不同核酸提取方法对HBV-DNA检测性能验证情况分析

目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、正确度、线性范围、检出限及抗干扰能力等性能进行验证和评价。结果达安全自动核酸提取仪提取达安试剂检测、手工提取达安试剂检测和手工提取圣湘试剂检测在精密度、正确度、线性范围、检出限方面验证结果均达标;达安全自动核酸提取仪提取圣湘试剂检测在低值检测中变异系数大于5%,最低检测限验证不合格;抗干扰能力方面,全自动核酸提取仪提取的2.0 g/dL血红蛋白浓度的样本用达安和圣湘试剂检测结果均不受影响。手工提取甘油三酯浓度达3000 mg/dL的样本用达安和圣湘试剂检测的结果均不受影响。结论不同厂家的提取和检测试剂避免混用,达安和圣湘试剂对HBV-DNA定量检测的结果均符合要求。

HBV C基因型有关的HBsAg阴性HBV DNA阳性患者S区突变对HBsAg的影响

目的通过构建HBV C基因型突变质粒研究HBsAg阴性HBV DNA阳性患者HBV S区突变对HBsAg水平的影响。方法收集2022年8月至2023年4月首都医科大学附属北京佑安医院107例HBsAg-/HBV DNA+患者血液样本,对成功提取扩增的HBV DNA S区进行测序,通过构建HBV C基因型突变质粒对HBV S区突变位点进行细胞功能验证,探讨OBI可能发生的分子机制。结果对成功提取扩增的68例患者进行测序,发现HBV S区存在大量突变,包括免疫逃逸突变(如sG145R、sK122R、sS114T、sT131P等)和跨膜结构域(transmembrane domain,TMD)突变(如sT5A、sG10D、sF20S等)。通过构建HBV C基因型突变质粒,进行细胞转染和细胞免疫荧光实验发现sG145R突变会明显降低HBsAg的表达,但是sK122R、sI26N、sQ29N、sR169H、sS114T、sT131P这6个突变位点并未影响细胞内外HBsAg的表达。结论通过测序发现HBsAg-/HBV DNA+患者HBV S区存在大量突变位点,通过构建sG145R、sK122R、sI26N、sQ29N、sS114T和ST131P等突变质粒发现sG145R突变会明显降低细胞内外HBsAg的表达,但是sK122R、sI26N、sQ29N、sR169H、sS114T、sT131P并未明显降低细胞内外HBsAg的表达。

不同病情乙型肝炎患者HBV-DNA定量、两对半检测结果差异

目的分析乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)-DNA定量检测与两对半检测结果的相关性,并观察不同病情HBV-DNA阳性率和两对半检测结果差异。方法选取江苏省泰兴市人民医院2021年4月至2023年4月收治的375例乙型肝炎患者病例为研究资料。比较不同乙肝两对半检测[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]结果患者HBV-DNA定量检测结果差异,将患者根据HBV-DNA定量检测结果分为阳性组和阴性组,比较乙肝两对半结果差异,使用Pearson相关性分析;将患者根据疾病类型分为肝炎组、肝硬化组和肝癌组,比较三组患者乙肝两对半和HBV-DNA定量检测结果差异。结果不同乙肝两对半类型患者HBV-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);HBV-DNA阳性组患者HBsAg、HBeAg水平高于HBV-DNA阴性组,HBsAb、HBeAb、HBcAb水平低于HBV-DNA阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);HBsAg、HBeAg水平与HBV-DNA呈正相关(P<0.05),HBsAb、HBeAb、HBcAb水平与HBV-DNA呈负相关(P<0.05);不同疾病类型患者乙肝两对半类型HBV-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同疾病类型患者HBV-DNA定量检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与两对半检测结果有相关性,不同乙肝两对半类型间及不同疾病类型间HBV-DNA均有差异,HBV-DNA定量检测联合两对半检测可较好地反映病毒复制和疾病进展情况,为临床治疗提供指导。

EB病毒DNA、LDH、铁蛋白联合检测在诊断弥漫性大B细胞淋巴瘤中的意义

目的 观察分析EB病毒DNA、LDH、铁蛋白联合检测在诊断弥漫性大B细胞淋巴瘤中的意义。方法选取2020年12月—2022年12月本院收治的淋巴瘤患者50例和淋巴结炎患者50例为研究对象,分为淋巴瘤组与对照组。对两组进行EB病毒DNA、LDH、铁蛋白联合检测,测定血液中EB病毒DNA的阳性检出率、LDH水平和铁蛋白水平的区别。结果 淋巴瘤组DNA的阳性检出率要明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清的对比中淋巴瘤组中的LDH和铁蛋白要明显高于对照组,LDH和铁蛋白高代表确诊恶性肿瘤的概率就越大,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EB病毒DNA、LDH、铁蛋白联合检测对诊断弥漫性大B细胞淋巴瘤具有重大意义,检测效果非常显著。

HBV感染患者HBV-DNA载量与乙肝五项指标的相关性研究

目的探讨乙肝病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染患者血清中乙型肝炎病毒脱氧核苷酸(HBV-DNA)载量与乙肝五项指标的相关性。方法选取沛县人民医院于2022年1月—2023年1月收治的100例HBV感染患者作为研究对象,所有患者均接受HBV-DNA载量与乙肝五项指标检测,并按照其HBV-DNA载量进行分组,分别为<50 IU/mL组69例、50~<10^(4) IU/mL组10例、10^(4)~10^(10) IU/mL组21例,对比3组检测结果。结果10^(4)~10^(10) IU/mL组乙型肝炎e抗体(Hepatitis B Virus e Antibody,HBeAb)、乙型肝炎e抗原(Hepatitis B e Antigen,HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(Hapatitis B Surface Antigen,HBsAg)指标高于50~<10^(4) IU/mL组、<50 IU/mL组,50~<10^(4) IU/mL组各指标水平高于<50 IU/mL组,差异有统计学意义(P均<0.05)。相关性分析后显示,HBeAb、HBeAg、HBsAg与HBV-DNA载量呈正相关(r=0.512、0.549、0.673,P均<0.05)。结论HBV-DNA载量与HBeAb、HBeAg、HBsAg指标之间有正性关联,可为评估HBV感染程度提供一定参考依据。

HBV DNA与乙肝五项定量在不同年龄段乙肝病毒感染患者病情进展中的意义

目的探讨乙肝病毒(HBV)DNA与乙肝五项定量[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]在HBV感染进程中各个阶段的差异,从而为慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、肝癌不同阶段的诊治提供参考依据。方法选择2020年1月至2021年12月收治的295例HBV感染患者为研究对象,根据年龄将其分为青年组(≤45岁,105例)、中年组(46~59岁,128例)和老年组(≥60岁,62例)。比较三组慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、肝癌患者的HBV DNA及乙肝五项定量。结果三组慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和肝癌患者的年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。青年组和中年组中,慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和肝癌患者的HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);慢性乙型肝炎患者的HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平明显高于乙肝肝硬化和肝癌患者(P<0.05)。老年组中,慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和肝癌患者的HBV DNA、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论青中年患者中,随着慢性乙型肝炎向乙肝肝硬化、肝癌的病程进展,HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平均呈现下降趋势,监测相关指标趋势对于提示疾病发展具有一定意义。

血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA联合检测对HBV所致肝癌的诊断及预后预测价值

目的探究血清异常凝血酶原Ⅱ(PIVKA-Ⅱ)、甲胎蛋白(AFP)与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)联合检测对HBV所致肝癌(HCC)的诊断及预后预测价值。方法选取2018年8月至2020年7月在本院接受治疗的98例HCC患者作为研究对象(肝癌组),另取同期95例体检健康人群作为健康组,95例肝硬化患者作为肝硬化组,观察3组受试者血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA表达水平和一般资料差异。根据肝癌组3年内预后情况将患者分为生存组(57例)和死亡组(41例)。比较肝癌组一般资料和血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平关系;多因素Logistic和COX回归分析分别分析影响受试者患肝癌和患者预后不良的影响因素;四格表法计算血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平对HCC的预测价值;ROC曲线分析评估血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平对HCC患者预后的预测价值。结果肝癌组患者血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平显著高于健康组和肝硬化组(P<0.05);HCC发病与血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平有关,且是危险因素(P<0.05)。HCC患者预后不良与血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平以及肿瘤数量有关(P<0.05),且是危险因素。血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平以及3项联合诊断HCC发病的准确度分别为77.43%、72.57%、77.43%和84.72%。血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平以及3项联合诊断HCC预后不良的AUC分别为0.823、0.841、0.824和0.958,3项联合诊断效能优于单一诊断(P<0.05)。结论血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平在HCC患者和预后不良患者中呈高表达,且3项联合可有效预测HCC发病和HCC患者预后情况。

HBV pgRNA联合cccDNA对慢性乙型肝炎患者抗病毒疗效的预测价值

目的探究乙型肝炎(HBV)前基因组RNA(pgRNA)联合共价闭合环状DNA(cccDNA)对慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒疗效的预测价值。方法收集2019年8月至2022年8月期间于本院进行抗病毒治疗的96例CHB患者的临床资料,根据患者治疗48周后是否获得完全应答分为完全应答组(78例)及非完全应答组(15例)。检测患者不同时间HBV cccDNA和HBV pgRNA水平,Logistic回归分析影响CHB患者获得完全应答的因素,并应用受试者工作特征(ROC)曲线分析pgRNA与cccDNA联合检测在抗病毒疗效的预测价值。结果96例患者中78例抗病毒治疗后获得非完全应答;完全应答组治疗24、48周HBV pgRNA、HBV cccDNA水平均低于非完全应答组(P<0.05);Logistic回归分析显示,治疗24周HBV pgRNA、HBV cccDNA高水平及治疗前ALT低水平是影响CHB患者抗病毒治疗无效的独立危险因素(P<0.05);经ROC分析显示,HBV pgRNA预测CHB患者抗病毒疗效的AUC值为0.618,95%CI为0.513~0.716,HBV cccDNA预测的AUC值为0.667,95%CI为0.561~0.760,二者联合预测的AUC值为0.881,95%CI为0.799~0.938。结论HBV pgRNA与cccDNA在CHB患者抗病毒治疗中下调,且治疗24周HBV pgRNA联合cccDNA检测对CHB抗病毒疗效具有更高的预测价值。

NS5ATP9与HBx相互作用促进HBV cccDNA的形成与转录

目的探讨丙型肝炎病毒NS5A反式调节蛋白9(hepatitis C virus NS5Atransactivated protein 9,NS5ATP9)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)形成与转录中的作用机制。方法利用1.3拷贝HBV表达质粒转染Huh7和HepG2细胞、整合有4拷贝HBV基因组的HepG2.2.15细胞、在诱导型四环素启动子控制下表达HBV的HepAD38细胞构建NS5ATP9过表达或干扰的HBV细胞模型,收集样品和细胞上清液,提取RNA、HBV核心DNA(coreDNA)、cccDNA和蛋白,利用酶联免疫吸附试验、实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、Southern blot和Western blot技术检测HBV总RNA、前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA)、乙型肝炎病毒s抗原(hepatitis B virus s antigene,HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigene,HBeAg)、松弛环状DNA(relax circular DNA,rcDNA)以及cccDNA水平。在HepG2细胞中转染乙型肝炎病毒x蛋白(hepatitis B virus x protein,HBx),通过免疫荧光成像及免疫共沉淀方法检测NS5ATP9与HBx的结合情况。双荧光素酶报告基因实验检测NS5ATP9对HBx启动子活性的影响。利用Huh7细胞转染HBV1.3及HBV稳定表达细胞株HepG2.2.15和HepAD38转染NS5ATP9过表达/干扰质粒,通过Western blot技术检测DDB1和SMC6的蛋白水平。结果在HBV病毒活跃的细胞中,NS5ATP9 mRNA水平[HepG2.2.15细胞:1.891±0.567比1.00±0.034,t=2.87,P=0.0351;HepAD38 tet+细胞:1.978±0.399比1.00±0.034,t=4.131,P=0.0091;HepAD38 tet-细胞:2.642±0.672比1.00±0.034,t=4.127,P=0.0091]和蛋白水平均显著增加。过表达NS5ATP9后可显著增加HBeAg[(5.402±0.327)S/COV比(2.68±0.552)S/COV,t=7.35,P=0.0018]、HBsAg[(2.846±0.185)S/COV比(1.512±0.221)S/COV,t=8.02,P=0.0013]、HBV pgRNA及rcDNA的表达水平,而干扰NS5ATP9后此增加作用消失[HBeAg:(2.029±0.09)S/COV比(3.733±0.445)S/COV,t=6.501,P=0.0029;HBsAg:(1.501±0.105)S/COV比(1.878±0.174)S/COV,t=3.216,P=0.0324)]。机制研究显示,NS5ATP9和HBx蛋白主要位于细胞核核仁内,并具有共定位信号,且NS5ATP9可显著提高HBx启动子(1071.06±79.44比488.47±40.12,t=13.09,P=0.00012)的转录活性。另外,过表达NS5ATP9可显著降低DDB1和SMC6的蛋白水平,而沉默NS5ATP9则可显著提高DDB1和SMC6的蛋白水平。结论HBV上调NS5ATP9的表达,形成HBV-NS5ATP9-HBV cccDNA-HBV的正反馈环路,NS5ATP9通过与HBx相互作用上调肝细胞中HBV cccDNA的形成与转录,进而促进慢性乙型肝炎的发生发展。

血常规衍生指标与HBV-DNA载量及ALT关系的研究

目的:选择中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)、血小板淋巴细胞比值(PLR)和血清谷丙转氨酶(ALT)、HBV-DNA作为研究指标,通过分析HBV感染者外周血NLR、PLR的表达与疾病进程及HBV-DNA载量和ALT的关系,探讨NLR和PLR在慢性乙型肝炎患者病情发展的临床意义。方法:收集慢性乙型肝炎患者475例外周血标本,检测血常规、肝功能和乙肝DNA水平,按照HBV-DNA载量水平不同分为阴性组(作为对照组)、低拷贝组、中拷贝组、高拷贝组,分别比较HBV-DNA升高组与阴性组外周血NLR、PLR水平,分析其差异性;同时按照ALT升高水平分为轻、中、重度三个观察组和正常对照组,分别比较观察组与正常组对应的外周血NLR、PLR水平,查找规律;对HBV-DNA阳性的患者在进行药物治疗过程中,监测血NLR、PLR水平变化。结果:NLR与疾病的进展有一定的相关性,其中中拷贝组和高拷贝组与阴性组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);而PLR与HBV-DNA未发现有显著相关性,但三个升高组与阴性组比较,PLR数值差异有统计学意义(P均<0.05);随着ALT的逐步升高,NLR也随着升高,轻度和中度升高组,NLR变化不大,但重度升高组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而PLR与ALT的关系不大,差异无统计学意义(P均>0.05);在抗病毒治疗的早期,由于淋巴细胞数量的减少,NLR和PLR会一时性升高。结论:NLR和PLR具有评估慢性HBV感染患者肝脏炎症活动度的临床应用价值,持续动态检测这两个指标的变化对慢性乙肝患者的病情预判有一定的指导作用。

乙肝大小三阳状态、不同HBVDNA载量孕妇肝功能指标水平分析

目的研究探讨乙肝孕妇大三阳和小三阳状态中乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)DNA载量、肝功能指标、肝纤维化标志物含量及不同HBVDNA载量孕妇的肝功能水平。方法选取临清市人民医院于2020年1月—2023年1月收治的120例乙肝孕妇作为研究对象,根据乙肝两对半检测结果将其分为两组,即大三阳组(n=60)和小三阳组(n=60)。比较两组HBVDNA载量、肝功能指标、肝纤维化标志物含量及不同HBVDNA载量孕妇的肝功能指标、肝纤维化标志物含量。结果大三阳组丙氨酸转移酶水平(29.00±7.62)U/L、HBVDNA水平(5.18±1.16)×10^(4)U/mL均高于小三阳组的(26.00±2.85)U/L、(2.08±1.11)×10^(4)U/mL,差异有统计学意义(t=2.856、14.956,P均<0.05)。大三阳组的重组人几丁质酶3样蛋白1水平低于小三阳组,差异有统计学意义(P<0.05)。伴随着HBVDNA载量上升,两组患者甲胎蛋白水平随之增加,但是在同等HBADNA载量下,两组甲胎蛋白水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论开展孕前抗乙肝病毒诊疗、孕期风险系数评估,采取科学有效的干预措施,均能够有效抑制乙肝在母婴中的传播。

高灵敏度HBV DNA检测在乙型肝炎相关性肝细胞肝癌中的临床应用价值研究

目的探讨高灵敏度HBV DNA检测在乙型肝炎相关性肝细胞肝癌中的临床应用价值研究。方法选取2020年1月至2022年5月于我院经普通荧光探针法检测HBV DNA水平持续低于1000 IU/ml的乙型肝炎相关性肝细胞肝癌患者60例,均通过高灵敏度HBV DNA检测,对患者的肝功能指标、血清免疫学标志和HBV DNA之间的相关性进行分析。结果60例患者中检出46例高灵敏度HBVDNA>10IU/ml的患者(HBVDNA阳性组),其中31例<100IU/ml者,15例>100IU/ml者;14例HBVDNA<10 IU/ml者(HBV DNA阴性组),HBV DNA阳性组发生肝硬化的概率(82.61%)比HBV DNA阴性组(50.00%)高;阴性组癌变前进行抗HBV药物治疗患者占比(45.45%)比癌变前未进行抗HBV药物治疗的患者占比(10.53%)高(P<0.05)。γ-GT、ALT正常组患者的HBV DNA阳性率低于γ-GT、ALT异常组(P<0.05)。结论持续复制的乙型肝炎病毒是导致乙型肝炎相关性肝细胞肝癌发生的关键因素,相较于普通的荧光探针法HBV DNA检测,高灵敏度HBV DNA检测效果更佳,能为临床提供一定的指导意义。

无锡地区HBsAg-/HBV DNA+献血人群HBcrAg检出特点分析

目的分析新型血清标志物乙型肝炎核心相关抗原(HBcrAg)在无锡地区HBsAg-/HBV DNA+献血人群中的检出特点。方法通过电话追踪随访了37名既往HBsAg-/HBV DNA+献血者并获得其血清,采用电化学发光法和实时荧光定量PCR核酸筛检出22例HBsAg-/HBV DNA+献血者血清作为OBI组进行HBcrAg酶联免疫吸附法检测。挑选出20名经2遍酶免和1遍核酸筛检的健康献血者的血清作为健康对照组,20例经无锡第五人民医院临床诊断为慢性乙型肝炎患者血清作为实验的CHB组,分别进行HBcrAg酶联免疫吸附法检测;并对OBI组进行HBcrAg与HBeAb、HBcAb、ALT、HBV DNA的相关性分析。结果37份献血者标本经化学发光法检测HBsAg和核酸筛查,检出22份HBsAg-/HBV DNA+标本即OBI组,检出率59.46%。OBI组与健康对照组、CHB组血清的HBcrAg表达含量分别是(0.92±0.13)ng/mL、(0.47±0.09)ng/mL、(1.14±0.23)ng/mL(P<0.05),OBI组与CHB组的HBcrAg表达均高于健康对照组(P<0.05)。OBI组的HBcrAg与HBeAb、HBcAb、ALT、HBV DNA指标均无相关性(P>0.05)。结论OBI组与CHB组的HBcrAg表达均高于健康对照组,其血清HBcrAg在一定程度上与HBeAb、HBcAb、ALT、HBV DNA无相关性,HBcrAg在筛查HBsAg-/HBV DNA+献血者中具有较好的应用前景。

失代偿期乙型肝炎肝硬化患者血清HBV-DNA水平与生化及凝血等指标相关性分析

目的分析失代偿期乙型肝炎肝硬化患者血清HBV-DNA水平与乙型肝炎病毒标志物、生化及凝血等指标的相关性。方法回顾性分析2018年1月至2020年12月我院收治的645例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者的临床资料,根据HBV-DNA水平分为4组:阴性组、低病毒载量组(<2.0×10^(3)IU/mL)、中病毒载量组(2.0×10^(3)~2.0×10^(5)IU/mL)和高病毒载量组(>105IU/mL),测定所有患者乙型肝炎病毒血清学标志物(HBV-M)、肝功能相关生化指标(ALT、AST、TBIL、DBIL、ALB)、凝血相关指标(PT、INR、APTT、TT、D-D、PLT),比较4组患者各项指标的差异,并分析各项指标与HBV-DNA水平的相关性。结果在失代偿期乙型肝炎肝硬化患者中,HBsAg和HBeAg的定量数值随着HBV-DNA水平的升高而增高,HBsAg的明显升高主要体现在HBV-DNA阴性组和低病毒载量组之间(779.40 vs 5773.00IU/mL),而HBeAg的表达在中病毒载量组(0.19 COI)和高病毒载量组(7.96 COI)中才出现显著升高,低病毒载量组的HBeAg阳性表达率较低。随着病毒载量的升高,患者的ALT、AST、TBIL、DBIL、D/T、AFP指标均有所升高,而ALB的水平降低;除TT存在显著性差异外,PT、APTT、INR、Fib、D-D、PLT这6个指标差异均无统计学意义。经Pearson相关性分析检验,失代偿期乙型肝炎肝硬化患者血清HBV-DNA水平与ALT、AST、TBIL、DBIL、AFP、PT、APTT、TT、D-D、HBsAg、HBeAg水平呈正相关(r>0,P均<0.05),与ALB、Fib水平呈负相关(r<0,P均<0.05),与PLT、HBeAb水平不存在相关性。结论在失代偿期乙型肝炎肝硬化患者中,血清HBV-DNA载量与HBsAg、HBeAg表达水平密切相关,与ALT、AST、TBIL、DBIL、D/T、ALB等肝功能相关生化指标相关,与凝血相关指标存在关联,但在不同HBV-DNA载量组中无差异。HBV-DNA载量可作为HBeAg阴性患者肝脏损害程度的有效预测指标。

HBV-DNA检测及血液细胞分析在肝炎性肝硬化治疗效果评价中应用

目的探讨与分析HBV-DNA检测及血液细胞分析在肝炎性肝硬化治疗效果评价中应用价值,以促进早期预测患者的预后。方法2019年2月到2022年1月选择在本院诊治的肝炎性肝硬化患者137例作为研究对象,所有患者都给予恩替卡韦治疗,在治疗前进行HBV-DNA检测及血液细胞分析,观察患者的预后并进行相关性分析。结果所有患者治疗观察3个月,有效患者数为107例,治疗有效率为78.1%。有效患者的性别、年龄、体重指数、病程、肝功能分级、血压等与无效患者对比无明显差异(P>0.05)。有效组的红细胞、血小板、白细胞、血红蛋白等血液细胞分析指标都明显高于无效组(P<0.05)。有效组的HBV-DNA载量明显少于无效组(P<0.05),血清TBi L、DBi L、ALP、GGT含量明显低于无效组(P<0.05)。在137例患者中,Spearsman分析显示红细胞、血小板、白细胞、血红蛋白、HBV-DNA载量都与患者预后有效呈现相关性(P<0.05)。结论恩替卡韦治疗乙肝肝硬化患者的疗效有待提高,HBV-DNA检测及血液细胞分析在肝炎性肝硬化治疗中的应用能有效评估患者预后情况。

湖州河川沙塘鳢群体线粒体DNA cyt b基因序列的遗传多样性分析

河川沙塘鳢具有肉鲜味美,细嫩可口的特点,营养价值与经济价值颇高,是一种极具发展潜力的水产养殖品种,对野生和人工繁育河川沙塘鳢的遗传结构进行检测分析,可为选育和种质保护提供参考资料。本文对湖州河川沙塘鳢(钟管野生群体及八里店养殖群体)的线粒体细胞色素b(cyt b)基因全长进行扩增和测序,并应用生物信息学软件与Gen Bank中太湖、鄱阳湖和巢湖3个群体的数据进行比较。河川沙塘鳢cyt b基因全长1141 bp,4种碱基在所得序列中平均含量为A(26.8%)、G(13.8%)、T(28.0%)、C(31.4%),序列分析显示,cyt b基因序列中变异位点378个,占分析位点的44.26%,含有241个简约信息位点,平均转颠换比值(TS/TV)为0.76。在5个群体138个个体中共检测到75个单倍型,平均单倍型多样性为0.869~1.000,核苷酸多样性为0.01431~0.03848。各群体间遗传距离差异较大(0.01493~0.05868),其中八里店与钟管群体的遗传距离最小(0.01493),而鄱阳湖与巢湖群体的遗传距离最大(0.05868),与构建的聚类图分析结果一致。群体中性检验显示八里店、钟管和太湖的Tajima’s D和Fu’s Fs值为正值;鄱阳湖和巢湖群体为负值,5个群体Tajima’s D和Fu’s Fs检验均不显著(P>0.01)。总体上,5个群体间具有较高程度的遗传分化。除了湖州的八里店与钟管群体共享6种单倍型外,其他群体间基本不共享单倍型,这可能是八里店养殖群体亲本来源于钟管野生群体的原因。应用cyt b基因可以明确地将湖州、太湖、鄱阳湖和巢湖群体之间区分开来。

弥漫大B细胞淋巴瘤^(18)F-FDG PET/CT代谢参数和循环肿瘤DNA突变丰度:相关性和生存分析

目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者18-氟-脱氧葡萄糖正电子发射断层显像/计算机断层扫描代谢参数与外周血循环肿瘤DNA(ctDNA)的相关性,以及这两类参数在预测无进展生存期(PFS)中的预后价值。方法:回顾性分析同期行外周血ctDNA检测及相应PET/CT扫描的DLBCL患者的临床、PET/CT及ctDNA资料。ctDNA取样及PET扫描时,根据疾病不同治疗及病情发展情况,将患者分为基线组和复发/难治性(R/R)组。ctDNA突变丰度以变异等位基因频率(VAF)表示,包括最大VAF(maxVAF)和平均VAF(meanVAF)。以41%最大标准化摄取值方法获得总代谢肿瘤体积(TMTV)和糖酵解总量(TLG),并获得两最远病灶距离(Dmax),采用Spearman相关分析评估PET参数与ctDNA突变丰度的相关性。在基线及R/R组中分别采用受试者工作特征(ROC)曲线获得这些参数和预测PFS的最佳截断值。采用Kaplan-Meier法勾画生存曲线并行log-rank检验比较生存差异。结果:共纳入67例DLBCL患者,男性33例,女性34例,中位年龄为56.0(46.0,67.0)岁,基线组29例,R/R组38例。PET参数中,除最大标准化摄取值(SUVmax)外,基线TMTV、TLG、Dmax均与基线ctDNA突变丰度显著相关(maxVAFvsTMTV:r=0.711;maxVAFvsTLG:r=0.709;maxVAFvsDmax:r=0.672;meanVAFvsTMTV:r=0.682;meanVAFvsTLG:r=0.677;meanVAFvsDmax:r=0.646),而在全部患者中,以上相关性明显减弱。在R/R患者中,仅TMTV与meanVAF具有较弱的相关性(r=0.376)。对各参数进行ROC分析结果表明,TMTV、TLG和Dmax预测PFS的特异性优于突变丰度,而ctDNA突变丰度的敏感性更好。除R/R患者外,在基线患者和全体患者中可观察到在不同乳酸脱氢酶水平下,TMTV、TLG、Dmax、VAF均具有显著差异(均P<0.05)。生存曲线表明,基线患者中,高TMTV(> 109.5 cm3)、高TLG(> 2 141.3)、高Dmax(> 33.1 cm)及高VAF(maxVAF> 7.74%、meanVAF> 4.39%)均是不良PFS的危险因素,而在R/R患者中仅高VAF(maxVAF和meanVAF均> 0.61%)是影响PFS的危险因素。结论:PET衍生参数与ctDNA突变丰度相关性良好,尤其是在基线患者中。ctDNA的VAF预测PFS较PET代谢参数更敏感,而PET代谢肿瘤负荷具有更好的特异性。TMTV、TLG和VAF均对PFS有良好的预后价值。PET/CT联合ctDNA在预后评估和个性化治疗方面有进一步研究的潜力。

乙肝五项、前S1抗原与HBV-DNA联合检测的临床应用

目的:探讨乙肝五项、前S1抗原和HBV-DNA在肝炎诊断的价值;方法:收集上海市松江区中心医院2022年7月1日-8月31日检测乙肝五项的标本3364例,分析其乙肝五项、前S1抗原的检出率、HBV-DNA的载量,另外收集上海市松江区中心医院2022年3月1日-2022年8月31日HBV-DNA高载量标本46例,中载量标本54例,低载量标本76例,对照组标本52例,统计并分析其ALT、AST、GGT含量;结果:3364例标本中HBSAg阳性率为9.3%,检出率较高的模式分别为全阴、25(+)、2(+)、245(+)、145(+)、5(+);在主要的乙肝五项型别中,只有145(+)和135(+)型别检测到HBV-DNA,135(+)检出率高于145(+);前S1抗原与HBeAg检出率不同;不同DNA载量的四个组别ALT、AST、GGT差别均有统计学意义,四个组别ALT、AST、GGT不完全相同;结论:乙肝五项、前S1抗原和HBV-DNA联合检测对乙肝的诊断有重要的意义。

HBV DNA定量与血清学标志物及CEA、HA联合检测HBV感染的临床价值

目的 探究乙型肝炎病毒(HBV DNA)定量与血清学标志物及血清癌胚抗原(CEA)、血清透明质酸酶(HA)联合检测HBV感染的临床价值。方法 选取2019年1月至2021年11月阜南县人民医院收治的慢性乙型病毒性肝炎患者92例作为研究对象,所有患者均行临床乙肝血清学标志物[包含乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)、乙肝病毒的核心抗体(抗-HBc)]、CEA、HA以及HBV DNA检测,观察并记录所有患者HBV DNA、CEA、HA的检测结果,比较血清标志物对HBV DNA的检测阳性率,分析HBV DNA定量与血清学标志物及CEA、HA联合检测HBV感染的临床价值。结果 92例患者中,HBV DNA阳性患者54例(58.70%),阴性38例(41.30%)。大三阳组患者HBV DNA阳性31/33例(93.94%),小三阳组患者HBV DNA阳性15/31例(48.39%),其他类型组患者HBV DNA阳性3/28例(10.71%)。92例患者CEA水平4.20(3.20,5.30)ng/mL;HA水平分别为112.00(98.00,126.00)ng/mL。HBV DNA阳性组患者CEA、HA水平显著高于HBV DNA阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。HBV DNA阳性组中,HBsAg阳性检出率显著高于HBeAg,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关结果显示,患者的HBV DNA定量与CEA、HBsAg、HA指标成正相关关系(P<0.05)。ROC分析显示:HBV DNA定量与血清学标志物及血清CEA、HA联合检测乙肝病毒感染的AUC=0.985(P<0.05),诊断敏感度为97.76%。结论 HBV DNA定量与血清学标志物CEA、HA联合检测在HBV感染诊断中具有较高的应用价值,可起到互补作用,为临床检测提供了新路径。

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后HBcrAg、HBV DNA、甲胎蛋白水平变化研究

目的:探讨乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗前后乙型肝炎核心相关抗原(HBcrAg)、乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)及甲胎蛋白(AFP)水平变化,为临床诊断和疗效预测提供参考依据。方法:选取2019年11月至2020年11月医院肝病科收治的80例HBeAg阳性CHB患者为研究对象,给予恩替卡韦分散片治疗12个月,根据病毒学应答判断标准将纳入患者分为应答组(50例)和非应答组(30例),比较治疗前以及治疗3个月、6个月和12个月时两组患者HBcrAg、HBV DNA、AFP、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、HBeAg以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,采用Pearson相关系数分析HBcrAg、HBV DNA、AFP与HBV血清标志物及ALT相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析HBcrAg、HBV DNA、AFP对实现完全应答的预测价值。结果:随着治疗时间的延长,两组患者HBcrAg、HBV DNA、AFP、HBsAg、HBeAg以及ALT水平总体呈下降趋势,其中应答组治疗各时间点上述指标均低于非应答组(P<0.05)。治疗前及治疗后,HBcrAg与HBV DNA、AFP、HBsAg、HBeAg以及ALT均呈正相关性(P<0.05),HBV DNA与AFP、HBsAg、HBeAg以及ALT均呈正相关性(P<0.05),AFP与HBsAg、HBeAg以及ALT均呈正相关性(P<0.05)。ROC曲线结果显示,治疗前HBcrAg、HBV DNA、AFP预测治疗后HBeAg阳性CHB患者完全应答的AUC分别为0.742(95%CI:0.653~0.831)、0.770(95%CI:0.683~0.856)、0.761(95%CI:0.673~0.849),三者联合预测的AUC为0.859(95%CI:0.795~0.924);治疗后HBcrAg、HBV DNA、AFP预测HBeAg阳性慢性乙肝患者完全应答的AUC分别为0.656(95%CI:0.546~0.766)、0.668(95%CI:0.554~0.782)、0.652(95%CI:0.544~0.759),三者联合预测的AUC为0.767(95%CI:0.677~0.857)。结论:血清HBcrAg、HBV DNA、AFP在HBeAg阳性CHB患者治疗前后水平变化较明显,各指标治疗前后水平与抗病毒疗效之间存在一定相关性,对治疗后实现完全应答具有良好预测价值。