2013-2020年广西重点种鸡场禽白血病净化效果分析

按照检测-淘汰-分群-再检测-再淘汰的原则,建立“生物安全+病原监测+淘汰”模式对2013—2020年广西11家重点种鸡场的种公鸡、种母鸡、育成鸡和雏鸡采集精液、蛋清、泄殖腔拭子、胎粪等样品进行禽白血病病原检测;公鸡和母鸡同时采集血浆蛋白进行禽白血病病毒(ALV)分离。通过多方式联合净化禽白血病,ALV阳性率逐年下降,净化效果非常显著。其中公鸡精液中ALV阳性率由2013年的7.45%下降到2020年的0.14%,母鸡蛋清样本ALV阳性率由2013年12.32%下降到2020年0.23%,雏鸡胎粪ALV阳性率由2018年3.60%下降到2020年0.47%。公鸡血浆蛋白病毒检出率由2013年的3.46%下降到2020年的0.78%,母鸡血浆蛋白病毒检出率由2013年的2.22%下降到2020年的0.20%。可以看出ALV净化效果非常显著,说明所建立的禽白血病净化方法在广西行之有效。

ALVE的筛查整合及其对坝上长尾鸡生产性能的影响

试验旨在研究禽内源性白血病毒(ALVE)在坝上长尾鸡中的分布及其对坝上长尾鸡生产性能的影响。利用分子进化遗传分析(MEGA)的邻位相连法构建禽白血病病毒(ALV)的系统进化树,最大似然法计算序列遗传距离。利用聚合酶链式反应(PCR)检测坝上长尾鸡中ALVE的整合,对ALVE-6和ALVE-B5整合与坝上长尾鸡产蛋、体重的关系进行双因素方差分析。配对卡方检验分析ALVE-6整合与ALV-p27抗原阳性的关联。结果发现:24条白血病病毒基因组分化为ALVE、禽外源性白血病病毒K亚群(ALVK)和ALVE与ALVK重组(ALVK+E/K)、禽外源性白血病病毒A亚群(ALVA)和ALVE与ALVA重组(ALVA+E/A)三大分支。病毒基因组的env区分化系数最高为0.641,3′UTR区分化系数最低为0.050,相对保守。4种ALVE在坝上长尾鸡基因组中有整合,ALVE-6的整合率最高,为87.63%。与ALVE-6阴性相比,ALVE-6阳性坝上长尾鸡的体重显著提高(P<0.05)。ALVE-6整合的PCR检测结果与ALV-p27抗原ELISA检测结果相互独立。研究表明,坝上长尾鸡具有较高的ALVE-6整合率,ALVE-6整合对坝上长尾鸡的生产性能有提升作用,且ALVE-6的整合不影响ALV-p27抗原检测结果,该研究结果为ALVE在选育生产性能优良的坝上长尾鸡中的应用提供了支持。

宁都黄鸡禽白血病和鸡白痢的监测与分析

为了解宁都黄鸡禽白血病和鸡白痢的流行情况,于2023年在宁都黄鸡规模化养殖场N1、宁都黄鸡散养场N2共采集样本866份,其中387份血清样品和479份蛋清样品。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对禽白血病p27抗原和J亚型禽白血病病毒(ALV-J)抗体进行检测,采用平板凝集试验(SPA)对鸡白痢抗体进行检测。结果表明,蛋清中禽白血病p27抗原总阳性率为7.1%,宁都黄鸡规模化养殖场N1种蛋带毒率较低,曾祖代、祖代和父母代种蛋带毒率均≦5.0%。血清中ALV-J抗体总阳性率为54.4%,鸡白痢抗体总阳性率为7.0%,宁都黄鸡规模化养殖场N1的鸡群此阶段鸡白痢抗体被检测为全阴性。宁都黄鸡存在感染禽白血病和鸡白痢现状,规模化养殖通过多种净化措施对降低禽白血病和鸡白痢的阳性率具有良好效果,各散养场需及时建立有效净化方案,以减少禽白血病和鸡白痢带来的经济损失。

天水市规模养鸡场禽白血病流行病学调查

为了解甘肃省天水市鸡禽白血病的流行情况,本文采用实时荧光PCR方法对2020~2021年采集的24个规模鸡场的480份泄殖腔拭子进行了病原学检测。结果显示,24个规模场中阳性场18个,场点阳性率为73.33%;480份样品中阳性样品203份,样品阳性率42.29%。其中不同用途的鸡禽白血病感染率不同,360份蛋鸡样品中阳性138份,阳性率38.33%;120份肉鸡样品中阳性65份,阳性率54.17%。结果表明,禽白血病病毒在天水市规模鸡场存在普遍流行的现象,且肉鸡的感染率高于蛋鸡。

E亚群禽白血病病毒分离株的全基因组序列分析

为了弄清江苏省某一地方品种种鸡场病死鸡的死亡原因,采集病死鸡组织,检测显示仅为ALV阳性;通过CEF和DF-1细胞培养、p27抗原检测和间接免疫荧光(IFA)对病毒进行鉴定;对病毒分离株前病毒DNA序列进行全基因组序列测定与分析。结果显示:分离株能够在CEF上生长,上清液中可检测到p27抗原,CEF出现特异性绿色荧光,DF-1细胞培养物以上检测均为阴性,初步表明分离株为ALV-E,命名为JY202106;其基因组大小为7529 bp,符合复制完整型C型反转录病毒特征,缺乏肿瘤基因;序列分析显示,分离株与参考株同源性为84.3%~98.7%,gp85进化分析分离株与ALV-E同属一个进化分支,与ev-1株同源性高达99.2%。研究表明地方品种鸡中存在内源性ALV,为该病的防控提供了参考和依据,也丰富了ALV基因组数据资料。

tva受体基因起始密码子突变对鸡感染A亚群禽白血病病毒的影响

[目的]探索tva受体基因起始密码子突变(tva c.3G>A)对鸡感染A亚群禽白血病病毒(Avian leukemia virus subgroup A, ALV-A)的影响。[方法]利用Sanger测序和RT-PCR验证我国黄羽肉鸡存在tva c.3G>A突变。利用流式细胞术检测tva c.3G>A突变对鸡体外感染RCASBP(A)-GFP荧光报告病毒的影响。通过ALV-A体内攻毒试验,探究tva c.3G>A突变对鸡体内感染ALV-A的影响。利用直接测序方法对我国黄羽肉鸡品系tva c.3G>A突变位点进行基因分型。[结果]Sanger测序和RT-PCR结果鉴定我国黄羽肉鸡品系tva基因编码区第3位碱基由G突变为A,该突变引起tva基因起始密码子序列由ATG突变为ATA。流式细胞术检测结果显示野生型tva c.3G/G鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast, CEF)对RCASBP(A)-GFP易感,纯合突变型tva c.3A/A CEF抗RCASBP(A)-GFP感染,表明tva c.3G>A突变导致鸡体外抗RCASBP(A)-GFP的感染。ALVA体内攻毒试验的结果表明,tva c.3G>A突变导致鸡体内抗ALV-A的感染。tva c.3G>A突变位点基因分型发现,CB01、CB08、CB10和CB15品系存在纯合抗性基因型tva c.3A/A,频率分别为0.10、0.15、0.23和0.08。[结论]tva c.3G>A突变引起鸡在体外、体内抗ALV-A感染,tva c.3G>A突变位点可作为ALV-A的遗传抗性位点。

砷制剂对禽白血病肿瘤细胞Warburg效应及Hedgehog信号通路的影响

【目的】探究三氧化二砷(ATO)对禽白血病(AL)肿瘤细胞Warburg效应及Hedgehog信号通路的影响,明确ATO缓解AL鸡肝脏肿瘤病变的作用机制,为生产上以ATO治疗AL提供科学依据。【方法】开展急性毒性试验,确定ATO对绿壳蛋鸡的安全性;通过p27抗原检测、PCR扩增鉴定、gp85基因测序等对禽白血病病毒(ALV)进行鉴定,并采集病鸡肿瘤组织制作病理组织切片进行病理性诊断;体外培养AL鸡肿瘤细胞,分别加入0.5、1.0和2.0μmol/L ATO进行处理,培养12、24和48 h后收集细胞,分别检测葡萄糖、乳酸、己糖激酶(HK)及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的含量;以ALV人工感染绿壳蛋鸡构建模型组,再用不同剂量(0.5、1.0和2.0 mg/kg·BW)ATO进行治疗,采用ELISA检测鸡肝脏组织中Hedgehog信号通路Gli1和Shh蛋白水平,并以实时荧光定量PCR检测Shh、Gli1、Gli2、Ptch2和Smo基因的表达情况。【结果】ATO对绿壳蛋鸡的半数致死量(LD_(50))为19.501 mg/kg·BW,LD_(50)-95%可信限为19.501±0.213 mg/kg·BW。从疑似患AL的绿壳蛋鸡中鉴定出1株ALV-J株,命名为GZCS01,其感染形成的肿瘤为肾母细胞瘤。以不同剂量(0.5、1.0和2.0μmol/L)ATO作用肾母细胞瘤细胞,培养48 h后发现细胞液中的葡萄糖、乳酸及HK含量均极显著降低(P<0.01,下同),同时能降低肾母细胞瘤细胞内的GLUT1含量,从而减弱肿瘤细胞Warburg效应;高剂量的ATO(2.0 mg/kg·BW)能极显著或显著抑制Shh和Gli1蛋白表达(P<0.05,下同),极显著或显著抑制Shh、Gli1、Gli2和Smo基因表达,同时极显著上调Ptch2基因表达。【结论】ATO能抑制肿瘤细胞对葡萄糖的摄取和乳酸生成,且降低关键酶生成,从而减弱Warburg效应,抑制肿瘤细胞增殖;ATO还可通过下调Hedgehog信号通路关键因子Shh、Gli1、Gli2和Smo的表达及促进Ptch2表达,从而减轻AL的肝脏病变。可见,使用砷制剂(如阿散酸等)治疗AL具有可行性。

鸡IFIT5对J亚群禽白血病病毒在DF-1细胞内复制的影响

【目的】制备鸡干扰素诱导蛋白含三角形四肽重复5(IFIT5)多克隆抗体,以探究IFIT5对J型禽白血病病毒(ALV-J)在鸡胚成纤维细胞(DF-1)内复制的影响。【方法】以感染ALV-J的鸡脾脏组织细胞提取的RNA反转录获得的cDNA作为模板,对IFIT5基因进行PCR扩增,利用重组酶将纯化后的PCR产物和线性化载体进行连接,构建重组质粒pET-28a-IFIT5和pcDNA5-flag-IFIT5并测序。将测序正确的重组质粒pET-28a-IFIT5转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达,表达的融合蛋白His-IFIT5纯化后免疫6周龄BALB/c雌鼠制备多克隆抗体,通过Western blotting鉴定抗体的特异性,利用间接ELISA测定抗体的效价。将测序正确的重组质粒pcDNA5-flag-IFIT5转染DF-1细胞,24 h后接种ALV-J,通过Western blotting检测DF-1细胞中过表达IFIT5对ALV-J复制的影响。【结果】试验成功扩增到大小为1 440 bp的IFIT5基因,并成功构建重组质粒pET-28a-IFIT5和pcDNA5-flag-IFIT5。pET-28a-IFIT5可以表达约56 ku的可溶性蛋白His-IFIT5,Western blotting结果显示,制备的鼠抗IFIT5蛋白多克隆抗体能特异性识别DF-1细胞中过表达的IFIT5蛋白,效价为1∶32 000。pcDNA5-flag-IFIT5能在DF-1细胞中高效表达,且在DF-1细胞中过表达IFIT5可以促进ALV-J复制。【结论】本研究制备的鼠抗IFIT5蛋白多克隆抗体具有较高的反应性和特异性;在DF-1细胞中过表达IFIT5可以促进ALV-J复制。本试验结果为深入研究IFIT5蛋白的生物学功能提供参考。

1株J亚群禽白血病病毒env基因克隆及生物信息学分析

【目的】通过生物信息学方法分析1株禽白血病病毒(Avian Leukosis virus,ALV)的囊膜蛋白env的分子特征。【方法】利用鸡成纤维细胞(DF-1)培养疑似禽白血病病鸡的血清样品,通过ELISA和实时荧光定量PCR鉴定ALV亚群。对env基因PCR产物进行测序,利用SeqMan拼接env基因。将该env基因与国内外多个ALV亚群进行序列比对及遗传进化分析,并借助多种生物信息学软件对env蛋白进行分析,包括理化性质、亲/疏水性、跨膜区、信号肽、糖基化位点、磷酸化位点、乙酰化位点、二级结构、三级结构、抗原决定簇和B细胞抗原表位预测。【结果】ALV-J毒株的env基因全长1719 bp,获得GenBank登录号为OP837418,其与J亚群ALV位于同一进化分支,相似性为89.3%~94.8%。该env蛋白有2个跨膜区,是由572个氨基酸组成的不稳定的亲水蛋白,不稳定系数预测值为43.49,总平均亲水性为―0.201;该env蛋白为非分泌蛋白,无信号肽,有17个N-糖基化修饰位点、77个O-糖基化修饰位点、42个磷酸化修饰位点、21个潜在抗原决定簇和9个连续碱基数超过10个的B细胞线性表位。该env蛋白的二级结构中无规则卷曲占比最大,为38.29%。【结论】env基因是导致ALV遗传变异的关键基因,其编码的囊膜蛋白env具有不稳定性,存在多个蛋白修饰位点和抗原表位。

北京信鸽中1株禽白血病病毒的分离和鉴定

为研究北京地区信鸽中禽白血病(AL)的流行情况,本试验从北京市沙河地区某市场抽样采集疑似AL信鸽血液样本共54份,通过检测p27抗原对其进行禽白血病病毒(ALV)鉴定;将分离株接种SPF鸡后检测其血清中ALV-Ab和ALV-J抗体,对分离株env基因进行扩增和测序,与各亚型ALV参考株gp 85基因核苷酸序列进行同源性分析,并构建系统发育进化树。结果显示,从54份样本中分离得到1株ALV,命名为CAU1501。ALV-J抗体检测全部呈阴性,ALV-Ab抗体检测有4份呈阳性。CAU1501的gp 85基因核苷酸序列与2007年美国分离株PDRC-3249同源性最高,与国内2009年山东分离株SDAU09E2遗传亲缘性最近,结合抗体检测结果确定分离株CAU1501为A亚群ALV。本试验结果可为后续北京地区鸽群AL的防控和净化提供参考依据。

复方中草药对禽白血病鸡成活率及免疫性能的影响

为研究防治武定鸡白血病的有效手段,在饲料中分别添加5种复方中草药(剂量1(0.2%增免疫+0.2%抗病毒)、剂量2(0.4%增免疫+0.4%抗病毒)、剂量3(0.6%增免疫+0.6%抗病毒)、剂量4(0.8%增免疫+0.8%抗病毒)、剂量5(1%增免疫+1%抗病毒))饲喂90日龄染病鸡,分别在120、150、180、210日龄调查成活率和进行血液免疫指标C3、C4、IgA、IgG测定。结果表明,5种剂量复方中草药饲喂病鸡,对试验鸡生长无明显影响;不同剂量组120、150、180、210日龄血清中C3、C4、IgA含量均低于对照组(不添加复方中草药),且剂量1组120日龄C3、IgA含量显著低于对照组,剂量2组120日龄C4含量显著低于对照组,剂量2组210日龄C3、IgA含量显著低于对照组;免疫球蛋白IgG含量除180日龄外,120、150、210日龄各剂量组均低于对照组,且120日龄剂量2组血清中免疫球蛋白IgG含量显著低于对照组;添加复合中草药饲喂试验鸡120 d后,剂量1、2、3组成活率均不同程度高于对照组,且剂量2组成活率达93.33%,显著高于剂量4、5组,剂量2、3组还出现转阴现象。表明该复方中药配方可以提高武定鸡白血病感染鸡的成活率、免疫性能等,且具有抑制(或治疗)武定鸡白血病的效果,以剂量2组(0.4%抗病毒+0.4%增免疫)效果最佳。

不同胎粪稀释液处理对禽白血病病毒ELISA抗原检测的影响

为研究不同胎粪样品稀释液处理胎粪后对禽白血病病毒p27抗原检测的影响,保证胎粪样品的检出率和检测的准确性,本试验利用禽白血病病毒ELISA抗原检测技术对ZOOKO胎粪样品稀释液、IDEXX样品稀释液和PBS缓冲液处理的胎粪样品进行检测。结果显示:ZOOKO胎粪样品稀释液、IDEXX样品稀释液和PBS缓冲液处理的胎粪样品阳性率分别为58%、54%和42%。通过试验说明ZOOKO胎粪样品稀释液有较高的临床应用价值,有助于提高阳性样本的检出率,为禽白血病净化胎粪样品检测提供更高效的商品化处理试剂,为临床检测提供可靠的数据支撑。

PCR法检测活毒疫苗中禽白血病病毒污染

为调查活毒疫苗中禽白血病病毒(ALV)污染情况,随机抽取安徽省鸡群使用的国内外公司(国内7家、国外1家)活毒疫苗(5个品种),先针对ALV各亚群保守的pol基因设计一对引物进行PCR检测,进一步针对env基因设计2对特异性引物,进行ALV J亚型和A^E亚型PCR检测。pol基因结果为鸡传染性囊病病毒(IBDV)B87株国内7个公司为阳性,鸡痘(AP)、鸡传染性喉气管炎(ILT)某国外公司为阳性,鸡新城疫(ND)LaSota株国内某公司为阳性。env基因结果为IBDV-B87株(国内某公司)和AP为J亚型阳性,ILT、ND-LaSota株和IBDV-B87株(国内另6个公司)为A^E亚型阳性。本研究共检测疫苗120份,ALV检出率达28.57%。因此,使用PCR法可作为活毒疫苗中ALV污染检测的有效方法,同时可以进一步鉴定污染的ALV是J亚型或A^E亚型。

贵州省地方品种鸡禽白血病病毒流行株的亚型鉴定及其分子特征分析

为了解贵州省9个地方品种鸡群中禽白血病病毒(ALV)流行株亚型与分子特征,本研究2016年从该省8个地区9个地方品种鸡群共采集380份鸡蛋样品。采集卵白用ELISA试剂盒检测ALV-P27抗原,阳性卵白接种CEF和DF1细胞分离病毒,培养7 d后检测细胞培养液中ALV-P27抗原,对感染细胞cDNA以4对ALV特异性引物进行PCR鉴定与分型。并选取9个鸡群的部分ALV分离株进行gp85基因的克隆测序与序列分析。结果表明,9个鸡群的卵白样品ALV-P27抗原阳性率为0~36%;阳性卵白的CEF和DF1细胞培养上清P27抗原检测结果相同,阳性率为26.8%(15/56),并鉴定出其亚型全部为J亚型(ALV-J)。已测序的21株ALV-J gp85基因序列与国内外ALV-J参考株同源性为86.6%~100%;进化树分析显示,21株ALV-J分离株在不同的分支,其进化关系和来源之间未发现明显规律。本研究表明,贵州省9个地方品种鸡群有6个存在ALV-J感染。其中,3个当地培育的品种鸡ALV感染率为0;而来自3个地区的绿壳蛋鸡ALV-P27抗原阳性率普遍较高(26.7%~36.0%)。本研究补充了我国禽白血病流行病学的数据并为该病的防制提供了调查依据。

2009—2010年中国部分地区进口鸡群禽白血病流行病学调查

为了解禽白血病(avian leukemia,AL)在中国进口品种鸡群中的感染状况,2008年12月至2010年6月,在4个省市各选择1个进口品种鸡场进行禽白血病流行病学调查。此次调查共涉及4个场、5个品种、不同代次、不同生长阶段的115个鸡群共计7000余份样品,分别采集泄殖腔拭子进行p27抗原的检测和血清中的J抗体、A/B抗体的检测。结果表明,中国进口品种鸡群中存在不同程度的ALV-J亚群、ALV-A/B亚群感染,J抗体阳性率普遍高于A/B抗体阳性率,且肉鸡品种的J抗体阳性率高于蛋鸡品种;此外,本次调查结果还显示,产蛋初期的鸡群p27抗原阳性率和J抗体阳性率较高。

地方品系鸡中一株A亚群鸡白血病病毒的分离和鉴定

将种蛋孵化到9~11d,分别制备成鸡胚成纤维细胞（chicken fibroblast cells,CEF）培养,再将其细胞上清接种对内源性白血病病毒（avian leukosis virus,ALV）有抵抗力的DF1细胞,从山东某地方品系种蛋中分离到一株外源性ALV,SDAU09E1。用PCR扩增其囊膜蛋白基因（env）并隆测序后,将其gp85序列与已发表的各亚群ALV比较分析表明,该毒株与A亚群6个毒株同源性最高,为89.1%~90.9%,而与已发表的鸡的A、C、D、E亚群ALV的gp85的同源性仅在73.2%~87.9%之间,与目前国内最常见的J亚群的gp85的同源性更是低至30.3%~32.4%。这是我国地方品系鸡群中第一次分离和鉴定出ALV-A及其gp85基因。

浙江省地方鸡种禽白血病毒抗原检测与部分分离株GP85基因序列分析

为了解浙江地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis vrius,ALV-J)的感染情况与流行毒株的分子特征,对浙江省部分地方品种鸡体内ALV的p27抗原进行了检测,从疑似感染鸡群中检测分离到5株ALV-J,并对其GP85基因进行PCR分子克隆和序列分析。研究结果显示:在检测的19个地方鸡品系中,所有品系的鸡样本都呈现抗原阳性,其中101系的抗体阳性率最高,母鸡阳性率为40.48%,公鸡阳性率为16.54%;126系次之,母鸡阳性率为28.87%,公鸡阳性率为3.30%;171系抗体阳性率最低,其母鸡阳性率仅为4.08%,公鸡的感染率为0。为了解地方鸡群中ALV-J的遗传变异,对分离到的5株ALV-J的GP85基因进行了分子克隆和序列分析。结果表明,5个分离毒株的GP85基因大小均为924 bp,与预期一致;本研究样品序列之间的核苷酸同源性为90.8%~98.5%,与原型毒株HPRS103核苷酸相似性为90.3%~97.0%,与国内其他分离株的同源性为86.5%~99.0%。分离株与福建(FJ201308株)和广东(WF13株)分离株的同源性最高。结果表明:浙江省大部分地方品种鸡都不同程度感染ALV-J,而且分离毒株已经发生了不同程度的变异,提示我们应加强浙江省地方品种鸡ALV的净化工作。

活毒疫苗中禽白血病病毒污染的检测方法探讨

[目的]探讨活毒疫苗中禽白血病病毒污染的检测方法。[方法]随机抽取安徽省鸡群使用的国内外活毒疫苗,使用对禽白血病病毒(ALV)群特异性p27抗原ELISA检测试剂盒进行检测,同时根据禽白血病病毒各亚群保守的pol基因设计引物,进行PCR检测。[结果]7个国内公司鸡传染性法氏囊B87株检测结果均为阳性,某国外公司鸡痘、鸡传染性喉气管炎检测结果呈阳性,某国内公司为阳性。鸡新城疫lasota株共检测疫苗35份,检出率达28.57%。ELISA检测结果与PCR结果相一致。[结论]使用p27抗原ELISA检测试剂盒和PCR法均可作为活毒疫苗中ALV污染检测的有效方法,说明活毒疫苗中ALV污染是ALV传播的重要因素。

七彩山鸡内源性禽白血病病毒的鉴定及其env基因序列分析

为了解七彩山鸡感染内源性禽白血病病毒(ALV)情况,从上海某七彩山鸡场采集200份血浆样品,经DF1细胞分离和ALV p27抗原ELISA方法检测出13份阳性样品。将含有阳性样品的第一代细胞裂解液及细胞上清液同时盲传接种至第2代细胞,培养9 d后,p27抗原均未被检测到。对ALV p27抗原阳性细胞培养物进行env基因的扩增,最终得到了1株内源性ALV前病毒序列,其基因序列与已知的禽白血病病毒同源性为39.1%~66.7%。以上结果表明,该七彩山鸡品系中存在内源性禽白血病病毒感染。

禽白血病病毒抗原高敏荧光微球快速定量检测方法的建立

为建立快速定量检测家禽样本中禽白血病病毒抗原的方法,对禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体细胞株2E5和3D5进行复苏、鉴定,通过反应条件优化,建立了禽白血病病毒抗原高敏荧光微球快速检测方法。该方法能够快速定量检测家禽样本中禽白血病病毒,敏感性高、特异性强,对其他家禽病原无交叉反应且具有良好的检测重复性。对采自全国的240份临床家禽样品进行检测,同时用美国IDEXX公司生产的ELISA抗原试剂盒开展比较,结果发现两种方法符合率达93.98%,其中阳性样品符合率为90.83%,阴性样品符合率为95.83%;组内与组间变异系数分别低于10%和15%。本研究建立的禽白血病病毒p27抗原高敏荧光微球快速检测方法,特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。