冻干b型流感嗜血杆菌结合物疫苗中磷含量测定方法建立及验证

目的:建立冻干b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗磷含量检测的超滤法联合紫外分光光度法,并对该方法进行验证及初步应用。方法:用去离子水将样品溶解后超滤,收集超滤管中Hib多糖,采用等体积比硫酸高氯酸消解样品,使用钼酸铵在酸性条件下与磷形成磷钼酸,与维生素C生成蓝色化合物,在825 nm下有最大吸收。对该方法进行线性、精密度、稳定性、准确度验证。用建立的方法检测3批次商业化冻干Hib结合疫苗磷含量。结果:标准磷在质量浓度1~10μg·mL^(-1)内线性关系良好(r=1.000),线性方程为Y=8.878×10^(-2)X+2.402×10^(-3),方法在低、中、高浓度水平下回收率均值分别为在97.35%、96.65%、97.42%(n=3),RSD分别为2.55%、0.95%、0.95%;重现性试验的RSD为2.81%;中间精密度RSD 2.14%;磷标准品衍生物溶液室温放置1 h稳定,RSD为0.39%。结论:该方法结果准确、可靠,可用于冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗磷含量检测,同时也为其他多糖蛋白结合疫苗磷含量测定提供了思路。

b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗(磷酸多核糖基核糖醇-白喉毒素突变体197)的安全性和免疫原性研究

目的评价b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗(Haemophilus Influenzae Typeb Conjugate Vaccine,Hib)[磷酸多核糖基核糖醇-白喉毒素突变体197(Polyribosylribitol Phosphate-Cross Reacting Material197,PRP-CRM197)]在中国儿童使用的安全性、免疫原性和加强免疫后的抗体应答。方法研究分三个阶段:第一阶段为I期安全性研究,先入组20名16～20月龄的幼儿,接种1剂Hib PRP-CRM197;15d后入组20名2～4月龄的婴儿,按间隔1个月的程序接种3剂Hib PRP-CRM197。每剂接种后收集30d内的安全性数据。第二个阶段为Ⅲ期基础免疫,入组916名2～4月龄受试者,随机分配到试验组(611人)和对照组(305人),分别接种3剂Hib PRP-CRM197或Hib PRP-T(Tetanus Toxoid,TT;破伤风类毒素)对照疫苗,每剂间隔1个月。第三个阶段为Ⅲ期加强免疫,对基础免疫完成3剂疫苗接种的受试者,于1周岁后加强免疫1剂。在Ⅲ期临床研究中,收集安全性和免疫原性的数据。抗-PRP抗体测定采用酶联免疫吸附试验。结果Ⅰ期安全性研究发现,Hib PRP-CRM197在两个年龄组(婴儿和幼儿)都有良好的耐受性。基础免疫和加强免疫的Ⅲ期临床研究表明,Hib PRP-CRM197的安全性和HibPRP-T相似。在完成基础免疫后1个月,实验组和对照组的所有受试者均达到了短期血清保护性抗-PRP抗体水平[≥0.15微克/毫升(g/ml)],且分别有99%和97%的受试者达到了长期血清保护性抗-PRP抗体水平(≥1.0g/ml)。在完成加强免疫后,所有受试者均达到了短期和长期的血清保护性抗体水平。与HibPRP-T组相比,接种HibPRP-CRM197始终产生更高的抗体几何平均浓度。结论 Hib PRP-CRM197疫苗在基础免疫和加强免疫后,都显示了良好的耐受性和快速的抗-PRP抗体应答。Hib PRP-CRM197的免疫原性不劣于HibPRP-T,且安全性也相似。Hib PRP-CRM197可用于中国儿童抗Hib感染的常规免疫接种。临床试验注册国家食品药品监督管理局《药物临床批件》2008L03160。

社区儿童接种b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗的前瞻性队列研究

目的评价社区儿童接种b型流行性感冒嗜血杆菌[Haemophilus Influenzae(Hi)Type b,Hib]结合疫苗的免疫效果。方法采用前瞻性队列研究方法分为疫苗接种组与非疫苗接种(对照)组,用细菌培养法、巢式聚合酶链反应检测两组儿童Hi携带状况,分析Hi携带率及下呼吸道疾病罹患率。结果两组儿童Hib携带率均较低;对照组未定型Hi阳性率显著高于接种组,以2～3岁尤为明显;各年龄组中对照组儿童支气管炎罹患率均显著高于接种组,Hib结合疫苗对儿童支气管炎发病的保护效果>90%;对照组中Hi培养阳性者气管炎发病显著高于Hi培养阴性者。结论儿童支气管炎的发病与Hi携带率高有关,接种Hib疫苗后导致Hi携带率下降以及支气管炎发病减少。

胸腺淋巴体质婴儿接种b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗后死亡1例报告

1调查情况1．1死婴背景男，2011年11月9日出生，足月顺产，体重3．5千克（kg），新生儿Apgar评分9．0分。婴儿既往无患病史，接种前精神状态良好，无过敏史，家庭成员无遗传病史和传染病史。婴儿此前曾接种过乙型肝炎疫苗、卡介苗、口服脊髓灰质炎减毒活疫苗，未出现过不良反应。1．2死亡经过生前于2012年2月10日9：00在预防接种门诊接种1剂b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗（Haemophilus Influenzae Type b Conjugate Vaccine，Hib），留置观察30min无异常回家。

接种b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗致婴儿过敏反应1例报告

患儿5月龄，男性。2008年5月接种第3剂b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗（Haemophihis Influenzae Type b Conjugate Vaccine，Hib：兰州生物制品研究所生产，每瓶0．5ml，含纯化Hib荚膜多糖≥10mg），按常规消毒，上臂三角肌肌内注射0．5ml。约10min后，婴儿面部出现痒感，烦燥，呼吸急促，T37℃，P100／min，R28／min，BP压70／40mmHg（10mmHg=1．33Kpa），急性病容。

接种b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗和吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风联合疫苗发生荨麻疹1例报告

患儿，男，2006年12月16日出生。2008年9月17日10：00，由监护人带到县疾病预防控制中心（CDC）预防接种门诊，接种b型流行性感冒（流感）嗜血杆菌结合疫苗（Haemophilus Influenzae Typeb Conjugate Vaccine，Hib）和吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风联合疫苗（Diphtheria，Tetanus，Acellular Pertussis Combined Vaccine，DTaP）第4剂。

b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗(磷酸多核糖基核糖醇-白喉毒素突变体197)在13～59月龄儿童中的安全性和免疫原性研究

目的评价b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗(Haemophilus Influenzae Typeb Conjugate Vaccine,Hib)[磷酸多核糖基核糖醇-白喉毒素突变体197(Polyribosylribitol Phosphate-Cross Reacting Material197,PRP-CRM197)]在13～59月龄儿童中使用的安全性和免疫原性。方法选择728名13～59月龄儿童,按1:1的比例随机分配到试验组(365人)和对照组(363人),分别肌内注射接种1剂PRP-CRM197或Hib[PRP-T(Tetanus Toxoid,TT;破伤风类毒素)],观察接种后7d内的局部和全身反应,收集接种后30d内的不良事件和用药情况。在接种疫苗前和接种疫苗后30d采集静脉血,用酶联免疫吸附试验检测抗-PRP抗体(Antibody to PRP,Anti-PRP)。结果分别有99%和100%接种PRP-CRM197和PRP-T的受试者,达到了短期[≥0.15微克/毫升(g/ml)]和长期(≥1.0g/ml)血清保护性Anti-PRP水平。两种疫苗的安全性相似。结论 Hib(PRP-CRM197)的耐受性良好,免疫原性不劣于Hib(PRP-T),为99%的受试者提供了血清保护性Anti-PRP。Hib(PRP-CRM197)可在13～59月龄儿童中进行免疫。临床试验注册国家食品药品监督管理局《药物临床批件》2008L03160。

同时接种无细胞百日咳-白喉-破伤风联合疫苗和b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗后发生血清病型急性荨麻疹1例报告

1一般资料1.1病例情况患儿,男,2008年12月20日出生,家长自述既往有青霉素过敏史,否认慢性病史和家族过敏史。既往接种过卡介苗1剂、乙型肝炎疫苗3剂、口服脊髓灰质炎减毒活疫苗3剂、无细胞百日咳-白喉-破伤风联合疫苗（Diphtheria，TetanusandAcellularPertussisCombinedVaccine，DTaP）3剂、麻疹．风疹减毒活疫苗1剂、b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗（HaemophilusInfluenzaeTypebConjugateVaccine，Hib）3剂，口服轮状病毒减毒活疫苗1剂，均未发生异常反应．

世界卫生组织关于b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗的立场文件(2013年7月)

依据为各成员国提供卫生政策方面指导意见这一职责,世界卫生组织（World Health Organization,WHO）就预防具有全球公共卫生影响疾病的疫苗及联合疫苗问题,发布一系列定期更新的立场文件。这些文件着重关注疫苗在大规模免疫规划中的使用,归纳了各相关疾病与疫苗的基本背景信息,并就如何在全世界范围内使用这些疫苗表明了WHO目前的立场。这些文件经外部专家和WHO工作人员审阅,

b型流感嗜血杆菌结合疫苗的制备及免疫学特性

目的制备ｂ型流感嗜血杆菌结合疫苗，观察免疫学特性。方法通过已二酸二肼（ＡＤＨ），将纯 化的荚膜多糖抗原与破伤风类毒素（ＴＴ）蛋白共价结合，制备ｂ型流感嗜血杆菌结合物。以２．５μｇ多糖或含２．５μｇ 多糖结合物经皮下免疫ＮＩＨ雌性小鼠，用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＰＲＰ抗体及Ｔ抗体水平。结果用本实验方法提 取的多糖、合成的多糖衍生物、多糖－蛋白结合物都具有ｂ型流感嗜血杆菌的抗原特异性，其化学组成及结构特性 与国外文献报道结果基本一致。单独用多糖免疫小鼠未能诱导高水平的血清ＰＲＰ抗体，而用结合物免疫小鼠却诱 导出高水平的血清ＰＲＰ抗体及ＴＴ抗体，并存在免疫记忆性。结论本实验为进一步临床评价结合物的体内保护 性效果提供了实验基础。

b型流感嗜血杆菌-破伤风类毒素结合疫苗与国产DTPw疫苗婴儿同时接种后的反应观察

目的观察婴儿同时接种b型流感嗜血杆菌-破伤风类毒素(Hib-TT)结合疫苗与国产DTPw疫苗后的反应。方法按照开放、随机的原则,将472名11～17周龄的健康男女婴儿分为2组,即DTPw组(234名)和DTPw+Hib组(238名)。DTPw组接种0.5mlDTPw疫苗,DTPw+Hib组同时在不同部位接种0.5mlHib结合疫苗,2组分别于3、4、5月龄各接种1针。在免疫接种后4d内,观察2组接种对象所有症状(征集与非征集的)的发生情况,对接种当日和随后30d报告的非征集性不良反应进行记录,并进行统计学分析。结果在接种疫苗后4d内,DTPw+Hib组与DTPw组所有症状的发生率相似,分别为49.1%和46.0%;在31d内,2组中出现非征集症状的比例分别为9.9%和9.8%,其中上呼吸道感染和咽喉炎是最常见的非征集性症状;未报告严重不良反应。结论婴儿同时接种DTPw疫苗和Hib结合疫苗具有良好的安全性和耐受性。

一种国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性及免疫原性研究

目的评价一种国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性和免疫原性。方法采用随机、盲态、阳性对照、非劣效性研究设计,选择3月龄~5岁健康婴幼儿为研究对象,分3个年龄组,按照1∶1比例随机接种试验疫苗和对照疫苗;使用日记卡收集安全性数据,采集免疫前和全程免疫后第28天血液标本进行抗体检测;并比较。结果试验组不良反应以一、二级为主,局部反应以红斑为主、全身反应以发热为主;与对照疫苗相当,试验疫苗具有可接受的安全性。两组全程免疫后第28天抗PRP抗体质量浓度≥1.0μg/mL的受试者百分比均为100.00%。仅在3~5月龄组中发现试验组GMC略低于对照组(P=0.041),另2个年龄组中GMCs、GMFIs差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论该b型流感嗜血杆菌结合疫苗安全性可以耐受,免疫原性良好。

药品包装材料与b型流感嗜血杆菌结合疫苗相容性研究

目的考察不同组合的内包装材料对Hib结合疫苗的影响,选出最适合的包装材料。方法对所选药品包装材料按照生产厂家的不同来搭配,共得到12种组合,根据相容性试验设计,将样品置于25±2℃环境下,分别在1、2、3、6个月时取样,进行pH值、内毒素、不溶性微粒3个项目的检测。结果对pH值、内毒素含量、不溶性微粒检测数据进行分析,选出了对Hib结合疫苗影响最小的包装材料组合C+Y组。结论一个适宜的包装内环境对产品的稳定性十分重要。

不同部位接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗不良反应比较

目的探讨不同部位接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗(haemophilus type b conjugate vaccine,Act-Hib)不良反应情况。方法将500例预防接种Act-Hib的2～8月龄婴幼儿随机分为实验组与对照组,每组各250例,分别于大腿前外侧肌和上臂三角肌进行疫苗接种。比较两组婴幼儿接种后局部及全身反应情况。结果实验组婴幼儿局部反应程度明显轻于对照组,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论婴幼儿预防接种Act-Hib,在大腿前外侧肌注射接种局部反应程度明显轻于在上臂三角肌注射。