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Screening of Chinese Herbal Medicines against Avian Infectious Laryngotracheitis Virus and Escherichia coli
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作者 Yanying ZHANG Qiumei SHI +2 位作者 Guisheng GAO Guangping GAO Ping SHEN 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2013年第5期25-27,31,共4页
[ Objective] This study aimed to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus and Escherichia coli. [ Method ] Conventional Chinese medicine plate dilution method, plate punching me... [ Objective] This study aimed to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus and Escherichia coli. [ Method ] Conventional Chinese medicine plate dilution method, plate punching method and test tube method were applied to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus based on chicken embryo inoculation experiment. [ Result ] Forsythia suspensa, Radix lsatidis, Isatis iadigotica, Lonicera japonica, Codonopsis pilosula, Astragalus membranaceus, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, C, tyeyrrhiza uralensis and Pericarpium granati had relatively strong anti-ILTV effect; among the Chinese herbal medicines against avian E. coli, Sanguisorba offwinalis, Fructus Mume, Rheum palmatum, Anemarrhena asphodeloides, Radix Scutellariae and Fagopyrum cymosum had relatively strong effect against avian E. coli Os, while other Chinese herbal medicines had relatively weak or no inhibitory effect on avian E. coli 0s and 05. [ Conclusion] This study laid the foundation for further development of Chinese herbal medicine compound preparations to treat avian infectious laryngotracheitis, avian colibacillosis and other viral diseases and bacterial diseases. 展开更多
关键词 Chinese herbal medicine SCREENING avian infectious laryngotracheitis virus Escherichia coli
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ILTVgB基因重组BCG菌株的构建及其免疫原性 被引量:1
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作者 宋杰 苏钢 +1 位作者 裴艳涛 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期413-417,共5页
gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆... gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pR-α-gB,再电转化至BCG中,形成重组菌株rBCG-gB。热激后gB蛋白在耻垢分枝杆菌M.smegmatismc2155中高效表达,并且通过ELISA和Western blotting检测能够被抗ILTVgB蛋白的单克隆抗体识别。将106CFU的重组菌株rBCG-gB皮下注射免疫3周龄的SPF鸡,分别测定了淋巴细胞指数(SI)、吞噬细胞的吞噬能力以及血清中IL-2和IFN-γ的水平,结果表明重组菌株rBCG-gB作为载体疫苗具有较强的免疫反应。动物保护试验结果表明,重组菌株rBCG-gB对鸡具有一定的免疫保护效果,能够保护SPF鸡抵抗ILTV强毒株的攻击,血凝抑制试验表明血凝抑制抗体滴度能够显著增加。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 gB糖蛋白基因 rBCG 免疫原性
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鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立
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作者 谢志勤 谢芝勋 +14 位作者 张艳芳 范晴 谢丽基 万丽军 罗思思 李孟 张民秀 曾婷婷 黄娇玲 王盛 李丹 韦悠 李小凤 任红玉 阮志华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期381-388,共8页
旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR... 旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 微滴式数字PCR 定量检测
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实时荧光定量RT-PCR检测ICP4、IFN-γ和IL-18基因在ILTV感染鸡三叉神经节中的表达 被引量:2
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作者 木古丽 王云峰 +3 位作者 石星明 童光志 何来 王玫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1150-1153,1166,共5页
将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2... 将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2、4、7、10、30d每组各取1只鸡颈静脉放血致死后无菌采集三叉神经节,提总RNA后利用real-timeRT-PCR的方法定量检测ICP4、IFN-γ和IL-18特异性mRNA。结果表明,在人工感染后处于潜伏状态的病毒能再被激活,并且ICP4基因在病毒还未被激活时就能低水平表达,这种低水平的立即早期(IE)基因的表达能提供持续的抗原刺激来维持神经节中的炎性细胞分泌IFN-γ和IL-18,以至于维持病毒处于潜伏状态而不致激活后感染其他的健康宿主;DEX处理后2d,IFN-γ的表达达到峰值,对病毒的再激活起抑制作用,尽管DEX处理前后IL-18的表达量没有明显变化,推测当潜伏的病毒一旦被激活时,IFN-γ可协同IL-18起到抑制IL-TV的作用。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 地塞米松(DEX) 基因表达定量分析 实时荧光定量RT—PCR
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抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗同居感染试验 被引量:7
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作者 王云峰 智海东 +6 位作者 王玫 孙永科 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-54,共4页
疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后... 疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病。在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件。在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护。在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体。这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 同居感染试验 免疫接种
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传染性喉气管炎病毒基因疫苗免疫效应 被引量:8
6
作者 王利丽 王云峰 +5 位作者 孙惠玲 杨春富 都兴洋 王玫 步志高 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期175-183,共9页
以传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株gB和gD基因为目的基因构建真核表达质粒pCAGG-gB和pCAGG-gD。将75只SPF鸡随机分为7组,经肌肉注射接种pCAGG-gB、pCAGG-gD、pCAGG-gB+pCAGG-gD、pCAGG-gB+rFPV-ILTVgB以及rFPV-ILTVgB,并设有生理盐水和空... 以传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株gB和gD基因为目的基因构建真核表达质粒pCAGG-gB和pCAGG-gD。将75只SPF鸡随机分为7组,经肌肉注射接种pCAGG-gB、pCAGG-gD、pCAGG-gB+pCAGG-gD、pCAGG-gB+rFPV-ILTVgB以及rFPV-ILTVgB,并设有生理盐水和空载体(pCAGG)对照组。免疫2周后以500EID50ILTV WG株强毒进行攻击,以评价ILTV基因疫苗以及基因疫苗和重组病毒联合应用对SPF鸡的免疫保护作用。血清抗体的检测表明:在免疫后的2周,各免疫组的鸡只均产生了特异性的ILTV抗体,外周血CD4+T、CD8+T、TCRγδ+T细胞明显高于对照组,并且pCAGG-gB和pCAGG-gD分别诱导了高水平的IL-18和IFN-γ的表达。ILTV强毒攻击后,非免疫鸡全部发病,并在第2天出现死亡。而各质粒免疫组均获得了一定的保护(保护率44%),两种质粒联合免疫(pCAGG-gB和pCAGG-gD)和重组病毒(rFPV-ILTVgB)与质粒(pCAGG-gB)联合免疫的免疫组的保护率(56%)高于单独免疫组,产生高水平细胞因子表达的免疫组的保护率高于对照组。重组鸡痘病毒免疫组的保护率(69%)最高。这些结果表明ILTV的DNA疫苗能够诱导鸡体产生特异性免疫应答,并能对传染性喉气管炎强毒的攻击提供一定的免疫保护。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒(iltv) DNA疫苗 免疫效力
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一株鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定及TK基因分析 被引量:8
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作者 孔聪聪 赵妍 +7 位作者 张晓敏 崔红玉 薛美 胡顺磊 闫帅 李巧玲 牛秀杰 王云峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期955-958,共4页
黑龙江省牡丹江市某养鸡场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。本研究利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的567 bp大小片段;将发病鸡喉头及分泌物处理后接种鸡胚... 黑龙江省牡丹江市某养鸡场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。本研究利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的567 bp大小片段;将发病鸡喉头及分泌物处理后接种鸡胚,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑。病毒接种鸡胚肾细胞48 h后电镜下可以观察到典型的疱疹病毒粒子形态,并且该分离株能够与ILTV单克隆抗体发生特异性反应。动物回归试验显示,感染的SPF鸡出现典型ILT症状,并能够从发病鸡体内重新分离到ILTV,由此判定该分离株为ILTV,并将其命名为MDJ0442。根据NCBI登录的ILTV序列(HQ630064)设计引物,以MDJ0442基因组为模板,PCR扩增TK的基因片段,进行测序和序列分析。结果表明,与其他ILTV参考病毒株相比,TK基因的核酸同源性为99.62%。本研究可以为ILTV的流行病学调查和分子生物学研究提供参考。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 分离鉴定 TK基因 序列分析
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鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学观察 被引量:9
8
作者 石玉祥 张登荣 +2 位作者 王雪敏 王哲 王艳梅 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第29期12710-12711,共2页
[目的]观察鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学变化,为人工制造鸡传染性喉气管炎病例模型方法研究提供参考。[方法]以健康鸡为对照,应用滴鼻、点眼及气管滴入方式同时进行感染,每只鸡接种100 TCID50传染性喉气管炎病毒液0.5 ... [目的]观察鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学变化,为人工制造鸡传染性喉气管炎病例模型方法研究提供参考。[方法]以健康鸡为对照,应用滴鼻、点眼及气管滴入方式同时进行感染,每只鸡接种100 TCID50传染性喉气管炎病毒液0.5 m l,研究感染鸡的病理组织学变化。[结果]结果表明,按上述方法对鸡进行人工感染后,鸡能够产生所报道的病理变化。[结论]该研究的人工感染方式所引起发病的鸡可以作为患传染性喉气管炎鸡的模型。 展开更多
关键词 人工感染 传染性喉气管炎病毒 病理组织学
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鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及其原核表达 被引量:4
9
作者 郑海洲 柏佳宁 +1 位作者 边艳青 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期343-345,共3页
根据鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因序列和表达载体pBV221的多克隆位点,设计了1对引物。以ILTV疫苗株基因组为模板,应用PCR扩增出gB基因片段,然后将其定向克隆于原核表达载体pBV221中,构建了重组质粒pBV-gB。重组质粒转化到受体菌... 根据鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因序列和表达载体pBV221的多克隆位点,设计了1对引物。以ILTV疫苗株基因组为模板,应用PCR扩增出gB基因片段,然后将其定向克隆于原核表达载体pBV221中,构建了重组质粒pBV-gB。重组质粒转化到受体菌DH5α中,得到阳性重组菌株DH5α(pBV-gB)。该菌株在温控诱导下,SDS-PAGE电泳可见表达的特异蛋白。ELISA检测证明,表达的蛋白具有较好的反应原性。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 原核表达 GB基因 SDS-PAGE电泳 ELISA检测 多克隆位点 B基因序列 PCR扩增 iltv 基因片段 表达载体 定向克隆 重组质粒 质粒转化 重组菌株 特异蛋白 反应原性 基因组 疫苗株 受体菌
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传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因在重组禽痘病毒中共表达 被引量:4
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作者 智海东 王云峰 +2 位作者 童光志 王玫 张绍杰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期963-966,共4页
在重组禽痘病毒中表达多个禽类病原的主要免疫原基因是构建多价基因工程疫苗的前提 ,但相关研究很少。在表达传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gB基因重组禽痘病毒的转移载体的基础上 ,构建了含有ILTVgB基因和新城疫病毒 (NDV)F基因的重组禽痘... 在重组禽痘病毒中表达多个禽类病原的主要免疫原基因是构建多价基因工程疫苗的前提 ,但相关研究很少。在表达传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gB基因重组禽痘病毒的转移载体的基础上 ,构建了含有ILTVgB基因和新城疫病毒 (NDV)F基因的重组禽痘病毒转移载体pSY gB F ,采用脂质体转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维 (CEF)细胞后 ,通过蓝斑试验筛选出重组禽痘病毒 (rFPV gB F) ,并进行了 6轮蚀斑纯化。Western blot试验和间接免疫荧光试验证明ILTVgB基因和NDVF基因在rFPV gB F感染的CEF细胞中获得表达。为传染性喉气管炎、新城疫与鸡痘活载体多价疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 糖蛋白B 新城疫病毒 融合蛋白 重组禽痘病毒
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鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gC和gD基因的克隆及序列分析 被引量:4
11
作者 孟松树 郭鑫 +4 位作者 张绍杰 王柳 仇华吉 王玫 童光志 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期108-111,共4页
根据已发表的传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA-2株的核酸序列 ,设计了 1对引物 ,以 ILTV中国王岗株 DNA为模板 ,PCR法扩增出 1条 1 .3 9kb的基因片段 ,将扩增产物插入到真核表达质粒 p CRTM 3 -Uni,得到重组质粒 p TA-g D。另将克隆到 p ... 根据已发表的传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA-2株的核酸序列 ,设计了 1对引物 ,以 ILTV中国王岗株 DNA为模板 ,PCR法扩增出 1条 1 .3 9kb的基因片段 ,将扩增产物插入到真核表达质粒 p CRTM 3 -Uni,得到重组质粒 p TA-g D。另将克隆到 p Bluescript SK质粒中的 g C基因酶切后 ,插入到 p CRTM 3 -Uni载体 ,得到重组质粒 p TA-g C。经电泳分析、酶切、PCR鉴定后 ,进行序列测定。序列分析表明 ,ILTV王岗株 g C基因的编码序列与 SA-2株的核苷酸同一性为 99%,而王岗株 g D基因的编码序列在其 C端多了 1 7个核苷酸 ,其余部分的同一性为 97%。鉴于 g C、g D基因在诱导机体产生对 ILTV的免疫应答中的作用 ,g C、g D基因的克隆及其真核表达质粒的构建 ,为 展开更多
关键词 GC基因 GD基因 克隆 序列分析 iltv 基因免疫
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鸡传染性喉气管炎病毒地方株的分离鉴定 被引量:3
12
作者 杨明凡 崔保安 +2 位作者 陈红英 王学斌 魏战勇 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第11期118-120,共3页
对河南荥阳某养鸡场发病鸡喉头和气管等病料进行病毒分离,采用鸡胚尿囊膜接种和琼脂扩散试验对分离病毒进行鉴定。结果表明,所分离病毒为鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV),获得了1株ILTV河南分离株。参考GenBank收录的鸡传染性喉气管炎病毒... 对河南荥阳某养鸡场发病鸡喉头和气管等病料进行病毒分离,采用鸡胚尿囊膜接种和琼脂扩散试验对分离病毒进行鉴定。结果表明,所分离病毒为鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV),获得了1株ILTV河南分离株。参考GenBank收录的鸡传染性喉气管炎病毒基因序列设计、并合成1对引物,以ILTV地方分离株的DNA为模板,PCR扩增出1条特异性条带,测序结果与GenBank收录序列的同源性达99.9%,说明分离病毒的这一段DNA序列相对保守。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 分离鉴定 PCR
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鸡传染性喉气管炎病毒实时荧光PCR检测方法的建立与应用 被引量:9
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作者 王楷宬 王素春 +5 位作者 孙亚伟 樊擎莹 康京丽 汪洋 刘华雷 黄保续 《中国动物检疫》 CAS 2020年第3期98-102,共5页
为探索适合临床高通量鸡传染性喉气管炎检测的方法,针对鸡传染性喉气管炎病毒gB基因序列保守区域,筛选1对特异性引物和1条特异性探针,建立了实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性评估和临床应用检测。结果显示:筛选出的引... 为探索适合临床高通量鸡传染性喉气管炎检测的方法,针对鸡传染性喉气管炎病毒gB基因序列保守区域,筛选1对特异性引物和1条特异性探针,建立了实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性评估和临床应用检测。结果显示:筛选出的引物和探针与其他禽类常见病毒无交叉反应,检测下限达到100拷贝/反应;对来自13个场的480份临床样本进行检测,检测出17个阳性样品,与常规PCR检测结果符合率为100%。结果表明,此方法特异性强,灵敏度高、耗时少,可用于鸡传染性喉气管炎的快速检测。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 实时荧光PCR检测 方法建立 应用
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鸡传染性喉气管炎病毒gB基因重组DNA疫苗的构建与免疫试验 被引量:8
14
作者 姬向波 刘文波 +4 位作者 魏建超 牛明福 周斌 曹瑞兵 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期481-484,共4页
本研究构建了编码ILTV主要抗原gB基因的重组DNA疫苗pcDNA-gB,质粒转染293-T细胞的间接免疫表明其表达的蛋白具有免疫反应性。为测定该DNA疫苗的免疫效果,将其与本室保存的重组鸡痘病毒rFPV-gB-gD-IgY分别以单独和混合的方式给4周龄非免... 本研究构建了编码ILTV主要抗原gB基因的重组DNA疫苗pcDNA-gB,质粒转染293-T细胞的间接免疫表明其表达的蛋白具有免疫反应性。为测定该DNA疫苗的免疫效果,将其与本室保存的重组鸡痘病毒rFPV-gB-gD-IgY分别以单独和混合的方式给4周龄非免疫鸡进行免疫,然后测定ILTV特异性抗体和T淋巴细胞增殖反应。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导鸡产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答。其中以pcDNA-gB/rFPV-gB-gD-IgY联合免疫组的效果最好,其诱导的抗体水平已接近于常规弱毒疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。上述研究结果为ILTV新型疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 DNA疫苗 糖蛋白B 重组鸡痘病毒 免疫效果
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鸡传染性喉气管炎病毒(江苏株)的分离与初步鉴定 被引量:3
15
作者 赵妍 孔聪聪 +11 位作者 张晓敏 崔红玉 石星明 蒿莲薇 胡顺磊 闫帅 薛美 牛秀杰 李巧玲 王玫 刘胜旺 王云峰 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第1期22-26,共5页
本研究从江苏省某养鸡场采集临床疑似鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotracheitis,ILT)的病鸡喉头气管,接种鸡胚绒毛尿囊膜分离病毒,命名为LJS091151。以分离毒人工感染SPF鸡,于攻毒后d3出现了ILT的典型临床症状,剖检亦可见喉头气... 本研究从江苏省某养鸡场采集临床疑似鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotracheitis,ILT)的病鸡喉头气管,接种鸡胚绒毛尿囊膜分离病毒,命名为LJS091151。以分离毒人工感染SPF鸡,于攻毒后d3出现了ILT的典型临床症状,剖检亦可见喉头气管黏膜充血肿胀、消化道空虚、黏膜充血等病理变化。根据GenBank发表的鸡传染性喉气管炎病毒(Infectiouslaryngotracheitis virus,ILT)gB、TK基因保守序列设计2对引物对分离株基因组DNA进行扩增和序列测定。序列分析表明,获得的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与GenBank发表的序列相似性均在99%以上,证明了分离株LJS091151为鸡传染性喉气管炎病毒。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 分离 鉴定 基因分析
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两株鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定 被引量:2
16
作者 陈红英 崔保安 +3 位作者 李新生 廖仲磊 段廷云 方丽云 《广东农业科学》 CAS CSCD 2007年第4期76-78,共3页
从河南省长葛、荥阳等地采集的病鸡(临床疑似感染ILTV)喉气管组织中分离得到两株病毒,暂命名为ILTV-CG和ILTV-XY。经人工接种易感鸡,ILTV-CG组于接种后第四天I、LTV-XY组于接种后第三天部分鸡只死亡,并可致死部分鸡胚,绒毛尿囊膜增厚且... 从河南省长葛、荥阳等地采集的病鸡(临床疑似感染ILTV)喉气管组织中分离得到两株病毒,暂命名为ILTV-CG和ILTV-XY。经人工接种易感鸡,ILTV-CG组于接种后第四天I、LTV-XY组于接种后第三天部分鸡只死亡,并可致死部分鸡胚,绒毛尿囊膜增厚且有大小不等、数量不一的白色痘斑;两株病毒对乙醚、氯仿敏感;在电镜下可观察到六边形、二十面体对称、有囊膜、具空心颗粒的病毒粒子;根据GenBank中收录的ILTV TK基因核苷酸序列,设计一对特异引物,以两病毒株及参考株的DNA为模板进行PCR反应,均扩增出完全一致的特异带,扩增产物用EcoRⅠ酶切后的酶切图谱也完全一致。试验结果表明两分离株均为ILTV。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 分离 鉴定
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抗禽流感或传染性喉气管炎两种重组鸡痘病毒疫苗联合免疫的相互影响 被引量:3
17
作者 王云峰 石星明 +3 位作者 王玫 杨春富 徐灵龙 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第1期7-14,共8页
"表达H5N1禽流感病毒HA和NA基因的重组鸡痘病毒(rFPV-AI)疫苗"以及"表达传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-ILT)疫苗"均已在实现商业化生产。由于两种疫苗使用了相同的载体病毒,如何使用才能减少相互干... "表达H5N1禽流感病毒HA和NA基因的重组鸡痘病毒(rFPV-AI)疫苗"以及"表达传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-ILT)疫苗"均已在实现商业化生产。由于两种疫苗使用了相同的载体病毒,如何使用才能减少相互干扰而产生最好的免疫效果。本研究设计了三个试验组:1)免疫rFPV-AI后间隔4周接种rFPV-ILT;2)rFPV-AI和rFPV-ILT混合后接种;3)将rFPV-AI和rFPV-ILT分别在两个翅膀同时免疫。结果表明,试验鸡接种rFPV-AI后4周接种rFPV-ILT,对传染性喉气管炎病毒WG株攻击的保护率为60%(6/10),低于rFPV-ILT单独免疫组的保护率(100%,10/10);rFPV-AI和rFPV-ILT混合后免疫组对禽流感病毒强毒攻击的保护率为80%(8/10),对传染性喉气管炎病毒强毒攻击的保护率为70%(7/10),而rFPV-AI和rFPV-ILT分两点同时接种对两种病毒攻击均能产生完全保护。本试验结果建议将这两种相同载体的重组病毒疫苗分两点同时接种以避免相互之间的干扰。 展开更多
关键词 禽流感 传染性喉气管炎 重组鸡痘病毒疫苗 联合免疫
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鸡传染性喉气管炎病毒长葛株gE全基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 王岩 杨明凡 +2 位作者 崔保安 张素梅 陈红英 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第28期8902-8904,共3页
[目的]防治鸡传染性喉气管炎,减少该病对养鸡业造成的损失。[方法]参考GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gE基因序列设计并合成1对引物,以ILTV河南长葛株DNA为模板,PCR扩增出一条1 550 bp的特异性条带,并克隆至pGEM-T载体上。经PCR扩增... [目的]防治鸡传染性喉气管炎,减少该病对养鸡业造成的损失。[方法]参考GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gE基因序列设计并合成1对引物,以ILTV河南长葛株DNA为模板,PCR扩增出一条1 550 bp的特异性条带,并克隆至pGEM-T载体上。经PCR扩增、酶切鉴定,得到含gE基因重组质粒,并对重组阳性质粒进行序列测定。[结果]与GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gE基因和其他部分疱疹病毒gE基因序列进行比较,发现传染性喉气管炎病毒间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.9%、99.8%;与其他动物疱疹病(MDV、CHV、PRV、EHV的gE基因)毒核苷酸的同源性分别为25.6%、23.9%、28.3%、26.1%。[结论]不同ILTV毒株之间gE基因差异甚小,gE基因比较保守,但与其他动物疱疹病(MDV、CHV、PRV、EHV的gE基因)毒核苷酸的同源性较低。该研究为gE基因的功能研究提供了依据。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 GE基因 克隆 序列分析
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禽传染性喉气管炎病毒体内外感染模型中鸡Toll样受体21 mRNA转录水平的研究 被引量:2
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作者 张焕容 陈世界 +3 位作者 皮晋魁 岳华 刘征鑫 汤承 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期965-969,共5页
为研究病毒与机体的相互作用,本研究参考GenBank中鸡Toll样受体21(ChTLR21)的基因序列设计实时定量PCR特异性引物,以鸡核糖体蛋白L4(RPL4)为内参基因,建立检测ChTLR21 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析ChTLR21在禽传染性喉气管... 为研究病毒与机体的相互作用,本研究参考GenBank中鸡Toll样受体21(ChTLR21)的基因序列设计实时定量PCR特异性引物,以鸡核糖体蛋白L4(RPL4)为内参基因,建立检测ChTLR21 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析ChTLR21在禽传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中和感染SPF雏鸡免疫器官脾脏、法氏囊和胸腺组织中的转录水平。结果显示:ILTV感染CEF后2 h、4 h、8 h和18 h时间点ChTLR21 mRNA转录水平分别为未感染对照细胞的1 540.53、0.98、1.19和3.70倍。但仅在ILTV感染2 h时引起ChTLR21转录水平升高,与对照组相比差异显著(p<0.05)。ILTV感染SPF雏鸡后6 h、24 h和30 h脾脏中ChTLR21 mRNA转录水平分别为未感染对照的56.34、59.85和3.61倍;法氏囊中分别为0.03、25.98和3.08倍;胸腺中分别为2.52、50和7.32倍。在感染初期,脾脏中ChTLR21转录量显著升高,随后有所降低,但均高于未感染对照(p<0.05);法氏囊中仅在感染6 h时呈显著抑制(p<0.01);胸腺中呈波动性转录水平升高,但与对照组无统计学差异(p>0.05)。本研究证明ChTLR21参与了鸡体对ILTV感染的应答,并在体内外感染模型中呈现不同的表达规律。 展开更多
关键词 禽传染性喉气管炎病毒 鸡Toll样受体21 鸡胚成纤维细胞 SPF雏鸡 实时荧光定量PCR
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运用套式PCR检测传染性喉气管炎病毒核酸 被引量:2
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作者 黄庚明 辛朝安 《中国病毒学》 CAS CSCD 2001年第3期265-269,共5页
选择鸡传染性喉气管炎病毒保守TK基因的蛋白编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测鸡传染性喉气管炎病毒DNA的套式PCR法。通过检测ILTV感染的鸡胚绒毛尿囊膜、实验室病料和临床病料 ,结果表明 ,套式PCR法能... 选择鸡传染性喉气管炎病毒保守TK基因的蛋白编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测鸡传染性喉气管炎病毒DNA的套式PCR法。通过检测ILTV感染的鸡胚绒毛尿囊膜、实验室病料和临床病料 ,结果表明 ,套式PCR法能检测出ILTV感染后的非免疫鸡胚和SPF鸡胚绒毛尿囊膜研磨液中的被稀释了10 5倍的病毒 (约 1fg的ILTVDNA) ,攻毒后第 10天还能从非免疫鸡和SPF鸡气管拭子中检出ILTV ,第 10天非免疫鸡气管拭子中ILTV的最大检出率为 7/ 10 ,第 10天SPF鸡气管拭子中ILTV的最大检出率为 8/ 10。对非免疫鸡和SPF鸡的气管拭子中ILTV最佳检出时间均在攻毒后第 5天。对临床样品中的ILTV的最大检出率为 7/ 7。经过核酸杂交验证 ,套式PCR法具有很高的特异性和敏感性 ,为从分子水平探讨ILTV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 TK基因 套式PCR 检测 病毒核酸
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