骨膜成骨细胞的分离培养及其成骨作用的放射自显影研究

取４只家兔胫前骨膜进行成骨细胞分离培养，用３Ｈ－ＴｄＲ标记，然后回植于同一供体的皮下、耳软骨缺损处及挠骨缺损处。分别在２周和４周后处死动物，原位取材，用放射自显影方法观察种植细胞的转归。结果表明，种植的细胞在皮下转化为类骨组织；在软骨缺损处转化为软骨组织；而在骨缺损处则转化为典型的骨组织。提示用骨膜分离培养成骨细胞，回植体内，有可能用于骨缺损和软骨缺损的修复。

神经元蛋白质磷酸化修饰分析方法的初步研究

目的 建立一种对神经细胞中的磷酸化蛋白质进行分离分析的方法。方法 培养新生乳小鼠神经细胞 ,加入 32 P- Na H2 PO4 2 .78× 10 6 Bq/ ml,37℃孵育 1.5 h。刺激组分别加入表皮生长因子 (EGF) 2 0 ng/ m l或胰岛素10 0 nm ol/ L,对照组加入等量的培养基 ,作用不同时间后液氮终止反应。裂解细胞 ,用 Bio- Rad DC Protein Assaykit测定细胞蛋白质含量 ,双向电泳分离细胞蛋白。放射自显影。结果 1双向电泳自显影图谱显示近数十个蛋白质斑点 ,绝大部分集中于 p H偏酸性和中性区域 ,p H4 .6～ 6 .5 ,其相对分子质量主要介于 2 0× 10 3～ 130× 10 3之间。2 EGF、胰岛素刺激不同时间后虽出现有磷酸化蛋白质斑点的增加或消失 ,但更多表现为某些磷酸化蛋白质斑点灰度的增强或减弱。 3对比分析发现 ,放射自显影图谱中只有少数斑点出现在双向电泳 Coom assie Brilliant BlueR- 2 5 0染色图谱中 ,提示神经细胞中的大多数磷酸化蛋白质为低丰度蛋白。结论 采用本研究建立的双向电泳和放射自显影技术可对神经细胞中的蛋白质可逆磷酸化修饰状态进行较为全面、动态的分析 ,方法灵敏、特异性强 。

花背蟾蜍角膜早期形态发生中胶原合成的放射自显影研究

本实验以~3H-脯氨酸为标记物,用放射自显影方法研究了花背蟾蜍眼的早期发育中胶原的合成、分布以及对角膜早期形态发生的作用。结果表明,角膜上皮从开始形成即合成胶原,并在角膜上皮基底面聚积。在角膜开始透明时,角膜上皮、内角膜和晶状体的胶原合成速率都明显增加,提示与角膜分化密切相关。

硫在铸铁高温各相中的分布

采用液淬法配合自射线照相研究了反球化元素硫在铸铁凝固过程各高温相中的分布。结果表明:灰铸铁中,硫在液相及片墨中的浓度较高,在奥氏体中最低,在D型石墨共晶团的周边有富集。在球铁中,球墨中硫的浓度相对较高,液相及奥氏体中则较低。粗片墨(A型)中硫的浓度比细片墨(D型)中的高,共晶奥氏体中硫的浓度高于先共晶枝晶奥氏体。自射线照相中乳胶的感光代表放射性物质的原子百分浓度。

小麦和大豆叶片的气孔不均匀关闭现象

用14CO2放射自显影的方法研究了田间小麦和大豆叶片在水分胁迫下的气孔关闭状况。正常浇水的小麦和大豆叶片呈现出对14CO2的均匀吸收。在小麦与大豆"片水势分别降至-1．75和-1．32MPa的土壤干旱条件下，两种作物叶片都发生气孔不均匀关闭。离休叶片在空气中快速脱水易引起气孔不均匀关闭。正常供水小麦叶片在晴天中午明显的光合午休时，无CO2的不均匀吸收。某些晴天中午，在大豆光合午休低谷时段观察到较明显的气孔不均匀关闭，用气体交换资料计算出的细胞间隙CO2浓度并不随气孔年度的降低而下降，反而略有回升。

棉花滴灌随水施滴灌专用肥中磷素的移动和利用率的^(32)P研究

应用同位素32P标记肥料和放射性同位素自显影技术,在网室利用平面根槽和盆栽试验通过滴灌随水施肥的方法,研究了滴灌专用肥(新疆农垦科学院专利产品)和磷酸二铵(美国进口)2种肥料中的磷在土壤中的移动和棉株对磷肥的利用率。试验结果表明:①棉株对滴灌专用肥中磷的利用率为21．05％,磷酸二铵为 16．88％。滴灌专用肥比磷酸二铵的利用率高出4．62％。②放射性自显影表明磷酸二铵中的磷在土壤中的最大垂直移动距离为6．2 cm,扩散面积为清水对照的1．85倍;滴灌专用肥中的磷在土壤中的最大垂直移动距离为 7．5 cm,扩散面积为清水对照的2．21倍。肥料随水滴施,提高了磷素在土壤中的运移能力。

知母皂甙元对老年大鼠脑M受体的调节

以３Ｈ－ＱＮＢ和３Ｈ－ＰＺ为放射配基，用放射自显影技术分别测定大鼠大脑皮层、海马、纹状体的Ｍ受体及Ｍ１受体亚型的相对含量。平行实验表明，老年组三个部位的Ｍ及Ｍ１密度均比青年大鼠相应部位的受体密度显著降低；衰老晚期大鼠受体的降低比衰老早期大鼠更显著。衰老早期及晚期的大鼠用知母皂甙元（ＺＭＳ）后，能明显提高相应皮层、海马降低的Ｍ及Ｍ１受体数，有显著性意义；对衰老早期大鼠纹状体部位的Ｍ及Ｍ１受体也有显著提高。三个脑区中，衰老大鼠Ｍ受体的变化和Ｍ１受体亚型的变化趋势基本一致，认为Ｍ受体数的降低主要是Ｍ１受体亚型数减少引起，并且随着衰老进程的发展，降低的程度也愈加明显。ＺＭＳ提高Ｍ受体数，可能是通过提高Ｍ１受体亚型的密度来实现。

硼径迹显微照相技术图像分析软件的设计

硼的径迹显微照相技术是检测材料中微量硼的含量与分布的有效的手段.本文开发建立了Windows环境下对硼径迹显微照片进行图像转换处理和定量测量的软件,利用该软件能够快速处理测量大批量硼径迹显微照片,测量结果的准确性和重复性良好.

日本液相扩散焊(TLP)钢管对焊技术研究近况

液相扩散焊 ( TLP)焊管方法以其特有的高自动化程度、高生产率、高性能、低变形、无焊接烟尘与飞溅等优点已引起了日本学术界与产业界的极大研发兴趣。重点介绍了日本新日铁公司的研究人员采用 α中子射线照射法对碳素钢液相扩散焊中降熔元素 B的扩散行为及存在形态的研究成果。研究结果指出 ,中间层内的降熔元素 B扩散入碳钢母材后 ,在冷却过程中 B在晶界聚集 ,以 Fe2 3( C,B) 6 化合物方式析出 ;在晶界周边则形成贫 B层 ,其结果是晶界近旁的淬硬性大幅度降低 ;接合部组织由晶界铁素体及晶内上贝氏体组成。在保温 60 0 s时 ,扩散距离达 2 mm,并求得 B在 1 4 73 K温度下的扩散系数为 1 .1× 1 0 - 9m2

^(18)F-FDG放射性自显影对ApoE^(-/-)小鼠主动脉斑块显像的初步研究

目的观察18F-FDG对基因敲除(Apolipoprotein E-Deficient,ApoE-/-)小鼠主动脉粥样斑块的核素显像,探讨18F-FDG核显像结果与油红染色之间关系,初步评价18F-FDG在检测粥样斑块中的作用。方法 20周龄ApoE-/-小鼠作为实验组,给予高脂饮食(0.15%胆固醇,15%脂肪),于第44周龄前禁食10-12h后,经尾静脉注射(0.56-0.71)mCi 18F-FDG,20min后处死小鼠分离主动脉,将血管纵行剖开,计算主动脉18F-FDG标准摄取值(SUV),然后行放射性自显影、油红染色,比较结果。正常C57BL/6N小鼠为对照组,给予普通饮食,其余做法相同。结果 ApoE-/-小鼠主动脉对18F-FDG的摄取值(0.243±0.054)较对照组C57BL/6N小鼠有显著性差异(0.112±0.004,P<0.05)。放射性自显影示实验组ApoE-/-小鼠主动脉上斑块区域与非斑块区域信号比为5.848(±2.416)∶1,且与油红染色相比其检测斑块的敏感性及特异性分别为60.194%、66.67%;对照组放射自显影图未见有特异性信号浓聚,与之对应的油红染色中亦未见到有染色阳性区域。结论 18F-FDGPET/CT无创性检测动脉粥样斑块具有可行性,有可能成为临床无创评价斑块稳定性的一种方法。

检测人外周血淋巴细胞抗6-TG突变的方法学问题

本文就人外周血淋巴细胞抗6-TG突变体测定的方法学问题做了介绍。淋巴细胞抗6-TG突变体具有稳定的抗6-TG表型,胞内缺乏次黄嘌呤-鸟嘌吟转磷酸核糖基酶(HPRT),HPRT基因存在结构改变。血样经冷冻预处理或使用流式细胞光度术时,放射自显影法所测结果与克隆检测法相似,正常成人血淋巴细胞抗6-TG突变率为10^(-6)～10^(-5),肿瘤病人接受化疗或放疗后该值升高。抗6-TG细胞测定反映了人体内特殊基因位点的突变频率,是体内体细胞突变的良好指标。

p^(38)丝裂原活化蛋白激酶活性放射自显影测定方法的建立和应用

建立 p38丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK)放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于血管内皮细胞中 p38MAPK活性动态变化的研究 .结果表明放射自显影激酶活性测定方法具有很好的量效关系、灵敏性和特异性 .在脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)刺激的血管内皮细胞 ,p38MAPK在LPS刺激15min后活性增高 ,30～ 6 0min达高峰 ,12 0min后活性逐渐下降 ,较好地反映了LPS刺激的内皮细胞中 p38MAPK活性的动态变化 .国内实验室完全有可能和条件 ,建立本国的放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于信号转导的研究 .

针刺与痛信息在清醒大鼠脊髓背角的投射——[~3H]-2-脱氧葡萄糖放射自显影研究

用[~3H]-2-脱氧葡萄糖相对定量的方法进一步证明了痛信息主要投射到同侧脊髓背角的Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ,Ⅴ、Ⅵ和Ⅹ层,针刺信息投射到同侧背角的Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ层,两者有相互重叠的层次投射,正是在这些部位,两种信息可能相互作用、在脊髓水平实现对痛觉的调制作用。

差异显示法的建立及其在辐射致癌机理研究中的初步应用

本研究目的建立差异显示技术，将其应用于辐诱发肺癌发生相关基因研究中。取ＳＨＴＦ细胞（ＳＶ４０永生化人胎气管成纤维细胞）和αＳＨＴＦ细胞（α粒子照射后能在软琼脂上形成克隆的ＳＨＴＦ细胞）以及肺癌组织和同例正常肺组织为模板，将其ｍＲＮＡ进行ＲＴＰＣＲ扩增，采用放射自显影法和硝酸银染色法显示扩增片段，并比较两者的显示效果。结果表明：在细胞和组织样品中均建立了差异显示法，但硝酸银染色的条带较放射自显影显示的清晰，再扩增后的显示率也较高，两者的复显示分别为８０％和５０％。结论：在细胞和组织样品中成功地建立了差异显示法，改进的条带显示法提高了复显率。

蒙特卡罗方法在径迹显微技术中的应用

径迹显微技术(PTA)是研究硼的晶界偏聚的行之有效的方法.本文运用蒙特卡罗方法建立了径迹固体探测器上蚀坑带宽度与晶界区域硼富集带实际宽度之间的对应关系.模拟计算结果表明,蚀坑带宽度受实际富集带宽度和晶界平面与磨面夹角2个因素影响.蚀坑带宽度随晶界硼富集带宽度的增加与晶界面与探测器平面夹角的减小而增加,利用本文程序计算结果,可根据蚀坑带宽度和晶界平面与磨面夹角更准确的获得实际富集带宽度.

荷苞牡丹碱诱发实验性癫痫大鼠各脑区的代谢和血流

静脉注射γ-氨基丁酸受体阻断剂荷苞牡丹碱(Bicuculline)诱发大鼠实验性癫痫,用碳^(14)2脱氧葡萄糖([~14C]2DG)和碳~14碘化安基比林([~14C]IAP)放射自显影法测定各脑区的葡萄糖摄取率和脑血流.实验结果提示:(1)荷苞牡丹碱诱发实验性癫痫时边缘系统的皮层下结构海马、杏仁核及锥体外系轴中的苍白球、黑质等脑区可能起重要作用.(2)海马区出现葡萄糖代谢与脑血流的明显不一致性,这一特征性变化在实验性癫痫发作中的地位值得进一步研究。

不同发育阶段小鼠胚胎S-期、M-期卵裂球的检测以及低温对胚胎细胞DNA合成的影响

利用放射自显影技术检测了小鼠着床前胚胎 ( 4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚 )不同发育阶段 (早、中、晚 ) S期和 M期卵裂球的比率 ,并研究了低温 ( 4℃ )对小鼠胚胎发育及 DNA合成的影响。结果显示 ,早期和中期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球比率较高 ,分别是 75%、92 % ,没有 M期卵裂球 ,晚期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球比率较低 ( 30 % ) ,M期卵裂球比率为 1 1 % ;早期和中期 8-细胞胚胎 S期卵裂球比率仍很高 ,分别是 73%、80 % ,M期卵裂球分别为 0、2 .5% ,晚期 8-细胞胚胎 S期卵裂球比率增至 6 4% ,M期卵裂球减少至 9% ;早、中、晚期桑葚胚的 S期卵裂球比率分别是 77%、72 %和 79% ,M期卵裂球的比率分别是 5%、3%和 3% ;早、中、晚期囊胚的 S期卵裂球比率分别是 78%、74 %和 77% ,M期卵裂球的比率分别是 4 %、3%和 4 %。 4℃的低温对小鼠早期胚胎的发育和 DNA合成都没有明显影响 ;4 -细胞、8-细胞胚胎和桑葚胚经低温处理及培养后其囊胚形成率和平均卵裂球数分别是 6 2 %和 ( 2 6± 6 )个、54%和 ( 2 5± 7)个、87%和 ( 34± 8)个 ;4 -细胞、8-细胞胚胎、桑葚胚和囊胚经低温处理后 S期卵裂球比率分别是 97%、77%、70 %和 74 %。

神经递质释放的计算机图像分析系统

抗体微探针是一项测量中枢神经系统中神经递质释放位置及其释放量的技术 ,神经递质释放的计算机图像分析系统扫描抗体微探针的放射自显影胶片 ,并将图像存入系统中。通过分析放射自显影图像的特点 ,根据有效、快速的原则 ,提出了有针对性的去噪、平滑等图像处理方法。从图像处理后的结果曲线上可以判断出神经递质释放的位置以及其释放量。

扣带皮质具有镇痛作用的形态学研究

采用ＨＲＰ和放射自显影法，研究了３０只大鼠扣带皮质与脑内一些与疼痛有关结构的纤维联系．结果表明丘脑内侧核内、外侧部及隔外侧核与扣带皮质前、后部都有联系，但以扣带前部为主；斜角带核和隔内侧核与扣带皮质前、后部均存在着纤维联系；扣带皮质前部与束旁核、中缝背核及尾壳核有纤维联系．这些与疼痛有关的结构主要与扣带皮质前部相联系，可能是扣带皮质前部在针刺镇痛中具有显著作用的形态学基础．

水稻种胚吸胀中DNA合成特性的电镜放射自显影研究

结合￣３Ｈ－ＴｄＲ标记用电镜放射自显影技术，对水稻种胚吸胀过程中ＤＮＡ的合成定位与合成变化，作了实验研究，获得了一系列照片。由此认为水稻种胚吸胀过程中存在一个明显的ＤＮＡ合成过程；照片与过膜－液闪法直接测定￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入量随吸胀时间的变化，是基本一致的。