳市第一人民医院2012年01月至2015年12月自愿参加乳腺癌筛查并有活检结果的253例病例进行研究。253例乳腺包块住院患者,诊断医师进行针吸穿刺后每例制成2张薄层涂片,1张涂片做巴氏染色,用于常规细胞学检查。另1张经Feulgen染色,用自动细胞DNA定量分析系统检测,每例均有病理结果证实。结果以活检结果作为金标准,253例中共有180例为乳腺良性肿瘤,7例为非典型增生及原位癌,66例为恶性。采用细胞DNA定量分析检测的敏感性和特异性分别为93.15%与95.89%,而常规细胞学检测的敏感性和特异性分别为80.82%与100%。同一个标本同时采用两种方法联合检测,敏感性可提高到94.52%。结论细胞DNA定量分析技术可与常规细胞学联合开展,应用在乳腺癌筛查中。

DNA定量分析及HPV检测在意义不明的非典型鳞状细胞患者分流中的意义

目的探讨DNA定量细胞学检查及HPV检测在意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)患者分流中的作用及意义。方法 225例ASCUS患者进行DNA定量细胞学检查、HPV检测及阴道镜下宫颈活检。结果 225例ASCUS病例中,病理活检为鳞状细胞癌2例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)62例,低度鳞状上皮内病变109例,炎症52例。DNA定量阳性组与阴性组的高级别病变检出率分别为45.63%和13.93%(P<0.01),而高危型HPV阳性组与阴性组高级别病变检出率分别为53.33%和9.52%(P<0.01)。以组织病理诊断为金标准,DNA定量分析用于预测高级别病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为73.44%、65.22%、45.63%、86.07%;HPV检测用于预测高级别病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为84.38%、59.01%、45.00%、90.48%;DNA定量分析联合HPV检测应用预测高级别病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为95.12%、74.68%、66.10%、96.72%。结论单独应用DNA定量分析或HPV检测可以将ASCUS患者中大部分高级别病变患者分流出来,两者联合应用可以减少高级别病变的漏诊及不必要的阴道镜检查和宫颈活检。

食管鳞癌DNA定量分析的临床意义

目的通过原发性食管鳞癌的DNA定量分析，探讨肿瘤细胞DNA含量与食管鳞癌的关系。方法采用CMIAS真彩色医学图像分析系统，对食管鳞癌术后标本以Feulgen法染色制成的石蜡切片进行检测，并计算出肿瘤细胞DNA相对倍体均值（简称11值）。结果u值随食管肿瘤增大而升高（P＜0．01）。u值随食管癌分期增高而升高（P＜0．01）。区域淋巴结有转移比无转移的u值大（p＜0．01）。u值随食管癌组织学分级增加而升高（p＜0．01）。结论食管鳞癌患者行DNA定量分析，可以帮助判断食管鳞癌的分期、恶性程度、预后和指导治疗。

基于DNA倍体的子宫颈癌初筛阳性人群年龄分布

目的:以细胞DNA定量分析系统为子宫颈癌初筛方法,分析初筛结果阳性者的年龄分布,探讨此筛查方法在资源匮乏地区的应用价值。方法:以某县所有适龄妇女为筛查对象,以细胞DNA定量分析系统对所获宫颈细胞进行DNA定量分析,在系统设定的标准下系统自动确定阳性患者。结果:15611名筛查对象共筛出阳性者558人(3.57%),45-49岁所占比例最高(4.38%);阳性构成大于3%的年龄分布存在二个高峰,分别是29-53岁和57-63岁。结论:作为一种初筛方法,结合阳性患者的年龄分布和系统自动判定阳性的能力,细胞DNA定量分析系统应用于资源匮乏地区子宫颈癌初筛也许是适宜的。

外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析在小儿传染性单核细胞增多症早期诊断中的价值

目的分析外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析在早期诊断小儿传染性单核细胞增多症中的应用价值。方法针对我院2015年1月至2018年2月收治的疑似早期小儿传染性单核细胞增多症患儿51例作为观察对象,针对51例疑似早期小儿传染性单核细胞增多症患儿实施外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析进行诊断,将最终的诊断结果与外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析诊断结果进行对比,分析外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析诊断早期小儿传染性单核细胞增多症的临床价值。结果经实施外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析后小儿传染性单核细胞增多症的敏感度为90.48%,特异度为90.00%,准确性为85.42%;诊断结果与最终的临床诊断结果相比(P>0.05),统计学无意义。结论外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析在早期诊断小儿传染性单核细胞增多症的过程中具有显著的诊断价值,值得临床推广。

879例女性宫颈液基细胞学检查与DNA定量分析法的对比研究

目的比较液基细胞学检查和DNA定量分析法在女性宫颈病变中的应用及其临床意义。方法对参与对比的879例妇女用宫颈刷取材,进行液基薄层制片,分别进行巴氏染色和DNA染色。对巴氏染色片做液基细胞学检查,并对DNA染色片进行全自动扫描诊断。结果对液基细胞学检查结果显示病变程度在非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)意义不明以上病例和全自动DNA倍体分析系统检测见异倍体细胞部分病例,建议进一步做阴道镜检查及宫颈活检。28例妇女做了病理活检。以细胞诊断结果为标准,计算出细胞DNA定量分析法在ASCUS以上宫颈病变的检出率。结论细胞DNA定量分析法与液基细胞学检查组合应用,能明显提高宫颈癌及癌前病变的阳性检出率,对我国女性宫颈癌的防治具有重要的意义。

细胞DNA定量分析在尿脱落细胞学鉴别诊断中的应用

目的探讨细胞DNA定量分析技术在尿脱落细胞学鉴别诊断中的临床价值,提高临床尿路上皮癌的确诊率。方法选择395例泌尿系统疾病患者,分别采用尿脱落细胞薄层细胞学(TCT)和Feulgen染色的细胞DNA定量分析技术(DNA-ICM)进行检测,并将两种结果进行对比,对其中检查结果异常的患者进行组织学活检。结果细胞DNA-ICM在尿路上皮癌诊断中的检出率、敏感度、特异性分别为48.9%(192/395)、94.6%(192/203)、51.4%(203/395),TCT的阳性率、敏感度、特异性分别为28.1%(110/395)、38.4%(110/285)、72.2%(285/395),DNA-ICM检测的敏感度高于TCT的敏感度,二者比较差异显著(P<0.01)。活检结果显示,DNA-ICM对癌、疑癌、异型细胞患者的诊断符合率分别为97.2%、91.3%、80.1%。结论细胞DNA-ICM在尿路上皮癌的诊断中有很好的应用价值,与TCT联合检测可明显提高尿脱落细胞的临床检出率和准确性,减少漏检的发生。

口腔鳞状细胞癌的DNA定量分析及临床意义

目的运用ICM-DNA定量分析系统研究口腔鳞状细胞癌的DI值及倍体分布情况,评估其与口腔鳞状细胞癌的临床病理因素的关系。方法收集口腔鳞癌石蜡标本79例作为实验组,25例口腔正常黏膜组织和30例口腔黏膜异常增生作为对照组,经Feulgen染色后分组进行ICM-DNA定量分析。结果实验组79例口腔鳞状细胞癌中异倍体出现率为55.7%(44/79),均明显高于对照组正常组织的0.0%(0/25)和口腔黏膜异常增生的46.7%(14/30),P=0.000;口腔黏膜异常增生组轻、中、重度三组间比较,异倍体出现率分别为0%(0/2)、14.3%(1/7)、61.9%(13/21),P=0.036;口腔鳞癌组高及中低分化组间比较,高分化组异倍体出现率42.5%(20/47)低于中低分化组为75%(24/32),P=0.004;有淋巴结转移的有78.6%出现异倍体(22/28),高于无淋巴结转移的43.1%(22/51),P=0.002。结论口腔鳞状细胞癌中DNA异倍体出现率均高于正常组织和黏膜异常增生。ICM-DNA定量分析对于口腔鳞癌的诊断以及恶性程度的判断提供有价值的临床指标,有望用于口腔鳞癌的辅助性临床预测及诊断。

全自动DNA倍体分析方法诊断高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的临床观察

目的:探讨用DNA倍体分析方法诊断高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌。方法:19 621例妇女用宫颈刷取材,液基薄层制片2张,1张进行巴氏染色作TBS诊断,另1张进行Feulgen染色,并经全自动DNA图像分析系统做DNA倍体分析,此病理结果为金标准,比较两种方法敏感性和特异性。结果:在623例宫颈活检病例中,病理证实401例正常,98例CIN1,66例CIN2,43例CIN3/CIS及15例宫颈浸润癌。在623例中,常规细胞学诊断483例正常或AS-CUS,81例LSIL和59例HSIL。DNA倍体分析发现106例正常,368例有1～2个(5C的异倍体细胞,149例有3个或3个以上(5C的异倍细胞。如果常规细胞学以LSIL和HSIL作为活检标准,发现CIN2及其以上级别病变76例,其敏感性为61.2%,特异性为87.2%;如果以3个或3个以上(5C的异倍细胞作为活检标准,发现CIN2及其以上级别病变的87例,其敏感性为70.2%,特异性为87.6%。结论:DNA倍体分析方法与常规细胞学检查相比,可提高诊断高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的敏感性。