乙酰普鲁兰纳米粒子BeWo b30细胞毒性及摄取研究

目的通过乙酰普鲁兰纳米粒子对人绒毛膜癌细胞（BeWo b30）的细胞毒性以及细胞摄取研究,为普鲁兰基纳米药物跨胎盘屏障机制及妊娠期用药提供科学依据。方法以透析法制备异硫氰酸荧光素标记的乙酰普鲁兰纳米粒子（fluorescein isothiocyanate labelled pullulan acetate nanoparticles,PA-FITC NPs）,分别利用激光粒度分析仪、扫描电镜、透射电镜考察乙酰普鲁兰纳米粒子粒径、Zeta电位、形貌及结构;用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）检测细胞生长曲线,考察不同浓度纳米粒子（0.4~2.0 mg/m L）对BeWo b30细胞的细胞毒性;考察纳米粒子浓度、孵育时间、孵育温度对BeWo b30细胞摄取纳米粒子的影响。结果 PA-FITC纳米粒子水合直径为（348.0±114.3）nm,Zeta电位为（-26.0±5.1）m V,呈表面光滑、内部结构规整的球形。PA-FITC纳米粒子在0.4~2.0 mg/m L浓度范围内细胞存活率为95.0%~100.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）;BeWo b30细胞摄取实验表明：细胞吞噬纳米粒子的量随着PA-FITC NPs的浓度升高和孵育时间延长而增大;当孵育温度从37℃降低至4℃,PA-FITC NPs的细胞摄取量显著降低（P〈0.05）。结论乙酰普鲁兰纳米粒子呈球形,对BeWo b30细胞无明显细胞毒性;BeWo b30细胞摄取PA-FITC纳米粒子与纳米粒子浓度、孵育时间和孵育温度呈正相关。